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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞凋亡中P38和Caspase-3表达的影响 被引量:10
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作者 王红梅 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 王一菱 宫璀璀 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期672-674,共3页
目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞凋亡中P38、Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 3组 :①对照组 :只加DMEM(Sigma)培养液 (含体积分数 10 %胎牛血清 )培养 4 8h。②Br组 :终浓度为 2× 10 -5... 目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞凋亡中P38、Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 3组 :①对照组 :只加DMEM(Sigma)培养液 (含体积分数 10 %胎牛血清 )培养 4 8h。②Br组 :终浓度为 2× 10 -5mol/L 8 Br cAMP的培养液培养 4 8h。③Q组 :终浓度为 4 3μmol/L槲皮素的培养液培养 4 8h。对以上 3组细胞以TUNEL法染色计数细胞凋亡率。以免疫组化方法观察 3组细胞的P38MAPK IR和Caspase 3 IR反应性。结果 :Br组及Q组细胞凋亡率高于对照组 ;Br组及Q组细胞的P38MAPK IR高于对照组 ;Br组及Q组细胞的Caspase 3 IR亦高于对照组。P38MAPK IR与Caspase 3 IR呈正相关。P均 <0 .0 5。结论 :P38MAPK及Caspase 3参与了 8 Br cAMP及槲皮素诱导的Eca 10 展开更多
关键词 p38 MApK Caspase-3 细胞凋亡 ECA-109细胞 8-BR-CAMp 槲皮素
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二硫苏糖醇诱导Eca109细胞凋亡及P38磷酸化检测 被引量:5
2
作者 冯若 张娓 +2 位作者 杨继要 刘国红 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第5期833-834,共2页
目的:检测二硫苏糖醇(DTT)诱导Eca109细胞凋亡及磷酸化P38(PP38)水平。方法:取对数生长期Eca109细胞分为3组:2mmol/L DTT处理组、PP38抑制剂SB203580孵育细胞2h后再加DTT处理组及对照组。应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用免疫组... 目的:检测二硫苏糖醇(DTT)诱导Eca109细胞凋亡及磷酸化P38(PP38)水平。方法:取对数生长期Eca109细胞分为3组:2mmol/L DTT处理组、PP38抑制剂SB203580孵育细胞2h后再加DTT处理组及对照组。应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用免疫组织化学技术检测P38的磷酸化水平。结果:DTT组、SB203580+DTT组及对照组的细胞凋亡率分别为16.8%、7.8%和3.1%。DTT组和DTT+SB203580组细胞凋亡率均高于对照组(P<0.01);与DTT组相比,SB203580+DTT组凋亡率下降(P<0.01)。DTT组PP38水平高于对照组(P<0.01)。结论:DTT可诱导人食管癌Eca109细胞凋亡,P38磷酸化起促进凋亡的作用。 展开更多
关键词 p38 凋亡 二硫苏糖醇 ECA109细胞
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CD109、HMW-CK、Vimentin、p63和AR在基底细胞样乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:5
3
作者 侍朋举 蔡海峰 +2 位作者 牛凤玲 赵燕会 赵刚 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2012年第10期884-888,共5页
目的探讨CD109、高分子量细胞角蛋白(HMW-CK)、波形蛋白(Vimentin)、p63和雄激素受体(AR)在基底细胞样乳腺癌(BLBC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法将ER、HER-2均阴性,CK5/6和/或EGFR阳性表达者定义为BLBC,采用免疫组化SP法检测... 目的探讨CD109、高分子量细胞角蛋白(HMW-CK)、波形蛋白(Vimentin)、p63和雄激素受体(AR)在基底细胞样乳腺癌(BLBC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法将ER、HER-2均阴性,CK5/6和/或EGFR阳性表达者定义为BLBC,采用免疫组化SP法检测CD109、HMW-CK、Vimentin、p63和AR在86例BLBC、57例管腔细胞型(Luminal)乳腺癌和33例HER-2过表达型乳腺癌中的表达情况。