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补中益气汤对A549和A549/DDP细胞顺铂敏感性影响差异研究
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作者 黄婧漪 刘玥彤 +3 位作者 李贺 牟琪瑞 于丹 高原 《辽宁中医药大学学报》 2025年第2期13-18,共6页
目的 探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性,并确定给药最佳剂量。方法 培养A549、A549/DDP细胞,不同浓度顺铂作用后应用CCK-8法检测各组生长抑制率;制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清,随机分为24组:A549细... 目的 探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性,并确定给药最佳剂量。方法 培养A549、A549/DDP细胞,不同浓度顺铂作用后应用CCK-8法检测各组生长抑制率;制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清,随机分为24组:A549细胞(5%空白血清组、10%空白血清组、20%空白血清组、5%低剂量含药血清组、10%低剂量含药血清组、20%低剂量含药血清组、5%中剂量含药血清组、10%中剂量含药血清组、20%中剂量含药血清组、5%高剂量含药血清组、10%高剂量含药血清组、20%高剂量含药血清组),A549/DDP细胞(5%空白血清组、10%空白血清组、20%空白血清组、5%低剂量含药血清组、10%低剂量含药血清组、20%低剂量含药血清组、5%中剂量含药血清组、10%中剂量含药血清组、20%中剂量含药血清组、5%高剂量含药血清组、10%高剂量含药血清组、20%高剂量含药血清组),应用CCK-8法检测各组A549、A549/DDP细胞生长抑制情况及生长抑制率,应用Annexin V-FITC/PI染色法检测各组细胞凋亡率。结果 顺铂对A549、A549/DDP细胞的最佳抑制浓度均为20μg/mL;10%中剂量补中益气汤对A549细胞顺铂的凋亡率和生长抑制率最为显著,相比而言,20%高剂量补中益气汤对A549/DDP细胞的作用最为显著。结论 与A549细胞相比,A549/DDP细胞需要更高浓度更高剂量的补中益气汤含药血清才能发挥最佳顺铂增敏效果,说明补中益气汤对A549细胞的顺铂增敏作用强于A549/DDP细胞。 展开更多
关键词 补中益气汤 顺铂 A549细胞 A549/ddp细胞 非小细胞肺癌
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基于转录组测序技术探讨隐丹参酮对A2780/DDP顺铂耐药细胞的影响及潜在机制
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作者 陈家鑫 蒋诗情 +3 位作者 陈芯媛 詹子欣 江明华 游翠芳 《中草药》 北大核心 2025年第2期546-557,共12页
目的 基于转录组测序技术探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)联合顺铂(cisplatin,DDP)干预对A2780/DDP细胞的影响及其潜在作用机制。方法 体外培养人卵巢癌A2780和A2780/DDP细胞,将细胞分为对照组、DDP组、DDP+CPT给药组,采用MTS细胞... 目的 基于转录组测序技术探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)联合顺铂(cisplatin,DDP)干预对A2780/DDP细胞的影响及其潜在作用机制。方法 体外培养人卵巢癌A2780和A2780/DDP细胞,将细胞分为对照组、DDP组、DDP+CPT给药组,采用MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒检测细胞存活率、划痕实验检测迁移能力、Transwell实验检测迁移和侵袭能力,探究DDP+CPT干预下对A2780/DDP细胞的影响。获取各组的细胞mRNA进行转录组测序,筛选差异表达基因,拓扑分析得到CPT改善A2780/DDP对DDP耐药的核心靶点,对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,采用分子对接技术研究CPT与核心靶点的结合能力,实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测核心靶点的mRNA表达情况。结果 A2780/DDP细胞的耐药指数为4;DDP+CPT干预可显著抑制A2780/DDP耐药株的细胞存活率、细胞迁移和细胞侵袭能力(P<0.001)。差异表达基因筛选结果表明,给药组与模型组相比共有253个差异表达基因,其中JUN原癌基因(JUN proto-oncogene gene,JUN)、Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)显著上调(P<0.05),而趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)显著下降(P<0.05)。GO和KEGG结果表明,CPT可能影响TLR信号通路、B细胞受体信号通路、白细胞介素-17等信号通路,从而改善A2780/DDP细胞对DDP的耐药性;RT-qPCR结果表明,CPT可上调JUN、TLR2、NOS2、NQO1的mRNA表达(P<0.001),抑制CXCR4的mRNA表达(P<0.001),改善A2780/DDP对DDP的耐药性。结论 CPT可改善A2780/DDP耐药细胞对DDP的耐药性,其机制可能与CPT上调JUN、TLR2、NOS2、NQO1的mRNA表达,下调CXCR4的mRNA表达有关。 展开更多
