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黄瓜线粒体基因CsWHY2与启动子克隆及过表达分析
1
作者 何小露 程春燕 +3 位作者 夏磊 袁高雅 孟雅 陈劲枫 《分子植物育种》 北大核心 2025年第7期2156-2163,共8页
本研究旨在探讨黄瓜WHIRLY2(WHY2)对成熟花粉粒中mtDNA数量的调控作用,为揭示黄瓜线粒体父系遗传分子机制提供理论基础。以黄瓜高代自交系‘CCMC’为材料,克隆CsWHY2基因及其启动子序列,并对启动子序列进行生物信息学分析;依据花蕾大小... 本研究旨在探讨黄瓜WHIRLY2(WHY2)对成熟花粉粒中mtDNA数量的调控作用,为揭示黄瓜线粒体父系遗传分子机制提供理论基础。以黄瓜高代自交系‘CCMC’为材料,克隆CsWHY2基因及其启动子序列,并对启动子序列进行生物信息学分析;依据花蕾大小收集花粉发育不同时期花药组织,通过实时荧光定量PCR分析花药组织中CsWHY2相对表达量;构建p-ProWHY2-CsWHY2表达载体,通过农杆菌介导法获得p-ProWHY2-CsWHY2转基因拟南芥,并进行表型观察;DAPI染色观察过表达植株成熟花粉粒中mtDNA数量的变化。结果表明:CsWHY2基因及启动子全长分别为726、2598 bp,启动子序列分析表明,其包含核心元件、植物激素响应及光响应等多个元件;RT-qPCR结果显示花药中CsWHY2相对表达量在变圆期急剧增加,成熟期显著下降,开花当天相对表达量最低,整体呈波峰型曲线变化;表型观察发现过表达植株更为矮小且叶片早衰;DAPI染色发现,过表达植株与野生型相比其营养细胞周围存在明显点状信号,这说明过表达植株花粉mtDNA数量显著多于野生型。综上表明CsWHY2影响花粉中的mtDNA数量,与黄瓜线粒体父系遗传密切相关。 展开更多
关键词 黄瓜 线粒体父系遗传 WHY2 MTDNA DAPI染色
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白丁香花粉发育过程及花粉萌发特性研究
2
作者 杨延红 姜倩倩 +3 位作者 刘丽娟 裴宝智 李政 付常乐 《种子》 北大核心 2025年第5期68-75,共8页
以白丁香花粉为试材,通过核染料4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)观察花粉发育过程,并找出花粉不同发育时期花蕾的形态特征,探究花粉离体萌发的培养条件。结果表明,白丁香花粉发育经历了母细胞时期、四分体时期、单核居中期、单核靠边... 以白丁香花粉为试材,通过核染料4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)观察花粉发育过程,并找出花粉不同发育时期花蕾的形态特征,探究花粉离体萌发的培养条件。结果表明,白丁香花粉发育经历了母细胞时期、四分体时期、单核居中期、单核靠边期和2-胞花粉时期,成熟花粉为2-胞花粉;在四分体时期出现多核异常四分体;单核靠边期花药长度为1.68~2.08 mm,花蕾长度为4.64~5.86 mm,发育过程中花蕾及花药颜色变化不明显;在花粉萌发中,糖、钙、硼及PEG-6000均显著影响花粉离体生长,最适培养基为0.3 g/L硼酸+0.20 g/L氯化钙+150 g/L蔗糖+25 g/L PEG-6000,培养3 h后花粉萌发率达69.60%。 展开更多
关键词 白丁香 花粉发育 花粉离体萌发 花蕾特征 DAPI染色
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DAPY类化合物抑制野生型HIV-1活性的QSAR研究 被引量：2
3
作者 石春雨 聂长明 +1 位作者 刘慧杰 宁左云 《分子科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期66-71,共6页
应用分子力学、半经验量子化学RM1方法优化了32个抗野生型HIV-1病毒毒株的二芳基嘧啶类(DAPYs)化合物分子结构,从分子构象模型中提取了多种参数并结合疏水性参数与指示性参数建立QSAR多元线性回归方程.回归方程显示:分子体积V的增大会... 应用分子力学、半经验量子化学RM1方法优化了32个抗野生型HIV-1病毒毒株的二芳基嘧啶类(DAPYs)化合物分子结构,从分子构象模型中提取了多种参数并结合疏水性参数与指示性参数建立QSAR多元线性回归方程.回归方程显示:分子体积V的增大会降低其抑制活性,而左苯环与嘧啶环间二面角θ增大可以提高抑制活性.同时指示性参数I表明左苯环CN基团加入可以明显增加抑制活性,嘧啶环上R1位置苯基与硝基的加入可以极大降低抑制活性. 展开更多
关键词 HIV-1 疏水性参数 二芳基嘧啶类似物(dapys) QSAR
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水分胁迫诱导八棱海棠和平邑甜茶细胞程序性死亡的研究 被引量：16
4
作者 曹慧 李春霞 +2 位作者 王孝威 邹岩梅 束怀瑞 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期469-474,共6页
