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绵羊DFAT细胞特性及其诱导成脂分化过程中关键基因的表达
1
作者 王世银 郭庆河 +5 位作者 宁程程 高莉 牛嘉 吕刚 张伟 王全德 《西北农业学报》 北大核心 2025年第3期387-396,共10页
为了揭示绵羊DFAT细胞特性及其诱导成脂分化过程中关键基因的表达,以实验室前期获得的不同年龄阿勒泰羊尾部脂肪组织DFAT细胞为试验材料,对其细胞增殖能力、诱导成脂分化能力及其诱导成脂分化过程中关键基因的表达规律进行深入研究。结... 为了揭示绵羊DFAT细胞特性及其诱导成脂分化过程中关键基因的表达,以实验室前期获得的不同年龄阿勒泰羊尾部脂肪组织DFAT细胞为试验材料,对其细胞增殖能力、诱导成脂分化能力及其诱导成脂分化过程中关键基因的表达规律进行深入研究。结果表明:来源于6、12和24月龄阿勒泰羊尾部脂肪组织的第3代DFAT细胞生长曲线均呈典型的“S”形曲线,细胞增殖速度未见明显差异;细胞连续传代20代后仍保持良好的细胞形态和增殖速度,且不同代次细胞之间未见明显差异;采用诱导和维持培养交替进行的诱导成脂分化体系(体系Ⅲ),其诱导成脂分化效率极显著优于持续诱导分化体系(体系Ⅰ)和先诱导然后维持培养的诱导分化体系(体系Ⅱ)(P<0.01);不同年龄来源DFAT细胞诱导成脂分化能力差异不显著(P>0.05);在DFAT细胞诱导成脂分化过程中,启动成脂分化的关键基因PPARγ和C/EBPα,脂质沉积关键基因ADIPOQ、FSP27、FABP4和LPL,脂质分解关键基因HSL、ATGL和Leptin,以及前体脂肪细胞标志性基因CD142和ICAM1均先出现极显著上调(P<0.01),然后又出现极显著下调(P<0.01),但脂肪细胞祖细胞标志性基因DPP4的表达量在诱导分化的第2天以后出现极显著下调(P<0.01),且在此后的整个诱导分化期间均保持极低的表达水平。研究结果证明在阿勒泰羊生命周期的很长时间内,其DFAT细胞均保持了良好的增殖及成脂分化能力。 展开更多
关键词 绵羊 阿勒泰羊 dfat细胞 诱导 成脂分化 脂肪细胞
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过表达Fad24对猪DFAT细胞在Dex成脂诱导条件下对胞内受体及辅助分子表达的影响
2
作者 徐琨 袁婷婷 +1 位作者 何西建 宋学雄 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期164-169,共6页
旨在探讨过表达Fad24对猪去分化脂肪细胞(DFAT)在成脂诱导条件下对胞内地塞米松(Dex)受体GR及其高亲和性辅助分子Hsp90和FKBPs表达的影响。用过表达载体pcDNA-Fad24和空载体pcDNA瞬时转染猪DFAT细胞,并在高浓度Dex(1μmol/L)成脂诱导液... 旨在探讨过表达Fad24对猪去分化脂肪细胞(DFAT)在成脂诱导条件下对胞内地塞米松(Dex)受体GR及其高亲和性辅助分子Hsp90和FKBPs表达的影响。用过表达载体pcDNA-Fad24和空载体pcDNA瞬时转染猪DFAT细胞,并在高浓度Dex(1μmol/L)成脂诱导液中诱导成脂分化,然后根据形态学观察检测诱导分化情况,用Real-time PCR和Western blot技术检测对GR及Hsp90和FKBPs表达的影响。结果显示,pcDNA空载体组在诱导5 d时可诱导出成脂细胞,而pcDNA-Fad24过表达组完全抑制成脂分化,细胞积聚形成多个小结节,诱导7 d后形成典型的成骨样结节,茜素红染色证实结节表面有矿化物质沉积。Real-time PCR检测证实,过表达组GRαmRNA的表达量在成脂诱导48 h显著上调(P<0.01),而GRβmRNA的表达量在成脂诱导12 h显著上调(P<0.01);GR的高亲和性辅助分子Hsp90 mRNA的表达量在成脂诱导48 h显著上调(P<0.01);FKBP 51 mRNA的表达量在成脂诱导24 h显著上调(P<0.01),而FKBP 52 mRNA的表达量在成脂诱导48 h显著上调(P<0.01)。Western blot检测证实,上述各因子的蛋白质表达谱与mRNA表达谱基本一致。过表达Fad24对猪DFAT细胞由成脂分化向成骨分化转化作用,与成脂诱导48 h时调控GRα及其Hsp90和FKBP 52表达的上调,以及GRβ和FKBP 51表达下调相关。 展开更多