关键词 隐丹参酮 顺铂 A2780/ddp细胞 转录组测序 分子对接
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补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响 被引量:1
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作者 于丹 王莹 刘春英 《解剖科学进展》 CAS 2024年第4期375-377,381,共4页
目的探讨Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2的相关性及补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响。方法20只SD大鼠,随机分成两组,分别给予将补中益气汤及生理盐水灌胃处理,采用血清药理学研究方法制备含药血清。细胞分... 目的探讨Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2的相关性及补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响。方法20只SD大鼠,随机分成两组,分别给予将补中益气汤及生理盐水灌胃处理,采用血清药理学研究方法制备含药血清。细胞分组:TGF-β_(1)(-)组、TGF-β_(1)(+)组(5ng/mL TGF-β_(1),作用48h)、TCM组(10%最佳含药血清组)、Snail-si组(Snail干扰组)。Western blot与Real time PCR方法分别检测各组细胞P53、Bax、Bcl-2基因及蛋白表达水平。结果与TGF-β_(1)(-)组比较,TGF-β_(1)(+)组P53、Bax蛋白及mRNA下调,Bcl-2 mRNA及蛋白表达上调。TCM组与TGF-β_(1)(+)组比较,P53、Bax蛋白及mRNA表达量增加,Bcl-2蛋白及mRNA表达量减少(P<0.05)。结论A549/DDP细胞Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2具有一定的相关性,表明补中益气汤含药血清可通过调节A549/DDP细胞Snail表达水平,干预凋亡相关因子的表达。 展开更多
关键词 补中益气汤 A549/ddp SNAIL 凋亡因子
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肺复方通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路对A549/DDP细胞耐药性的影响
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作者 谭小宁 梁子成 +1 位作者 柳卓 邱云 《中国中医急症》 2024年第6期963-967,共5页
目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化... 目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化,Western blotting和RT-PCR检测PI3K/Akt/Nrf2信号通路及下游血红素氧合酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达变化。结果与空白对照组、顺铂组相比,联合组引起细胞G1期阻滞,增加细胞内活性氧的累积,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比,肺复方组和联合组能减少Nrf2核转位,下调p-Akt、HO-1、NQO1、MRP1蛋白表达和mRNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论肺复方能够通过调控PI3K/Akt/Nrf2信号通路增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 肺复方 A549/ddp细胞 PI3K/Akt/Nrf2信号通路 耐药性
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蒽醌修饰物KA-4s抑制SKOV3/DDP细胞增殖并诱导铁死亡 被引量:1
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作者 赵英丹 李欣晓 +4 位作者 许淑妹 陈强健 杨盈盈 侯华新 黎丹戎 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第3期356-363,共8页
目的:探讨蒽醌修饰物KA-4s在体外对人顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖的影响和诱导细胞铁死亡的机制。方法:将SKOV3/DDP细胞分为对照组和不同浓度(2μmol/L、5μmol/L和7μmol/L)的蒽醌修饰物KA-4s组。采用MTT法检测单药KA-4s和顺铂(D... 目的:探讨蒽醌修饰物KA-4s在体外对人顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖的影响和诱导细胞铁死亡的机制。方法:将SKOV3/DDP细胞分为对照组和不同浓度(2μmol/L、5μmol/L和7μmol/L)的蒽醌修饰物KA-4s组。采用MTT法检测单药KA-4s和顺铂(DDP)对SKOV3/DDP细胞活力的影响,划痕实验检测细胞的迁移能力,线粒体绿色荧光探针(Mito-Tracker Green)检测线粒体形态改变,透射电镜观察线粒体超微结构。以铁死亡诱导剂RSL3为阳性对照组,用DCFA-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,比色法检测细胞内总铁蛋白含量,western blotting检测铁死亡相关蛋白GPX4、FSP1的表达情况。结果:KA-4s和顺铂作用48 h后,卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖均明显受到抑制,相比顺铂,KA-4s的抑制作用更强(P<0.001),并能抑制细胞迁移。经KA-4s处理后线粒体受损,线粒体结构改变,膜密度增大,嵴减少甚至消失。与空白对照组相比,阳性RSL3组和KA-4s组SKOV3/DDP细胞内ROS水平升高(均P<0.001),5μmol/L KA-4s组总铁离子含量显著升高(P<0.001),卵巢癌SKOV3/DDP细胞中GPX4、FSP1蛋白的表达均降低(P<0.01),但正常卵巢IOSE80细胞中GPX4表达均无改变。结论:KA-4s能抑制SKOV3/DDP细胞增殖、迁移并诱导细胞铁死亡。 展开更多
