lncRNA DHRS4-AS1调节miR-221-3p/SOCS3信号轴对甲状腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响

1

作者 王辉 郭宇 +3 位作者 张培培 杨皓宇 田春桃 金明明 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期798-805,共8页

目的探究长链非编码RNA DHRS4-AS1(lncRNA DHRS4-AS1)调节微小RNA-221-3p(miR-221-3p)/细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)信号轴对甲状腺癌(TC)细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响。方法采用实时定量PCR检测TC细胞系中lncRNA DHRS4-AS1、... 目的探究长链非编码RNA DHRS4-AS1(lncRNA DHRS4-AS1)调节微小RNA-221-3p(miR-221-3p)/细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)信号轴对甲状腺癌(TC)细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响。方法采用实时定量PCR检测TC细胞系中lncRNA DHRS4-AS1、miR-221-3p和SOCS3 mRNA的表达,筛选出最佳细胞系用于后续实验;将FTC-133细胞分为Control组、pcDNA-NC组、DHRS4-AS1组、DHRS4-AS1联合agomir-NC组和DHRS4-AS1联合miR-221-3p-agomir组。采用实时定量PCR检测转染效率;双荧光素酶报告基因法验证lncRNA DHRS4-AS1、SOCS3和miR-221-3p的靶向关系;采用Western blot法检测SOCS3在FTC-133细胞中的表达;EdU法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测FTC-133细胞凋亡情况;通过划痕实验检测FTC-133细胞迁移情况;Transwell^(TM)小室检测FTC-133细胞侵袭情况;通过裸鼠移植瘤实验观察lncRNA DHRS4-AS1对TC移植瘤生长的影响。结果本研究利用双荧光素酶报告基因法验证,结果显示lncRNA DHRS4-AS1、miR-221-3p、SOCS3三者之间具有靶向关系;lncRNA DHRS4-AS1和SOCS3在FTC-133细胞中表达下调、miR-221-3p表达上调;过表达lncRNA DHRS4-AS1可以抑制FTC-133细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导凋亡;miR-221-3p过表达可逆转过表达lncRNA DHRS4-AS1对FTC-133细胞的增殖、侵袭和迁移的抑制作用,并抑制FTC-133细胞凋亡;裸鼠移植瘤实验观察到,过表达lncRNA DHRS4-AS1使裸鼠瘤组织质量降低和体积减小,同时miR-221-3p表达量下降,SOCS3表达量升高。结论lncRNA DHRS4-AS1在FTC-133细胞中低表达,过表达lncRNA DHRS4-AS1可以通过调节miR-221-3p/SOCS3信号轴,从而抑制TC细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码RNA dhrS4-AS1 微小RNA-221-3p 细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3) 甲状腺癌(TC) 增殖 侵袭 迁移

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DHRS4-AS1调控miR-221对肺癌增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响 被引量：1

2

作者 马强 谌登珍 《河北医药》 2025年第6期925-929,共5页

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)DHRS4-AS1对微小RNA(miR)-221的靶向调控及对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺癌组织中DHRS4-AS1和miR-221表达。在肺癌细胞A549中转染pcDNA3.1-DHRS4-AS1,噻唑蓝(... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)DHRS4-AS1对微小RNA(miR)-221的靶向调控及对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺癌组织中DHRS4-AS1和miR-221表达。在肺癌细胞A549中转染pcDNA3.1-DHRS4-AS1,噻唑蓝(MTT)和平板克隆实验检测细胞存活与克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,免疫印迹试验检测P21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Caspase-3、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达。双萤光素酶报告实验验证DHRS4-AS1与miR-221靶向。pcDNA3.1-DHRS4-AS1和miR-221共转染,观察过表达miR-221对DHRS4-AS1诱导的细胞A549增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中DHRS4-AS1表达量明显减少,miR-221表达量显著增加(P<0.05)。过表达DHRS4-AS1增加凋亡率、P21、Caspase-3、E-cadherin蛋白表达,降低细胞存活率、MMP-2蛋白表达、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数(P<0.05)。DHRS4-AS1靶向、调控miR-221。过表达miR-221能逆转DHRS4-AS1对细胞A549增殖、迁移、侵袭、凋亡的作用。结论DHRS4-AS1可靶向调控miR-221抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 lncRNA dhrS4-AS1 MIR-221 肺癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡

