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deltex-1腺病毒载体的构建及其在大鼠bMSCs中的表达 被引量：2
1
作者 王荥 王延洲 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1555-1558,共4页
目的构建deltex-1基因腺病毒载体并研究其在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,bMSCs)中的表达。方法采用高保真酶PCR扩增deltex-1基因并测序,亚克隆至pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体后在BJ5183细菌中进行重组,挑选... 目的构建deltex-1基因腺病毒载体并研究其在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,bMSCs)中的表达。方法采用高保真酶PCR扩增deltex-1基因并测序,亚克隆至pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体后在BJ5183细菌中进行重组,挑选正确的重组子在FT293细胞中包装成病毒。以CsCl2方法纯化病毒,并进行滴度测定。将目的基因病毒感染bMSCs细胞后收集总RNA及蛋白,用PCR及Western blot方法检测目的基因表达水平。结果①成功扩增了大小为1 883 bp的大鼠deltex-1,并成功构建了大小为4.5 kb的同源重组腺病毒穿梭载体,滴度为1.23×1011 IU/ml;②对培养的大鼠bMSCs进行流式检测,结果为CD90、CD44阳性表达,分别为99.57%和85.66%,而CD45表达阴性,阳性率为0.35%;③荧光显微镜观察deltex-1转染效率为60%～70%,RT-PCR及Western blot检测结果显示转染后deltex-1表达明显增强,说明转染成功。结论成功构建deltex-1基因腺病毒载体并能在bMSCs中高表达。 展开更多
关键词 deltex-1基因 克隆 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 表达
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Deltex-1对骨髓间充质干细胞增殖及其向平滑肌细胞分化的影响 被引量：2
2
作者 王荥 王延洲 +1 位作者 刘禄斌 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期109-115,共7页
目的探讨Deltex-1对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)增殖及其向平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)分化的影响。方法分离培养大鼠骨髓bMSCs,采用流式细胞仪检测鉴定。通过Deltex-1过表达腺病毒载体p Ad/... 目的探讨Deltex-1对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)增殖及其向平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)分化的影响。方法分离培养大鼠骨髓bMSCs,采用流式细胞仪检测鉴定。通过Deltex-1过表达腺病毒载体p Ad/Deltex-1感染bMSCs后,采用CCK-8(cell count kit-8)法检测Deltex-1过表达对bMSCs增殖的影响;将未感染、经Deltex-1病毒感染及经空病毒感染的bMSCs与SMCs共培养,采用免疫荧光细胞化学、RT-PCR及Western blot分别检测其bMSCs中SMCs标志物平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SM-MHC)及Notch信号通路相关因子Notch-1的表达,单纯培养的bMSCs、SMCs的相同检测作正常对照。结果成功分离、培养大鼠bMSCs。CCK-8检测证实:与对照比较,经Deltex-1病毒感染的bMSCs生长减慢,48 h开始显得更为明显(P<0.05,P<0.01);免疫荧光细胞化学、RT-PCR及Western blot检测显示:与对照比较,经Deltex-1病毒感染的bMSCs与SMCs共培养后显著表达SMCs的标志物SM-MHC,较弱表达Notch信号通路相关因子Notch-1(P<0.01)。结论 Deltex-1过表达可抑制bMSCs的增殖,并促进其向SMCs分化。 展开更多
关键词 deltex-1 骨髓间充质干细胞 平滑肌细胞 细胞分化
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Deltex1多态性与中国西南部人群对乙型肝炎疫苗不应答相关
3
作者 张潆玉 王崇 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第4期824-824,共1页