结果 CD109在BLBC、Luminal型乳腺癌和HER-2过表达型乳腺癌组织中的阳性表达率分别为61.6%,8.8%和9.1%,HMW-CK分别为90.7%、26.3%和33.3%,AR分别为31.4%、71.9%和42.4%,组间差异均有统计学意义(P<0.05);Vimentin的阳性表达率分别为57.0%、42.1%和51.5%,p63分别为31.4%、29.8%和24.2%,组间差异均无统计学意义(P>0.05)。在BLBC中CD109、HMW-CK、Vimentin和p63的表达与临床病理特征无关(P>0.05),而AR的表达与组织学分级有关(P<0.05)。结论 CD109和HMW-CK是诊断BLBC的特异性标记物,而Vimentin和p63无诊断意义,AR表达缺失与BLBC的侵袭和恶性表型有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 CD109 HMW-CK VIMENTIN p63 AR
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p38MAPK在戊地昔布诱导Eca109细胞凋亡中的调控作用 被引量:6
4
作者 张玉军 郝军 +4 位作者 刘淑霞 左连富 刘俊茹 吴海江 郭建文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期497-501,共5页
目的探讨p38MAPK信号转导途径在戊地昔布诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的调控作用。方法将正常培养的人食管癌Eca109细胞随机分为正常对照组、戊地昔布组和戊地昔布+SB203580组;采用流式细胞术和DNA Ladder检测凋亡情况;RT-PCR检测p38mRN... 目的探讨p38MAPK信号转导途径在戊地昔布诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的调控作用。方法将正常培养的人食管癌Eca109细胞随机分为正常对照组、戊地昔布组和戊地昔布+SB203580组;采用流式细胞术和DNA Ladder检测凋亡情况;RT-PCR检测p38mRNA的表达变化;流式细胞术和免疫细胞化学检测p38蛋白的表达变化。结果①戊地昔布能够诱导Eca109细胞发生凋亡,并呈剂量依赖性,而SB203580能够部分降低戊地昔布诱导的Eca109细胞的凋亡率;②戊地昔布能够上调Eca109细胞中p38mRNA和蛋白的表达,而戊地昔布+SB203580组p38mRNA和蛋白的表达下降;③p38蛋白表达与凋亡率呈正相关。结论戊地昔布能够通过部分激活p38MAPK信号途径诱导Eca109细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 人食管癌Eca109细胞 戊地昔布 凋亡 p38MApK SB203580
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p16^(INK4α)重表达对人食管癌细胞系EC109生长的抑制作用 被引量:5
5
作者 周勇安 谷仲平 +2 位作者 王线妮 马群风 黄立军 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第8期877-881,共5页
目的探讨用腺病毒介导野生型的 p16基因在食管癌细胞系表达,研究重表达野生型 p16基凶对食管癌细胞系 EC109生长的抑制作用,为寻找食管癌致癌机制的研究及其基因治疗提供理论基础.方法用基因重组技术,将 pcDNA3-p16中的野生型 p16基因用... 目的探讨用腺病毒介导野生型的 p16基因在食管癌细胞系表达,研究重表达野生型 p16基凶对食管癌细胞系 EC109生长的抑制作用,为寻找食管癌致癌机制的研究及其基因治疗提供理论基础.方法用基因重组技术,将 pcDNA3-p16中的野生型 p16基因用 Kpn I/Bam H (?)进行双酶切,克隆入腺病毒表达载体pAdCMV 中,将重组质粒 pad-CMV-p16与腺病毒质粒 JM17用Lipofectamime 2000共转染293细胞,产生重组腺病毒.用重组腺病毒感染人食管癌细胞系 EC109,在感染后的不同时段,用免疫荧光、打点杂交方法检测 p16基因在细胞中的表达.用MTT 法及流式细胞仪观察 p16基因的表达对食管癌细胞株生长的影响.结果经酶切鉴定野生型 p16基因克隆入腺病毒表达载体中,与 JM17共转染293细胞后,可产生具有感染活性的重组腺病毒,用重组腺病毒感染食管癌细胞株 EC109细胞后,可抑制食管癌细胞的生长,同对照组相比其最大抑制率可达52.7%.Multipcycle 分析软件分析对细胞周期影响表明,处于 G_0~G_1期的细胞为41%~63%.感染后的细胞经 Dot blot 和 Westernblot 杂交证实,有外源的 p16mRNA 及蛋白的表达.结论重组腺病毒可将野生型 p16基因导入人食管癌细胞系EC109中,野生型 p16基因在 p16基因功能缺失的细胞中重表达能抑制癌细胞恶性生长.p16基因功能缺失是食管癌致癌因素之一. 展开更多
关键词 食管肿瘤 病理学 肿瘤细胞 p16基因表达 EC109
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涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ra sp21 p53基因表达影响的研究 被引量:7
6
