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小鼠DNaseI基因真核表达质粒的构建及鉴定 被引量:1
1
作者 谭国珍 米向斌 +2 位作者 尹若菲 叶艳芬 曾凡钦 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第B06期27-28,共2页
[目的]构建小鼠DNaseI基因真核表达质粒。[方法]采用RT-PCR法从小鼠肾组织中获得DNaseI基因的cDNA,克隆至真核表达载体pBluescript(PBS)上,选择阳性克隆并测序。[结果]扩增得到的DNaseI基因编码区的cDNA全长852 bp,编码283个(理论值)氨... [目的]构建小鼠DNaseI基因真核表达质粒。[方法]采用RT-PCR法从小鼠肾组织中获得DNaseI基因的cDNA,克隆至真核表达载体pBluescript(PBS)上,选择阳性克隆并测序。[结果]扩增得到的DNaseI基因编码区的cDNA全长852 bp,编码283个(理论值)氨基酸残基,与Genebank中序列完全一致。[结论]小鼠DNaseI基因真核表达质粒已成功构建,为进一步实施DNaseI基因治疗SLE奠定了基础。 展开更多
关键词 dnasei 基因 质粒 小鼠 系统性红斑狼疮
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食管癌高发家族成员脆性部位,SCE与DNaseI敏感区的相关研究 被引量:1
2
作者 周宏远 刘凯 +2 位作者 高秀坤 肖林 陶德明 《四川肿瘤防治》 1995年第4期3-6,共4页
采用延长培养时间的低浓度对酸诱导及Brdu替代2~4个细胞周期的方法及染色体原位切口移位技术,对30例高发家族成员,24例低发家族成员及20例正常人进行脆性部位、SCE及DNaseI敏感区的观察分析。结果表明:高发家... 采用延长培养时间的低浓度对酸诱导及Brdu替代2~4个细胞周期的方法及染色体原位切口移位技术,对30例高发家族成员,24例低发家族成员及20例正常人进行脆性部位、SCE及DNaseI敏感区的观察分析。结果表明:高发家族的脆性部位和SCE检出率(6.90%;7.56±1.41)明显高于低发家族(3.50%;5.24±0.92)及正常人(3.20%;4.86±1.51)P<0.05。SCE发生在16个高发染色体位点上,多居于染色体G显带的浅带区并与脆性部位、癌基因位点及DNaseI敏感区有一定的相关性。 展开更多
关键词 食管癌 脆性部位 SCE dnasei敏感区
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荧光分光光度法检测系统性红斑狼疮患者血清DNaseI酶意义探讨
3
作者 汤红峰 曾凡钦 +1 位作者 陈宜芳 李佰有 《岭南皮肤性病科杂志》 2000年第4期6-9,共4页
目的:探讨血清DNaseI异常对SLE发生发展的影响。方法:荧光分光光度法检测68例SLE患者。结果:SLE患者血清DNaseI水平低于正常,活动期患者低于缓解期患者,伴肾损害患者低于非肾损害患者。血清DNase I水平与血沉、ANA呈负相关,与补体C_3、... 目的:探讨血清DNaseI异常对SLE发生发展的影响。方法:荧光分光光度法检测68例SLE患者。结果:SLE患者血清DNaseI水平低于正常,活动期患者低于缓解期患者,伴肾损害患者低于非肾损害患者。血清DNase I水平与血沉、ANA呈负相关,与补体C_3、C_4呈正相关,与病情活动积分及DNA含量呈负相关。结论:荧光分光光度法可简便、灵敏地检测DNaseI水平,SLE患者血清DNaseI水平下降,DNA含量升高,提示DNaseI水平下降是导致SLE患者体内DNA升高的重要原因,并在SLE的发生发展中起者重要作用。 展开更多
关键词 患者 血清DNA SLE 荧光分光光度法 发生发展 红斑狼疮 升高 检测系统
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Interactions between HMG proteins and the core sequence of DNaseI hypersensitive site 2 in the locus control region (LCR) of the human β-Mike globin gene cluster
4
作者 赵晖 张树冰 +1 位作者 蒋俶 钱若兰 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2000年第6期631-636,共6页
