早发型重度子痫前期中ADMA与DDAH2的表达水平及临床意义 被引量：5

1

作者 赵莉娜 李嘉蔚 刘国成 《中国医药导报》 CAS 2018年第36期71-74,82,共5页

目的探讨早发型重度子痫前期患者血清及胎盘组织中非对称二甲基精氨酸(ADMA)和二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)的表达及其之间的相关性,揭示二者在疾病发生发展中的作用机制,从发病机制方面寻求疾病早期诊疗依据。方法选取2017年1月～2... 目的探讨早发型重度子痫前期患者血清及胎盘组织中非对称二甲基精氨酸(ADMA)和二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)的表达及其之间的相关性,揭示二者在疾病发生发展中的作用机制,从发病机制方面寻求疾病早期诊疗依据。方法选取2017年1月～2018年1月于广东省妇幼保健院(以下简称"我院")住院的45例重度子痫前期孕妇作为实验组,其中早发型重度子痫前期组25例、晚发型重度子痫前期组20例。选择同期在我院待产的35名健康孕妇作为对照组。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中ADMA与DDAH2的表达水平及免疫组化SP法检测两组胎盘组织中ADMA与DDAH2的表达水平。采用Spearman线性相关分析进行相关性分析。结果外周血清中,ADMA在早发型重度子痫前期组中的表达水平显著高于晚发型组及对照组(P <0.05);晚发型重度子痫前期组显著高于对照组(P <0.05);早发型重度子痫前期组显著低于晚发型组及对照组(P <0.05);晚发型重度子痫前期组显著低于对照组(P <0.05)。在胎盘组织中,早发型重度子痫前期患者ADMA阳性染色率显著高于晚发型组(P <0.05),晚发型重度子痫前期组显著高于对照组(P <0.05);早发型重度子痫前期组显著低于晚发型组(P <0.05),晚发型重度子痫前期组患者胎盘组织中DDAH2阳性表达率显著低于对照组(P <0.05)。早发型重度子痫前期组患者DDAH2与ADMA在外周血清及胎盘中表达呈显著负相关(r=-0.77,P <0.05)。结论早发型重度子痫前期患者外周血清及胎盘组织中ADMA表达水平显著升高,DDAH2显著下降,且两者呈负相关性。提示ADMA和DDAH2与早发型重度子痫前期发病密切相关。两者可能通过作用血管内皮细胞损伤,影响滋养细胞浸润,参与早发型重度子痫前期疾病的发生和发展。 展开更多

关键词 早发型重度子痫前期 滋养细胞 ADMA ddah2

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DDAH2基因多态性与冠心病的相关性研究 被引量：1

2

作者 李虹 杨军 +2 位作者 苏锐 肖传实 高奋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1490-1493,共4页

目的:研究中国人群二甲基精氨酸二甲基氨基酸水解酶(Dimethyl arginine dimethyl amion acid hydrolase,DDAH2)基因单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法:从山西医科大学第二医院选取冠心病患者165例和匹配的对照组192例。并记录所有研... 目的:研究中国人群二甲基精氨酸二甲基氨基酸水解酶(Dimethyl arginine dimethyl amion acid hydrolase,DDAH2)基因单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法:从山西医科大学第二医院选取冠心病患者165例和匹配的对照组192例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料,采取连接酶检测反应(Ligase detection reaction,LDR)-测序分型方法检测各组基因rs2272592位点C/T的基因型并统计各组的基因型频率。结果:冠心病组rs2272592基因型频率与对照组之间相比较无统计学意义(P>0.05)。结论:DDAH2基因rs2272592点C/T多态性可能与中国人冠心病发病不相关。 展开更多

关键词 ddah2基因 ADMA 基因多态性 冠心病

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丁酸钠对HEK293细胞中DDAH2表达的作用

3

作者 李英慧 孙陆 陈凯师 《沈阳大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第6期443-445,共3页