【据《PLoS One》2016年2月报道】题：Deltex1多态性与中国西南部人群对乙型肝炎疫苗不应答相关（作者Xie B等）乙型肝炎疫苗是阻止HBV感染及减少流行最重要和有效的方法。然而,流行病学研究证明超过5%的患者对乙型肝炎疫苗无或低应答。... 【据《PLoS One》2016年2月报道】题：Deltex1多态性与中国西南部人群对乙型肝炎疫苗不应答相关（作者Xie B等）乙型肝炎疫苗是阻止HBV感染及减少流行最重要和有效的方法。然而,流行病学研究证明超过5%的患者对乙型肝炎疫苗无或低应答。T淋巴细胞相关的免疫遗传多态性可促进乙型肝炎疫苗的免疫应答。Deltex 1基因与T淋巴细胞的无反应性相关, 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 deltex1 中国西南部 免疫应答 流行病学研究 无反应性 遗传多态性 大坪医院 连锁不平衡 转录调控因子
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DTX2促进奥沙利铂耐药的结直肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化 被引量：1
4
作者 马振南 刘福全 +1 位作者 赵雪峰 张晓微 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第4期829-836,共8页
目的探讨DTX2对奥沙利铂耐药的结直肠癌(CRC/OXA)细胞的影响及作用机制。方法利用CCK8检测奥沙利铂(OXA)对CRC细胞的抑制率,构建CRC/OXA细胞系,检测CRC/OXA细胞中DTX2的表达水平,利用基因工具干预CRC/OXA细胞,分为未转染组(con)、敲低组... 目的探讨DTX2对奥沙利铂耐药的结直肠癌(CRC/OXA)细胞的影响及作用机制。方法利用CCK8检测奥沙利铂(OXA)对CRC细胞的抑制率,构建CRC/OXA细胞系,检测CRC/OXA细胞中DTX2的表达水平,利用基因工具干预CRC/OXA细胞,分为未转染组(con)、敲低组(DTX2-shRNA)及共转染组(DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2)。采用平板克隆、划痕和Transwell侵袭实验检测改变DTX2的表达对CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭能力的影响,并通过Western blotting检测各组中Notch2、NICD、Ecadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白的表达水平。利用SW620/OXA细胞同样分组行裸鼠移植瘤实验,体内验证对裸鼠成瘤及蛋白的影响。结果OXA对CRC细胞有明显抑制作用,SW620和LoVo细胞IC50分别为6.00和8.00μmol/L,成功构建CRC/OXA细胞系,CRC/OXA细胞中DTX2表达量明显升高(P<0.01)。DTX2-shRNA组中CRC/OXA细胞明显抑制增值、迁移侵袭能力(P<0.05),DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2组可逆转增强CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭的能力(P<0.05)。Notch2、NICD及Vimentin蛋白平均表达水平,在DTX2-shRNA组中明显降低,而DTX2-shRNA+pcDNA-Notch2组明显升高(P<0.01);E-cadherin蛋白表达水平在以上两组中的趋势相反且有明显差异(P<0.01)。体内实验显示DTX2可明显促进SW620/OXA细胞移植瘤的生长及对应蛋白的变化(P<0.05)。结论DTX2通过Notch2信号通路促进CRC/OXA细胞增值、迁移侵袭及上皮间质转化,DTX2可能作为提高OXA疗效的分子标志物。 展开更多
关键词 deltex-2 结直肠癌 Notch2信号通路 上皮间质转化 奥沙利铂 耐药
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基于TCGA数据库分析DTX2在肾透明细胞癌组织中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响
5
作者 秦翰成 刘婉璐 +1 位作者 静雅杰 陈志鸿 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期383-391,共9页