HMG proteins are abundant chromosomal non-histone proteins. It has been suggested that the HMG proteins may play an important role in the structure and function of chromatin. In the present study, the binding of HMG p... HMG proteins are abundant chromosomal non-histone proteins. It has been suggested that the HMG proteins may play an important role in the structure and function of chromatin. In the present study, the binding of HMG proteins (HMG1/2 and HMG14/17) to the core DNA sequence of DNasel hypersensitive site 2 (HS2core DNA sequence, -10681-10970 bp) in the locus control region (LCR) of the human β-like globin gene cluster has been examined by using both the in vitro nucleosome reconstitution and the gel mobility shift assays. Here we show that HMG1/2 can bind to the naked HS2core DNA sequence, however, HMG 14/17 cannot. Using the in vitro nucleosome reconstitution we demonstrate that HMG14/17 can bind to the HS2core DNA sequence which is assembled into nucleosomes with the core histone octamer transferred from chicken erythrocytes. In contrast, HMG 1/2 cannot bind to the nucleosomes reconstituted in vitro with the HS2core DNA sequence. These results indicate that the binding patterns between HMG proteins and the HS2core DNA sequence which exists in different states (the naked DNA or the in vitro reconstituted nucleosomal DNA) are quite different. We speculate that HMG proteins might play a critical role in the regulation of the human β-like globin gene's expression. 展开更多
关键词 HMG proteins HUMAN β-like GLOBIN gene CLUSTER dnasei HYPERSENSITIVE SITE 2 (HS2) the in vitro nucleosome reconstitution.
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中药治疗对β-珠蛋白基因簇位点调控区高敏位点2与核蛋白结合作用的影响 被引量:6
5
作者 柴立民 吴志奎 +2 位作者 张新华 刘志昂 蔡辉国 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期239-241,i002,共4页
目的 探讨中药益髓生血颗粒调控 β- 珠蛋白mRNA的分子机制。 方法 中药治疗 3个月 ,分别提取正常人和患者治疗前后骨髓有核细胞的核蛋白 ;采用凝胶滞后实验 ,将核蛋白与HS2位点序列探针结合后 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 ,观察电泳... 目的 探讨中药益髓生血颗粒调控 β- 珠蛋白mRNA的分子机制。 方法 中药治疗 3个月 ,分别提取正常人和患者治疗前后骨髓有核细胞的核蛋白 ;采用凝胶滞后实验 ,将核蛋白与HS2位点序列探针结合后 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 ,观察电泳图谱的改变。结果 患者治疗前的核蛋白与探针结合后的电泳速率与正常人存在明显差异 ,而患者治疗后核蛋白与探针结合后与正常人的电泳图谱接近。结论 中药治疗后影响 β- 珠蛋白基因簇位点调控区HS2位点与核蛋白因子GATA 1的结合作用 ,这可能是中药治疗本病的分子机制之一。 展开更多