以一种去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(NaBu)作为乙酰化刺激因素,探讨乙酰化在DDAH2表达中的作用.以NaBu刺激人胚肾293(HEK293)细胞,应用real-time PCR和Western印迹杂交方法检测DDAH2mRNA和蛋白表达水平.结果显示NaBu以时间和浓度依赖方式上调... 以一种去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(NaBu)作为乙酰化刺激因素,探讨乙酰化在DDAH2表达中的作用.以NaBu刺激人胚肾293(HEK293)细胞,应用real-time PCR和Western印迹杂交方法检测DDAH2mRNA和蛋白表达水平.结果显示NaBu以时间和浓度依赖方式上调DDAH2 mRNA表达水平,同时对DDAH2蛋白表达水平亦起到明显的上调作用. 展开更多

关键词 丁酸钠 乙酰化 ddah2

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重组腺病毒Ad-DDAH2转染大鼠脂肪干细胞的可行性

4

作者 李学峰 周世豪 +5 位作者 王新花 庞益伟 王雁林 李清春 刁兴华 刘海燕 《滨州医学院学报》 2021年第2期88-91,共4页

目的探讨腺病毒载体(Ad-DDAH2)转染大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的可行性。方法构建Ad-DDAH2-GFP质粒。原代培养大鼠ADSCs,流式细胞术检测免疫表型CD29、CD45、CD90表达情况。以不同滴度的Ad-DDAH2-GFP转染ADSCs,用荧光显微镜计数转染效率及... 目的探讨腺病毒载体(Ad-DDAH2)转染大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的可行性。方法构建Ad-DDAH2-GFP质粒。原代培养大鼠ADSCs,流式细胞术检测免疫表型CD29、CD45、CD90表达情况。以不同滴度的Ad-DDAH2-GFP转染ADSCs,用荧光显微镜计数转染效率及细胞形态。通过RT-PCR及Western Blot检测DDAH2在ADSCs中的表达情况。结果Ad-DDAH2-GFP重组腺病毒载体构建、包装成功,且病毒滴度达到2E+10PFU/ML。第4代ADSCs生长曲线呈现“S”形。细胞免疫表型CD29、CD90阳性率分别为(95.83±0.53)%、(91.32±0.27)%,CD45阳性率为(1.59±0.06)%,符合ADSCs免疫表型特征。当病毒感染复数值为80、100时,转染效率均可达到90%以上。但病毒感染复数值为100时,ADSCs出现明显细胞病理现象,因此病毒感染复数值为80被视为最佳感染复数,RT-PCR及Western Blot鉴定可见阳性扩增条带。结论Ad-DDAH2-GFP重组腺病毒载体构建成功,可以高效转染大鼠ADSCs。DDAH2在mRNA及蛋白稳定长期表达,为后续体内实验奠定了实验基础。 展开更多

关键词 ddah2 脂肪干细胞 腺病毒 转染

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社区老年人DDAH2基因多态性与高血压的相关性研究 被引量：2

5

作者 隋静 高玉敏 +7 位作者 赵美清 王靖宇 王志香 刘琦 程佳颖 周旭颖 刘东洋 王昱锜 《中国循证心血管医学杂志》 2022年第5期611-614,619,共5页

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因rs2272592、rs805035位点多态性及基因-环境交互作用与内蒙古包头地区人群高血压易感性之间的关系。方法选取内蒙古包头包钢社区老年高血压患者及健康人群各282例,使用统一问卷收集研究对... 目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因rs2272592、rs805035位点多态性及基因-环境交互作用与内蒙古包头地区人群高血压易感性之间的关系。方法选取内蒙古包头包钢社区老年高血压患者及健康人群各282例,使用统一问卷收集研究对象的基本信息并采集外周血。外周血血细胞提取研究对象DNA,利用多重高温连接酶检测反应技术(iMLDR)检测rs805305、rs2272592位点基因多态性。采用SNPstats在线软件进行遗传模型分析;多因素条件Logistics回归法分析DDAH2基因多态性及基因-环境交互作用与高血压易感性之间的关系。结果rs2272592位点超显性遗传模型、rs805305位点显性遗传模型为较优遗传模型(P<0.05);多因素条件Logistics回归提示rs2272592位点G/A基因型与高血压易感性有关(P<0.05);单因素条件Logistics回归发现rs2272592位点超显性遗传模型*睡眠总分与高血压易感性有关(P<0.05),但调整其他环境因素后关联消失(P>0.05)。结论rs2272592位点G/A基因型可能是高血压发生的危险因素;暂未发现DDAH2基因rs805305、rs2272592位点多态性与环境因素间存在基因-环境交互作用,影响高血压的发生。 展开更多