关键词 Fad24 猪dfat细胞 成脂诱导 GR受体 高亲和性辅助分子
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过表达Fad24使猪DFAT细胞在成脂诱导条件下转向成骨分化 被引量：1
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作者 袁婷婷 徐海翔 +2 位作者 徐琨 何西建 宋学雄 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2576-2582,共7页
旨在探索过表达Fad24基因对猪DFAT细胞诱导成脂分化的影响。根据猪Fad24基因序列设计引物,克隆猪Fad24基因的全长CDS区片段,构建猪Fad24过表达载体,通过测序比对碱基和氨基酸序列,通过脂质体瞬时转染技术,将过表达Fad24载体转染猪DFAT细... 旨在探索过表达Fad24基因对猪DFAT细胞诱导成脂分化的影响。根据猪Fad24基因序列设计引物,克隆猪Fad24基因的全长CDS区片段,构建猪Fad24过表达载体,通过测序比对碱基和氨基酸序列,通过脂质体瞬时转染技术,将过表达Fad24载体转染猪DFAT细胞,从mRNA水平验证了Fad24基因在猪DFAT细胞中的过表达水平,然后将过表达Fad24的猪DFAT细胞在体外诱导成脂分化,从形态学、Fad24、成脂和成骨分化核心转录因子表达水平上进行了检测。结果表明,猪Fad24过表达载体碱基序列一致性高达99.8%,氨基酸序列一致性高达100%;过表达Fad24的猪DFAT细胞Fad24的表达量高出正常猪DFAT细胞表达量约45倍;成脂分化诱导5 d时,与对照组的正常分化比较,过表达Fad24的猪DFAT细胞成脂分化完全被抑制,相反强力转向成骨分化,细胞积聚成许多小结节,诱导7 d时已形成典型的成骨样大结节,表面可见细胞分泌物;经茜素红染色鉴定,证实细胞分泌物中含有矿化物质沉淀;经Real-time PCR检测,证实过表达Fad24试验组显著下调成脂分化核心转录因子PPARγ2、SREBP-1c(P<0.05)和显著上调成骨分化核心转录因子Runx2的表达(P<0.01)。结果提示,过表达Fad24通过调控成脂和成骨核心转录因子,完全抑制猪DFAT细胞成脂分化,并强力促进向成骨分化转化。 展开更多
关键词 过表达Fad24 dfat细胞 成脂 成骨 分化 猪
原文传递
绵羊脂肪细胞去分化和诱导再分化特性及关键基因表达规律研究
4
作者 张伟 郭庆河 +5 位作者 崔炳灿 高莉 宁程程 牛嘉 王世银 吕刚 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期4638-4653,共16页
本试验旨在初步探究绵羊脂肪细胞去分化机制和诱导再分化能力差异。分别使用经优化的“天花板”培养法研究不同月龄和组织来源脂肪细胞去分化能力,及去分化过程中细胞形态和关键基因的表达,并对不同组织来源去分化脂肪(DFAT)细胞诱导成... 本试验旨在初步探究绵羊脂肪细胞去分化机制和诱导再分化能力差异。分别使用经优化的“天花板”培养法研究不同月龄和组织来源脂肪细胞去分化能力,及去分化过程中细胞形态和关键基因的表达,并对不同组织来源去分化脂肪(DFAT)细胞诱导成脂分化能力进行比较。结果表明:若不使用不同孔径的细胞筛筛选脂肪细胞大小,不同月龄相同来源的脂肪细胞完成去分化的时间无显著差异(P>0.05);相同月龄绵羊的尾部脂肪细胞和肾周脂肪细胞完成去分化的时间无显著差异(P>0.05),但均极显著长于肌内脂肪细胞(P<0.01)。若将脂肪细胞筛选为不同大小的细胞组,则不论是尾部脂肪细胞还是肌内脂肪细胞,直径<300目细胞筛孔径的细胞完成去分化的时间均极显著短于直径>300目细胞筛孔径的细胞(P<0.01),直径>200目细胞筛孔径的尾部脂肪细胞完成去分化的时间又极显著长于直径200~300目细胞筛孔径的细胞(P<0.01),证明脂肪细胞完成去分化的时间与其细胞大小有关,而与其来源无明显相关性。