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剪接因子DDX3Y下调IL-6/JAK/STAT3信号通路促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长的机制研究
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作者 周雅静 李东宝 +6 位作者 王鹏博 段开鹏 董超 李炜康 孙小童 徐呈祥 周进 《中国临床新医学》 2025年第6期642-651,共10页
目的分析剪接因子DDX3Y下调IL-6/JAK/STAT3信号通路促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长的机制。方法通过生物信息学方法分析DDX3Y在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平以及DDX3Y表达情况与患者预后的关系。收集苏州大学附属第一医院收治的... 目的分析剪接因子DDX3Y下调IL-6/JAK/STAT3信号通路促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长的机制。方法通过生物信息学方法分析DDX3Y在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平以及DDX3Y表达情况与患者预后的关系。收集苏州大学附属第一医院收治的男性胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织(距离胃癌组织>5 cm)进行免疫组化染色。对人胃永生化黏膜上皮细胞GES-1以及男性来源胃癌细胞SNU-1、NUGC-3、KATOIII、MKN74、HGC-27、NCI-N87进行培养。采用Western blot法检测DDX3Y在不同细胞系中的表达水平。通过慢病毒转染SNU-1细胞和HGC-27细胞,分别构建DDX3Y高表达/低表达的细胞(OE-DDX3Y/shDDX3Y),进行EdU细胞增殖实验。利用男性胃癌患者的胃癌组织构建类器官,并通过慢病毒转染进一步构建DDX3Y高表达/低表达的类器官,分析抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路对类器官直径及活力的影响。使用RBPmap在线网站预测DDX3Y与IL-6前体mRNA结合的可能性。结果癌旁组织中DDX3Y mRNA表达水平显著高于胃癌组织(P<0.05)。DDX3Y mRNA高表达患者的生存预后显著优于低表达患者(log-rank检验:χ^(2)=7.856,P=0.005)。与GES-1细胞相比,DDX3Y蛋白在HGC-27细胞中显著高表达(P<0.05);相较于HGC-27细胞,SNU-1细胞中DDX3Y蛋白表达量较低(P<0.05)。在SNU-1细胞中,OE-DDX3Y组的DDX3Y蛋白表达量显著高于高表达对照组(P<0.05),OE-DDX3Y组EdU染色阳性细胞比例显著低于高表达对照组(P<0.05)。在HGC-27细胞中,shDDX3Y-1组的DDX3Y蛋白表达量显著低于低表达对照组(P<0.05),shDDX3Y组EdU染色阳性细胞比例显著高于低表达对照组(P<0.05)。相较于高表达对照组,OE-DDX3Y组类器官直径显著减小(P<0.05),活力显著降低(P<0.05),抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路后类器官直径进一步减小(P<0.05),活力进一步降低(P<0.05)。相较于低表达对照组,shDDX3Y组类器官直径显著增大(P<0.05),活力显著增加(P<0.05),抑制IL-6/JAK/STAT3信号通路后类器官直径显著减小(P<0.05),活力显著降低(P<0.05)。RBPmap在线网站预测结果提示DDX3Y很可能与IL-6的前体mRNA发生结合(Z-score>3,结合信号显著)。结论剪接因子DDX3Y下调促进男性胃癌细胞增殖和类器官生长,其调控IL-6的可变剪接并可进一步通过影响IL-6/JAK/STAT3信号通路发挥促进肿瘤进展的作用。 展开更多
关键词 ddx3Y 肿瘤细胞增殖 可变剪接 IL-6/JAK/STAT3信号通路 胃癌性别差异
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DDX3X肝特异性敲除在对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤中的作用机制研究
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作者 莫胤康 范子豪 +1 位作者 徐玲 任锋 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第4期554-559,共6页
目的探讨DDX3X在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠急性肝损伤(APAP-induced acute liver injury,AILI)中的作用及机制。方法动物实验使用C57BL/6J小鼠(包括野生型、DDX3X^(fl/fl)和DDX3X^(Δhep)小鼠),APAP(300 mg/kg)诱导急... 目的探讨DDX3X在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠急性肝损伤(APAP-induced acute liver injury,AILI)中的作用及机制。方法动物实验使用C57BL/6J小鼠(包括野生型、DDX3X^(fl/fl)和DDX3X^(Δhep)小鼠),APAP(300 mg/kg)诱导急性肝损伤。检测肝功、病理评价小鼠肝脏损伤;qRT-PCR方法检测基因表达水平;利用Western blotting方法确定蛋白表达含量;ELISA方法鉴定小鼠血清中蛋白表达水平。结果DDX3X的基因和蛋白表达在APAP处理时间梯度中先上升后降低;APAP处理24 h后,DDX3X^(fl/fl)小鼠出现了严重的肝损伤,而DDX3X^(Δhep)小鼠的肝损伤显著减轻,主要表现在小鼠肝功水平显著降低(P<0.05),病理坏死区域和炎症细胞浸润面积减少。两组小鼠中肝组织CYP2E1和GSH的蛋白表达在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。同时,与DDX3X^(fl/fl)小鼠相比,DDX3X^(Δhep)小鼠在APAP处理后炎症指标TNF-α、IL-1β和IL-6在肝组织中基因表达和血清中含量均显著降低(P<0.05)。结论DDX3X肝特异性敲除可能通过降低炎症反应来明显改善小鼠AILI,这为DDX3X在调控肝损伤的功能方面提供了理论支撑。 展开更多