关键词 蒽醌修饰物 SKOV3/ddp细胞 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 活性氧
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声带癌前病变组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1、果蝇母亲DDP同源物4表达水平与术后复发和恶变的相关性研究 被引量:1
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作者 李世伟 田秀芬 窦倩雯 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2024年第2期79-84,共6页
目的探讨声带癌前病变组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1)、果蝇母亲DDP同源物4(drosophila mothers against DDP homolog 4,Smad4)表达水平与术后复发和恶变的相关性。方法回顾性分析2018... 目的探讨声带癌前病变组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1)、果蝇母亲DDP同源物4(drosophila mothers against DDP homolog 4,Smad4)表达水平与术后复发和恶变的相关性。方法回顾性分析2018年8月~2021年8月郑州大学第一附属医院收治的162例声带癌前病变患者的临床和病理资料,收集手术切除癌前病变组织(癌前病变组)及病变旁正常黏膜组织(对照组),采用免疫组织化学法检测组织中TIMP-1、Smad4表达情况。分析TIMP-1、Smad4阳性率与临床病理特征的关系,并采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析法分析其对术后复发和恶变的影响。结果与对照组正常黏膜组织比较,癌前病变组的TIMP-1阳性率较高,Smad4阳性率较低(P<0.05)。不同病变范围、是否累及前连合、不同程度上皮异常增生患者的TIMP-1、Smad4阳性率存在差异(P<0.05)。术后随访时间24~60个月,中位随访时间36个月,随访期间失访患者6例,随访率96.30%(156/162),随访期间术后复发35例(21.60%),术后恶变16例(9.88%);Kaplan-Meier生存分析显示,TIMP-1阳性患者术后复发率和恶变率高于TIMP-1阴性患者(P<0.05);Smad4阴性患者术后复发率和恶变率高于Smad4阳性患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,喉咽反流、病变范围>1/2、中/重度异型增生、TIMP-1阳性、Smad4阴性是复发的独立危险因素(P<0.05),年龄>60岁、累及前连合、TIMP-1阳性、Smad4阴性是恶变的独立危险因素(P<0.05)。结论声带癌前病变组织中TIMP-1高表达、Smad4低表达,且TIMP-1阳性、Smad4阴性表达者术后复发和恶变风险较高。 展开更多
关键词 癌前状态 复发 声带癌前病变 基质金属蛋白酶抑制剂-1 果蝇母亲ddp同源物4
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抗菌肽Dermaseptin-PP协同化疗药物抗肿瘤并逆转A549/DDP细胞顺铂耐药性
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作者 闫丽文 胡祖成 +4 位作者 彭凤栖 胡文均 胡海燕 陈基杰 陆洋 《中国现代中药》 CAS 2024年第10期1727-1738,共12页
目的:探究抗菌肽Dermaseptin-PP对多种化疗药物体外抗肿瘤活性的协同增效作用,以及其对人非小细胞肺癌顺铂(DDP)耐药细胞株A549/DDP耐药性的逆转作用,并进一步探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同质量浓度的Dermaseptin... 目的:探究抗菌肽Dermaseptin-PP对多种化疗药物体外抗肿瘤活性的协同增效作用,以及其对人非小细胞肺癌顺铂(DDP)耐药细胞株A549/DDP耐药性的逆转作用,并进一步探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同质量浓度的Dermaseptin-PP对人非小细胞肺癌A549、H157细胞或小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖抑制作用,考察低毒质量浓度Dermaseptin-PP与多烯紫杉醇(DTX)、阿霉素(DOX)或DDP联用对A549、H157或4T1细胞的协同抗肿瘤作用;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测低毒质量浓度Dermaseptin-PP对A549/DDP细胞DDP耐药性的逆转作用。