关键词 ddah2基因多态性 高血压 危险因素

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DDAH2C-449G基因多态性与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死的相关性

6

作者 刘洁 王前 +2 位作者 郭艳敏 卢军栋 齐凡星 《卒中与神经疾病》 2016年第2期88-90,共3页

目的探讨DDAH2C-449G基因多态性与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死(atherothrombotic infarct of brain)的关系。方法共纳入345例脑梗死患者和201例对照组人群,以DDAH2C-449G基因为遗传标志,采用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片段长度多态... 目的探讨DDAH2C-449G基因多态性与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死(atherothrombotic infarct of brain)的关系。方法共纳入345例脑梗死患者和201例对照组人群,以DDAH2C-449G基因为遗传标志,采用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片段长度多态性技术(RFLP)检测DDAH2C-449G基因多态性。结果动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死GG基因型、G等位基因频率较对照组高(P<0.05)。结论DDAH2C-449G基因多态性可能与动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死发病有关,G等位基因可能是动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死的易感基因。 展开更多

关键词 AIS 遗传 基因 ddah2C-449G 聚合酶链反应

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脓毒症糖尿病大鼠肺脏血管内皮细胞损伤及DDAH2／NOS／NO系统变化 被引量：4

7

作者 刘秀娟 穆恩 +2 位作者 梁英健 章志丹 马晓春 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1105-1111,共7页

目的探讨糖尿病脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤及一氧化氮系统在其发生机制中的作用。方法中国医科大学动物实验中心，清洁级Wistar大鼠64只随机（随机数字法）分为A、B、C、D四组，（健康对照组，n=16、糖尿病组，n=16、单纯脓毒症组... 目的探讨糖尿病脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤及一氧化氮系统在其发生机制中的作用。方法中国医科大学动物实验中心，清洁级Wistar大鼠64只随机（随机数字法）分为A、B、C、D四组，（健康对照组，n=16、糖尿病组，n=16、单纯脓毒症组，n=16、糖尿病发生脓毒症组，n=16）。糖尿病模型，一次性腹腔注射链脲左菌素60mg／kg，48h后随机测定尾静脉末梢血糖≥16．67mmol／L，为模型成功，饲养4周后下一步试验。脓毒症模型：一次性尾静脉注射大肠杆菌内毒素10mg／kg体质量。测定全血Tie-2mRNA表达，测定肺脏组织对伊文思蓝渗透性及肺脏干湿质量比、血清及肺组织NO含量，real-timePCR测定肺组织诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、DDAH2mRNA水平。数据采用单因素方差分析，并用LSD法进行组问两两比较，P〈0．05为差异有统计学意义。结果糖尿病脓毒症组较单纯脓毒症组全血Tie-2mRNA表达增多（19．72±0．70）VS．（3．99±0．92），P=0．00，肺干湿质量比更为降低（0．19±0．01）VS．（0．22±0．01），P=0．000，肺脏对EBD通透性增加更为严重（3．76±0．77）vs．（1．74±0．24），P=0．000，血清一氧化氮水平增高水平D组低于C组，（123．13±4．24）VS．（188．30±5．18），P=0．000。在肺组织中表达，两组均显示出高NO水平（53．62±6．70），（23．63±3．92）vs．（10．37±1．29），P=0．00，且D组近2倍高于C组（P=0．00）A、B、C组eNOS表达各组之间差异无统计学意义，D组低于A组，（0．07±0．02）VS．（0．38±0．05），P=0．017；iNOS表达C、D组均高于A组，（80．23±2．49），（32．48±5．37）VS．（1．74±0．23），均P=0．00；D组高于C组（P=0．00）。DDAH2mRNA水平D及C组均低于A组，（0．49±0．13），（7．26±0．50）VS．（11．96±0．550，P均=0．00；D组低于C组（P=0．00）。结论糖尿病脓毒症机体表现为更为严重内皮细胞损伤，严重NO系统调节失衡是糖尿病脓毒症血管内皮损伤加重的可能机制。 展开更多