关键词 对乙酰氨基酚 药物性肝损伤 ddx3X 炎症反应
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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠脑干中的表达变化 被引量:3
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作者 张雅雯 王箐 +5 位作者 原萌 刘焕彩 王巧真 丁昊宇 周风华 陈燕春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-6,共6页
目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干... 目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠脑干中的表达变化,探讨DDX3和CK1ε在ALS脑干运动神经元变性中的作用。方法选取ALS转基因鼠33只,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)和晚期(122 d)3个时间点剥离脑干,应用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光染色技术分别检测ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1ε的表达规律,在脑干运动核团舌下神经(12 N)和面神经(7 N)中阳性细胞的分布特点及细胞定位,每组均选择相同数量的同窝野生型鼠作为对照。结果 RT-PCR和Western blotting结果显示,与同窝野生型鼠相比,ALS转基因鼠脑干组织中DDX3和CK1εmRNA于95 d、108 d、122 d表达均无明显变化,DDX3和CK1ε蛋白在95 d和108 d表达上调,122 d表达下调(P<0.01,P<0.001)。免疫荧光结果显示,在ALS鼠和野生型鼠脑干的12 N和7N区域均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞,DDX3和CK1ε表达在神经元,在星形胶质细胞不表达。ALS鼠和野生型鼠DDX3和CK1ε免疫反应性具有差异。结论 DDX3和CK1ε在脑干中的表达异常与ALS发病密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 脑干 ddx3 酪蛋白激酶Ⅰε 免疫印迹法 反转录聚合酶链反应 小鼠
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DDX3和CK1ε在ALS转基因小鼠大脑皮层中的表达变化 被引量:2
4
作者 王箐 原萌 +5 位作者 刘焕彩 梁婵婵 林宝勇 张雅雯 周风华 陈燕春 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期15-20,共6页
目的:观察RNA解旋酶DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的表达变化,探讨DDX3与CK1ε表达改变在ALS发病中的作用和意义。方法:选择SOD1-G93A转基因小鼠进行试验,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)、晚期(122 d)... 目的:观察RNA解旋酶DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的表达变化,探讨DDX3与CK1ε表达改变在ALS发病中的作用和意义。方法:选择SOD1-G93A转基因小鼠进行试验,分别于发病早期(95 d)、中期(108 d)、晚期(122 d)取材。应用免疫荧光双标染色方法检测DDX3和CK1ε在ALS转基因小鼠大脑皮层中的表达变化规律及其与神经元的共定位关系。应用RT-PCR和Western Blot技术检测ALS转基因小鼠大脑皮层组织中DDX3和CK1ε在mRNA、蛋白水平的表达变化,每组均选择同年龄的野生型小鼠作为对照组。结果:与野生型鼠相比,ALS转基因小鼠大脑皮层组织中的DDX3蛋白和mRNA早期表达均无明显变化,中、晚期表达均升高;CK1ε蛋白在ALS小鼠发病早期没有明显改变,中、晚期表达升高,mRNA表达无明显变化。免疫荧光双标结果显示,ALS转基因小鼠和野生型小鼠大脑皮层组织中均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞,且与神经元共表达。ALS转基因小鼠大脑皮层组织内DDX3与CK1ε免疫反应性较同龄野生型鼠明显增强。结论:DDX3与CK1ε表达异常与ALS大脑皮层病变密切相关,参与了ALS发病。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 转基因小鼠 大脑皮层 RNA解旋酶ddx3 酪蛋白激酶1ε 小鼠
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DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达 被引量:2