采用流式细胞术检测Dermaseptin-PP对DDP诱导A549细胞凋亡的影响,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验及碘化丙啶(PI)摄取实验考察Dermaseptin-PP对A549和A549/DDP细胞膜完整性的影响,最后通过扫描电镜观察Dermaseptin-PP处理后A549和A549/DDP细胞膜形态的变化。结果:Dermaseptin-PP可在体外抑制A549、H157和4T1细胞增殖且呈剂量依赖性;与低毒质量浓度Dermaseptin-PP(0.002、0.020、0.200μg·mL^(-1))联用后,DTX、DOX及DDP对A549细胞的增殖抑制率均有不同程度的提高,半数抑制浓度(IC50)均有所降低,药物联合指数(CI)基本均小于0.9,其中Dermaseptin-PP与DDP的协同作用最强(CI<0.4)。此外,Dermaseptin-PP与DDP联用对H157和4T1细胞的CI也均小于0.9,表现为协同作用。低毒质量浓度Dermaseptin-PP(0.2、2.0、4.0μg·mL^(-1))均能显著逆转A549/DDP细胞的DDP耐药性,逆转倍数(RF)分别为2.83、5.09、9.73。相比于单用DDP,与0.2μg·mL^(-1) Dermaseptin-PP联用可显著提高A549细胞的凋亡率(P<0.05);不同质量浓度的Dermaseptin-PP均可显著增加A549、A549/DDP细胞的LDH释放率和PI摄取率,且呈浓度依赖性;扫描电镜观察发现,经2×IC50的Dermaseptin-PP处理后,A549细胞的细胞膜明显受损、质膜解体、细胞形态发生改变,A549/DDP细胞的细胞膜也出现明显孔洞。结论:Dermaseptin-PP对多种化疗药物体外抗肿瘤活性均具有协同增效作用,其中与DDP的协同作用最强,并且能够逆转A549/DDP细胞的DDP耐药性,其增效及逆转耐药的机制可能与破坏肿瘤细胞膜,进而提高化疗药物入胞药量有关。 展开更多
关键词 抗菌肽 Dermaseptin-PP 化疗 抗肿瘤 耐药 顺铂
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OSTP-DDP靶向抑制卵巢癌A2780细胞生长作用的研究 被引量:1
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作者 李俏然 唐正 +2 位作者 卢雪琳 刘小敏 梁晓秋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期204-210,共7页
目的研究卵巢癌特异性结合肽(ovarian cancer specific targeting peptide,OSTP)与顺铂(cis-dichlorodiamineplatinum,DDP)偶联物(OSTP-DDP)对卵巢癌A2780细胞的靶向抑制作用。方法化学合成OSTP-DDP,体外培养卵巢癌A2780细胞,采用CCK-8... 目的研究卵巢癌特异性结合肽(ovarian cancer specific targeting peptide,OSTP)与顺铂(cis-dichlorodiamineplatinum,DDP)偶联物(OSTP-DDP)对卵巢癌A2780细胞的靶向抑制作用。方法化学合成OSTP-DDP,体外培养卵巢癌A2780细胞,采用CCK-8法分别检测OSTP-DDP和DDP对卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用;通过Annexin V-FITC凋亡试剂盒分别检测OSTP-DDP和DDP对卵巢癌A2780细胞的周期和凋亡作用。结果通过质谱分析和高效液相色谱(HPLC)分析,提示成功合成OSTP-DDP。CCK-8法检测显示,OSTP-DDP与DDP分别以不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L^(-1))处理卵巢癌A2780细胞24、48、72 h后,均可对该细胞的生长起到抑制作用,且呈时间、浓度依赖性。且OSTP-DDP的作用强于DDP(P<0.05),提示OSTP-DDP具有靶向抑制细胞生长作用。流式细胞术检测结果显示,经OSTP-DDP和DDP处理后,细胞周期均被阻滞于G_1期,作用72 h后,OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞的周期抑制作用强于DDP,差异具有统计学意义(P<0.05)。作用24、48、72 h后,OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞凋亡的作用强于DDP(P<0.01)差异具有统计学意义,提示OSTP-DDP具有较强的靶向诱导细胞凋亡作用。结论 OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞的生长具有靶向抑制作用,OSTP作为化疗药物靶向载体治疗卵巢癌有良好的应用前景。 展开更多
关键词 卵巢癌A2780细胞 OSTPddp ddp 增殖抑制 凋亡 靶向治疗
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川芎嗪对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的逆转作用研究 被引量:15
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作者 刘明华 任美萍 +2 位作者 李蓉 章卓 肖顺汉 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期1982-1984,1987,共4页
