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干扰DBH-AS1上调miR-149抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭 被引量：2
1
作者 徐海霞 伊碧霞 胡娥 《中国优生与遗传杂志》 2021年第11期1538-1543,共6页
目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。方法将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC组(转染小干扰RNA阴性对照s... 目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。方法将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC组(转染小干扰RNA阴性对照si-NC)、si-DBH-AS1+anti-miR-149组(同时转染si-DBH-AS1和miR-149抑制剂anti-miR-149)、si-DBH-AS1+anti-miR-NC组(同时转染si-DBH-AS1和miR-149抑制剂阴性对照anti-miR-NC)。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中DBH-AS1和miR-149的表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测迁移、侵袭细胞数目,免疫印迹实验(Western blot)检测细胞核相关抗原Ki67、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达。生物信息学预测与双荧光素酶实验DBH-AS1与miR-149的靶向结合。结果24例子宫内膜癌组织中DBH-AS1的表达水平显著升高,miR-149的表达水平显著降低,二者呈显著负相关(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DBH-AS1组子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平显著减少,miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。与si-DBH-AS1+anti-miR-NC组相比,si-DBH-AS1+anti-miR-149组显著提高子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平,显著降低miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平(P<0.05)。DBH-AS1可以靶向调控miR-149的表达。结论干扰DBH-AS1可以上调miR-149的表达,抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 dbh-as1 miR-149 增殖 迁移 侵袭
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lncRNA DBH-AS1通过靶向miR-1291影响婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖和凋亡
2
作者 覃佳佳 郭莹 +1 位作者 吴俊 刘洋 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第4期578-587,共10页
该文旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1对婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖和凋亡的影响及可能机制。收集49个婴幼儿的血管瘤组织及瘤旁正常皮下组织,利用qRT-PCR检测血管瘤组织及瘤旁正常皮下组织中DBH-AS1和miR-1291的表达情况,... 该文旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1对婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖和凋亡的影响及可能机制。收集49个婴幼儿的血管瘤组织及瘤旁正常皮下组织,利用qRT-PCR检测血管瘤组织及瘤旁正常皮下组织中DBH-AS1和miR-1291的表达情况,通过Pearson相关性分析评价婴幼儿血管瘤患者血管瘤组织中DBH-AS1和miR-1291表达水平的相关性。CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblot检测增殖、凋亡相关蛋白的表达情况。血管瘤组织中DBH-AS1的表达水平高于瘤旁正常皮下组织(P<0.05),而miR-1291表达水平低于瘤旁正常皮下组织(P<0.05),Pearson相关性分析结果显示,血管瘤组织中DBH-AS1表达水平与miR-1291表达水平呈负相关(r=–0.887,P<0.01)。与si-NC组或miR-NC组比较,si-DBH-AS1组和miR-1291组细胞增殖活性和Ki-67、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率和cleaved-caspase9、cleaved-caspase3蛋白表达水平升高(P<0.05)。DBHAS1可靶向结合miR-1291,且si-DBH-AS1组HemECs中miR-1291表达水平高于si-NC组(P<0.05)。下调miR-1291逆转干扰DBH-AS1对HemECs增殖和凋亡的作用(P<0.05)。干扰DBH-AS1表达可阻碍HemECs增殖,并促进细胞凋亡,其可能通过负调控miR-1291发挥作用。 展开更多
关键词 血管瘤 dbh-as1 miR-1291 细胞增殖 凋亡
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干扰lncRNA DBH-AS1表达通过靶向调控miR-423-5p抑制直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭
3
作者 梁倩萍 张磊 +3 位作者 褚菲菲 李琨琨 张洋 吴慧丽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期5053-5058,共6页
目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1表达是否通过靶向调控微小RNA-423-5p(miR-423-5p)影响直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测直肠癌组织和细胞中lncRNA DBH-AS1和miR-423-5p表达。构建干扰l... 目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1表达是否通过靶向调控微小RNA-423-5p(miR-423-5p)影响直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测直肠癌组织和细胞中lncRNA DBH-AS1和miR-423-5p表达。构建干扰lncRNA DBH-AS1表达的SW1463细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达,Transwell小室法检测细胞迁移侵袭。SW1463细胞中转染miR-423-5p,观察其对细胞增殖、迁移、侵袭的影响。生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析DBH-AS1和miR-423-5p的靶向关系。共转染si-DBH-AS1和anti-miR-423-5p,评估抑制miR-423-5p表达对干扰lncRNA DBH-AS1表达诱导的SW1463细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结果与癌旁组织或NCM460细胞比较,直肠癌组织或细胞SW1463、Caco-2、SW480中DBH-AS1表达量显著增加,miR-423-5p表达量显著减少(均P<0.05)。干扰lncRNA DBH-AS1表显著降低SW1463细胞48 h、72 h的细胞活性、CyclinD1蛋白表达、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达(均P<0.05),显著提高p21、p27蛋白水平(均P<0.05)。miR-423-5p过表达显著抑制SW1463细胞48 h、72 h的细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(均P<0.05),而提高p21蛋白水平(P<0.05)。DBH-AS1靶向调控miR-423-5p的表达。抑制miR-423-5p表达逆转了干扰lncRNA DBH-AS1表达对SW1463细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论干扰lncRNA DBH-AS1表达可通过靶向调控miR-423-5p表达,从而抑制直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 lncRNA dbh-as1 miR-423-5p 直肠癌 增殖 迁移 侵袭
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长链非编码lncRNA DBH⁃AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及作用机制 被引量：4
4
作者 贾春英 张荣明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期226-232,共7页
目的探讨长链非编码lncRNA DBH⁃AS1(DBH⁃AS1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及机制。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT⁃PCR)检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中DBH⁃AS1、MicroRNA⁃138(miR⁃138)和Hypoxia⁃inducible factor⁃1α(HI... 目的探讨长链非编码lncRNA DBH⁃AS1(DBH⁃AS1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及机制。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT⁃PCR)检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中DBH⁃AS1、MicroRNA⁃138(miR⁃138)和Hypoxia⁃inducible factor⁃1α(HIF⁃1α)的mRNA表达水平。采用双荧光素酶报告分析三者的结合情况。采用流式细胞技术、qRT⁃PCR和免疫印迹法(Western blot)检测敲低或过表达DBH⁃AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,并分析miR⁃138和HIF⁃1α的表达变化。结果DBH⁃AS1和HIF⁃1α瘢痕疙瘩组织和细胞中显著上调,而miR⁃138明显下调(P<0.05)。双荧光素酶结果显示DBH⁃AS1能够靶向结合miR⁃138,miR⁃138能够靶向结合HIF⁃1α。低表达DBH⁃AS1或过表达miR⁃138明显促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡。敲低miR⁃138能逆转沉默DBH⁃AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,敲低HIF⁃1α显著抑制沉默miR⁃138对细胞凋亡的作用(P<0.05)。结论低表达DBH⁃AS1能够通过调控miR⁃138/HIF⁃1α通路促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡,提示DBH⁃AS1可能成为瘢痕疙瘩治疗的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 lncRNA DBH⁃AS1 瘢痕疙瘩 miR⁃138 成纤维细胞 HIF⁃1α 凋亡
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