5
作者 原萌 王箐 +5 位作者 刘金梦 林宝勇 梁婵婵 刘焕彩 孙钰凯 陈燕春 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期243-248,共6页
目的:检测DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达变化,探讨其在ALS纹状体病变中的作用,为ALS研究提供新的实验依据。方法:将发病早期、中期和晚期(即95 d、108 d和122 d)的成年野生型小鼠和SOD1-G93A突变型ALS转基因... 目的:检测DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达变化,探讨其在ALS纹状体病变中的作用,为ALS研究提供新的实验依据。方法:将发病早期、中期和晚期(即95 d、108 d和122 d)的成年野生型小鼠和SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠分别处死取材,运用免疫荧光技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的表达水平进行检测,运用RT-PCR技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的m RNA水平进行检测,运用Western Blot行蛋白水平变化检测。结果:野生型小鼠和SOD1-G93A突变型转基因小鼠纹状体中均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞。DDX3和CK1ε在神经元表达,但在星形胶质细胞不表达。在发病的中期和晚期,DDX3在ALS转基因小鼠纹状体中的m RNA和蛋白表达与野生型鼠相比均升高。CK1εm RNA在ALS发病的早期不变化,在中期、晚期较野生型鼠降低;而在ALS发病的早期转基因小鼠纹状体中CK1ε蛋白表达量较野生型鼠升高,在中期、晚期降低。结论:DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体中表达异常与ALS纹状体的病变密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩性侧索硬化症 转基因小鼠 纹状体 ddx3 CK1ε
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DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化 被引量:2
6
作者 王箐 王巧真 +5 位作者 刘永新 张雅雯 马晓君 赵春艳 杜红梅 陈燕春 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期369-372,411,共5页
目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应... 目的:探讨RNA解旋酶DDX3和DDX5在环磷酰胺致大鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达及与神经管畸形发生之间的关系,为阐明神经管畸形发生的分子机制提供实验依据。方法:选取不同时间点环磷酰胺致神经管畸形模型组和对照组大鼠石蜡切片,应用免疫荧光组织化学显色法检测神经上皮细胞中DDX3和DDX5的表达变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5阳性表达在环磷酸胺处理后4 h无改变,8、12、24 h均升高,48 h则降低,差异均有统计学意义。结论:环磷酰胺导致大鼠胚胎神经管神经上皮细胞中DDX3和DDX5表达异常,提示DDX3和DDX5可能参与了神经管畸形的发生。 展开更多
关键词 环磷酰胺 神经管畸形 RNA解旋酶 ddx3 DDX5 大鼠
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MicroRNA-1285及其靶标DDX3X对猪塞内卡病毒感染PK-15细胞的调控作用
7
作者 孙媛 唐晓钰 +5 位作者 白杨 陈雨琪 郑瑶瑶 吴佼玲 蓝天 马静云 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期357-366,共10页
[目的]探究MicroRNA-1285(miR-1285)及其靶标DDX3X在猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞中的调控作用。[方法]利用qRT-PCR、双荧光素酶活性及Western blot等方法研究miR-1285和DDX3X对I型干扰素(IFN-β)分泌及RIG-I信号通路... [目的]探究MicroRNA-1285(miR-1285)及其靶标DDX3X在猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞中的调控作用。[方法]利用qRT-PCR、双荧光素酶活性及Western blot等方法研究miR-1285和DDX3X对I型干扰素(IFN-β)分泌及RIG-I信号通路的作用,分析miR-1285及DDX3X对SVA 3C蛋白基因表达的影响。[结果]SVA感染PK-15细胞后,miR-1285表达量显著升高,并且miR-1285与DDX3X存在负靶向关系,二者可促进IFN-β转录及蛋白水平的表达。miR-1285通过靶向DDX3X对RIG-I信号通中的MAVS、TRAF3信号分子起调控作用。对于SVA 3C蛋白基因,DDX3X可以显著抑制其转录,并且可以逆转miR-1285所诱导的上调趋势。[结论]SVA感染PK-15细胞后,宿主miR-1285及其靶标DDX3X对IFN-β及病毒3C蛋白的表达具有调控作用,研究结果将为明确miRNAs调控SVA感染的分子机制奠定基础,并为SVA的防控和诊断提供新的科学依据。 展开更多