目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,探讨川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。方法采用逐步递增DDP浓度、体外间歇诱导法诱导建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP;CCK-8(cell counting kit-8)检测川芎嗪对COC1/DDP细... 目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,探讨川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。方法采用逐步递增DDP浓度、体外间歇诱导法诱导建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP;CCK-8(cell counting kit-8)检测川芎嗪对COC1/DDP细胞顺铂耐药性的逆转作用;GSH和GSSG试剂盒检测细胞内GSH的水平,高效液相色谱测定细胞内顺铂的含量。结果历时5个月建立了在1.0μg/mL DDP作用下生长良好的耐药细胞株COC1/DDP,耐药指数为9.44,对卡铂、长春新碱和阿霉素有不同程度的交叉耐药性;川芎嗪0.25 mg/mL对COC1/DDP的顺铂耐药性有逆转作用,逆转倍数达到3.76倍;与COC1比较,COC1/DDP细胞内GSH水平增高,顺铂含量下降,但经川芎嗪0.25 mg/mL干预后,COC1/DDP胞内的GSH水平降低,顺铂的含量增加(P<0.01)。结论川芎嗪对COC1/DDP的顺铂耐药性有逆转作用,其机制可能与干预COC1/DDP细胞内GSH/GST-π解毒系统,增加细胞内顺铂的含量有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 顺铂 COC1/ddp 多药耐药性
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榄香烯乳诱导线粒体凋亡途径逆转肺癌A549/DDP细胞株耐药 被引量:35
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作者 姚成才 涂远荣 +4 位作者 姜杰 康宁 叶社房 张义 陈俊鹏 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第6期1276-1281,共6页
目的:探讨榄香烯乳(elemene,ELE)逆转人肺腺癌耐顺铂(cisplatin,DDP)细胞A549/DDP的耐药性及作用机制。方法:采用MTT法检测榄香烯乳单用的细胞毒作用及与DDP合用时耐药逆转作用。荧光探针JC-1结合激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变... 目的:探讨榄香烯乳(elemene,ELE)逆转人肺腺癌耐顺铂(cisplatin,DDP)细胞A549/DDP的耐药性及作用机制。方法:采用MTT法检测榄香烯乳单用的细胞毒作用及与DDP合用时耐药逆转作用。荧光探针JC-1结合激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化。DCFH-DA荧光探针结合流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。用谷胱甘肽试剂盒结合分光光度法检测计算GSH/(GSSG+GSH)比值。蛋白质印迹法检测胞质中Cyto C、Pro-caspase-3、Caspase-3和Bcl-2家族蛋白表达情况。结果:不同浓度榄香烯乳抑制A549/DDP细胞株生长,呈时间-剂量依赖性效应,联合顺铂能提高A549/DDP细胞株对顺铂的敏感性而逆转耐药。不同浓度榄香烯乳联合顺铂使A549/DDP细胞株线粒体膜电位下降,ROS浓度增加,GSH/(GSSG+GSH)比值降低,上调胞质中Cyto C、Caspase-3、Bad蛋白表达,下调Pro-caspase-3、Bcl-2蛋白表达。结论:榄香烯乳逆转A549/DDP细胞株耐药性可能与其损伤线粒体膜,活化胞内氧化还原体系,诱导线粒体凋亡路径有关。 展开更多
关键词 肺癌 榄香烯 线粒体 凋亡 A549 ddp细胞株
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吴茱萸碱逆转人肺癌细胞株A549/DDP耐药机理的实验研究 被引量:24
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作者 农丽 伍钢 +4 位作者 戴晓芳 赵迎超 任精华 朱芳 黄黎黎 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2010年第6期487-492,共6页
目的观察吴茱萸碱逆转人肺腺癌耐药株A549/DDP细胞耐药性的效果并探讨其与阻断NF-κB信号传导通路的相关性。方法采用MTT法检测单用吴茱萸碱、顺铂(DDP)以及两药联用在不同时间对A549/DDP细胞的增殖影响,计算IC50及耐药逆转倍数。流式... 目的观察吴茱萸碱逆转人肺腺癌耐药株A549/DDP细胞耐药性的效果并探讨其与阻断NF-κB信号传导通路的相关性。方法采用MTT法检测单用吴茱萸碱、顺铂(DDP)以及两药联用在不同时间对A549/DDP细胞的增殖影响,计算IC50及耐药逆转倍数。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况。RT-PCR检测各组MDR1、NF-κB、Bcl-2、MMP-2和VEGF的mRNA表达。Westernblot法检测各组细胞的pIκB-α、pIKKα蛋白表达水平。结果吴茱萸碱0.125mg/L、0.25mg/L针对A549/DDP细胞对DDP的耐药逆转倍数分别为3.668和11.48。RT-PCR显示在吴茱萸碱作用下检测基因的mRNA表达随着吴茱萸碱浓度的增加和时间的延长其表达逐渐下降。当吴茱萸碱与DDP联用时,可明显提高A549/DDP细胞对化疗药的敏感性,凋亡细胞显著增加(P<0.05)。Westernblot法结果提示A549/DDP细胞中pIκB-α的表达水平随着吴茱萸碱作用时间的延长逐渐下降,pIKKα表达则无显著变化。结论吴茱萸碱可以通过抑制IκB-α的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加耐药细胞对DDP的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 多药耐药 NF-ΚB A549/ddp细胞株 吴茱萸碱 机制