关键词 糖尿病 脓毒症 肺微血管内皮细胞 二甲基精氨酸一二甲胺水解酶 非对称性二甲基氨基酸 一氧化氮合酶 一氧化氮 内皮细胞损伤

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氧化苦参碱抑制异丙肾上腺素诱导大鼠慢性心力衰竭及对ADMA代谢通路的影响 被引量：26

8

作者 王洋 徐烨华 +5 位作者 熊爱琴 袁娅妮 郑萍 马萍 戴贵东 徐清斌 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期471-477,共7页

目的:探讨氧化苦参碱抑制异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭及其对非对称二甲基精氨酸(ADMA)代谢通路的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠,皮下注射ISO 5 mg·kg-1·d-1,连续给药7 d诱发大鼠慢性心力衰竭。氧化苦参碱(100... 目的:探讨氧化苦参碱抑制异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭及其对非对称二甲基精氨酸(ADMA)代谢通路的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠,皮下注射ISO 5 mg·kg-1·d-1,连续给药7 d诱发大鼠慢性心力衰竭。氧化苦参碱(100,50 mg·kg-1)于ISO注射前7 d灌胃给药,共14 d。检测血清学指标、心功能血流动力学参数、心脏质量,并观察心肌组织病理变化,同时采用Western blotting法测定相关蛋白的表达。结果:氧化苦参碱(100,50 mg·kg-1)可显著降低ISO诱导的心力衰竭大鼠升高的血清心肌肌钙蛋白I(cTn I)水平,改善左心室收缩和舒张功能及左心室重构,显著减轻ISO致大鼠心肌的病理学改变。还可降低ISO诱导心力衰竭大鼠血清ADMA含量(P<0.01),增加心室肌组织中二甲基二甲胺水解酶2(DDAH2)蛋白的表达(P<0.01),但对ISO诱导升高的蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)无影响。结论:氧化苦参碱可改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠的心功能,抑制心室重构,其作用机制与降低血清ADMA水平和增高心肌组织DDAH2表达水平有关。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 异丙肾上腺素 慢性心力衰竭 ADMA PRMT1 ddah2

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苦参碱调控ADMA代谢通路抑制异丙肾上腺素诱导大鼠慢性心力衰竭的作用 被引量：7

9

作者 张伟 靳晓晔 +5 位作者 戴贵东 王彤 常人元 徐小亚 李蕊 方芳 《陕西中医药大学学报》 2022年第5期109-113,共5页

目的研究苦参碱对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)的作用及其对非对称二甲基精氨酸(ADMA)代谢通路的影响。方法Sprague-Dawley大鼠皮下注射ISO(5mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药... 目的研究苦参碱对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)的作用及其对非对称二甲基精氨酸(ADMA)代谢通路的影响。方法Sprague-Dawley大鼠皮下注射ISO(5mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药7 d)建立大鼠慢性心力衰竭模型。苦参碱(100,50和25mg·kg^(-1))于ISO注射前1h前进行灌胃给药,共7 d。检测大鼠心功能,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、脑钠肽(BNP)和ADMA含量,采用Western blot测定心肌组织精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)和二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)的蛋白表达。结果苦参碱(100、50和25mg·kg^(-1))预防给药显著改善了ISO诱导心力衰竭大鼠的左心室功能障碍,降低了模型大鼠升高的cTnI、BNP、ADMA血清水平(P<0.01),逆转了模型大鼠心肌组织DDAH2蛋白表达下调(P<0.01),而对其PRMT1蛋白表达上调无影响。结论苦参碱通过上调心肌组织DDAH2表达,降低血清ADMA含量,从而改善ISO诱发的慢性心力衰竭大鼠的心功能障碍,且随着苦参碱剂量增加,改善效果更加明显。 展开更多