关键词 MicroRNA-1285 ddx3X 猪塞内卡病毒 IFN-Β RIG-I信号通路
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RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后关系的研究
8
作者 胡金飞 胡望远 《中国妇幼健康研究》 2018年第10期1264-1268,共5页
目的探讨RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后的关系。方法收集2010年1月至2012年12月间就诊金华市中心医院确诊为转移性乳腺癌(Ⅳ期)的患者共83例,经RT-PCR技术检测术后癌组织及癌旁组织RNA解旋酶DDX3的表达情况,分析其与转移性乳腺癌患... 目的探讨RNA解旋酶DDX3与转移性乳腺癌预后的关系。方法收集2010年1月至2012年12月间就诊金华市中心医院确诊为转移性乳腺癌(Ⅳ期)的患者共83例,经RT-PCR技术检测术后癌组织及癌旁组织RNA解旋酶DDX3的表达情况,分析其与转移性乳腺癌患者术后生存状况的关系。结果通过RT-PCR检测结果显示,RNA解旋酶DDX3在转移性乳腺癌组织中的表达(0.49±0.06)显著高于癌旁组织的表达量(0.23±0.02)(t=4.956,P<0.05)。同时,RNA解旋酶DDX3在转移部位、转移部位数、雌激素受体/孕激素受体(ER/PR)状态临床因素中表达存在明显差异(t/F值分别为8.013、9.227、8.246,均P<0.05),而在年龄、是否绝经、癌组织类型临床因素中不存在明显差异(t/F值分别为1.432、0.914、1.107,均P>0.05)。DDX3的表达水平≥0.45在术后3年的复发率明显高于其表达水平<0.45者(χ2=8.121,P<0.05)。同时,DDX3的表达水平≥0.45者的平均复发时间也短于其表达水平<0.45者,两组差异均具有统计学意义(t=7.235,P<0.05)。利用Cox风险回归模型分析结果显示,转移部位、转移部位数、DDX3的表达量是转移性乳腺癌术后预后的独立危险因素(OR值分别为1.427、1.203、2.886,均P<0.05),术后辅助放化疗是保护因素(OR=0.779,P<0.05)。结论 RNA解旋酶DDX3是转移性乳腺癌患者术后预后的影响因素,通过对RNA解旋酶DDX3的检测可为转移性乳腺癌患者临床诊治提供一定的参考价值。 展开更多
关键词 RNA解旋酶ddx3 乳腺癌 转移性 生存率 COX回归
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Ddx3基因在不同日龄小鼠睾丸组织中的表达
9
作者 龚淼 张雷 +3 位作者 李莉 赵昱 赵春芳 任广伟 《中国民康医学》 2017年第4期1-4,22,共5页
目的:观察小鼠睾丸初次生精过程中的发育特点;检测Ddx3基因与蛋白在小鼠睾丸生精过程中的表达模式;探讨Ddx3基因对小鼠睾丸生精的影响。方法:采用HE染色与PAS染色的方法观察不同日龄小鼠睾丸组织的石蜡切片;用荧光实时定量PCR的方法检测... 目的:观察小鼠睾丸初次生精过程中的发育特点;检测Ddx3基因与蛋白在小鼠睾丸生精过程中的表达模式;探讨Ddx3基因对小鼠睾丸生精的影响。方法:采用HE染色与PAS染色的方法观察不同日龄小鼠睾丸组织的石蜡切片;用荧光实时定量PCR的方法检测Ddx3 mRNA在小鼠睾丸精子发生过程中的表达;采用免疫组织化学和Western blot方法检测DDX3蛋白在小鼠睾丸初次生精过程中的表达特点和细胞内定位。结果:HE染色结果显示4、13、21、35、42和60日龄是小鼠睾丸发生初次生精过程的特定阶段;荧光实时定量PCR结果显示Ddx3 mRNA在4日龄以后小鼠睾丸组织中均有表达,于35日龄开始明显增高,随后表达水平保持稳定;Western blot显示DDX3蛋白在35、42和60日龄小鼠睾丸生精小管中出现特异性表达并逐渐增高;免疫组织化学法显示DDX3蛋白主要在初级精母细胞和精子细胞的细胞质和细胞核中表达。结论:DDX3蛋白在小鼠初次精子发生过程中呈现特异性表达,提示Ddx3基因可能在精母细胞与精子细胞的发育中发挥作用。 展开更多
关键词 ddx3基因 小鼠 精子发生 睾丸 DEAD box 精母细胞
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DDX3和酪蛋白激酶1ε在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠海马中的表达 被引量:5
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作者 蒲蕾东 张雅雯 +5 位作者 王箐 刘焕彩 刘永新 王巧真 管英俊 陈燕春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期375-380,共6页
目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马中的表达变化,揭示DDX3和CK1ε的表达改变与ALS发病的关系。方法 33只ALS转基因鼠和33只野生型鼠分别于发病不同时期取材,应用RT-PCR和Western blotting技术检... 目的检测DDX3和酪蛋白激酶1ε(CK1ε)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠海马中的表达变化,揭示DDX3和CK1ε的表达改变与ALS发病的关系。方法 33只ALS转基因鼠和33只野生型鼠分别于发病不同时期取材,应用RT-PCR和Western blotting技术检测海马组织中DDX3和CK1ε的表达变化;通过免疫荧光双标染色技术观察DDX3和CK1ε阳性细胞的分布特点及其与神经元、星形胶质细胞等的共表达情况。结果与野生型鼠相比,ALS转基因鼠海马中DDX3 mRNA和蛋白在发病早期变化不明显,中期和晚期表达均明显降低;CK1εmRNA和蛋白则在发病早期、中期和晚期表达均降低。免疫荧光双标结果显示,在ALS鼠和野生型鼠海马齿状回区和CA区均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞。DDX3和CK1ε主要表达在神经元,在星形胶质细胞未见表达。与野生型鼠比较,ALS转基因鼠海马中DDX3和CK1ε免疫反应性明显降低。结论 DDX3和CK1εmRNA和蛋白在ALS转基因鼠海马中表达均降低,表明DDX3和CK1ε表达异常与ALS海马区病变密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 海马 ddx3 酪蛋白激酶1ε 转基因 免疫印迹法 小鼠
