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一种无需DEPC提取高质量棉花总RNA的方法 被引量:2
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作者 刘冬梅 丁锦平 +1 位作者 李成伟 李付广 《江西农业学报》 CAS 2009年第7期15-17,共3页
DEPC做为RNAnase抑制剂常用于RNA的提取,但其本身具有毒性,容易对操作者产生伤害并易造成环境污染。该实验以改良CTAB法为基础,提高β-巯基乙醇的浓度到10%,无需DEPC就能提取高质量的RNA。分别以不同陆地棉为材料提取了棉花的总RN... DEPC做为RNAnase抑制剂常用于RNA的提取,但其本身具有毒性,容易对操作者产生伤害并易造成环境污染。该实验以改良CTAB法为基础,提高β-巯基乙醇的浓度到10%,无需DEPC就能提取高质量的RNA。分别以不同陆地棉为材料提取了棉花的总RNA,测得OD260/OD:80在1.7—2.1之间,且大部分样品都能清晰看到3条RNA条带,将此RNA反转录获得的cDNA为模板克隆到了棉花ATP合成酶β亚基基因,说明此方法提取的棉花总RNA既能满足分子生物学实验要求又大大地减少了毒害作用。 展开更多
关键词 棉花 depc 改良CTAB法 RNA 提取方法
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RNA提取过程中DEPC的毒性 被引量:4
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作者 王长晔 《天津科技》 2008年第5期5-6,共2页
在RNA提取的过程中,如采用DEPC进行无RNA酶处理,DEPC可能对人体产生毒害。通过查阅国际大量毒理学食品保健以及环境保护等相关法规资料,对DEPC性质及其毒性进行了分析,并总结得出DEPC对人体的毒害结论。
关键词 生物化学 RNA提取 depc
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化脓性链球菌脂蛋白FtsB的基因克隆、表达、纯化与功能研究 被引量:1
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作者 李慧 吕洁 +5 位作者 王红翠 王南杰 李楠 詹胜 阳小燕 孙雪松 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1786-1792,共7页
体外克隆化脓性链球菌5005的ftsb基因,表达并纯化FtsB蛋白,并对其铁色素结合特性进行初步研究。首先通过PCR方法从基因组中扩增ftsb基因,将其连接到pGEX4T-1载体上,转入大肠杆菌DH5α中大量扩增,将测序正确的重组载体转化到表达宿主大... 体外克隆化脓性链球菌5005的ftsb基因,表达并纯化FtsB蛋白,并对其铁色素结合特性进行初步研究。首先通过PCR方法从基因组中扩增ftsb基因,将其连接到pGEX4T-1载体上,转入大肠杆菌DH5α中大量扩增,将测序正确的重组载体转化到表达宿主大肠杆菌BL21进行表达,优化诱导表达条件。利用亲和层析方法纯化表达产物,并对FtsB的铁色素结合特性进行研究,同时通过DEPC封闭组氨酸实验对其结合位点进行初步研究。成功构建原核表达载体pGEX-ftsb,获得分子量约33 kD的野生型FtsB蛋白,产率为30 mg/L。紫外-可见光谱研究表明FtsB和铁色素结合后在450 nm处出现紫外吸收峰,DEPC封闭组氨酸实验证明FtsB中组氨酸不参与铁色素的结合。对FtsB蛋白进行铁色素结合特性和结合位点进行研究,为进一步研究细菌中的铁色素转运机理及开发疫苗候选物和药靶奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 化脓性链球菌 FtsB蛋白 铁色素 depc
原文传递
小肽转运载体2在奶牛乳腺小肽摄取中的作用研究 被引量:4
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作者 周苗苗 吴跃明 +2 位作者 刘红云 赵珂 刘建新 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1303-1308,共6页
本试验旨在研究2型小肽转运载体(oligopeptide transporter 2,PepT 2)在奶牛乳腺组织吸收利用小肽合成乳蛋白过程中的作用。在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中分别添加不同浓度的苯丙氨酸二肽(Phe-Phe)(0和11.7μg/mL)和/或焦碳酸二乙酯... 本试验旨在研究2型小肽转运载体(oligopeptide transporter 2,PepT 2)在奶牛乳腺组织吸收利用小肽合成乳蛋白过程中的作用。在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中分别添加不同浓度的苯丙氨酸二肽(Phe-Phe)(0和11.7μg/mL)和/或焦碳酸二乙酯(DEPC)(0、0.01、0.1、0.5和1.0 mmol/L)进行培养,试验结束后收集乳腺组织和培养液分别用于基因表达和乳蛋白合成的检测。结果表明,Phe-Phe促进了PepT 2和αs1-酪蛋白基因表达及乳蛋白合成(P<0.05);随DEPC添加浓度的升高,αs1-酪蛋白基因表达(P<0.01)和乳蛋白合成(P<0.05)显著降低;0.5 mmol/L DEPC显著降低了Phe-Phe组αs1-酪蛋白的基因表达(P<0.05)和乳蛋白合成(P<0.01)以及不添加小肽组乳蛋白合成(P<0.05),但不影响不添加小肽组αs1-酪蛋白基因表达(P>0.05)。结果提示,奶牛乳腺能摄取Phe-Phe用于乳蛋白的合成,PepT 2可能在乳腺小肽摄取过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 二肽 PepT2 酪蛋白 depc 奶牛乳腺组织
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橡胶树胶乳RNA简易提取和保存方法的比较探索 被引量:3
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作者 庄盈婷 仝征 +4 位作者 王力敏 王红岩 周承 王旭初 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第10期1907-1913,共7页