关键词 苦参碱 ADMA ddah2 异丙肾上腺素 慢性心力衰竭

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二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因-449G/C多态性及二甲基精氨酸水平与2型糖尿病的相关性研究 被引量：2

10

作者 石柔 杨晶晶 +3 位作者 雷又鸣 李会芳 韩睿 宋滇平 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期393-397,共5页

目的研究二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）基因-449G/C多态性及非对称性二甲基精氨酸（ADMA）水平与T2DM的关系。方法选取T2DM患者（T2DM组）288例和健康对照者（NC组）279名,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技... 目的研究二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）基因-449G/C多态性及非对称性二甲基精氨酸（ADMA）水平与T2DM的关系。方法选取T2DM患者（T2DM组）288例和健康对照者（NC组）279名,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测DDAH2基因-449G/C多态性,应用ELISA检测血浆ADMA的浓度。结果（1）T2DM组DDAH2基因-449G/C位点的G/G基因型和G等位基因频率高于NC组（χ^2=16.742、12.178,P〈0.001）;（2）T2DM组DDAH2基因449G/G多态性携带者具有较高的ADMA水平[（11.15±2.71）vs（7.04±1.46）μmol/L,P〈0.05];DDAH2基因-449G/C多态性与胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）无相关性（P〉0.05）。（3）T2DM组血浆ADMA水平高于NC组[（9.51±2.44）vs（4.64±0.92）μmmol/L,P〈0.05];（4）ADMA水平与TC、LDL-C、FPG、2 hPG、SBP、DBP呈正相关（P〈0.05）,与HOMA-IR无相关性（P〉0.05）;多元逐步回归分析显示,FPG是血浆ADMA水平的影响因素（P〈0.001）;（5）Logistic回归分析显示,DDAH2-449G/G多态性、血浆ADMA水平是T2DM发生的独立危险因素（P〈0.05）。结论（1）在云南地区汉族人群中,DDAH2基因-449G/G多态性可能是T2DM的遗传危险因素;此基因型携带者具有较高的ADMA水平;（2）T2DM患者血浆ADMA水平升高,FPG是其影响因素;（3）DDAH2基因-449G/C多态性及血浆ADMA水平与HOMA-IR无相关性。 展开更多

关键词 二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因 多态性 非对称性二甲基精氨酸 糖尿病 2型 遗传易感性

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内蒙古通辽地区二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2基因与蒙古族高血压继发左心室肥厚的关联研究

11

作者 辛颖 奥乌力吉 +1 位作者 王丽梅 赵丽 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第19期41-46,共6页