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《Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma》解读——创新转化,擅用科研的临床语言
11
作者 赵维莅 《临床血液学杂志》 CAS 2016年第5期691-693,共3页
本文最初发表于《Nature Genetics》杂志2015年第47卷,题录为:Jiang L,Gu ZH,Yan ZX,Zhao X,et al.Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma[J].Nat Genet,2015,47:1061-1066。这是... 本文最初发表于《Nature Genetics》杂志2015年第47卷,题录为:Jiang L,Gu ZH,Yan ZX,Zhao X,et al.Exome sequencing identifies somatic mutations of DDX3X in natural killer/T-cell lymphoma[J].Nat Genet,2015,47:1061-1066。这是迄今为止NK/T细胞淋巴瘤最全面系统的基因组学图谱,也是对相关突变基因致病原理及其临床意义进行的深入系统阐述,反映了我国血液学工作者在淋巴瘤研究中的最高水平,有较重要的理论与临床意义。本文经通信作者的许可,再次通过佳文解读的方式对这一研究成果进行阐述,供各位赏析。 展开更多
关键词 自然杀伤/T细胞淋巴瘤 外显子测序 ddx3X基因
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醋酸铅对雄性小鼠睾丸Y染色体基因Ddx3y蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 黄格娜 徐林 +2 位作者 徐陶 李亚晨 朴丰源 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期347-350,共4页
目的通过观察亚慢性铅暴露对小鼠睾丸组织Y染色体基因Ddx3y蛋白表达的影响,为探讨铅的雄性生殖毒作用机制提供新的靶标依据。方法:昆明种小鼠48只,按体重将小鼠随机分为对照组,0.5、1.0和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度... 目的通过观察亚慢性铅暴露对小鼠睾丸组织Y染色体基因Ddx3y蛋白表达的影响,为探讨铅的雄性生殖毒作用机制提供新的靶标依据。方法:昆明种小鼠48只,按体重将小鼠随机分为对照组,0.5、1.0和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度醋酸铅的方式使小鼠染铅,连续染毒60 d。取小鼠睾丸组织,用苏木素-伊红(HE)染色法进行组织病理学观察,用Western blotting和免疫组化方法检测睾丸组织Ddx3y蛋白的表达及组织分布。结果与对照组比较,染铅组睾丸曲细精管内细胞排列松散、紊乱、层次不清,精原细胞层和初级精母细胞层之间间隙变宽,且随着染铅浓度的增加精子细胞明显减少。Western blotting检测结果显示,染铅组的小鼠睾丸组织中Ddx3y蛋白表达显著低于对照组,且有剂量-反应关系。免疫组化结果显示,随着染铅剂量的增加,睾丸组织中抗Ddx3y蛋白免疫反应明显降低。结论亚慢性铅暴露可抑制小鼠精子的发生、发育和下调睾丸组织Y染色体基因Ddx3y蛋白的表达。 展开更多
关键词 醋酸铅 雄性生殖毒性 Y染色体 ddx3y蛋白
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DDX3X基因变异致X连锁智力障碍3例临床分析及康复随访 被引量:1
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作者 夏秦 顾琴 +5 位作者 陈婷 张何威 霍洪亮 曹徐君 王巍巍 吉永春 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期948-954,共7页
目的总结DDX3X基因变异导致X连锁智力障碍(XLID)患儿的临床特征及基因变异特点。方法回顾性分析2018年1月至2021年4月在康复科就诊的3例因DDX3X基因变异致XLID患儿的基因检测结果及临床表型,长期随访其康复训练效果。结果例1为8个月23... 目的总结DDX3X基因变异导致X连锁智力障碍(XLID)患儿的临床特征及基因变异特点。方法回顾性分析2018年1月至2021年4月在康复科就诊的3例因DDX3X基因变异致XLID患儿的基因检测结果及临床表型,长期随访其康复训练效果。结果例1为8个月23天男孩,例2为6个月女孩,例3为1岁6个月女孩。3例患儿首次就诊均表现为全面发育迟缓,特殊面容及肌张力障碍。全外显子测序发现例1为DDX3X基因c.1025+3A>C(p?)剪切突变,其母亲该位点为杂合子状态,父亲为野生型,根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)指南,该变异为临床意义未明性变异。经RT-PCR及Sanger验证后,该变异可引起内含子10部分保留及外显子10部分跳跃,提示该变异可能是导致基因功能异常的候选位点,该位点未经报道。例2为c.1535-1536 delAT(p.H 512 Rfs*5)缺失突变,其父母该位点均为野生型,根据ACMG指南,该变异为新发致病性变异。例3为在DDX3X基因7号内含子区域发现一处c.679+2T>G剪切突变,其父母该位点均为野生型,该变异为新发致病性变异。结论本研究发现3个新的国内首次报道的DDX3X基因变异位点,其中1例剪切突变经验证为候选位点;丰富了DDX3X基因变异谱,为患儿的临床诊断和遗传咨询提供了依据。 展开更多