关键词 中医药 β珠蛋白基因簇位点调控区 dnasei 高敏位点2 核蛋白 结合作用
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中国人血清脱氧核糖核酸酶I(DNase I)的遗传多态性研究
6
作者 柳燕 李莉 陈捷 《中国法医学杂志》 CSCD 1997年第3期152-155,共4页
应用薄层PAGIF(T=5%,C=3%)结合特异酶底物染色技术,调查了中国随机人群DNaseI遗传多态性的分布,检出在中国人群中两种常见的等位基因,即DNaseI*1和DNasel*2,其基因频率DNaseI*1为0.53,DNaseI*2为0.47。家系分析表明:子代... 应用薄层PAGIF(T=5%,C=3%)结合特异酶底物染色技术,调查了中国随机人群DNaseI遗传多态性的分布,检出在中国人群中两种常见的等位基因,即DNaseI*1和DNasel*2,其基因频率DNaseI*1为0.53,DNaseI*2为0.47。家系分析表明:子代个体谱带分别来自父亲和母亲,谱带在亲代和子代之间的传递符合孟德尔遗传规律。按Hardy-Weinberg法则进行吻合度检验,观察值与期望值一致。人血清DNaseI等电点经测定为4.0。 展开更多
关键词 中国人 dnasei 遗传多态性 基因频率 法医学鉴别
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热休克前后人hsp90 β基因DNase I高敏感位点的研究
7
作者 施一江 吴宁华 《中日友好医院学报》 1998年第3期243-244,共2页
1材料与方法11材料限制性内切酶SacI、脱氧核糖核酸酶Ⅰ(deoxyribonucleaseⅠ,DNaseⅠ)为德国BoehringerMannheim公司产品;Jurkat细胞株、人hsp90β基因组DNA... 1材料与方法11材料限制性内切酶SacI、脱氧核糖核酸酶Ⅰ(deoxyribonucleaseⅠ,DNaseⅠ)为德国BoehringerMannheim公司产品;Jurkat细胞株、人hsp90β基因组DNA1102bp/173bp片段由本... 展开更多
关键词 热休克 HSP90Β基因 高敏感位点 dnasei
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PCR防污染技术的研究进展 被引量:4
8
作者 王璐茜 邹秉杰 周国华 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第14期2797-2800,共4页
聚合酶链式反应(PCR)是一种高灵敏核酸扩增技术,广泛应用于核酸检测中。但在实际应用过程中,扩增产物及其他核酸片段的污染会导致假阳性的结果,制约了PCR在临床检测中的应用。为了解决这一问题,建立了许多PCR防污染的方法,除了早期建立... 聚合酶链式反应(PCR)是一种高灵敏核酸扩增技术,广泛应用于核酸检测中。但在实际应用过程中,扩增产物及其他核酸片段的污染会导致假阳性的结果,制约了PCR在临床检测中的应用。为了解决这一问题,建立了许多PCR防污染的方法,除了早期建立的并已得到广泛应用的物理隔绝法、光照法及水解法外,近年来还发展了酶消化法、化学修饰法及DEAE纤维素法。本文对PCR防污染技术的原理、应用及进展进行了综述。 展开更多
关键词 PCR 防污染 UNG dnasei 限制性内切酶
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外源RNA对小鼠白蛋白基因表达及DNaseⅠ敏感性的影响 被引量:2
9
作者 张红艳 刘爱京 +2 位作者 刘福英 王秀芳 吕占军 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期26-29,T001,共5页
兔肝RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,大鼠肝RNA注射入小鼠前列腺 ,用免疫组织化学染色检测外源RNA对小鼠白蛋白基因表达的影响 ;不同RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,提取细胞核 ,DNaseⅠ消化 ,PCR法扩增小鼠白蛋白基因 ,检测白蛋白基因消... 兔肝RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,大鼠肝RNA注射入小鼠前列腺 ,用免疫组织化学染色检测外源RNA对小鼠白蛋白基因表达的影响 ;不同RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,提取细胞核 ,DNaseⅠ消化 ,PCR法扩增小鼠白蛋白基因 ,检测白蛋白基因消化情况。 展开更多
