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LncRNA DLG1-AS1调控miR-203/ZEB2轴诱导甲状腺乳头状癌细胞恶性化生长和转移的机制研究 被引量：4
1
作者 冯立新 翟传夫 谭清玉 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2021年第2期133-141,共9页
目的:探讨LncRNA DLG1-AS1对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞恶性化生长和转移的影响,并对其可能的分子机制进行研究。方法:体外培养PTC细胞(TPC1、KTC-1、B-CPAP、HTori-3)和正常甲状腺上皮细胞Nthy-ori3-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-... 目的:探讨LncRNA DLG1-AS1对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞恶性化生长和转移的影响,并对其可能的分子机制进行研究。方法:体外培养PTC细胞(TPC1、KTC-1、B-CPAP、HTori-3)和正常甲状腺上皮细胞Nthy-ori3-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中DLG1-AS1和miR-203表达差异。将B-CPAP细胞分为空白对照组、阴性对照组(转染pcDNA3.1空载体和阴性对照序列)、shDLG1-AS1组(转染pcDNA3.1-shDLG1-AS1)、shDLG1-AS1+miR-203抑制物组(转染pcDNA3.1-shDLG1-AS1和miR-203抑制物)。通过CCK-8法和Transwell小室法检测细胞增殖、迁移和侵袭活性。蛋白质印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达。双荧光素酶报告分析DLG1-AS1、miR-203、ZEB2之间的靶关系。结果:经qRT-PCR法检测,与Nthy-ori3-1细胞相比,TPC1、KTC-1、B-CPAP、HTori-3细胞中DLG1-AS1相对表达量均升高,同时miR-203相对表达量均降低(均P<0.05),选择DLG1-AS1相对表达量最高的B-CPAP细胞进行后续实验。与空白对照组和阴性对照组相比,shDLG1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭活性降低,ZEB2、N-cadherin、vimentin、β-catenin蛋白表达下调,同时E-cadherin表达上调(均P<0.05)。与shDLG1-AS1组相比,shDLG1-AS1+miR-203 inhibitor组细胞增殖、迁移、侵袭活性被逆转,ZEB2、N-cadherin、vimentin、β-catenin蛋白表达上调,同时E-cadherin表达下调(均P<0.05)。经双荧光素酶报告证实,DLG1-AS1可以直接调控miR-203,而ZEB2则是miR-203的下游靶基因。结论:LncRNA DLG1-AS1通过与miR-203竞争结合,消除miR-203对靶基因ZEB2表达的抑制,促进PTC细胞发生EMT,这可能是PTC恶性化生长和转移的重要机制。 展开更多
关键词 LncRNA dlg1-as1 miR-203 上皮间质转化 甲状腺乳头状癌 增殖 转移
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lncRNA DLG 1-AS 1靶向miR-103 a-3 p对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响
2
作者 张春玲 李治岐 左燕雨 《福建医科大学学报》 2025年第1期1-8,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLG 1反义RNA1(DLG 1-AS 1)是否通过靶向miR-103 a-3 p影响肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭。方法qRT-PCR分析DLG 1-AS 1和miR-103 a-3 p在肺癌组织中的表达量;双荧光素酶报告基因检测和RNA免疫沉淀(RIP)... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLG 1反义RNA1(DLG 1-AS 1)是否通过靶向miR-103 a-3 p影响肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭。方法qRT-PCR分析DLG 1-AS 1和miR-103 a-3 p在肺癌组织中的表达量;双荧光素酶报告基因检测和RNA免疫沉淀(RIP)技术确定DLG 1-AS 1与miR-103 a-3 p的靶向关系;qRT-PCR检测干扰DLG 1-AS 1表达后A549细胞的miR-103 a-3 p表达量;CCK-8实验和克隆形成实验分析DLG 1-AS 1和miR-103 a-3 p表达对A549细胞增殖的影响;Transwell实验分析DLG 1-AS 1和miR-103 a-3 p表达对A549细胞迁移和侵袭的影响;Western-blot法检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)的表达情况。结果与癌旁组织比较,肺癌组织的DLG 1-AS 1表达量显著升高(P<0.05),而miR-103 a-3 p表达量显著下降(P<0.05)。miR-103 a-3 p是DLG 1-AS 1的靶基因,干扰DLG 1-AS 1表达后,miR-103 a-3 p表达量显著升高(P<0.05),A549细胞活力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin表达量均显著下降(P<0.05),E-cadherin表达量显著上升(P<0.05)。与干扰DLG 1-AS 1表达比较,同时干扰DLG 1-AS 1和miR-103 a-3 p表达后,A549细胞活力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin表达量均显著上升(P<0.05),而E-cadherin表达量显著下降(P<0.05)。结论干扰DLG 1-AS 1可上调miR-103 a-3 p表达,进而降低肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 dlg 1-as 1 miR-103 a-3 p 肺癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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