关键词 ddx3X基因 X连锁智力障碍 遗传学分析
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DDX3 RNA解旋酶在基因调控、肿瘤和病毒感染中的功能 被引量:1
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作者 武炜 孙英杰 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第1期95-102,共8页
DEAD-box RNA解旋酶DDX3是一种多功能的蛋白,其参与RNA代谢的多个过程,包括转录、剪接、mRNA核输出、翻译、RNA降解和核糖体生物合成。此外,DDX3还参与了细胞周期调控、细胞凋亡、Wnt-β-catenin信号和肿瘤发生等。最近研究表明,DDX3参... DEAD-box RNA解旋酶DDX3是一种多功能的蛋白,其参与RNA代谢的多个过程,包括转录、剪接、mRNA核输出、翻译、RNA降解和核糖体生物合成。此外,DDX3还参与了细胞周期调控、细胞凋亡、Wnt-β-catenin信号和肿瘤发生等。最近研究表明,DDX3参与天然免疫信号通路并且促进抗病毒分子(如:干扰素调控因子3和Ⅰ型干扰素)的产生,DDX3也是一些病毒的主要靶点,因此,DDX3可作为研发抗病毒药物的新靶点。本文简单介绍了DDX3的结构和功能,总结了其在基因表达调控、细胞周期调控和细胞凋亡过程中发挥的作用,最后阐述了病毒如何通过与DDX3的互作调控宿主先天性免疫,以期为细胞的稳态调控和抗病毒先天性免疫调控提供新的思路。 展开更多
关键词 ddx3 RNA解旋酶基因 调控 肿瘤 病毒感染
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基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法的Ddx3x肝脏条件性敲除小鼠模型的构建与鉴定 被引量:2
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作者 潘桢桢 徐玲 +5 位作者 张向颖 高耀 田原 范子豪 曹亚玲 任锋 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第10期1275-1280,共6页
目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法... 目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法对F0代和F1代小鼠进行基因鉴定。将Ddx3x-flox F1代小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏条件性敲除Ddx3x基因小鼠(Ddx3x^(Δhep))。采用PCR方法和Western blotting方法分别检测Ddx3x^(Δhep)基因小鼠目的基因与蛋白的表达。选取8周龄雄性野生型C57/6J小鼠、Ddx3x^(Δhep)小鼠、Ddx3x^(fl/fl)小鼠,测定血清ALT、AST水平评价肝脏肝损伤情况。结果对F1代小鼠基因PCR鉴定的结果表明,基因型符合Ddx3x^(fl/fl);F1代小鼠与Alb-Cre小鼠杂交,子代与Ddx3x^(fl/fl)小鼠杂交,即获得Ddx3x^(Δhep)小鼠;PCR与Western blotting结果显示,目的小鼠肝组织中Ddx3x基因和蛋白表达显著降低。此外,Ddx3x^(Δhep)小鼠无胚胎致死现象,出生后生理状况良好。正常饲养条件下,Ddx3x^(Δhep)小鼠与Ddx3x^(fl/fl)小鼠及野生型小鼠相比,血清ALT、AST指标及体质量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法成功构建了Ddx3x^(Δhep)小鼠动物模型,为后续研究Ddx3x在肝脏中的生物学功能及作用机制奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9技术 Cre-LoxP系统 ddx3x 肝脏条件性敲除小鼠
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奶山羊DDX3Y蛋白多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 杜伟伟 代邦国 +1 位作者 钟玉玲 史怀平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第1期1-9,16,共10页