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MARDHRS4的鉴定及其对DHRS4转录的调节

3

作者 常晓兰 冯雷 冯广友 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2013年第2期120-123,共4页

目的:筛选新的小鼠DHRS4反义链转录本并对其功能进行研究。方法:采用快速cDNA末端扩增方法,从小鼠正常肝细胞株NCTC1469中克隆DHRS4反义链转录本,据此转录本设计合适siRNA,然后转染NCTC1469细胞,转染成功36h后应用RT-qPCR检测细胞内DHRS... 目的:筛选新的小鼠DHRS4反义链转录本并对其功能进行研究。方法:采用快速cDNA末端扩增方法,从小鼠正常肝细胞株NCTC1469中克隆DHRS4反义链转录本,据此转录本设计合适siRNA,然后转染NCTC1469细胞,转染成功36h后应用RT-qPCR检测细胞内DHRS4mRNA水平的改变。结果:成功克隆出1个新的天然反义RNA,全长835nt,属于长链非编码RNA(longnon-coding RNA,LncRNA),命名为MARDHRS4,应用siRNA干扰MARDHRS4后,DHRS4mRNA降低约40%。结论:来自DHRS4反义链的LncRNA MARDHRS4具有增强DHRS4转录的作用。 展开更多

关键词 MARdhrS4 dhrS4 长链非编码RNA 转录

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DHRS4L2非编码RNA调控CPNE6基因表达（英文） 被引量：2

4

作者 李一凡 黄东阳 +6 位作者 王磊 杜冀晖 刘戈飞 王永 周蓓 李蓉 麦丽文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1098-1105,共8页

DHRS4/NRDR基因编码一种属于SDR家族的酶,在维甲酸合成、类固醇代谢和苯甲基代谢中发挥生物合成催化作用.DHRS4基因定位于14q11.2,有两个相似的拷贝基因,分别为DHRS4L2和DHRS4L1.我们前期发现了DHRS4L2基因一个上游转录起始位点,命名为D... DHRS4/NRDR基因编码一种属于SDR家族的酶,在维甲酸合成、类固醇代谢和苯甲基代谢中发挥生物合成催化作用.DHRS4基因定位于14q11.2,有两个相似的拷贝基因,分别为DHRS4L2和DHRS4L1.我们前期发现了DHRS4L2基因一个上游转录起始位点,命名为DHRS4L2-Ea.在本研究中,我们用RT-PCR和双脱氧测序法发现一个新的从DHRS4L2-Ea转录的选择性剪接亚型DHRS4L2-900a(KC237374).同时RT-PCR结果显示在SK-N-SH细胞DHRS4L2-Ea选择性剪接亚型中DHRS4L2-iso(AY616183)表达最多,为主要亚型.在SK-N-SH细胞过表达DHRS4L2-800a(AY920361)使DHRS4L2-Ea基因下游CPNE6 mRNA表达下调.在HeLa细胞过表达DHRS4L2-800a(AY920361)或DHRS4L2-900a(KC237374)进一步表明DHRS4L2-Ea抑制CPNE6表达的作用.定量PCR结果显示si-RNA抑制DHRS4L2-Ea表达使CPNE6 mRNA表达上调.亚硫酸盐测序结果显示在SK-N-SH转染DHRS4L2-800a(AY920361)的样本中CPNE6基因DNA CpG甲基化增加.综上所述,本研究揭示DHRS4L2表达的非编码RNA抑制其下游基因CPNE6的表达. 展开更多

关键词 dhrS4L2 CPNE6 选择性剪接 转录调控 人神经母细胞瘤

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鹅DHRS7基因克隆、序列分析及其在鹅肥肝形成过程中的表达特点 被引量：1