以苹果属抗旱能力较强的八棱海棠(Malus robusta Rehd.)和较弱的平邑甜茶[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]水培幼苗为试验材料,利用细胞形态学、DNAladder等技术,用20%PEG 6000模拟水分胁迫进行诱导细胞程序性死亡研究。经DAPI染色后荧... 以苹果属抗旱能力较强的八棱海棠(Malus robusta Rehd.)和较弱的平邑甜茶[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]水培幼苗为试验材料,利用细胞形态学、DNAladder等技术,用20%PEG 6000模拟水分胁迫进行诱导细胞程序性死亡研究。经DAPI染色后荧光显微镜观察发现两个苹果属材料均呈现细胞染色质凝集、细胞核缩小、变形、解体等细胞程序性死亡的形态学特征;同时,DNA琼脂糖凝胶电泳可观察到明显的"梯状"DNA条带(DNA ladder)。由此表明,水分胁迫诱导苹果属植物具有明显的细胞程序性死亡的典型形态及生化特征,是一种主动的细胞死亡过程,八棱海棠细胞程序性死亡持续的时间长于平邑甜茶。 展开更多
关键词 苹果属 水分胁迫 程序性死亡 DAPI DNA LADDER
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大白菜游离小孢子培养胚胎发生中的加倍机制 被引量：24
5
作者 李菲 张淑江 +2 位作者 章时蕃 钮心恪 孙日飞 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期974-978,共5页
利用Leica体视显微镜,DAPI荧光染色观察比较大白菜小孢子正常发育为成熟花粉粒与游离小孢子培养胚胎发生细胞核的分裂方式,探讨大白菜游离小孢子培养胚胎发生及其自然加倍的机理。观察结果显示以B途径为主要发育途径的大白菜小孢子,胚... 利用Leica体视显微镜,DAPI荧光染色观察比较大白菜小孢子正常发育为成熟花粉粒与游离小孢子培养胚胎发生细胞核的分裂方式,探讨大白菜游离小孢子培养胚胎发生及其自然加倍的机理。观察结果显示以B途径为主要发育途径的大白菜小孢子,胚胎发生的启动机制是热激诱导下单倍体小孢子体积膨大,染色体发生自然加倍,从而激发小孢子进入孢子体发育途径;大白菜小孢子胚再生植株具有较高的自然加倍率,这与小孢子培养热激诱导激发小孢子单核自然加倍为二倍体密切相关。 展开更多
关键词 大白菜 小孢子培养 DAPI荧光染色 胚胎发生 染色体自然加倍
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高质量花生根尖细胞染色体制片方法研究 被引量：16
6
作者 杜培 张新友 +4 位作者 李丽娜 黄冰艳 易明林 董文召 汤丰收 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第3期31-35,共5页
为了能快速获得用于染色体分带或者荧光原位杂交的高质量花生根尖细胞染色体制片,通过选择适当粗细的花生侧根,经过对二氯苯浸泡预处理,卡诺氏固定液固定后,直接用45%醋酸烘烤压片,得到了细胞平整、染色体分散的根尖细胞染色体制片。与... 为了能快速获得用于染色体分带或者荧光原位杂交的高质量花生根尖细胞染色体制片,通过选择适当粗细的花生侧根,经过对二氯苯浸泡预处理,卡诺氏固定液固定后,直接用45%醋酸烘烤压片,得到了细胞平整、染色体分散的根尖细胞染色体制片。与HCl解离压片的方法相比,该方法中试剂对染色体影响微小。与酶解去壁低渗法相比,该方法没有酶解去壁低渗的过程,不需要用果胶酶和纤维素酶等较贵重试剂,节约了时间和成本,提高了制片效率。该方法不仅适用于花生,也适用于芝麻、水稻、玉米、大豆、青豆、番茄等多种植物。 展开更多
关键词 花生 根尖细胞 染色体 醋酸烘烤 制片方法 DAPI染色
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长江口及邻近海域表层海水细菌多样性及群落结构 被引量：9
7
作者 刘晓辉 王健鑫 +4 位作者 王帅兵 樊英萍 俞凯成 蒋然 刘明华 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1531-1541,共11页
从长江口及邻近海域10个站点采集表层海水,通过DAPI染色计数和克隆文库构建的方法,对细菌的多样性及群落结构进行初步研究。DAPI染色计数结果显示长江口及邻近海域表层海水中细菌丰度总体较高,生物量变化较大,从1.16×10^5（A04站... 从长江口及邻近海域10个站点采集表层海水,通过DAPI染色计数和克隆文库构建的方法,对细菌的多样性及群落结构进行初步研究。DAPI染色计数结果显示长江口及邻近海域表层海水中细菌丰度总体较高,生物量变化较大,从1.16×10^5（A04站点）到1.48×10^6 cells/m L（B03站点）;总体趋势从长江口向外海增加。细菌克隆文库的系统发育分析表明：细菌序列以变形菌门为主（占总文库的60.61%）,其中α-变形菌纲是绝对优势类群（50.62%）;其次是拟杆菌门（15.18%）、放线菌门（14.79%）和蓝细菌门（4.61%）,还有少量厚壁菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、浮霉菌门、纤维杆菌门、疣微菌门等;另外柔膜菌门和SAR类群也有发现。文库多样性分析结果显示长江口及邻近海域部分站点表层海水中细菌多样性显著,与研究区海域水产养殖活动有关,并受到区域洋流和海洋化学环境（如低氧带）的影响。 展开更多