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芦荟大黄素脂质体逆转人肺腺癌细胞A549/DDP对顺铂多药耐药的作用研究 被引量:13
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作者 曾嵘 周知午 +1 位作者 吴翠芳 周于禄 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1443-1445,共3页
目的:研究芦荟大黄素脂质体(aloe emodin liposomes,AE-L)在体外对耐药人肺腺癌细胞系A549/ DDP对顺铂(DDP)的耐药性。方法:采用MTT检测方法得出AE-L的无毒细胞浓度、低毒细胞浓度以及空脂质体(empty liposomes,E-L)的无毒浓度;再以E-L... 目的:研究芦荟大黄素脂质体(aloe emodin liposomes,AE-L)在体外对耐药人肺腺癌细胞系A549/ DDP对顺铂(DDP)的耐药性。方法:采用MTT检测方法得出AE-L的无毒细胞浓度、低毒细胞浓度以及空脂质体(empty liposomes,E-L)的无毒浓度;再以E-L无毒浓度做对照组,分别测出AE-L无毒细胞浓度组、低毒细胞浓度组耐药细胞逆转倍数;电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定各组细胞内顺铂浓度。结果:AE-L无细胞毒浓度组(2.0 mg·L^(-1))使A549/DDP细胞对DDP的IC_(50)由16.81 mg·L^(-1)降至5.86 mg·L^(-1);低细胞毒浓度(7.0 mg·L^(-1))组的IC_(50)降至4.34 mg·L^(-1);2组均明显提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度。结论:AE-L能部分逆转A549/DDP细胞的多药耐药(MDR),其机制与增加细胞内药物浓度有关。 展开更多
关键词 芦荟大黄素 脂质体 逆转 多药耐药 A549/ddp
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注射用黄芪多糖对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP耐药逆转作用研究 被引量:19
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作者 张莹 贾英杰 +3 位作者 李小江 朱津丽 张欣 张丽丽 《药物评价研究》 CAS 2012年第6期417-419,共3页
目的探讨注射用黄芪多糖药物血清在体外对耐顺铂(DDP)人肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用。方法通过建立小鼠肿瘤模型,运用血清药理学方法,以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨注射用... 目的探讨注射用黄芪多糖药物血清在体外对耐顺铂(DDP)人肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用。方法通过建立小鼠肿瘤模型,运用血清药理学方法,以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨注射用黄芪多糖对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP的耐药逆转作用。结果注射用黄芪多糖药物血清高、中、低剂量组分别与DDP合用时对A549/DDP细胞的耐药逆转倍数分别为1.24、1.41、1.34;且中、高剂量组与阳性对照DDP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论注射用黄芪多糖能明显增加A549/DDP耐药细胞对DDP的敏感性,提高细胞死亡率,具有耐药逆转作用。 展开更多
关键词 注射用黄芪多糖 肺癌 A549 ddp 耐药性
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补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响 被引量:11
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作者 易佳丽 王莹 +2 位作者 井欢 史妍婷 刘春英 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1250-1255,共6页