关键词 外源RNA dnasei 敏感性 小鼠 Alb基因 白蛋白 基因表达
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邻苯二甲酸二酯诱导果蝇脑组织基因差异表达谱的研究 被引量:4
10
作者 马建红 吕立夏 厉曙光 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第2期91-94,共4页
[目的]获得邻苯二甲酸二(2- 乙基己基)酯[di(2 -ethylhexyl)phthalate ,DEHP]诱导果蝇脑组织的基因差异表达谱。[方法]设喂饲0 .2 %DEHP浓度的果蝇为实验组,乳化剂为对照组,2周后断头进行总RNA抽提,DNaseΙ消化去除DNA污染;用Oligotex... [目的]获得邻苯二甲酸二(2- 乙基己基)酯[di(2 -ethylhexyl)phthalate ,DEHP]诱导果蝇脑组织的基因差异表达谱。[方法]设喂饲0 .2 %DEHP浓度的果蝇为实验组,乳化剂为对照组,2周后断头进行总RNA抽提,DNaseΙ消化去除DNA污染;用OligotexmRNAMiNiKit(QIAGEN)得到纯的mRNA ;合成双链cDNA ;采用体外转录的方法获得大量cRNA与Affymetrix的果蝇表达谱芯片进行杂交,计算机扫描处理数据。[结果]差异表达的基因片段共计3 5个:①上调的基因有2 0个,包括CYP6A2、CYP6A8、CYP6W1、CYP4P1、UGT3 6Bb、GST、羧酸酯酶、转甲基酶、氧化还原酶、EST10、JHEH1、KEAP1、CG690 8、CG1942、CG10 5 60、CG115 2 9、CG10 5 5 3、CG12 83、CG12 5 0 5等;②下调的基因有15个,包括MST5 7Da、MST5 7Db、ACP95EF、OS E、OS C、PBPRP3、PBPRP1、A10、CG1862 8、CG113 91、CG182 84、CG842 4、CG5 2 90、CG13 947、CG15 2 63等。差异表达基因中大多数与信号传导、细胞代谢、生长、发育、组织分化及转录因子等功能相关,尚有一些基因功能未知。[结论]运用高通量基因芯片技术获得DEHP诱导果蝇脑组织的基因差异表达谱,为从分子水平系统研究DEHP的毒性机制提供有益的线索。 展开更多
关键词 基因差异表达谱 邻苯二甲酸二酯 脑组织 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 果蝇 AFFYMETRIX DEHP dnasei 双链cDNA 差异表达基因 基因芯片技术 mRNA 表达谱芯片 计算机扫描 氧化还原酶 总RNA MiNi cRNA 体外转录 基因片段 羧酸酯酶
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大鼠前列腺甾体结合蛋白Cl基因上与其表达有关的DNase Ⅰ超敏感位点的鉴定 被引量:1
11
作者 杨珉 商权 +2 位作者 张友端 M.C.Parker 张永莲 《自然科学进展(国家重点实验室通讯)》 1994年第3期359-360,共2页
大鼠前列腺腹叶(V.P)分泌的甾体结合蛋白(PSPP)足一个四聚体,由C1,C2和C3三个基因编码,其表达受雄激素在原始转录水平上严格调控,且具有高度的种族和组织专一性(张永莲等待发表工作),是研究雄激素调控真核基因转录机制的理想系统。我们... 大鼠前列腺腹叶(V.P)分泌的甾体结合蛋白(PSPP)足一个四聚体,由C1,C2和C3三个基因编码,其表达受雄激素在原始转录水平上严格调控,且具有高度的种族和组织专一性(张永莲等待发表工作),是研究雄激素调控真核基因转录机制的理想系统。我们已经对调控C3基因表达的顺式调控元件和反式作用因子作过一些研究,由于真核基因在细胞内是与核蛋白结合并高度折叠以染色质的形式被包装在细胞核中,因此,其基因表达与染色质结构的变化有密切关系,而且由此观察到的分子机制可能更反映在整体的情况。目前已知,当基因的转录活性变化时,在染色质中对核酸酶(如DNase Ⅰ)敏感性也随之改变,即DNA上被DNase Ⅰ作用的位点—称之为DNase Ⅰ超敏感位点(DHS)也不相同。DHS一般出现在启动子、增强子和熄灭子等顺式调控元件附近。 展开更多
关键词 前列腺 甾体结合蛋白 基因表达 dnasei 大鼠
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黄鳝二价体上微量DNaseⅠ敏感性和限制性内切酶原位切割分析
12
作者 杜丽萍 余其兴 +3 位作者 周荣家 崔建勋 郭一清 赵则春 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期308-314,共7页