关键词 长江口 细菌 多样性 DAPI 16S RDNA
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奶牛舍环境中气载微生物含量的检测 被引量：13
8
作者 刘敬博 柴同杰 +3 位作者 苗增民 周玉法 刘东燕 李明勇 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第5期56-60,共5页
【目的】准确地定量奶牛舍环境中气载微生物（细菌和真菌）的含量,并评估其健康风险。【方法】利用国际标准的AGI-30空气采样器,以无菌生理盐水为采样介质,收集奶牛舍空气样品,分别用培养计数法和4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）染色法,对... 【目的】准确地定量奶牛舍环境中气载微生物（细菌和真菌）的含量,并评估其健康风险。【方法】利用国际标准的AGI-30空气采样器,以无菌生理盐水为采样介质,收集奶牛舍空气样品,分别用培养计数法和4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）染色法,对奶牛舍环境中气载微生物含量进行计数,比较两种方法的差异,并对气载微生物潜在危害进行评估。【结果】培养计数法测得奶牛舍内气载微生物含量为1.14×105～8.32×106CFU/m3,而DAPI染色法为9.3×105～5.93×107CFU/m3,DAPI染色法所测气载微生物含量约是培养计数法的7～733倍。以染色法测得的奶牛舍内气载微生物含量计算,人与奶牛每min吸入的微生物量分别为1.58×105CFU和3.29×106CFU。【结论】染色计数法更能客观地反映环境中的气载微生物含量,有助于对环境的健康风险进行科学评估。 展开更多
关键词 奶牛舍 气载微生物 培养计数法 DAPI染色法
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大豆异黄酮对金黄色葡萄球菌的抑菌机制研究 被引量：33
9
作者 王海涛 王倩 谢明杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期2586-2591,共6页
【目的】研究大豆异黄酮(Soybean isoflavone,SI)的抑菌机制。【方法】本试验利用呼吸代谢抑制实验和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光染色对大豆异黄酮的抑菌机制进行研究。【结果】呼吸代谢... 【目的】研究大豆异黄酮(Soybean isoflavone,SI)的抑菌机制。【方法】本试验利用呼吸代谢抑制实验和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光染色对大豆异黄酮的抑菌机制进行研究。【结果】呼吸代谢抑制实验结果表明,当SI的终浓度为0.8mg·ml-1时,可显著抑制金黄色葡萄球菌苹果酸脱氢酶的活性,SI组苹果酸脱氢酶的比活性与对照组相比降低了74.97%。DAPI染色结果显示,DAPI可以和金黄色葡萄球菌内的核酸结合,经过SI作用28h后,菌体内的核酸含量呈明显下降趋势,其中DNA的荧光强度减少了33.53%,RNA减少了39.82%。【结论】SI具有有较强的抑菌活性,其抑菌机制是通过抑制细菌的呼吸代谢和核酸的合成等方面实现的。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 抑菌机制 苹果酸脱氢酶 DAPI
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Steedman’s wax包埋切片DAPI染色法证实铝诱导花生根尖细胞程序性死亡 被引量：7
10
作者 邓伦武 黄文静 +4 位作者 何海旺 何虎翼 李创珍 韦善清 何龙飞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1353-1357,共5页
【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包埋切... 【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包埋切片等一系列过程,利用荧光染料DAPI染色观察细胞核形态变化。【结果】100μmol/L AlCl3可引起花生根尖细胞核形态发生改变,核质浓缩、核边缘化、呈新月状等,具有明显的PCD特征。花生根尖细胞在铝胁迫下发生PCD,PCD程度与花生耐铝性呈负相关,与处理时间呈正相关。【结论】Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是一种快速、高效的适用于观察花生根尖细胞核形态的方法。 展开更多
关键词 花生 铝胁迫 细胞程序性死亡 Steedman’s wax包埋切片 DAPI染色
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海带染色体的DAPI染色及核型初步分析 被引量：10
11