目的该研究拟在内蒙古通辽地区的蒙古族人群中验证二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2（DDAH2）基因多态性与高血压左心室肥厚的关联。方法研究对象为2011年9月-2013年5月通辽市疾病预防控制中心收集的800例蒙古族高血压患者，其中包括400例高... 目的该研究拟在内蒙古通辽地区的蒙古族人群中验证二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2（DDAH2）基因多态性与高血压左心室肥厚的关联。方法研究对象为2011年9月-2013年5月通辽市疾病预防控制中心收集的800例蒙古族高血压患者，其中包括400例高血压伴左-42室肥厚（LVH）患者，400例高血压不伴有LVH患者，同时收集400例血压正常人作为对照。所有入选者均进行心脏超声的检测。使用单倍体型-tagging-单核苷酸的多态性（SNPs）的方法，研究DDAH2基因tagSNPs与原发性高血压继发左心室肥厚遗传易感因素的关系。结果在DDAH2基因上与其他SNPs（rs707916，rs805304）完全连锁，位于启动子区的tag-SNP-449C／G（rs805305），与携带GG基因型的患者相比，携带C等位基因（GC＋CC）的高血压左心室肥厚患者的左心室质量指数[（61．5±11．2）g／m2.7 vs（56．9±11．1）g／m2.7，P〈O．01]、左心室后壁厚度[（12．1±2．2）mmvs（11．0±2．0）mm，P〈0．051以及相对室壁厚度f（48．1±9．0）％VS（45．828．7）％，P〈0．011均增加。此外，-449位携带C等位基因（GC＋CC）增加高血压左心室肥厚的易感度（OR=1．33，95％CI：1．01-1．45，P〈O．05）。结论DDAH2基因的常见变异-449C／G与蒙古族高血压继发左心室肥厚的发生有关联。 展开更多

关键词 二甲基精氨酸-二甲胺水解酶基因 变异 原发性高血压 左心室肥厚 蒙古族

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应用PCR-RFLP技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因-449G/C多态性的实验研究

12

作者 杨晶晶 石柔 +1 位作者 宋滇平 陈洪艳 《中国老年保健医学》 2015年第3期30-32,共3页

目的确定聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(dimethyl arginine dimethylamine hydrolase 2,DDAH2)基因-449G/C的最... 目的确定聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(dimethyl arginine dimethylamine hydrolase 2,DDAH2)基因-449G/C的最适实验条件。方法对影响DDAH2基因PCR反应的主要因素进行研究。结果最适变性温度为95℃,最适退火温度为58℃,最适引物浓度为0.25μmol/L,最适2X Power Taq PCR Master Mix浓度为12.5μl,酶切体系为15.5μl体系中加5.0μl产物用5U的限制性内切酶Sma I消化。结论应用PCR-RFLP技术建立的DDAH2基因-449G/C位点多态位点检测方法简便、经济、快速。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 二甲基精氨酸二甲胺水解酶2 实验条件

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二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因启动子区-个NF-κB反应元件的鉴定

13

作者 李英慧 李家亓 +2 位作者 孙陆 初国铭 赵彦艳 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期322-326,共5页

目的鉴定二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）基因启动子区的一个NF-κB反应元件，证明其在DDAH2转录激活中的作用。方法应用多种软件分析DDAH2启动子区，寻找潜在的转录因子结合位点；构建系列截短的DDAH2基因启动子荧光素酶报告基因... 目的鉴定二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）基因启动子区的一个NF-κB反应元件，证明其在DDAH2转录激活中的作用。方法应用多种软件分析DDAH2启动子区，寻找潜在的转录因子结合位点；构建系列截短的DDAH2基因启动子荧光素酶报告基因载体，转染人胚肾HEK293细胞，通过荧光素酶活性检测分析各段启动子的活性；应用电泳泳动迁移实验（electrophoresis mobility shift assay，EMSA）和染色质免疫沉淀（chromatin immunoprecipitation，CHIP）方法分别在体外及体内鉴定NF-κB反应元件；构建NF-κB位点突变的DDAH2基因启动子荧光素酶报告基因载体，转染细胞，比较其与野生型启动子活性差异。结果DDAH2基因启动子区存在多种潜在的转录因子结合位点；DDAH2的各段启动子具有高转录活性，其中-530～-437区域为一个正调控区域；DDAH2基因启动子-476～469区为NF-κB反应元件，NF-κB可特异性结合于该位点；该NF-κB元件突变使DDAH2基因启动子活性显著下降。结论DDAH2基因启动子-476～469区为NF-κB反应元件，该元件在DDAH2转录激活中具有重要的作用。 展开更多

关键词 ddah2基因 NF-κB反应元件 一氧化氮 高血压

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