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DPPA2和Cyclin H在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量：2
1
作者 徐纪伟 孙丹华 《医学研究杂志》 2020年第1期94-99,共6页
目的检测发育多能性相关基因2(DPPA2)及细胞周期蛋白H(Cyclin H)在人胃癌组织中的表达,探讨其临床病理关系。方法收集60例胃癌患者的癌组织和癌旁组织,然后将每个组织块切成两部分,一部分组织用石蜡包埋,剩余部分组织立即装入冻存管放... 目的检测发育多能性相关基因2(DPPA2)及细胞周期蛋白H(Cyclin H)在人胃癌组织中的表达,探讨其临床病理关系。方法收集60例胃癌患者的癌组织和癌旁组织,然后将每个组织块切成两部分,一部分组织用石蜡包埋,剩余部分组织立即装入冻存管放于超低温冰箱中冻存,采用免疫组织化学及免疫印迹方法检测两种组织内的DPPA2和Cyclin H表达水平,并结合患者资料进行临床病理相关性分析。结果通过免疫组织化学检测发现DPPA2和Cyclin H在胃癌组织中的阳性率分别为91.7%(55/60)和90.0%(54/60),而两种蛋白在对应癌旁组织中的阳性率分别为8.30%(5/60)和6.67%(4/60),DPPA2和Cyclin H在胃癌组织内的表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),且DPPA2在胃癌组织内的含量与肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润深度具有关联性,Cyclin H在胃癌组织内的含量与淋巴结转移具有关联性(P<0.05)。免疫印迹检测结果显示,DPPA2和Cyclin H在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DPPA2和Cyclin H在人胃癌组织中呈现高水平表达,对胃癌的发生、发展及患者预后具有重要意义,可以作为胃癌恶性程度和预后不良的标志,在临床诊断治疗方面具有重要指导意义。 展开更多
关键词 dppa2 CYCLIN H 胃癌
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Dppa2基因启动子区Oct4结合位点突变对其活性的影响
2
作者 马娜 陈天姬 +2 位作者 李珑 陈婧 杜娟 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第21期4001-4004,共4页
目的:探讨Dppa2基因5'端启动子区Oct4结合位点突变对Dppa2基因启动子活性的影响。方法:PCR扩增包括Oct4结合位点的Dppa2基因5'端转录起始点上游-2439^+293 bp的启动子序列,片段长度为2732 bp。将该片段连接到p GL3-Basic载体,... 目的:探讨Dppa2基因5'端启动子区Oct4结合位点突变对Dppa2基因启动子活性的影响。方法:PCR扩增包括Oct4结合位点的Dppa2基因5'端转录起始点上游-2439^+293 bp的启动子序列,片段长度为2732 bp。将该片段连接到p GL3-Basic载体,构建野生型p GL3-2439表达载体。采用定点突变法,将-1959^-1957位碱基的GCA突变成TAG,构建Oct4结合位点突变型p GL3-mo2439表达载体。用上述两种表达载体、PGL3-basic载体和Oct4表达载体分别瞬时转染HEK 293细胞。细胞培养48 h后,利用双荧光素酶报告系统测定各组细胞表达的荧光素酶的相对活性。结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定,证实野生型(p GL3-2439)和突变型(p GL3-mo2439)载体构建成功。荧光素酶活性测定结果显示,转染Dapp2基因启动子野生型p GL3-2439表达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为16.307,突变型p GL3-mo2439表达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为10.634。Oct4结合位点突变后,Dppa2基因启动子区转录活性较野生型降低了35%。结论:Dppa2基因5'端启动子区-1959^-1957位的Oct4结合位点突变可能导致Dppa2基因启动子活性下降。 展开更多
关键词 dppa2启动子 Oct4结合位点 荧光素酶
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人类胚胎干细胞分化过程中DPPA2基因的表达情况分析(英文) 被引量：2
3
作者 陈天姬 杜娟 +2 位作者 杜丽丽 欧阳琦 卢光琇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第2期106-111,共6页