作者 王明艳 许冬青 +5 位作者 刘华东 赵凤鸣 江励华 梁枫 张民庆 蔡宝昌 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第3期530-531,共2页
目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人... 目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ras p21、突变型p53基因表达的影响。此外以ICR纯种小鼠的骨髓细胞为材料,以微核为指标,观察涤痰化瘀汤的致变作用,以进行药物安全性评估。结果:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞有抑制作用;含药血清组与对照血清组比ras p21、突变型p53基因表达均降低;涤痰化瘀汤药物组的微核率与正常对照组比无显著差别。结论:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长有明显的抑制作用且对ras p21、突变型p53基因表达有影响。涤痰化瘀汤无致变作用。 展开更多
关键词 涤痰化瘀汤 人食管癌ECA-109细胞 抑制作用 rasp21基因 p53基因
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绵羊肺炎支原体P109蛋白质分子特征、原核表达及其免疫反应性 被引量:8
7
作者 谢珊珊 黄金 杨发龙 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期824-828,共5页
为了研究绵羊肺炎支原体P109蛋白质的结构与功能,本试验对p109基因进行生物信息学分析,并对其部分基因片段进行了PCR扩增、克隆和原核表达,采用Western-blot方法对其免疫反应性进行分析。结果显示,P109基因与猪肺炎支原体黏附相关基因mh... 为了研究绵羊肺炎支原体P109蛋白质的结构与功能,本试验对p109基因进行生物信息学分析,并对其部分基因片段进行了PCR扩增、克隆和原核表达,采用Western-blot方法对其免疫反应性进行分析。结果显示,P109基因与猪肺炎支原体黏附相关基因mhp384高度同源。重组蛋白质在大肠杆菌Rosetta(DE3)工程菌中成功获得表达,以包涵体的形式存在;经纯化的重组蛋白质与山羊抗绵羊肺炎支原体全菌血清发生结合反应,表明P109蛋白质是绵羊肺炎支原体的免疫原之一。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 p109蛋白质 原核表达 免疫反应性
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斑蝥酸钠对体外培养的人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的影响 被引量:5
8
作者 梁枫 王明艳 许冬青 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期2064-2065,共2页
目的研究斑蝥酸钠对体外培养的人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的影响。方法采用流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠处理前后人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的变化。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24h均可使Bcl-2、p53基因在人... 目的研究斑蝥酸钠对体外培养的人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的影响。方法采用流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠处理前后人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的变化。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24h均可使Bcl-2、p53基因在人食管癌Eca109细胞中的表达下降(p<0.01)。结论斑蝥酸钠可抑制Bcl-2、p53基因在人食管癌Eca109细胞中的表达。 展开更多
关键词 斑蝥酸钠 BCL-2 p53 人食管癌Eca109细胞株
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LINC01140通过miR-452-5p/Wnt/β-catenin轴调控食管鳞状细胞癌Eca109细胞的增殖与侵袭 被引量:3
9