【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到奶山羊DDX3Y基因CDs区全序列,测序后通过生物信息学... 【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到奶山羊DDX3Y基因CDs区全序列,测序后通过生物信息学方法比对分析确定DDX3Y蛋白N端1-120氨基酸及C端570-660氨基酸为抗原片段,然后用PCR分别克隆这2个片段的基因,最后利用搭桥PCR方法得到奶山羊DDX3Y截短抗原基因序列。将DDX3Y截短抗原基因序列连接pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-DDX3Y原核表达载体,将该载体导入到大肠杆菌BL21中诱导表达。通过Ni-NTA Resin纯化重组蛋白后免疫3月龄雌性新西兰大耳兔,采用间接ELISA(iELISA)法测定抗体效价,用Western blot测定抗体特异性。【结果】PCR扩增得到1 983 bp奶山羊DDX3Y基因CDs区全长序列及CDs区5′端360 bp(1-360 bp)序列和3′端273 bp(1 710-1 983 bp)序列。搭桥PCR获得了633 bp的DDX3Y截短抗原基因序列。成功构建了pET32a(+)-DDX3Y载体,并表达出分子质量约为42 ku的重组蛋白。制备出奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白多克隆抗体,iELISA法检测抗体效价为1∶10~5;Western blot检测表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别原核表达的奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白以及公羊睾丸组织DDX3Y蛋白。【结论】成功制备出了奶山羊DDX3Y截短抗原蛋白多克隆抗体。 展开更多
关键词 奶山羊 多克隆抗体 H-Y抗原 ddx3Y
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MiR-206调控DDX3X促进胰腺癌不良预后及其机制的分析 被引量:2
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作者 段怡平 陈梁玥 +6 位作者 朱翠雯 马甜甜 李东旭 柳家翠 赵允畅 朱光庭 喻明霞 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第2期222-227,共6页
目的研究miR-206在胰腺癌(PAAD)中表达和关键靶基因预测,分析靶基因DDX3X在PAAD中表达及突变与预后的关系,研究其在PAAD恶性进展中的分子机制。方法利用TCGA公共数据集进行生物信息学分析,比较miR-206在PAAD样本和正常样本的表达差异。... 目的研究miR-206在胰腺癌(PAAD)中表达和关键靶基因预测,分析靶基因DDX3X在PAAD中表达及突变与预后的关系,研究其在PAAD恶性进展中的分子机制。方法利用TCGA公共数据集进行生物信息学分析,比较miR-206在PAAD样本和正常样本的表达差异。通过starBase、TargetScan和miRDB在线数据库对PAAD中miR-206的靶基因进行预测,并用韦恩图整合了重叠基因。PPI分析获得评分最高模块的基因,确定关键候选靶基因。利用卡方检验分析DDX3X与患者肿瘤远处转移的关系。通过Kaplan-Meier法分析DDX3X在PAAD中的预后价值。利用KEGG和GO分析探索DDX3X参与的分子通路。结果与正常组织比较,miR-206在PAAD组织表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);筛选出369个基因作为miR-206的潜在靶标;PPI评分最高模块中的14个靶基因作为miR-206在PAAD起关键调控作用的候选基因;靶基因DDX3X在PAAD的突变率为1.1%,与患者不良预后的高风险有关。DDX3X在PAAD组织中表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05),且DDX3X高表达与PAAD患者差的总体生存率相关(HR=1.6,P<0.05);DDX3X与远处转移显著相关(P<0.05);DDX3X高表达与较差的OS有关(HR=1.61,95%CI:1.05~2.48,Logrank P<0.05)。靶基因DDX3X的GO分析发现其可能在蛋白磷酸化、核斑点和转录共激活因子活性等中发挥重要作用;在KEGG数据集中,对靶基因DDX3X显著富集的信号通路分析预测,其主要参与了细胞周期、胰腺癌和调节干细胞多能性、TGF-β、FoxO、MAPK等信号通路的调控,大多与肿瘤相关信号通路有关(P<0.05)。结论MiR-206的低表达水平使DDX3X在PAAD中显著上调,可通过多条分子通路调控PAAD的发生发展,DDX3X可作为PAAD潜在的新型标志物。 展开更多
关键词 胰腺癌 MiR-206 TCGA 预后 ddx3X
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下调猪精子DDX3Y mRNA水平对其IVF胚胎体外发育的影响
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作者 李崇 李涛 +4 位作者 吴珍芳 蔡更元 郑恩琴 李紫聪 刘德武 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期110-114,共5页
为了研究猪精子中DDX3Y mRNA的保留情况,探讨其对受精后胚胎体外发育的影响,试验采用定量PCR分析猪精子中DDX3Y mRNA,并利用转染抗DDX3Y小干扰RNA(siRNA)的猪精子进行体外受精,统计其体外受精(IVF)胚胎体外发育效率及性别比例。结果表明... 为了研究猪精子中DDX3Y mRNA的保留情况,探讨其对受精后胚胎体外发育的影响,试验采用定量PCR分析猪精子中DDX3Y mRNA,并利用转染抗DDX3Y小干扰RNA(siRNA)的猪精子进行体外受精,统计其体外受精(IVF)胚胎体外发育效率及性别比例。结果表明:猪精子中DDX3Y mRNA有较高水平的表达;利用有效抗DDX3Y的siRNA转染猪精子,可将其DDX3Y mRNA显著下调至对照组的12.4%(P<0.05),精子活力显著下降到0.44(P<0.05);利用转染抗DDX3Y siRNA的猪精子进行体外受精,产生的胚胎在卵裂率、囊胚率及性别比例等方面与对照组相比差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 精子 胚胎 小干扰RNA(siRNA) ddx3Y 性别比例