目的:基于TCGA数据库分析Deltex E3泛素连接酶2(DTX2)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达水平及临床意义,探讨DTX2对ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:利用TIMER数据库分析DTX2在泛癌组织中的表达水平,通过UALCAN数据库进一步验证... 目的:基于TCGA数据库分析Deltex E3泛素连接酶2(DTX2)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达水平及临床意义,探讨DTX2对ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:利用TIMER数据库分析DTX2在泛癌组织中的表达水平,通过UALCAN数据库进一步验证ccRCC组织和癌旁组织中DTX2 mRNA和蛋白表达差异。使用UALCAN数据库中的TCGAccRCC队列数据集,分析ccRCC中DTX2表达与患者临床病理特征的相关性。通过K-M plot数据库分析DTX2表达与ccRCC患者预后的相关性。利用DAVID数据库对DTX2相关基因进行GO和KEGG通路富集分析。通过qPCR法检测DTX2基因在人胚肾293(HEK293)细胞和ccRCC细胞A498、Caki-1中的表达水平。利用siRNA技术分别将DTX2 siRNA及其阴性对照质粒转入A498、Caki-1细胞,采用CCK-8法、平板克隆实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测敲低DTX2对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:TCGA数据库分析结果表明,与癌旁组织相比,ccRCC组织中DTX2 mRNA和蛋白均呈高表达(均P<0.01)。DTX2表达水平与ccRCC患者的病理分期、临床分级、不同亚型和淋巴结转移相关联(均P<0.01),DTX2高表达与患者的不良预后具有相关性(均P<0.01)。GO功能和KEGG通路富集分析结果显示,DTX2表达相关基因主要参与蛋白酶体介导的泛素依赖性蛋白质分解代谢等生物学过程,并主要富集到了mTOR信号通路等与肿瘤的相关信号通路中(均P<0.05)。体外细胞实验结果表明,A498和Caki-1细胞中DTX2表达水平高于HEK293细胞;敲低DTX2表达可显著降低A498和Caki-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力(均P<0.01)。结论:DTX2在ccRCC组织和细胞中呈高表达,其高表达患者的预后较差。敲低DTX2表达可抑制ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭,DTX2有望成为ccRCC新的生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 deltex E3泛素连接酶2 肾透明细胞癌 增殖 迁移 侵袭 临床意义
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Notch信号通路研究进展 被引量：8
6
作者 鲁茁壮 王立生 吴祖泽 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期135-138,共4页
在无脊椎动物和脊椎动物发育过程中 ,Notch信号对细胞的命运决定起关键作用。通过Notch受体的信号传递能够扩大并固化相邻细胞之间的分子差异 ,最终决定细胞的命运。本文综述了Notch信号通路的相关细节 。
关键词 NOTCH 信号通路 细胞 受体 deltex
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敲减DTX4表达抑制C2C12细胞成肌分化
7
作者 钟月春 邹丽宜 +4 位作者 陈潇楷 汪宗桂 戴忠 吴铁 左长清 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期489-494,共6页
DTX4(Deltex 4 homolog)蛋白属于Deltex家族成员;Deltex家族是Notch信号通路的调节因子.已知Notch信号通路在成肌分化中发挥重要作用.然而,DTX4是否参与调控肌肉发育尚未有报道.本研究探索DTX4对成肌分化的影响及作用机制.实时定量PCR... DTX4(Deltex 4 homolog)蛋白属于Deltex家族成员;Deltex家族是Notch信号通路的调节因子.已知Notch信号通路在成肌分化中发挥重要作用.然而,DTX4是否参与调控肌肉发育尚未有报道.本研究探索DTX4对成肌分化的影响及作用机制.实时定量PCR和蛋白质印迹分析揭示,伴随小鼠C2C12成肌细胞(myoblast)分化为肌管(myotube)过程,成肌分化标志蛋白肌球蛋白重链(myosin heavy-chain,My HC)、肌细胞生成素(myogenin)表达逐渐升高,DTX4 mRNA及蛋白质表达水平也逐渐升高.通过顺序专一的siRNA敲减DTX4表达后,C2C12成肌细胞肌管面积和肌管融合指数明显减少;My HC、肌细胞生成素蛋白表达水平明显降低;但ERK信号通路未见明显变化.上述结果表明,敲减DTX4表达抑制C2C12细胞成肌分化.我们的结果提示,DTX4可能参与C2C12细胞成肌分化. 展开更多
关键词 DTX4蛋白 成肌分化 肌球蛋白重链 肌细胞生成素
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