作者 郭艳丽 尹情 +4 位作者 韩俊淑 郭炜 沈素朋 梁佳 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期900-907,共8页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01140在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织及细胞中的表达及其对Eca109细胞增殖与侵袭的影响及其分子机制。方法:选取2012年3月至2015年5月河北医科大学第四医院收治的13... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01140在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织及细胞中的表达及其对Eca109细胞增殖与侵袭的影响及其分子机制。方法:选取2012年3月至2015年5月河北医科大学第四医院收治的133例ESCC患者的临床资料和GEPIA数据库中收集的182例ESCC组织及286例食管正常黏膜组织的LINC01140表达数据,以及ESCC细胞系Kyse150、Eca109和TE13。用qPCR法检测癌组织和细胞中LINC01140的表达水平,分析其表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。分别将pcDNA3.1-LINC01140、阴性对照(pcDNA3.1-NC)或miR-452-5p mimic及阴性对照(miR-NC)转染到Eca109细胞,MTS、Transwell实验分别检测细胞的增殖与侵袭能力。用双荧光报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测LINC01140与miR-452-5p的靶向结合作用及LINC01140对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果:LINC01140在ESCC组织和细胞中表达均显著下调(均P<0.01),LINC01140低表达与ESCC患者年龄、淋巴结转移、TNM分期及OS密切相关(均P<0.05)。LINC01140过表达明显抑制Eca109细胞的增殖及侵袭能力(均P<0.01)。机制研究表明,LINC01140可能通过竞争结合miR-452-5p影响Wnt/β-catenin信号通路的活化水平继而调控Eca109细胞的恶性生物学行为。结论:LINC01140通过靶向miR-452-5p/Wnt/β-catenin轴促进ESCC细胞的增殖与侵袭能力,其有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的标志物。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 ECA109细胞 LINC01140 miR-452-5p WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖 侵袭
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p27^(Kip1)基因V109G多态性与乳腺癌易感性的Meta分析 被引量:2
10
作者 韦凤 陈巍魏 +4 位作者 许晶 聂伟伟 王丽 陈龙邦 管晓翔 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2012年第1期24-27,共4页
目的探讨p27Kip1(CDKN1B,以下简称p27)基因V109G多态性与乳腺癌易感性的关系。方法检索Med-line、Pubmed、Web of Science和CNKI数据库,获取p27基因V109G多态性与乳腺癌易感性的相关研究,以病例组和对照组p27基因V109G基因型分布的比值... 目的探讨p27Kip1(CDKN1B,以下简称p27)基因V109G多态性与乳腺癌易感性的关系。方法检索Med-line、Pubmed、Web of Science和CNKI数据库,获取p27基因V109G多态性与乳腺癌易感性的相关研究,以病例组和对照组p27基因V109G基因型分布的比值比(OR)为效应指标,确定纳入标准,对文献进行评价筛选和异质性检验,用Meta分析软件对各研究原始结果进行统计处理,计算合并OR值及95%可信区间。结果按照纳入标准共入选3篇文献,累计病例1853例,对照病例1516例,Meta分析结果显示合并OR值为0.95(95%可信区间:0.82~1.12,Z值为0.58)。结论以目前相关研究结果的Meta分析显示,p27基因V109G基因多态性与乳腺癌易感性之间不存在相关性,即p27基因V109G多态性不影响个体患乳腺癌的风险。 展开更多
关键词 乳腺癌 p27 V109G 多态性 易感性 META分析
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p15^(INK4B)基因转染对人食管鳞癌细胞EC109增殖的抑制作用 被引量:2
11
作者 张学彦 刘铁夫 +2 位作者 于旸 刘伟 崔希威 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1945-1950,共6页
目的:探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用PCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的P15蛋白变化:流... 目的:探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用PCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的P15蛋白变化:流式细胞仪分析细胞周期变化,应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响.结果:p15转染细胞存在外源p15基因,并有P15蛋白高表达;EC109-p15细胞生长速度低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组,集落形成率显著低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组(20.8±1.3%vs54.3±3.2%,56.8±2.3%,P<0.01);流式细胞仪观察到P15蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(62.4±7.1%vs38.0±5.8%,34.4±1.0%,P<0.01),S期比例显著低于空载体组和未转染组(21.1±1.3%vs35.5±2.4%,36.3±0.7%,P<0.01),并出现亚G1峰(凋亡峰).透射电镜亦发现p15转染组发生细胞凋亡.结论:p15基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡. 展开更多
