期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
3种转染试剂在SKOV3细胞中转运大质量质粒的效率比较
1
作者 朱国念 倪银芸 吴思思 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期27-29,33,共4页
以pAdeasy-1-EGFP作为外源转入质粒,表达绿色荧光蛋白的融合基因,分别用3种转染试剂Lipofectamine 3000、DNA-In CRISPR和FuGENE HD转染SKOV3细胞,比较3种转染试剂在SKOV3细胞中转染大质量质粒的转染效率,以此选择合适的转染试剂解决携... 以pAdeasy-1-EGFP作为外源转入质粒,表达绿色荧光蛋白的融合基因,分别用3种转染试剂Lipofectamine 3000、DNA-In CRISPR和FuGENE HD转染SKOV3细胞,比较3种转染试剂在SKOV3细胞中转染大质量质粒的转染效率,以此选择合适的转染试剂解决携带大片段质粒转染效率低的问题。通过观察GFP绿色荧光评估转染效率,并用CCK8法测定3种转染试剂对细胞存活率的影响。实验结果显示Lipofectamine 3000转染效率大于50%,FuGENE HD转染效率约20%,DNA-In CRISPR的转染效率小于5%。Lipofectamine 3000转染SKOV3细胞24 h后细胞活性达到(97.5±2.52)%,FuGENE HD和DNA-In CRISPR转染试剂的细胞活性分别为(89.5±2.43)%和(95.5±3.48)%。对比分析表明,转染试剂Lipofectamine 3000转染效率较高且细胞毒性低,适用于SKOV3细胞进行大质量质粒的转染。 展开更多
关键词 LIPOFECTAMINE 3000 FuGENE HD dna-in CRISPR pAdeasy-1-EGFP SKOV3细胞 大片段质粒
在线阅读 下载PDF
四种转染试剂对H9C2细胞转染效率的比较 被引量：4
2
作者 倪银芸 丁雨 吴思思 《华西医学》 CAS 2017年第7期1024-1028,共5页
目的比较4种不同转染试剂对大鼠心肌细胞H9C2细胞的转染效率,以选择最优转染方法。方法以带有增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的质粒作为外源基因,分别用4种不同转染试剂Fu GENE HD、DNA-In CRISPR、Lip... 目的比较4种不同转染试剂对大鼠心肌细胞H9C2细胞的转染效率,以选择最优转染方法。方法以带有增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的质粒作为外源基因,分别用4种不同转染试剂Fu GENE HD、DNA-In CRISPR、Lipofectamine 3000和Lipofectamine 2000转染H9C2细胞,通过荧光显微镜观察和荧光酶标仪检测荧光强度来评价转染效率,并通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测4种转染试剂对细胞活性的影响。结果 Lipofectamine 3000转染效率最高(>50%);而DNA-In CRISPR转染效率最低(<1%)。4种转染试剂中Lipofectamine 3000对细胞毒性也最低,转染48 h后细胞活性为94.55%。结论转染试剂Lipofectamine 3000在保证相对较高的转染效率的同时也具有最低的细胞毒性,更适合用于H9C2细胞的转染。 展开更多
关键词 转染 大鼠心肌细胞H9C2 FuGENE HD dna-in CRISPR LIPOFECTAMINE 3000 LIPOFECTAMINE 2000
原文传递
血清SAM/SAH在Hcy引起动脉粥样硬化基因组DNA甲基化中的作用 被引量：8
3
作者 张辉 郭伟 +7 位作者 高婷婷 马燕琼 惠淑宁 马胜超 杨晓玲 蒋袁絮 田珏 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期129-133,共5页
目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型... 目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型对照组、高蛋氨酸组、叶酸+Vit B12干预组,每组12只,分别给予不同饮食;另取健康4周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食。饲养15周后,HE染色观察血管内动脉斑块的形成,高效液相色谱检测血清中Hcy、SAM、SAH的水平改变,n MS-PCR检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中Bl重复序列DNA甲基化改变。结果高蛋氨酸组血清Hcy与正常对照组相比升高约2.39倍(P<0.01),HE染色可见高蛋氨酸组中有动脉斑块形成;与正常对照组相比,模型对照组、高蛋氨酸组SAM/SAH增加了1.68倍和2.75倍(P<0.01);高蛋氨酸组B1重复序列DNA甲基化水平降低11.8%(P<0.05),且与SAM/SAH比值呈明显负相关(r=-0.3638,P=0.0210)。结论 ApoE―/―小鼠中B1重复序列发生DNA低甲基化改变,且与SAM/SAH呈负相关,提示血清SAM/SAH可作为一个判断血管As的生物学指标。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 B1重复序列 DNA甲基化 S-腺苷甲硫氨酸/S-腺苷同型半胱氨酸
暂未订购
血清非甲基化胰岛素DNA检测方法的建立 被引量：2
4
作者 林健 刘颖丰 +2 位作者 谢志国 周智广 黄干 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第30期2393-2397,共5页
目的建立血清非甲基化胰岛素DNA的检测方法，并初步评价其临床应用价值。方法对文献报道的Akirav法和Husseiny法反应体系进行验证和改良。同时选取2014年2月至2015年2月中南大学湘雅二医院门诊或病房诊断为1型糖尿病（T1DM）且病程1年... 目的建立血清非甲基化胰岛素DNA的检测方法，并初步评价其临床应用价值。方法对文献报道的Akirav法和Husseiny法反应体系进行验证和改良。同时选取2014年2月至2015年2月中南大学湘雅二医院门诊或病房诊断为1型糖尿病（T1DM）且病程1年以内的患者6例，以及年龄相匹配的健康对照8例，采用改良Akirav法检测其血清中非甲基化胰岛素DNA水平，初步评价临床应用价值。本研究方案经中南大学湘雅二医院伦理委员会批准[（2012）伦理审第（S12）号]。结果Akirav法的甲基化非依赖性PCR（MIP）反应特异性较差，无法获得目标产物；Husseiny法的甲基化特异性定量PCR（qMSP）引物扩增效率为（76．98±2．88）％，低于推荐的80％，结果可信度差。利用Akirav法的主要思路，结合Husseiny法中提供的引物，建立的改良Akirav法灵敏度较高，检测T1DM患者血清中的非甲基化胰岛素DNA水平高于正常对照[非甲基化指数（DI）分别为0．039（0．028—0．083）和0．016（0．003—0．029），P=0．005]。结论改良Akirav法能有效检测血清非甲基化胰岛素DNA水平，T1DM患者血清中非甲基化胰岛素DNA水平高于健康人。 展开更多
关键词 糖尿病 1型 非甲基化胰岛素DNA 诊断技术和方法
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部