采用DNase Ⅰ超敏感性分析和限制性内切酶介导的原位切口平移技术(Restriction Enzyme Nick Translation,RE-NT)对黄鳝二价体基因组结构进行了分析研究。已知DNaseⅠ超敏感性与潜在活性基因分布密切相关。结果表明,经DNaseⅠ介导的原位... 采用DNase Ⅰ超敏感性分析和限制性内切酶介导的原位切口平移技术(Restriction Enzyme Nick Translation,RE-NT)对黄鳝二价体基因组结构进行了分析研究。已知DNaseⅠ超敏感性与潜在活性基因分布密切相关。结果表明,经DNaseⅠ介导的原位切口平移处理,在黄鳍二价体上可展现类D带带型,而由限制性内切酶介导的原位切口平移结果显示,AluⅠ和MspⅠ均在黄鳝二价体上诱导产生类G带带型,HpaⅡ和HaeⅢ则优先切割5号二价体上一特定区域,诱导出一段由标记信号所构成的类C带,对上述结果进行了分析和讨论。 展开更多
关键词 原位切口平移 dnasei 限制性内切酶 黄鳝 二价体
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基于DNAzyme的单链核酸酶活性研究
13
作者 刘卓靓 李旺 +1 位作者 黄燕 姚守拙 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期502-506,共5页
本文报道了一种基于DNAzyme的可视检测单链核酸酶活性的新方法。DNAzyme是一种具有类过氧化物酶活性的单链DNA分子,在H2O2存在下能够催化无色底物2,2′-连氮基-双-(3-乙基并二氢噻唑啉-6-磺酸)二价阴离子(ABTS^2-)氧化成蓝绿色物质A... 本文报道了一种基于DNAzyme的可视检测单链核酸酶活性的新方法。DNAzyme是一种具有类过氧化物酶活性的单链DNA分子,在H2O2存在下能够催化无色底物2,2′-连氮基-双-(3-乙基并二氢噻唑啉-6-磺酸)二价阴离子(ABTS^2-)氧化成蓝绿色物质ABTS^-.自由基。催化体系中单链核酸酶的加入能水解DNAzyme,导致被DNAzyme催化的ABTS^-.减少,从而可以通过颜色变化和紫外-可见吸收光谱检测相应的单链核酸酶活性。以DNase I和S1核酸酶作为单链核酸酶代表进行实验,实验结果表明对DNase I检测的线性范围为0.5-5 U/mL,检出限为0.15 U/mL;对S1核酸酶检测的线性范围为1-10 U/mL,检出限为0.11 U/mL。该方法还能用于单链核酸酶抑制剂的检测,结果表明:Zn2+对DNase I的半数抑制浓度(Ic50)为56.4 mol/L,焦磷酸盐对S1核酸酶的Ic50为1.17 mmol/L。 展开更多
关键词 DNAZYME 单链核酸酶 dnasei S1 抑制剂
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雷蒙德氏棉DNase Ⅰ高敏感位点(DHSs)文库构建方法
14
作者 王惠敏 刘玉玲 +5 位作者 韦洋洋 张树林 刘震 卢全伟 杨太有 彭仁海 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第3期101-105,共5页
染色质DNA对DNase Ⅰ表现出高敏感性的位点(DNase Ⅰ hypersensitive sites,DHSs)多是顺式作用元件所在的位置,包括启动子、增强子、调节子和衰减子等.研究DHSs位点的数目及其动态变化是探明顺式作用元件功能、揭示基因表达调控机制,乃... 染色质DNA对DNase Ⅰ表现出高敏感性的位点(DNase Ⅰ hypersensitive sites,DHSs)多是顺式作用元件所在的位置,包括启动子、增强子、调节子和衰减子等.研究DHSs位点的数目及其动态变化是探明顺式作用元件功能、揭示基因表达调控机制,乃至进行基因编辑和创新遗传材料的重要辅助手段.本文借鉴水稻和拟南芥DHSs文库构建方法,通过优化设计,初步建立了二倍体雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii D5)的DHSs文库,为深入进行棉花功能基因组研究奠定基础. 展开更多
关键词 雷蒙德氏棉 dnasei高敏感位点(DHSs) 顺式作用元件 文库构建
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高纯度线粒体DNA的快速提取
15
作者 梅玉屏 傅先元 叶成仁 《广州师院学报(自然科学版)》 2000年第3期70-73,共4页