5

作者 何桦 潘志雄 +7 位作者 刘贺贺 李乐 夏露 胡深强 鲁凯 董霞 李亮 王继文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1385-1391,共7页

为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝... 为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝脏、皮脂、腹脂等10个组织中的差异表达,以及填饲对鹅肝脏中DHRS7表达变化的影响。结果发现,鹅DHRS7基因cDNA全长1 279bp,含一个完整的开放阅读框1 011bp(可编码336个氨基酸),25bp的5′UTR和243bp的3′UTR序列;生物信息学分析结果显示,鹅DHRS7含有跨膜结构域以及NADP结合位点,且在这些功能区域变异较少;荧光定量结果显示,DHRS7在鹅肝脏和脂肪组织中都有较高表达,填饲后鹅肝脏中DHRS7的表达水平显著上调(P<0.05)。以上结果表明,DHRS7在鹅肥肝形成过程中具有重要的作用。 展开更多

关键词 鹅 短链脱氢酶7(dhrS7) RACE CDNA全序列 生物信息学分析

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DHRS4L1基因选择性剪接亚型的克隆及分析 被引量：2

6

作者 苏中静 陈海滨 +4 位作者 宋旭红 刘戈飞 李奇 王瑞俭 黄东阳 《解剖科学进展》 CAS 2011年第1期63-66,73,共5页

目的检测分析DHRS4基因簇新命名基因DHRS4L1的RNA选择性剪接亚型和转录特点,并预测其功能。方法 cDNA末端快速扩增克隆DHRS4L1转录本剪接亚型的全长序列,Jellyfish软件比对RNA亚型的外显子组成,RNAStructure和在线开放读码框预测其二级... 目的检测分析DHRS4基因簇新命名基因DHRS4L1的RNA选择性剪接亚型和转录特点,并预测其功能。方法 cDNA末端快速扩增克隆DHRS4L1转录本剪接亚型的全长序列,Jellyfish软件比对RNA亚型的外显子组成,RNAStructure和在线开放读码框预测其二级结构和蛋白编码功能,定量PCR检测DHRS4L1剪接亚型在不同细胞系中的表达水平。结果在人神经母细胞瘤细胞克隆得到3个DHRS4L1RNA剪接亚型的全长序列,它们具有相对稳定的二级结构,开放读码框短并且缺乏真核生物的翻译起始位点。定量PCR检测显示DHRS4L1在肝细胞表达高,在神经母细胞瘤和睾丸细胞中表达较低。结论 DHRS4L1转录产物存在不同长度的剪接亚型,它们可能不是蛋白的编码序列,而是作为非编码RNA参与其它基因的表达调控。 展开更多

关键词 dhrS4L1 选择性剪接 转录 人神经母细胞瘤

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用DHR型k-ε紊流模型对锥形渐扩管内紊流的数值仿真——壁面函数·BFC法之时间步长、加速系数和数值方法的影响

7

作者 何永森 蒋紫筠 肖瑞 《湘潭大学自然科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期14-18,共5页

用DHR型k-ε紊流模型及其壁面函数·BFC(边界拟合曲线坐标变换)法,对总扩散角为80、扩散度为4的锥形渐扩管内充分发展的不可压粘性紊流场进行了数值仿真.所研究紊流的入口雷诺数为1.16×105和2.93×105.在不同的时间步长、... 用DHR型k-ε紊流模型及其壁面函数·BFC(边界拟合曲线坐标变换)法,对总扩散角为80、扩散度为4的锥形渐扩管内充分发展的不可压粘性紊流场进行了数值仿真.所研究紊流的入口雷诺数为1.16×105和2.93×105.在不同的时间步长、加速系数和数值方法等计算条件下进行了数值仿真.分别给出了时均流速和紊流动能分布的计算结果,并分别将其与实验结果进行比较和分析,得知不同计算条件对计算结果的影响程度,计算结果与实验结果较好符合. 展开更多