目的研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备补中益气汤高剂量(补中益气汤1.134 g/mL,2 mL)、中剂量(补中益气... 目的研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备补中益气汤高剂量(补中益气汤1.134 g/mL,2 mL)、中剂量(补中益气汤0.576 g/mL,2 mL)、低剂量(补中益气汤0.284 g/mL,2 mL)含药血清,采用MTT法检测不同剂量和浓度的补中益气汤含药血清对A549及A549/DDP细胞的增殖抑制效应,计算耐药逆转倍数;采用免疫细胞化学法、Western blot技术、免疫荧光三种方法检测Survivin在两细胞株中的表达。结果补中益气汤含药血清对A549和A549/DDP细胞有明显抑制作用,10%各剂量组抑制率均高于5%相应剂量组,且随着剂量浓度的升高,抑制率也逐渐升高;与10%空白组比较,10%中、低剂量组抑制率升高(P<0.05);10%中剂量含药血清作用后,A549和A549/DDP IC50均降低(P<0.05),逆转倍数均升高,对A549/DDP细胞的逆转倍数达到2.46,使A549/DDP对顺铂的耐药性下降;与本组A549比较,免疫细胞化学法、Western blot法、免疫荧光法均检测到A549/DDP细胞中Survivin的表达量均降低(P<0.05),与10%空白组比较,10%中剂量组A549/DDP均降低(P<0.05)。结论 10%中剂量补中益气汤含药血清对A549及A549/DDP细胞都有抑制作用,并可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,其逆转机制可能与减少细胞内Survivin的表达,增强A549/DDP对化疗药物的敏感性有关。 展开更多
关键词 A549/ddp细胞株 SURVIVIN蛋白 补中益气汤 顺铂耐药
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黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)抑制小鼠Lewis肺癌复发瘤生长的机制 被引量:15
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作者 刘丹 李杨 +4 位作者 王雪林 王彦君 马寅瑞 陈彦文 明海霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1105-1110,共6页
目的观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌术后复发瘤病理形态及转移相关蛋白CD44、CD62P和骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法选取C57BL/6J小鼠10只作为供瘤组,另外80只随机分为模型组、(50、100、200)μg/mL APS处理组、6 mg/... 目的观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌术后复发瘤病理形态及转移相关蛋白CD44、CD62P和骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法选取C57BL/6J小鼠10只作为供瘤组,另外80只随机分为模型组、(50、100、200)μg/mL APS处理组、6 mg/kg DDP处理组、3 mg/kg DDP联合(50、100、200)μg/m L APS处理组,每组10只。取供瘤组小鼠瘤组织制备Lewis瘤单细胞悬液接种于每只小鼠左侧后肢爪垫内侧皮下10 d后,切除爪垫瘤组织,建立肺癌术后复发转移模型;造模次日起给药,第16天脱颈处死。采用HE染色法观察术后复发瘤组织病理形态,免疫组织化学染色法检测复发瘤中CD44、CD62P和OPN的表达。结果与模型组相比,各处理组复发瘤组织坏死加重,尤以DDP联合200μg/mL APS处理组更明显,且各处理组CD44、CD62P和OPN蛋白的表达均有降低,以DDP以及DDP联合(100、200)μg/m L APS处理组最为显著。结论DDP联合APS能抑制Lewis肺癌细胞生长并降低瘤组织CD44、CD62P和OPN蛋白表达。 展开更多
关键词 黄芪多糖(APS) LEWIS肺癌 顺铂(ddp) CD44 CD62P 骨桥蛋白(OPN)
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人参单体Rh_2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的体外研究 被引量:16
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作者 周东波 胡成平 +1 位作者 苏晓丽 杨红忠 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期257-260,共4页
背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A54... 背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A549/DDP细胞经不同浓度梯度的人参单体Rh2干预,分别应用MTT实验观察其对细胞增殖的影响,用流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数及相关基因表达的改变,以及用双抗体夹心ELISA法测定细胞上清液sApo-1/Fas浓度变化。结果①人参单体Rh2可抑制A549/DDP细胞的生长,并呈剂量、时间依赖作用。②人参单体Rh2处理A549/DDP细胞24h,实验组凋亡指数显著高于对照组(P<0.001),G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P<0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。③实验组p53、Fas阳性表达率显著高于对照组(P<0.01,P<0.001),Bcl-2阳性表达率显著低于对照组(P<0.001)。④实验组A549/DDP细胞培养上清液于不同时间sApo-1/Fas含量均显著低于对照组(P<0.05)。结论人参单体Rh2具有诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的作用,其分子机制可能是上调p53和Fas及下调Bcl-2的表达、通过Fas/FasL系统途径诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参单体Rh2 肺肿瘤 A549/ddp细胞株 凋亡
