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拟南芥DBB1a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测
被引量:
2
1
作者
屠小菊
汪启明
+5 位作者
李秀山
邓克勤
唐东英
罗泽宇
赵小英
刘选明
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2010年第2期224-228,共5页
PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a。15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测。证实目的蛋白以...
PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a。15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测。证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合。表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBBl a功能奠定了基础。
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关键词
dbbla
原核表达
蛋白纯化
WESTERN
BLOTTING
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职称材料
题名
拟南芥DBB1a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测
被引量:
2
1
作者
屠小菊
汪启明
李秀山
邓克勤
唐东英
罗泽宇
赵小英
刘选明
机构
湖南大学生命科学与技术研究院
湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室
湖南大学 生命科学与技术研究院
出处
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2010年第2期224-228,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30600368
30770200)
文摘
PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a。15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测。证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合。表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBBl a功能奠定了基础。
关键词
dbbla
原核表达
蛋白纯化
WESTERN
BLOTTING
Keywords
DBB1 a
prokaryotic expression
protein purification
western blotting
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥DBB1a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测
屠小菊
汪启明
李秀山
邓克勤
唐东英
罗泽宇
赵小英
刘选明
《激光生物学报》
CAS
CSCD
2010
2
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