关键词 dhr型k—ε紊流模型 壁面函数·BFC法 锥形渐扩管 数值仿真 时间步长 加速系数 数值方法

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结直肠癌患者DHRS9的表达及其临床意义

8

作者 贾利 贾霖 韩建军 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第3期430-436,共7页

目的:探讨脱氢酶/还原酶家族成员9(DHRS9)表达对结直肠癌临床预后的意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测163例临床结直肠癌组织样本,并挑选58例新鲜样本,提取总蛋白和总RNA,采用Western blot和q PCR方法检测DHRS9表达情况。结果:We... 目的:探讨脱氢酶/还原酶家族成员9(DHRS9)表达对结直肠癌临床预后的意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测163例临床结直肠癌组织样本,并挑选58例新鲜样本,提取总蛋白和总RNA,采用Western blot和q PCR方法检测DHRS9表达情况。结果:Western blot和q PCR检测结果表明,结直肠癌组织中DHRS9蛋白和mRNA表达均下调,且淋巴结转移(P=0.032)、TNM晚期(P=0.021)、疾病复发(P=0.001)和患者死亡(P=0.014)显著影响DHRS9表达。Kaplan-Meier分析结果显示,DHRS9表达下调预示患者无病生存期(P=0.003)和疾病特异性生存时间(P=0.021)较短。Cox多变量分析表明,DHRS9表达下调是结直肠癌患者疾病预后不良的独立预后标志物。此外,联合采用DHRS9表达检测和TNM分期对患者预后进行判断更加准确。结论:DHRS9表达下调与结直肠癌患者肿瘤发展密切相关,可以作为结直肠癌患者疾病临床预后标志物。 展开更多

关键词 dhrS9 结直肠癌 生存率 预后 标志物

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DHR123流式细胞分析在慢性肉芽肿病诊断中的应用

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作者 佟月娟 贺建新 +4 位作者 徐保平 刘秀云 赵顺英 申昆玲 江载芳 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第5期467-471,共5页

目的探讨二氢罗丹明流式细胞分析(DHR123 FC)方法在慢性肉芽肿病(CGD)诊断中的应用。方法选取在我院就诊、经临床和基因突变分析确诊为CGD的4例患儿。采用DHR123 FC分析血液中中性粒细胞群分布,评估DHR123 FC诊断的敏感性。结果病例1和2... 目的探讨二氢罗丹明流式细胞分析(DHR123 FC)方法在慢性肉芽肿病(CGD)诊断中的应用。方法选取在我院就诊、经临床和基因突变分析确诊为CGD的4例患儿。采用DHR123 FC分析血液中中性粒细胞群分布,评估DHR123 FC诊断的敏感性。结果病例1和2 CYBB基因突变分析分别为925G>A/E309K,731G>A/C244Y,均为已报道突变,临床表型为变异型;DHR123 FC显示中性粒细胞轻度移位,刺激指数约为10(正常为>40)。病例3为X-CGD女性携带者发病;CYBB基因突变分析为杂合的1212 del G;DHR123 FC显示有2.3%中性粒细胞正常移位,刺激指数为258.67;97.7%中性粒细胞无移位,刺激指数约为1。病例4为经典CGD患者,中性粒细胞无移位,刺激指数为1;干细胞移植后DHR123FC显示80.02%中性粒细胞正常移位,刺激指数为127.8。结论变异型CGD中性粒细胞轻度移位,刺激指数明显低于正常。DHR123 FC分析敏感性高,可用于变异型CGD及X-CGD女性携带者发病的诊断及干细胞移植后植入情况的监测。 展开更多

关键词 dhr123流式细胞学 变异型慢性肉芽肿病 携带者 干细胞移植

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基质金属蛋白酶-2在DHR心脏中表达的意义及波生坦的影响

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作者 王学忠 章萍 +4 位作者 王岳松 钱钧 洪小苏 陈建昌 焦阳 《中国血液流变学杂志》 CAS 2005年第3期360-363,374,共5页