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消岩汤药物血清对A549/DDP多药耐药逆转作用的研究 被引量:17
17
作者 张莹 贾英杰 +1 位作者 杨洁 李小江 《天津中医药》 CAS 2010年第4期334-336,共3页
[目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/... [目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨消岩汤对肺癌耐药细胞的多药耐药逆转作用。[结果]消岩汤高、低剂量组的抑瘤率分别是48.36%和27.87%;消岩汤荷瘤动物含药血清高、低剂量组分别与DDP合用时,对耐药细胞A549/DDP的杀伤作用分别是DDP组的1.78倍和1.57倍。[结论]消岩汤可改善小鼠生活质量,拮抗恶病质,并能够抑制肿瘤生长;消岩汤含药血清对A549及A549/DDP均有生长抑制作用,且能增强DDP对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用,具有耐药逆转作用。 展开更多
关键词 中药 血清药理学 肺癌 A549/ddp 耐药性
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重组人血管内皮抑素联合5-Fu/DDP序贯腹腔注药治疗胃癌恶性腹水的临床观察 被引量:12
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作者 方凤奇 宋欣新 +3 位作者 郭慧淑 丑述阳 刘美作 张春霞 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第33期23-26,共4页
目的探讨重组人血管内皮抑素(恩度)联合化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)/顺铂(DDP)序贯腹腔注药治疗胃癌恶性腹水的疗效和不良反应。方法将58例胃癌恶性腹水患者随机分为治疗组(恩度+5-Fu+DDP)、对照组(5-Fu+DDP)两组,判断两组治疗胃癌恶性腹... 目的探讨重组人血管内皮抑素(恩度)联合化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)/顺铂(DDP)序贯腹腔注药治疗胃癌恶性腹水的疗效和不良反应。方法将58例胃癌恶性腹水患者随机分为治疗组(恩度+5-Fu+DDP)、对照组(5-Fu+DDP)两组,判断两组治疗胃癌恶性腹水的疗效、起效时间、生活质量及毒副反应。结果两组治疗胃癌恶性腹水的有效率:治疗组75.0%、对照组51.7%;起效时间:治疗组11.5 d、对照组17.0 d;对生活质量的影响:治疗组生活质量改善明显高于对照组;不良反应:治疗组不良反应与对照组相近。结论恩度联合5-Fu/DDP序贯腹腔注药治疗胃癌恶性腹水具有疗效高、起效时间快,可缩短疗程,提高生活质量,是治疗胃癌恶性腹水的有效方法。 展开更多
关键词 胃癌 恶性腹水 重组人血管内皮抑素 5-FU ddp
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补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,mTOR表达的影响 被引量:13
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作者 刘亚莉 易佳丽 刘春英 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期725-730,共6页
探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂... 探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂量+顺铂组(低联组),培养A549/DDP细胞(浓度为5×106个/m L),接种于各组,观察各组成瘤情况。给予相应治疗,14 d后取瘤组织固定、切片,免疫组织化学方法、Real-time PCR方法检测各组裸鼠移植瘤中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR蛋白和mRNA的表达水平。结果显示补中益气汤联合顺铂可降低移植瘤体积,中联组和高联组的抑瘤率与顺铂组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与荷瘤对照组比较,中联组和高联组Bad,NF-κB,Survivin,m TOR的蛋白和mRNA的表达明显减少(P<0.05),caspase-9的蛋白和mRNA在中联组和高联组的表达逐渐增多,与荷瘤对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Bad,NF-κB,caspase-9的mRNA,中联组和高联组与顺铂组、低联组、荷瘤对照组比较有统计学意义(P<0.05),低联组、顺铂组、荷瘤对照组两两比较,无统计学差异,各因子蛋白和mRNA的表达中联组和高联组比较,无统计学意义。结果表明补中益气汤与顺铂联合作用可抑制A549/DDP移植瘤的生长,补中益气汤抑制A549/DDP移植瘤的作用可能是通过调节Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR,促进细胞凋亡实现的。 展开更多
关键词 补中益气汤 A549/ddp 裸鼠 BAD NF-κB CASPASE-9 SURVIVIN m TOR
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