关键词 p15^INK4B 基因转染 食管鳞癌 食管鳞癌细胞 EC109 细胞增殖 抑制作用 流式细胞仪分析 p15基因 p15蛋白
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DTT与顺铂诱导对食管癌Eca109细胞磷酸化P38表达的影响 被引量:1
12
作者 冯若 翟文龙 +2 位作者 刘国红 金辉 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第5期893-895,共3页
目的:探讨磷酸化P38在顺铂和DTT诱导的食管癌Eca109细胞凋亡中的作用。方法:分别用DTT与顺铂诱导处理食管癌Eca109细胞,未加药组作为对照。采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;用免疫组化方法检测磷酸化P38的表达情况。结果:与对照组相比... 目的:探讨磷酸化P38在顺铂和DTT诱导的食管癌Eca109细胞凋亡中的作用。方法:分别用DTT与顺铂诱导处理食管癌Eca109细胞,未加药组作为对照。采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;用免疫组化方法检测磷酸化P38的表达情况。结果:与对照组相比,DTT处理组及顺铂处理组细胞凋亡率明显升高。免疫组化结果显示:2处理组磷酸化P38的水平均明显高于对照组(P<0.05);DTT处理组磷酸化P38大部分位于细胞核内,而顺铂组磷酸化P38则主要弥散于细胞浆内。结论:磷酸化P38在DTT和顺铂诱导的食管癌Eca109细胞凋亡时细胞内分布不同,激活的P38可能通过不同途径参与细胞凋亡。 展开更多
关键词 p38 凋亡 顺铂 DTT Eca109细胞系
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p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性的Meta分析 被引量:1
13
作者 韦凤 韩萍 +1 位作者 罗阔 杨志祥 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第17期1360-1365,共6页
目的:通过Meta分析系统评价p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性的关系。方法:检索PubMed、Medline、Web of Science和中国知网等数据库中研究p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性关系的研究。运用Rev-Man5.0软件进行异质性检验、系统... 目的:通过Meta分析系统评价p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性的关系。方法:检索PubMed、Medline、Web of Science和中国知网等数据库中研究p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性关系的研究。运用Rev-Man5.0软件进行异质性检验、系统性评价和分层亚组分析,计算合并OR及95%CI;应用State 11.0软件进行定量发表偏倚检验。结果:共纳入13项研究,累计病例组4 894例,对照组5 413例。G等位基因携带者肿瘤总体易感性降低,OR=0.81,95%CI=0.66~0.99,P=0.04,尤其是前列腺癌(OR=0.60,95%CI=0.36~0.98,P=0.04)和食管癌(OR=0.34,95%CI=0.22~0.55,P<0.01)。剔除不符合或不能进行HWE检验的研究后,再次行Meta分析。结果显示,G等位基因与肿瘤易感性无相关性,OR=0.82,95%CI=0.64~1.03,P=0.09。高加索人群(OR=0.97,95%CI=0.84~1.12,P=0.67)和亚洲人群(OR=0.77,95%CI=0.57~1.02,P=0.07)、基于医院(OR=0.70,95%CI=0.42~1.17,P=0.17)和社区(OR=0.86,95%CI=0.67~1.11,P=0.24)的肿瘤患者,p27Val109Gly基因多态性与肿瘤易感性无明显相关性。结论:p27Val109Gly基因多态性G等位基因与肿瘤的易感性呈负相关,尤其是前列腺癌和食管癌。这种相关性在高加索人、亚洲人及对照组来源于医院或社区的患者中不显著。 展开更多
关键词 p27 Val109Gly 基因多态性 肿瘤 易感性 META分析
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EGCG对人食管癌ECa109细胞生长凋亡及其p16基因甲基化状态、mRNA和蛋白表达水平的影响 被引量:1
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作者 王永连 白玉 王忠民 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第10期1437-1441,共5页