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猴源DDX3X基因的克隆及生物信息学分析
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作者 杨洪 田浪 +5 位作者 张升波 张喜懿 温贵兰 程振涛 王开功 周碧君 《贵州农业科学》 CAS 2019年第12期70-75,共6页
为猴源DDX3X基因与相关病毒作用机理的深入研究奠定基础,根据Gen Bank预测的猪源DDX3X基因序列(登录号HQ266638)设计合成特异性引物,采用RT-PCR从猴源肾细胞中扩增DDX3X基因,将其克隆至pMD-19T载体测序,并对其进行生物学特征分析。结果... 为猴源DDX3X基因与相关病毒作用机理的深入研究奠定基础,根据Gen Bank预测的猪源DDX3X基因序列(登录号HQ266638)设计合成特异性引物,采用RT-PCR从猴源肾细胞中扩增DDX3X基因,将其克隆至pMD-19T载体测序,并对其进行生物学特征分析。结果表明:克隆的猴源DDX3X基因全长1989 bp,与猕猴的核苷酸序列同源性达99.6%,与绿猴、猕猴和人并列在同一遗传进化分支上,与三者的一致性较高;蛋白编码有662个氨基酸,共计20种氨基酸;甘氨酸含量最高,为11.5%,理论等电点为6.73;猴源DDX3X基因含有DEAD-Like解旋酶超家族结构域和C端结构域,DDX3X蛋白具有良好的亲水性,二级、三级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。猴源DDX3X基因与多个调节细胞进程、RNA加工的关键蛋白存在相互作用。 展开更多
关键词 ddx3X基因 猴源肾细胞 T克隆 生物信息学分析
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DDX3X regulates cell survival and cell cycle during mouse early embryonic development 被引量:4
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作者 Qian Li Pan Zhang +8 位作者 Chao Zhang Ying Wang Ru Wan Ye Yang Xuejiang Guo Ran Huo Min Lin Zuomin Zhou Jiahao Sha 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 2014年第4期282-291,共10页
DDX3X is a highly conserved DEAD-box RNA helicase that participates in RNA transcription, RNA splicing, and mRNA transport, translation, and nucleo-cytoplasmic transport. It is highly expressed in metaphase II (MII)... DDX3X is a highly conserved DEAD-box RNA helicase that participates in RNA transcription, RNA splicing, and mRNA transport, translation, and nucleo-cytoplasmic transport. It is highly expressed in metaphase II (MII) oocytes and is the predominant DDX3 variant in the ovary and embryo. However, whether it is important in mouse early embryo development remains unknown. In this study, we investigated the function of DDX3X in early embryogenesis by cytoplasmic microinjection with its siRNA in zygotes or single blastomeres of 2-cell embryos. Our results showed that knockdown of Ddx3x in zygote cytoplasm led to dramatically diminished blastocyst formarion, reduced cell numbers, and an increase in the number of apoptotic cells in blastocysts. Meanwhile, there was an accumulation of p53 in RNAi blastocysts. In addition, the ratio of cell cycle arrest during 2-cell to 4-cell transition increased following microinjection of Ddx3x siRNA into single blastomeres of 2-cell embryos compared with control. These results suggest that Ddx3x is an essential gene associated with cell survival and cell cycle control in mouse early embryos, and thus plays key roles in normal embryo development. 展开更多
关键词 ddx3X early embryo P53 APOPTOSIS cell cycle
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