针对巴西橡胶树胶乳RNA的提取方法存在操作复杂、步骤多、时间长、保存条件要求苛刻等问题以及橡胶树胶乳远距离、长时间采样的诸多不便等问题,介绍一种具有操作简单、实验时间短、步骤少等优点的简易巴西橡胶树胶乳RNA提取方法和一种... 针对巴西橡胶树胶乳RNA的提取方法存在操作复杂、步骤多、时间长、保存条件要求苛刻等问题以及橡胶树胶乳远距离、长时间采样的诸多不便等问题,介绍一种具有操作简单、实验时间短、步骤少等优点的简易巴西橡胶树胶乳RNA提取方法和一种适于长时间保存胶乳的方法。该方法仅仅以DEPC水为提取液,提取的RNA浓度可以达到为0.722μg/mL,纯度OD260/OD280在2.0~2.2之间,总RNA提取量为36.1μg/mL,可以满足后续分子生物学实验RT-PCR和RACE的要求;对在冰上保存1~10 d的胶乳提取RNA,浓度在0.502~0.722μg/mL之间,OD260/OD280在1.8~2.4之间,总RNA的提取量在20.8~35.44μg/mL之间。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 胶乳 RNA提取 depc RNA保存
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黄烷酮-7-O-乙酰氨基酸及二肽衍生物的合成 被引量:2
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作者 何晓树 郭安安 +1 位作者 杨福秋 雷兴翰 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第12期536-539,555,共5页
合成16个黄烷酮-7-O-乙酸、乙酸酯、乙酰氨基酸和二肽衍生物。以DEPC催化形成酰胺键获得成功。合成的目标化合物的心血管药理初筛结果不理想。
关键词 黄烷酮 氨基酸二肽 depc 合成 活性
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柴油机排出颗粒物不同组分对哺乳动物遗传毒性的研究 被引量:3
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作者 吕源明 叶舜华 《中国公共卫生学报》 1995年第3期183-184,共2页
采用大鼠原代肝细胞UDS试验,对国产东风柴油机排出颗粒物不同分离组分进行研究,评价各组分对DNA的损伤作用。结果表明:各种不同组分(有机酸F1组分除外)均可诱导DNA的损伤,导致cpm值的升高,且在一定范围内存在剂量... 采用大鼠原代肝细胞UDS试验,对国产东风柴油机排出颗粒物不同分离组分进行研究,评价各组分对DNA的损伤作用。结果表明:各种不同组分(有机酸F1组分除外)均可诱导DNA的损伤,导致cpm值的升高,且在一定范围内存在剂量-反应关系,其中以有机碱F2和多环芳烃F4组分的毒性较高。 展开更多
关键词 柴油机 排出颗粒物 组分 哺乳动物 遗传毒性
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核糖核酸和焦炭酸二乙酯修饰影响ribozyme切割活性的初步研究
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作者 黄扬中 任秀容 +2 位作者 祁国荣 王昌才 陆长德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第6期1-4,共4页
以抗HPV16E7-ribozyme作为研究模型,对影响ribozrme切割活性的一些因素进行了初步探讨。结果发现,核糖核酸(RNA)可以明显影响ribozyme的体外切割活性,且其活性随着加入反应的RNA量和RNA种类的不同而异,细胞内的RNA可能会明显影响... 以抗HPV16E7-ribozyme作为研究模型,对影响ribozrme切割活性的一些因素进行了初步探讨。结果发现,核糖核酸(RNA)可以明显影响ribozyme的体外切割活性,且其活性随着加入反应的RNA量和RNA种类的不同而异,细胞内的RNA可能会明显影响ribozyme的体内切割活性。另外,ribozyme的焦炭酸二乙酯修饰也可明显影响ribozyme的切割活性,说明ribozyme保守序列中的腺苷酸(A)对其活性的维持是重要的。 展开更多
关键词 RIBOZYME 修饰 核糖酸酸 焦炭酸二乙酯 切割活性
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Spectral Properties and Characterization of the Modified PSⅡCore Complexes
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作者 LI Shu-Qin CHEN Yao-Dong +2 位作者 TANG Chong-Qin LI Liang-Bi KUANG Ting-Yun 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期643-645,共3页
Even though light is the unique source of enengy forphotosynthesis,it can also be hannful to plant,Photoin-hibition occurs when light energy absorption largely ex-ceeds the energy consumption of photosynthetic reactio... Even though light is the unique source of enengy forphotosynthesis,it can also be hannful to plant,Photoin-hibition occurs when light energy absorption largely ex-ceeds the energy consumption of photosynthetic reactions.Today,the mechanisnu of photoinhibition has become amajor topic of photosynthesis research.It is generally ae-cepted that PS IⅡis affected predominantly by photounhi-bition[1],which causes a loss of electron transfer caparityand oxygen evolution activity,bleaching of pigment,degradation of D,and other proteins,croes-linking be-tween polypeptidesi. 展开更多
关键词 PSⅡcore complexes spectral properties MODIFICATION
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