目的探讨表没食子儿茶素食子酸酯(EGCG)对人食管癌ECa109细胞生长及凋亡的作用,并检测其对ECa109细胞中p16基因甲基化状态、mRNA和蛋白表达水平的影响。方法以0、25、50、100、200 mg/L浓度的EGCG分别作用于食管癌ECa109细胞24、48、72... 目的探讨表没食子儿茶素食子酸酯(EGCG)对人食管癌ECa109细胞生长及凋亡的作用,并检测其对ECa109细胞中p16基因甲基化状态、mRNA和蛋白表达水平的影响。方法以0、25、50、100、200 mg/L浓度的EGCG分别作用于食管癌ECa109细胞24、48、72、96 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ECa109细胞吸光度值,观察细胞存活率;用流式细胞术测定不同浓度EGCG处理后的细胞凋亡率,甲基化特异性PCR(MSP)检测抑癌基因p16在不同药物浓度下的甲基化状态,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测基因p16 mRNA的表达,并用免疫印迹法Western blot检测p16蛋白的表达情况。结果 EGCG处理食管癌ECa109细胞后,MTT法测得细胞存活率随着EGCG浓度和作用时间的增加而降低,各浓度间比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪凋亡检测显示,在96 h时25、50、100、200 mg/L EGCG处理的细胞凋亡率分别为9.98%、15.60%、19.40%、27.20%,与0 mg/L(0.21%)处理比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MSP法显示,p16基因在未加药组(0 mg/L)为高甲基化状态,EGCG处理食管癌ECa109细胞96 h后,25 mg/L组p16基因仍为甲基化,而50 mg/L组出现部分甲基化,100、200 mg/L组表现为去甲基化状态。FQ-PCR法测得25、50、100、200 mg/L组p16基因mRNA相对表达量分别是1.18±0.43、1.29±0.11、1.52±0.74、1.67±0.37,与0 mg/L组(1.00±0.00)比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,EGCG处理细胞96 h后,0、25 mg/L组p16蛋白为无表达,50、100、200 mg/L组恢复表达。结论 EGCG可明显抑制ECa109细胞增殖,诱导ECa109细胞凋亡,且具有明显的剂量和时间依赖性;EGCG可使ECa109细胞中p16基因去甲基化,增加其mRNA和蛋白表达;EGCG可能通过逆转p16基因高甲基化抑制食管癌ECa109细胞。 展开更多
关键词 食管癌 ECA109细胞 EGCG p16 甲基化
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p27Val109Gly基因多态性在肿瘤发生发展中的作用机制 被引量:1
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作者 韦凤 管晓翔 陈龙邦 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2011年第9期845-848,共4页
p27是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CDKI)家族中的重要成员,能阻滞细胞进入G1期或S期,其蛋白表达水平及活性改变与肿瘤发生发展有关。p27基因存在多个单核苷酸多态性(SNPs)位点,其中p27Val109Gly(rs2066827)基因多态性位于其降解蛋白J... p27是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CDKI)家族中的重要成员,能阻滞细胞进入G1期或S期,其蛋白表达水平及活性改变与肿瘤发生发展有关。p27基因存在多个单核苷酸多态性(SNPs)位点,其中p27Val109Gly(rs2066827)基因多态性位于其降解蛋白Jab1结合区,导致p27与降解蛋白Jab1的不同结合活性,从而影响其在肿瘤发生发展中的作用,因此被认为是p27基因最重要的多态性。本文拟综述p27Val109Gly基因多态性在肿瘤发生发展中的分子机制。 展开更多
关键词 p27 Val109Gly 基因多态性 肿瘤
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S1P5对食管癌细胞Eca109黏附能力的影响 被引量:1
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作者 胡为民 李丽 +4 位作者 唐恩洁 敬保迁 冯莉 王朝莉 任碧轩 《西部医学》 2010年第6期987-990,共4页