报道了一种改进的线粒体 DNA( mitochondrial DNA, mtDNA)提取方法,该方法不仅使提取mtDNA的周期缩短了,而且操作简便,提取的线粒体DNA结构完整,并彻底避免了核DNA、线粒体 RNA、蛋白质... 报道了一种改进的线粒体 DNA( mitochondrial DNA, mtDNA)提取方法,该方法不仅使提取mtDNA的周期缩短了,而且操作简便,提取的线粒体DNA结构完整,并彻底避免了核DNA、线粒体 RNA、蛋白质、有机溶剂等的污染;该方法还可以根据不同的试验要求而选取相应的步骤。与其他方法相比较,该方法具有快速、简便、经济、产品纯度高以及mtDNA结构完整等特点,其得率和纯度均能满足mtDNA的各种分析要求。 展开更多
关键词 线粒体DNA dnasei 碱变性方法 提取方法 核DNA 线粒体RNA 蛋白质
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脱氧核糖核酸酶1类似物3基因表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性 被引量:2
16
作者 瞿兵 陈鹏飞 李希平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第7期718-722,共5页
目的探讨脱氧核糖核酸酶1类似物3(deoxyribonuclease 1 like 3,DNASE1L3)基因表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集NCBI(National Center for Biotechnology Information)GEO(Gene Expression Omnibus)公共数据库的225份肝... 目的探讨脱氧核糖核酸酶1类似物3(deoxyribonuclease 1 like 3,DNASE1L3)基因表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集NCBI(National Center for Biotechnology Information)GEO(Gene Expression Omnibus)公共数据库的225份肝癌组织样本基因表达谱数据集,将探针信号强度以2为底的对数值作为DNASE1L3的相对表达量,≥5为高表达组,<5为低表达组。对样本的基因表达谱数据及对应的患者临床数据进行病理指标的回顾性分析和预后情况分析;通过基因集富集方法分析DNASE1L3表达相关的肿瘤基因集。结果与DNASE1L3高表达组比较,低表达组样本中甲胎蛋白(AFP)含量较高(P=0.001),肿瘤体积较大(P=0.009),美国癌症联合委员会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)共同建立的肿瘤分期体系(TNM)分期(P<0.001)、巴塞罗那临床肝癌评分系统(BCLC)分期(P=0.043)、意大利肝癌小组评分体系(CLIP)分期(P=0.010)均较差,且更易发生转移(P<0.001);DNASE1L3低表达组患者的预后明显差于高表达组(P=0.007,HR:1.807,95%CI:1.175~2.779);DNASE1L3低表达组可富集到组蛋白结合、微管运动、组蛋白激酶活性等多个肿瘤相关基因集,但高表达组未富集到肿瘤相关基因集。结论 DNASE1L3基因表达与肝癌临床病理特征及预后相关,其低表达是肝癌的危险因素之一。 展开更多
关键词 肝癌 脱氧核糖核酸酶1类似物3 病理特征 预后
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环介导等温扩增技术快速检测食品中的耐热芽孢菌 被引量:1
17
作者 窦明理 霍贵成 《食品科技》 CAS 北大核心 2012年第12期320-323,326,共5页
针对食品中的好热黄无氧芽孢菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌等耐热芽孢菌,以spo0A基因部分序列为靶基因,设计了一套引物,能够同时对这3种菌进行环介导等温扩增(LAMP)检测,扩增只需要60min。该法快速并具有良好的特异性,灵敏度可... 针对食品中的好热黄无氧芽孢菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌等耐热芽孢菌,以spo0A基因部分序列为靶基因,设计了一套引物,能够同时对这3种菌进行环介导等温扩增(LAMP)检测,扩增只需要60min。该法快速并具有良好的特异性,灵敏度可达到8cfu/mL,是普通PCR的10倍。DNaseI的使用与LAMP结合,可有效降解死菌游离DNA,消除其影响。结果表明,该方法用于奶粉及罐头制品中耐热芽孢菌的检测,具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等优点,在食品微生物检测中拥有广阔的前景。 展开更多
关键词 好热黄无氧芽孢菌 嗜热脂肪地芽孢杆菌 凝结芽孢杆菌 spo0A基因 环介导等温扩增技术 dnasei
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