DPPA2(Developmental Pluripotency-Associated gene2)是近年来发现的在多能性细胞中特异表达的一个基因,它被认为参与维持干细胞的"干性".但目前为止,并没有关于该基因在人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)... DPPA2(Developmental Pluripotency-Associated gene2)是近年来发现的在多能性细胞中特异表达的一个基因,它被认为参与维持干细胞的"干性".但目前为止,并没有关于该基因在人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)分化过程中的表达情况的报道,其功能也尚不清楚.通过Real-time PCR对DPPA2基因在hESCs分化过程中的表达情况进行分析,此外还对其在异常核型hESCs,人类胚胎癌细胞(human embryonic carcinoma cells,hECCs)NTERA-2以及其它5种癌细胞中的表达情况进行检测.结果表明DPPA2基因在hESCs中特异表达,其表达水平随着hESCs的分化而显著下调.该基因在异常核型hESCs和NTERA-2细胞中也有表达,但在其它肿瘤细胞中未检测到该基因的表达.此外,以EGFP-N1系统为基础的亚细胞信号定位结果表明,DPPA2是一个核蛋白.这些结果提示,DPPA2基因可能在维持hESCs特性的过程中发挥着重要的作用. 展开更多
关键词 dppa2基因 人类胚胎干细胞 干性 核蛋白
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小鼠Dppa2基因shRNA载体的构建及干扰效果的检测 被引量：1
4
作者 陈天姬 杜娟 卢光琇 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第3期404-407,共4页
目的:构建有效的针对小鼠Dppa2基因的shRNA(short hairpin RNA)干扰载体。方法:设计合成2对针对小鼠Dppa2基因的shRNA序列以及1对与哺乳动物基因组无同源性的shRNA序列作为对照,构建pSUPER.Retro.puro干扰载体并进行PCR,酶切和测序验证... 目的:构建有效的针对小鼠Dppa2基因的shRNA(short hairpin RNA)干扰载体。方法:设计合成2对针对小鼠Dppa2基因的shRNA序列以及1对与哺乳动物基因组无同源性的shRNA序列作为对照,构建pSUPER.Retro.puro干扰载体并进行PCR,酶切和测序验证。进一步将各干扰载体分别转染小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs),RT-PCR检测干扰效率。结果:PCR,酶切和测序验证均表明各shRNA载体构建成功。将空载体及各重组载体分别转染小鼠ESCs发现,干扰组Dppa2基因表达水平相对于空载体对照组和阴性shRNA载体对照组明显下调。结论:成功构建了有效的针对小鼠Dppa2基因的shRNA干扰载体,为进一步研究Dppa2基因在维持小鼠ESCs不分化过程中的作用提供了基础。 展开更多
关键词 dppa2 RNA干扰(RNAinterference RNAi) shRNA载体
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DPPA2基因的研究进展 被引量：1
5
作者 赵谦 杜娟 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第18期3565-3568,共4页
DPPA2(Developmental pluripotency-associated gene 2)是近年来发现的一种在多能性细胞和某些癌组织中特意表达的基因。它与早期胚胎发育密切相关,参与维持胚胎干细胞的多能性及自我更新,还在体细胞重编程为多能性诱导干细胞的过程中... DPPA2(Developmental pluripotency-associated gene 2)是近年来发现的一种在多能性细胞和某些癌组织中特意表达的基因。它与早期胚胎发育密切相关,参与维持胚胎干细胞的多能性及自我更新,还在体细胞重编程为多能性诱导干细胞的过程中发挥了作用。此外,它还是一种新的肿瘤抗原,有望成为某些恶性肿瘤的特异性免疫治疗新靶点。本文就DPPA2的结构、功能,以及它与胚胎发育、恶性肿瘤、体细胞重编程的关系等方面的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 dppa2 胚胎发育 胚胎干细胞 恶性肿瘤
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胚胎干细胞中DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的研究
6
作者 杨洁 雷霆钧 +3 位作者 田平平 吴传芳 欧阳劲 秦岭 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期366-370,共5页
本文分别构建了小鼠胚胎干细胞的带FLAG多肽标签的DPPA和带HA多肽标签的DPPA4蛋白真核表达载体.将该质粒转入小鼠成纤维细胞HEK293中进行细胞体内表达,并利用免疫印记和免疫共沉淀技术证明了DPPA2和DPPA4蛋白在细胞内可以相互作用.因此... 本文分别构建了小鼠胚胎干细胞的带FLAG多肽标签的DPPA和带HA多肽标签的DPPA4蛋白真核表达载体.将该质粒转入小鼠成纤维细胞HEK293中进行细胞体内表达,并利用免疫印记和免疫共沉淀技术证明了DPPA2和DPPA4蛋白在细胞内可以相互作用.因此,提出了在胚胎干细胞的自我更新和分化等过程中,DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的结论. 展开更多
关键词 dppa2 PDDA4 胚胎干细胞 免疫印记 免疫共沉淀
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