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠(DHR)心脏微小血管重塑中作用及其可能的调节机制。方法30只雄性SD大鼠,切除左侧肾脏后一周,随机等分为3组。其中,一组为对照组,饮自来水;另两组分别为模型组和波生坦组,开... 目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠(DHR)心脏微小血管重塑中作用及其可能的调节机制。方法30只雄性SD大鼠,切除左侧肾脏后一周,随机等分为3组。其中,一组为对照组,饮自来水;另两组分别为模型组和波生坦组,开始予脱氧皮质酮(DOCA)(50mg.kg-1.week-1)皮下注射,连续5周。5周末处死动物,按相应的要求留取血液和心脏标本,分别行血浆ET-1浓度、微小血管密度及MMP-2/TIMP-2蛋白和基因表达的检测。结果在DHR左心室心内膜下心肌中存在微小动脉密度增加和毛细血管密度减少,MMP-2的mRNA和MMP-2/TIMP-2的蛋白表达上调;波生坦能抑制血压升高,减轻微小血管损害,下调MMP-2/TIMP-2的mRNA和蛋白表达,MMP-2的表达同微小血管密度间具有良好的相关性。结论在DHR心脏中存在微小血管病变,MMP-2/TIMP-2表达可能参与微小血管病变的病理机制,内皮素-1可能是通过调节MMP-2/TIMP-2表达参与微小血管病变。 展开更多

关键词 dhr 波生坦 微小血管 心内膜下心肌 MMP-2/TIMP-2

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DHRS4反义RNA结合蛋白的高通量检测与分析

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作者 苏中静 宋旭红 +1 位作者 常晓兰 黄东阳 《解剖学研究》 CAS 2018年第1期17-22,共6页

目的 DHRS4是细胞内NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶家族成员4的编码基因。与人类DHRS4基因以头对头形式存在的反义转录本AS1DHRS4,可以调控DHRS4基因的转录。本研究高通量检测分析DHRS4反义RNA结合的蛋白以探讨DHRS4反义转录本调控正... 目的 DHRS4是细胞内NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶家族成员4的编码基因。与人类DHRS4基因以头对头形式存在的反义转录本AS1DHRS4,可以调控DHRS4基因的转录。本研究高通量检测分析DHRS4反义RNA结合的蛋白以探讨DHRS4反义转录本调控正义基因表达的作用机制。方法采用甲醛交联细胞内的核酸-蛋白复合物,然后通过生物素标记的奇数组和偶数组寡核苷酸作为探针pull-down AS1DHRS4结合的蛋白,LCMS/MS鉴定后数据库比对分析DHRS4反义RNA结合的蛋白。结果奇数组和偶数组探针pull-down后分别鉴定得到650种和508种蛋白,两组探针检测的共同蛋白434种。大部分蛋白为结合蛋白并与RNA的加工和修饰相关。结论 DHRS4反义RNA结合的蛋白的检测和分析为今后进一步研究反义RNA功能和机制提供了线索和基础。 展开更多

关键词 dhrS4 反义RNA RNA结合蛋白 寡核苷酸探针

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DHRS4基因簇缺失型神经母细胞瘤细胞株的克隆和鉴定

12

作者 苏中静 刘戈飞 +3 位作者 宋旭红 陈海滨 常晓兰 黄东阳 《解剖学研究》 CAS 2011年第2期89-91,共3页

目的单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列。方法有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增... 目的单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列。方法有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增殖,PCR、RT-PCR检测DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1基因的DNA和RNA含量,Westernblotting检测DHRS4蛋白的表达。结果筛选得到单克隆神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,在DNA、RNA和蛋白水平均未检测到DHRS4基因簇的DNA序列及表达产物。结论经过克隆低表达DHRS4基因簇的SH-SY5Y细胞,得到纯系的DHRS4基因簇缺失的SH-SY5Y-细胞株,该细胞对于进一步研究DHRS4基因簇的功能和表达调控都是难得的细胞模型。 展开更多

关键词 dhrS4基因簇 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株 基因缺失

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DHRS4基因在猪骨骼肌中的表达及其与生长性状的关联分析 被引量：1

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作者 张垒霞 杨言昭 +4 位作者 李文通 刘颖 周荣 杨亚岚 李奎 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期131-139,共9页