作者 刘宇 毕燕会 周志刚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期50-54,共5页
鉴于海带染色体比较小且数目存在分歧等原因,利用0.2%秋水仙素对海带配子体及孢子体处理10 h左右,经过卡诺试剂固定、多种酶组合处理及30 cm的高位滴片,可以获得质量比较高的海带染色体;使用灵敏度高、特异性强的DNA荧光染料DAPI进行染... 鉴于海带染色体比较小且数目存在分歧等原因,利用0.2%秋水仙素对海带配子体及孢子体处理10 h左右,经过卡诺试剂固定、多种酶组合处理及30 cm的高位滴片,可以获得质量比较高的海带染色体;使用灵敏度高、特异性强的DNA荧光染料DAPI进行染色,结果显示,海带雌、雄配子体的染色体各为31条,孢子体染色体为62条,大多为短杆状或者点状;雌配子体染色体的大小为0.78～2.61μm,稍大于雄配子体(大小为0.57～2.17μm)。根据染色体的大小,对海带配子体的染色体核型进行了初步分析。这些结果为分子标记的染色体定位等细胞学研究奠定了技术基础。 展开更多
关键词 海带 配子体 DAPI 染色体 核型 孢子体
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骨髓基质干细胞豚鼠内耳移植初步观察 被引量：11
12
作者 葛圣雷 谢鼎华 +5 位作者 朱钢华 陈勇 张青松 肖自安 陈主初 肖志强 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2005年第3期177-178,i001,共3页
目的　建立骨髓基质干细胞(marrowstromalcell,MSC)内耳移植技术,研究内耳细胞移植的可行性。方法　将豚鼠骨髓基质干细胞分离培养,用4 ,6 -联脒- 2 -苯基吲哚( 4 ,6 -diamidino - 2 -phenylindole,DAPI)荧光标记,采用显微注射技术在耳... 目的　建立骨髓基质干细胞(marrowstromalcell,MSC)内耳移植技术,研究内耳细胞移植的可行性。方法　将豚鼠骨髓基质干细胞分离培养,用4 ,6 -联脒- 2 -苯基吲哚( 4 ,6 -diamidino - 2 -phenylindole,DAPI)荧光标记,采用显微注射技术在耳蜗底周鼓阶钻孔,通过钻孔处缓缓注入细胞,术后14天处死,行耳蜗石腊切片,荧光显微镜及HE染色观察移植细胞成活情况。结果　骨髓基质干细胞内耳移植成活,并贴壁生长。结论　成功地建立了骨髓基质干细胞内耳移植技术。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 细胞移植 DAPI
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miR-449a与胃癌的相关性 被引量：5
13
作者 赵亚刚 李立平 +2 位作者 吴伟洪 吴炜景 谢子英 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第23期3857-3861,共5页
目的:从临床及细胞学角度探究miR-449a与胃癌发生的相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胃癌组织与癌旁周围正常组织中miR-449a表达水平;使用Lipofectamine 2000转染法对MGC803细胞系miR-449a表达进行上调及下调,采用实时细... 目的:从临床及细胞学角度探究miR-449a与胃癌发生的相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胃癌组织与癌旁周围正常组织中miR-449a表达水平;使用Lipofectamine 2000转染法对MGC803细胞系miR-449a表达进行上调及下调,采用实时细胞动态监测(RTCA)系统及DAPI染色法检测MGC803细胞生长与凋亡情况。结果:(1)相比癌旁周围正常组织,胃癌组织中miR-449a为低表达,其相对表达量为(23.934±4.566,P=0.000);(2)相对于对照组,上调MGC803细胞系miR-449a表达后,RTCA实验结果细胞增殖速度降低(3.947±3.677,P=0.000),DAPI染色结果显示细胞凋亡增加(59.900±8.700,P=0.002);下调miR-449a表达后细胞增殖速度增快(9.005±1.372),凋亡减少(12.500±3.600)。结论:miR-449a具有类似抑癌作用,其低表达与胃癌的发生、发展具有相关性。 展开更多
关键词 MiR一449 MGC803 胃癌 RTCA DAPI
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小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色法 被引量：8
14
作者 张艳芬 许重洁 +1 位作者 杨保胜 刘小学 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第29期5696-5698,共3页