目的研究S1P5对食管鳞癌Eca109细胞黏附能力的影响。方法从人正常食管黏膜上皮克隆S1P5基因,构建表达载体S1P5-EGFP,转染Eca109细胞,经G418筛选,获得S1P5-EGFP/Eca109稳定细胞株。以对照载体Control-EGFP转染的Eca109细胞作为对照,荧光... 目的研究S1P5对食管鳞癌Eca109细胞黏附能力的影响。方法从人正常食管黏膜上皮克隆S1P5基因,构建表达载体S1P5-EGFP,转染Eca109细胞,经G418筛选,获得S1P5-EGFP/Eca109稳定细胞株。以对照载体Control-EGFP转染的Eca109细胞作为对照,荧光显微镜下观察细胞的形态,用黏附试验评价其黏附能力。结果成功构建S1P5-EGFP和Control-EGFP载体并转染Eca109细胞获得稳定细胞株。S1P5表达于细胞膜并使细胞略呈梭形改变。S1P5过表达致Eca109细胞黏附能力明显低于对照(P<0.05),并且不受其配体1-磷酸鞘氨醇(S1P)的影响。结论 S1P5组成性抑制Eca109细胞的黏附能力,食管癌细胞可能通过下调S1P5的表达增强其黏附。 展开更多
关键词 S1p5 食管癌 ECA109细胞
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DSR-PD150P数字摄像机的主要特点及使用技巧 被引量:1
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作者 杨斌 钟穗珠 《中国有线电视》 北大核心 2003年第3期129-130,共2页
索尼DSR -PD15 0P数字摄像机作为专业级的设备 ,由于性能较好、价格适中 ,在电视台和学校电教中心使用较普遍。分析其主要技术特点 ,并对一些特殊功能的使用技巧作简单介绍。
关键词 dsr-pd150p 使用技巧 数字摄像机 数字分量 模数转换 数码照相
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钼对食管癌细胞ECA-109化疗增敏及食管癌干细胞p75NTR的抑制 被引量:5
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作者 蔡中立 丁春萍 +2 位作者 冀胜辉 刘红锋 陈凡州 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第50期8084-8089,共6页
背景:食管癌化疗过程中很容易出现耐受性,无法达到令人满意的治疗效果,通过使用适当的敏感剂可以有效抑制肿瘤细胞以及肿瘤干细胞的增殖。目的:探讨钼对食管癌细胞ECA-109化疗敏感性的影响及对食管癌干细胞p75NTR的抑制作用。方法:取对... 背景:食管癌化疗过程中很容易出现耐受性,无法达到令人满意的治疗效果,通过使用适当的敏感剂可以有效抑制肿瘤细胞以及肿瘤干细胞的增殖。目的:探讨钼对食管癌细胞ECA-109化疗敏感性的影响及对食管癌干细胞p75NTR的抑制作用。方法:取对数期食管癌细胞ECA-109随机分为空白组、单纯顺铂组、单纯加钼组、顺铂加钼组,后3组采用不同的质量浓度进行实验。利用MTT法检测各组食管癌细胞ECA-109生长增殖情况,流式细胞仪检测各组食管癌干细胞p75NTR比例。结果与结论:不同质量浓度顺铂对食管癌细胞ECA-109增殖有一定的抑制作用,且对食管癌干细胞具有较强的杀伤作用,随着给药质量浓度和时间的增加均呈增强趋势;单纯钼对食管癌细胞ECA-109的增殖抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用均不明显;顺铂和钼联用对食管癌细胞ECA-109的抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用增强,与单纯同质量浓度顺铂组及空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),且呈一定的浓度、时间依赖性。结果表明,钼可以提高顺铂的化疗敏感性,促进顺铂对食管癌细胞ECA-109以及食管癌干细胞p75NTR抑制作用的增强,可以作为一种重要的化疗增敏剂。 展开更多
关键词 食管肿瘤 顺铂 组织工程 干细胞 肿瘤干细胞 食管癌 ECA-109细胞 化疗 敏感性 化疗增敏 p75神经营养因子受体
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p38在二硫苏糖醇与顺铂诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的作用
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作者 冯若 刘国红 +2 位作者 金辉 邢文英 张钦宪 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第8期67-68,共2页
将人食管癌Eca109细胞分为七组,其中三组分别加二硫苏糖醇(DTT,Ds)、顺铂(Cs)及二药联合(Ds+Cs)处理细胞,另三组则先用磷酸化p38特异性抑制剂SB203580孵育,再分别加Ds、Cs及Ds+Cs处理细胞,未加药组作为对照(C′)。采用流式细胞仪技术检... 将人食管癌Eca109细胞分为七组,其中三组分别加二硫苏糖醇(DTT,Ds)、顺铂(Cs)及二药联合(Ds+Cs)处理细胞,另三组则先用磷酸化p38特异性抑制剂SB203580孵育,再分别加Ds、Cs及Ds+Cs处理细胞,未加药组作为对照(C′)。采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率。结果与C′比较,各组均存在明显差异(P均<0·01);SB203580孵育细胞后,与相应组别比较,Ds、Cs、Ds+Cs凋亡率均明显下降(P均<0·01)。证实p38MAPK在Ds和Cs诱导食管癌Eca109细胞凋亡中被显著激活,p38MAPK的激活可能是多种上游凋亡信号传导必经的共同通路。 展开更多
关键词 p38 凋亡 顺铂 DTT Eca109细胞系 食管肿瘤
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