为探讨猪DHRS 4基因在骨骼肌中的表达及其与生长性状的相关性,本研究分析了DHRS 4基因在长白猪出生后30、180和300 d不同类型骨骼肌中的表达,并在蓝思白猪资源群体中筛选DHRS 4基因的多态性位点,进一步通过Sequenom SNP分型技术对DHRS ... 为探讨猪DHRS 4基因在骨骼肌中的表达及其与生长性状的相关性,本研究分析了DHRS 4基因在长白猪出生后30、180和300 d不同类型骨骼肌中的表达,并在蓝思白猪资源群体中筛选DHRS 4基因的多态性位点,进一步通过Sequenom SNP分型技术对DHRS 4基因进行基因分型,分析了DHRS 4基因多态性位点与猪生长性状(料重比、平均日增重和平均背膘厚)的相关性。结果显示,DHRS 4基因在30、180和300 d长白猪的胸肌、腿肌和背肌中均有表达,在胸肌和腿肌中,DHRS 4基因在30 d的表达显著或极显著高于180和300 d(P<0.05;P<0.01),而在背肌的不同发育时期中,其表达水平没有显著差异(P>0.05)。此外,本研究在蓝思白猪资源群体中找到了3个位于DHRS 4基因上的单核苷酸多态性位点:rs334250151、rs342446613和rs326982309。关联分析结果表明,rs334250151位点与料重比呈显著相关,该位点AA基因型个体的料重比显著低于TT基因型个体(P<0.05)。研究揭示,DHRS 4基因可能参与猪的骨骼肌发育,rs334250151位点可以作为一个新的分子标记应用于猪生长性状的遗传改良中。 展开更多

关键词 dhrS 4基因 SNP 生长性状 骨骼肌

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正常肝和肝癌细胞中DHRS4L2基因选择性剪接亚型的克隆及其表达调控研究 被引量：1

14

作者 甘雪琼 宋旭红 +3 位作者 李蕊 张巧霞 杜牡丹 黄东阳 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2010年第5期329-334,共6页

目的:鉴定正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞Hep-G2中DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型,并探讨其表达调控机制。方法:应用RT-PCR,3′RACE和生物信息学方法发现并鉴定DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型;去甲基化药物5-aza-dC处理HL-7702和Hep-G2细... 目的:鉴定正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞Hep-G2中DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型,并探讨其表达调控机制。方法:应用RT-PCR,3′RACE和生物信息学方法发现并鉴定DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型;去甲基化药物5-aza-dC处理HL-7702和Hep-G2细胞,通过RT-PCR和real-time PCR方法检测DHRS4L2的表达情况。结果:发现了2个新的DHRS4L2剪接亚型DHRS4L2A和DHRS4L2A3,2个新亚型均出现了新的第1个外显子,命名为Ea,前者缺失外显子1,后者缺失外显子1和3;在正常肝细胞中去甲基化后含DHRS4L2外显子1的转录产物比处理前明显增加,在肝癌细胞中则比处理前减少。结论:获得2个新的DHRS4L2剪接亚型,并发现DHRS4L2的表达和甲基化调控相关,且甲基化的调控作用在正常肝与肝癌细胞之间存在差异,其机制尚待进一步探讨。 展开更多

关键词 辅酶Ⅱ-依赖性视黄醇脱氢/还原酶 表达调控 dhrS4L2基因 选择性剪接

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DHRS2蛋白对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响 被引量：1

15

作者 李济民 杨芳 +2 位作者 袁伟奇 王昊 罗以勤 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第12期1899-1903,共5页