实验将DAPI染色方法运用到小鼠微核检测中。选取20只小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。2组均往小鼠腹腔注射环磷酰胺60mg/kg,1次/d,连续注射3d。实验组采用DAPI染色;对照组采用10%的Giemsa染色。结果显示,实验小鼠骨髓组织细胞微核... 实验将DAPI染色方法运用到小鼠微核检测中。选取20只小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。2组均往小鼠腹腔注射环磷酰胺60mg/kg,1次/d,连续注射3d。实验组采用DAPI染色;对照组采用10%的Giemsa染色。结果显示,实验小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色特异性强,易判断,对照组Giemsa染色结果特异性差,且不能排除染色过程中Giemsa染液中的染色颗粒沉淀的干扰,这样就使Giemsa染色后,对微核的判断造成困难。本实验建立了小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色方法,检测效果好,特异性强。 展开更多
关键词 微核 骨髓组织细胞 DAPI染色法
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天然二倍体和四倍体泥鳅鳍细胞系染色体组构成研究 被引量：4
15
作者 李雅娟 隋燚 +4 位作者 赵睿 李霞 周贺 刘博 马海艳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期83-88,共6页
对传代20次的天然二倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞系进行染色体标本制备,并对其染色体核型、Ag-NORs及CMA3/DA/DAPI三重荧光染色等进行研究。结果显示,1二倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为2n=50,核型公式为:2n=10m+4sm+36t,NF=64;四... 对传代20次的天然二倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞系进行染色体标本制备,并对其染色体核型、Ag-NORs及CMA3/DA/DAPI三重荧光染色等进行研究。结果显示,1二倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为2n=50,核型公式为:2n=10m+4sm+36t,NF=64;四倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为4n=100,核型公式为:4n=20m+8sm+72t,NF=128。2天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有2个Ag-NORs,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有4个Ag-NORs,均位于第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。3天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为2个,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为4个;均位于核仁组织区,即第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。结果表明,天然二倍体和四倍体泥鳅鳍培养细胞制备的染色体数目、核型和带型与体细胞一致。 展开更多
关键词 泥鳅 二倍体 四倍体 细胞系 染色体组 AG-NORS CMA3/DA/DAPI
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培养法和染色法对养殖环境中微生物气溶胶浓度的检测 被引量：8
16
作者 刘敬博 柴同杰 +1 位作者 苗增民 刘晓敏 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期86-89,共4页
比较不同检测方法对微生物气溶胶检验效果的影响。采用国际标准的AGI-30空气采样器,收集空气样品,分别用培养计数法和DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚)染色计数法来比较不同养殖环境中微生物气溶胶的浓度。培养计数法测得鸡舍、猪舍和牛舍环... 比较不同检测方法对微生物气溶胶检验效果的影响。采用国际标准的AGI-30空气采样器,收集空气样品,分别用培养计数法和DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚)染色计数法来比较不同养殖环境中微生物气溶胶的浓度。培养计数法测得鸡舍、猪舍和牛舍环境中微生物气溶胶的浓度分别为5.73×105～6.72×106cfu/m3空气,9.5×105～4.01×106cfu/m3空气,5.4×104～8.33×105cfu/m3空气,而DAPI染色计数的浓度分别为8.0×106～3.25×108cell/m3空气,1.5×107～2.28×108cell/m3空气,9.0×105～5.93×107cell/m3空气。培养计数法所得浓度仅为DAPI染色计数法的0.04%～10.4%。染色计数法可能会更加客观的反映环境中微生物气溶胶的浓度。 展开更多
