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DVC1在氮芥致人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用
1
作者
程晋
余文珮
+4 位作者
叶枫
董训虎
赵远鹏
但国蓉
邹仲敏
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第21期2214-2221,共8页
目的探讨蛋白水解酶DVC1在氮芥诱导人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用。方法利用siRNA干预DVC1表达,50μmol/L氮芥染毒细胞后,采用Western blot检测DNA损伤修复蛋白的表达;荧光酶标仪测定1~24 h DNA-蛋白交联总量;Slot blo...
目的探讨蛋白水解酶DVC1在氮芥诱导人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用。方法利用siRNA干预DVC1表达,50μmol/L氮芥染毒细胞后,采用Western blot检测DNA损伤修复蛋白的表达;荧光酶标仪测定1~24 h DNA-蛋白交联总量;Slot blot检测DNA与O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^(6)-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)的共价交联;免疫沉淀检测MGMT泛素化水平。构建GST-DVC1融合蛋白,GST下拉实验检测DVC1与MGMT、泛素的结合。结果si-DVC1干预后,DNA-蛋白交联总量升高。氮芥降低交联蛋白MGMT原型的水平,但增强其泛素化水平;DVC1可结合泛素,si-DVC1可进一步增强MGMT的泛素化及DNA-MGMT的交联量,与泛素结合酶抑制剂NSC697923和蛋白酶体抑制剂MG132引起的交联结果类似。si-DVC1引起DNA损伤修复蛋白Rad51表达降低、Ku70表达升高。结论DNA-蛋白交联的清除依赖于交联蛋白的泛素化;DVC1通过与泛素相互作用,促进氮芥诱导的DNA-蛋白交联的清除,并维持DNA以同源重组方式修复损伤的能力。
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关键词
氮芥
dvc1
DNA蛋白交联
O
6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
人支气管上皮细胞
原文传递
题名
DVC1在氮芥致人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用
1
作者
程晋
余文珮
叶枫
董训虎
赵远鹏
但国蓉
邹仲敏
机构
陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系防化医学教研室
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第21期2214-2221,共8页
基金
陆军军医大学青年培育项目(2018XQN03)
军队医学科技青年培育计划(20QNPY001)。
文摘
目的探讨蛋白水解酶DVC1在氮芥诱导人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用。方法利用siRNA干预DVC1表达,50μmol/L氮芥染毒细胞后,采用Western blot检测DNA损伤修复蛋白的表达;荧光酶标仪测定1~24 h DNA-蛋白交联总量;Slot blot检测DNA与O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^(6)-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)的共价交联;免疫沉淀检测MGMT泛素化水平。构建GST-DVC1融合蛋白,GST下拉实验检测DVC1与MGMT、泛素的结合。结果si-DVC1干预后,DNA-蛋白交联总量升高。氮芥降低交联蛋白MGMT原型的水平,但增强其泛素化水平;DVC1可结合泛素,si-DVC1可进一步增强MGMT的泛素化及DNA-MGMT的交联量,与泛素结合酶抑制剂NSC697923和蛋白酶体抑制剂MG132引起的交联结果类似。si-DVC1引起DNA损伤修复蛋白Rad51表达降低、Ku70表达升高。结论DNA-蛋白交联的清除依赖于交联蛋白的泛素化;DVC1通过与泛素相互作用,促进氮芥诱导的DNA-蛋白交联的清除,并维持DNA以同源重组方式修复损伤的能力。
关键词
氮芥
dvc1
DNA蛋白交联
O
6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
人支气管上皮细胞
Keywords
nitrogen mustard
dvc1
DNA-protein crosslink
O 6-methylguanine-DNA methyltransferase
human bronchial epithelial cells
分类号
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
R977.3 [医药卫生—药品]
R994.7 [医药卫生—毒理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DVC1在氮芥致人支气管上皮细胞DNA-蛋白交联损伤修复中的作用
程晋
余文珮
叶枫
董训虎
赵远鹏
但国蓉
邹仲敏
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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