目的研究DHRS2蛋白对肠癌耐药细胞敏感性影响及其机制。方法利用串联质谱标签法(TMT)对结直肠癌耐药细胞系HCT116/OXA与其亲本进行差异蛋白筛选;CCK-C法检测结直肠癌耐药细胞株HCT116/OXA对奥沙利钳敏感性及沉默DHRS2蛋白对其耐药性影响... 目的研究DHRS2蛋白对肠癌耐药细胞敏感性影响及其机制。方法利用串联质谱标签法(TMT)对结直肠癌耐药细胞系HCT116/OXA与其亲本进行差异蛋白筛选;CCK-C法检测结直肠癌耐药细胞株HCT116/OXA对奥沙利钳敏感性及沉默DHRS2蛋白对其耐药性影响;蛋白质印迹法验证差异表达蛋白以及检测沉默DHRS2蛋白后对相关信号通路蛋白调节作用。结果耐药细胞株HCT116/OXA中DHRS2蛋白水平明显高于亲本细胞株(P<0.001);沉默DHRS2蛋白可增加HCT116/OXA对奥沙利钳的敏感性;同时下调P53蛋白和切除修复交叉互补基1(ERCC1)蛋白的表达。此外,干扰P53蛋白后,ERCC1蛋白表达也明显减少。结论沉默DHRS2蛋白可部分恢复结直肠癌耐药细胞株HCT116/OXA对化疗药物敏感性,其机制可能为通过下调P53蛋白进而抑制ERCC1蛋白表达引起。 展开更多

关键词 结直肠癌 化疗耐药 dhrS2蛋白 P53蛋白 ER-CC1蛋白 奥沙利铂

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DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达

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作者 张伟红 张西臣 +5 位作者 邢沈阳 李泽中 宫鹏涛 李建华 杨举 倪劲松 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期537-542,F0003,共7页

目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3... 目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒。实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Westernblotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况。结果:成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒。PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组(P<0.05),DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多(P<0.05),DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100%(37/37);在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9%(7/37),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润。 展开更多

关键词 dhrS7基因 过表达 干扰 细胞周期 乳腺肿瘤 MCF-7细胞

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小鼠DHRS4基因原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备 被引量：1

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作者 张廷银 闫银侠 黄东阳 《汕头大学医学院学报》 2011年第1期5-8,共4页

目的:构建小鼠pDESTTM17/DHRS4重组载体,制备小鼠抗DHRS4多克隆抗体。方法:应用RT-PCR从小鼠肝组织扩增DHRS4的开放阅读框序列,测序确认后将其编码区构建到载体pDONRTM201上,再通过LR置换反应再将其置换到载体pDESTTM17上,测序后转化到E... 目的:构建小鼠pDESTTM17/DHRS4重组载体,制备小鼠抗DHRS4多克隆抗体。方法:应用RT-PCR从小鼠肝组织扩增DHRS4的开放阅读框序列,测序确认后将其编码区构建到载体pDONRTM201上,再通过LR置换反应再将其置换到载体pDESTTM17上,测序后转化到E.coliBL21-AI工程菌中,并经阿拉伯糖诱导表达出抗DHRS4融合蛋白。以小鼠融合蛋白作为免疫原免疫大白兔,制备小鼠抗DHRS4多克隆抗体。结果:成功构建小鼠DHRS4重组载体;转化重组质粒的E.coliBL21-AI经阿拉伯糖诱导4 h后高效表达DHRS4融合蛋白;Western bolt实验结果显示制备的多克隆抗体可特异性检测小鼠肝组织DHRS4相应蛋白的表达。结论:成功构建小鼠pDESTTM17/DHRS4原核表达载体和获得小鼠抗DHRS4多克隆抗体。 展开更多

关键词 dhrS4 基因克隆 蛋白表达 多克隆抗体

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基质金属蛋白酶-2在DHR心脏中的表达及麝香保心丸的影响 被引量：3

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作者 王学忠 章萍 +2 位作者 王岳松 洪小苏 陈建昌 《中国中医急症》 2006年第8期893-895,共3页