脂肪细胞启动去分化后,细胞中的大脂滴逐步裂解为小脂滴,调控脂质合成和分解的基因均出现极显著上调(P<0.01),同时在细胞培养基中检测到甘油三酯含量出现极显著上升(P<0.01),而游离脂肪酸的含量虽有显著上升(P<0.05),但在整个去分化过程中基本保持稳定,推断脂肪细胞在去分化过程中主要通过直接排出脂滴完成细胞中脂质的清除。随着脂肪细胞的去分化,脂肪细胞祖细胞和前体脂肪细胞标志基因以及干细胞标志基因均出现极显著上调(P<0.01),说明脂肪细胞逆转了细胞命运决定而重新获得了干细胞特性。不同组织来源的DFAT细胞诱导成脂分化能力无显著差异(P>0.05)。综上所述,绵羊脂肪细胞大小与其去分化能力极显著相关,但与其组织来源和年龄无明显相关性。DFAT细胞主要通过排出脂滴完成细胞内脂质的清除并获得干细胞特性,但DFAT细胞诱导成脂分化能力不受其组织来源的影响。 展开更多
关键词 绵羊 脂肪细胞 脂质 脂滴 去分化 dfat 诱导分化
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航天器直接声场试验技术研究进展 被引量：5
5
作者 刘振皓 任方 +3 位作者 原凯 李海波 张忠 秦朝红 《装备环境工程》 CAS 2018年第2期68-73,共6页
为了使得航天器的设计、制造与试验能够并行开展,同时降低试验成本、缩短试验周期,在最近十余年,国外发展了直接声场试验技术(DFAT)。这种新型的噪声试验技术与混响场试验相比更为方便、快捷,极大地提高了试验效率。针对未来飞行器研制... 为了使得航天器的设计、制造与试验能够并行开展,同时降低试验成本、缩短试验周期,在最近十余年,国外发展了直接声场试验技术(DFAT)。这种新型的噪声试验技术与混响场试验相比更为方便、快捷,极大地提高了试验效率。针对未来飞行器研制与试验,论述了DFAT技术的进展情况。从扬声器阵列的布置方式、控制技术的改进和DFAT技术目前所具备的能力现状等三个方面阐述了DFAT试验系统的组成与发展,对近十年来国外开展的典型DFAT试验进行了梳理,并总结了在试验中发现的声场一致性、与混响场的差异、试验件结构响应和驻波等相关问题。对DFAT技术的后续应用前景进行了展望,提出了我国发展DFAT技术所面临的问题和挑战。 展开更多
关键词 直接声场试验 扬声器 混响声场 MIMO控制 dfat
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去分化脂肪细胞多向分化潜能与应用
6
作者 张洋 肖丽玲 《海南医学》 CAS 2017年第9期1458-1462,共5页
去分化脂肪细胞(DFAT cells)来源于成熟脂肪细胞,且具有多向分化潜能,其特征类似于干细胞的一种细胞。在体外可通过天花板培养法提取出DFAT细胞,经过诱导后,DFAT细胞可向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、肌细胞、神经细胞等分化... 去分化脂肪细胞(DFAT cells)来源于成熟脂肪细胞,且具有多向分化潜能,其特征类似于干细胞的一种细胞。在体外可通过天花板培养法提取出DFAT细胞,经过诱导后,DFAT细胞可向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、肌细胞、神经细胞等分化。因此,DFAT细胞是一种在组织工程和干细胞治疗中很好的潜在资源,从而广泛应用于多种疾病及组织损伤修复的研究当中。 展开更多
关键词 去分化脂肪细胞 分化 脂肪干细胞 临床应用
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形形色色的电视新技术
7
《家电大视野》 2004年第1期40-40,共1页
关键词 DLP 光显电视 LCOS 硅晶成像 DNLe dfat 3D背投 DSP
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