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠(DHR)心脏微小血管重塑中的作用及麝香保心丸对其的影响。方法18只雄性SD大鼠切除左侧肾脏后1周,随机等分为三组。建立DOCA-HDR模型,5周后检测心脏血管密度以及MMP-2因子的... 目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠(DHR)心脏微小血管重塑中的作用及麝香保心丸对其的影响。方法18只雄性SD大鼠切除左侧肾脏后1周,随机等分为三组。建立DOCA-HDR模型,5周后检测心脏血管密度以及MMP-2因子的表达量。结果在DHR左心室心内膜下心肌中存在微小动脉密度增加和毛细血管密度减少,MMP-2mRNA和MMP-2/TIMP-2的蛋白表达上调;麝香保心丸不能抑制血压升高,但能减轻微小血管损害,下调MMP-2mRNA和蛋白表达,MMP-2的表达同微小血管密度间具有良好的相关性。结论DHR心脏中存在微小血管病变,MMP-2/TIMP-2表达可能参与微小血管病变的病理过程,麝香保心丸可能通过调节MMP-2表达产生对DOCA-高血压大鼠心脏的微小血管损害的保护作用。 展开更多

关键词 鹿香保心丸 微小血管密度 MMP-2/TIMP-2 DOCA-高血压大鼠心脏

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数字化转型背景下高科技企业DHR人才画像及培养策略研究 被引量：4

19

作者 杨剑 《黑龙江科学》 2022年第11期49-51,共3页

随着数字经济的快速发展,高科技企业面临着数字化转型的压力,将大数据技术、云计算、人工智能技术运用到企业人力资源管理是数字化人力资源(DHR)的典型特征。以数字化转型为背景,对高科技企业DHR人才进行了人才画像,并对高校DHR人才及... 随着数字经济的快速发展,高科技企业面临着数字化转型的压力,将大数据技术、云计算、人工智能技术运用到企业人力资源管理是数字化人力资源(DHR)的典型特征。以数字化转型为背景,对高科技企业DHR人才进行了人才画像,并对高校DHR人才及高科技企业在职DHR人才培养提出了建议,以期提升人才培养质量,促进企业的可持续发展。 展开更多

关键词 数字化转型 dhr 人才画像 培养策略

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HPV16 E6 下调 DHRS2 表达可介导宫颈上皮细胞的致癌转化 被引量：1

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作者 杜秀蓉 陶沐珩 +4 位作者 贾永琴 伍婷婷 凌开建 王延洲 梁志清 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期715-724,共10页

目的探讨HPV16 E6对宫颈上皮细胞基因及信号通路的影响,筛选与致癌转化相关的基因。方法构建HPV16 E6感染的正常人宫颈上皮细胞(HUCEC)模型,进行转录组测序筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并进行基因本体(Gene ... 目的探讨HPV16 E6对宫颈上皮细胞基因及信号通路的影响,筛选与致癌转化相关的基因。方法构建HPV16 E6感染的正常人宫颈上皮细胞(HUCEC)模型,进行转录组测序筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因和基因组(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析差异信号通路。采用RT-qPCR验证主要差异下调表达基因。对主要差异基因的蛋白结构与HPV16 E6蛋白进行分子对接预测分析,通过RT-qPCR及Western blot验证HUCEC细胞模型中主要差异基因表达情况,并采用RT-qPCR及Western blot实验在宫颈癌细胞系SiHa及CaSki中进一步验证差异基因的表达。结果共筛选出差异表达2倍以上的基因55个。本研究聚焦下调差异基因,结果表明:负调控的差异基因GO功能富集于氧化还原过程;KEGG富集分析主要与碳水化合物代谢及癌症等相关。10个差异基因mRNA下调表达趋势与测序结果基本一致。分子对接预测DHRS2与HPV16 E6蛋白存在相互作用。与对照组比较,HUCEC细胞模型中HPV16 E6下调DHRS2的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)、ETV5的蛋白(P<0.01)表达;在SiHa、CaSki细胞系中,与对照组比较,DHRS2的mRNA及蛋白表达亦明显下调(P<0.05),并与P53蛋白表达趋势正相关。结论HPV16 E6可能通过下调DHRS2表达介导宫颈细胞致癌转化,促进宫颈癌发生。 展开更多

关键词 HPV16 E6 dhrS 2 宫颈上皮细胞 致癌转化 宫颈癌

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