关键词 气载微生物 培养计数法 DAPI染色 畜禽舍环境
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两种不同染色法在流式细胞术中检测细胞周期的探讨 被引量：5
17
作者 麦丽萍 钟诗龙 +3 位作者 杨敏 余细勇 单志新 林秋雄 《热带医学杂志》 CAS 2011年第12期1363-1366,F0004,共5页
目的比较碘化丙啶(PI)和4,6-联脒-2苯基吲哚(DAPI)两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响。方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种... 目的比较碘化丙啶(PI)和4,6-联脒-2苯基吲哚(DAPI)两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响。方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种方法的测定结果,同时进行细胞计数,观察细胞浓度变化。结果PI和DAPI法染色后0h上机测定,结果分别为:CV值(7.72±0.19)、(5.92±0.09),G0/G1期含量(69.63±1.16)%、(69.87±1.28)%,S期含量(24.53±0.47)%、(24.43±0.86)%,G2/M期含量(5.85±1.04)%、(5.72±0.65)%,两种方法检测细胞周期的结果基本一致(P>0.05);染色后24h重新测定,结果分别为:CV值(8.82±0.05)、(6.09±0.30),G0/G1期含量(58.50±0.90)%、(70.47±0.81)%,S期含量(31.73±0.75)%、(23.67±0.45)%,G2/M期含量(9.51±0.47)%、(5.86±0.46)%,两种方法检测细胞周期的结果差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI法染色后0和24h测定结果基本一致(P>0.05),而PI法检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。细胞计数结果显示,放置24hPI法细胞损耗为63.14%,DAPI法细胞损耗为12.50%,两种方法结果差异有统计学意义(P<0.05)。染色24h后PI法细胞开始崩解,镜下见较多的细胞碎片,而DAPI法细胞形态良好。结论应用流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色法优于PI染色法。 展开更多
关键词 PI染色法 DAPI染色法 细胞周期 流式细胞术
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麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在颅骨缺损大鼠体内迁移的影响 被引量：6
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作者 侯费祎 谢兴文 +2 位作者 李慎松 邵宏斌 张莲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第13期2043-2048,共6页
背景:骨髓间充质干细胞是多向分化干细胞,在骨折愈合和中有着重要作用。如何促进其在体内迁移,进而促进骨缺损的修复,有着重要研究意义。目的:研究不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响,探讨其促进骨折愈合的机制及... 背景:骨髓间充质干细胞是多向分化干细胞,在骨折愈合和中有着重要作用。如何促进其在体内迁移,进而促进骨缺损的修复,有着重要研究意义。目的:研究不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响,探讨其促进骨折愈合的机制及其引经理论初探。方法:建立大鼠颅骨缺损的大鼠模型;贴壁筛选法提取干细胞,取第3代细胞,利用DAPI进行标记,然后尾静脉回植入颅骨缺损的大鼠体内。分别以0,42,84,168μL/kg麝香酮灌胃1次。结果与结论:与高剂量麝香酮组和空白组相比,低、中剂量麝香酮组骨缺损部分的骨髓间充质干细胞数量增加,干细胞因子和Fractalkine的表达水平明显增加。提示中低剂量麝香酮具有促进外源性干细胞在体内的迁移作用。 展开更多
关键词 干细胞 移植 骨髓间充质干细胞 麝香酮 颅骨缺损 DAPI 细胞迁移 干细胞因子 FRACTALKINE 国家自然科学基金
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DAPI标记骨髓间充质干细胞在胶质瘤模型大鼠脑内的迁徙和定位 被引量：3
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作者 于音 杨洪发 +6 位作者 邵佳甲 邬巍 朱东 姜涛 郭永川 梁前垒 李衍鑫 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期4243-4246,共4页
背景:骨髓间充质干细胞作为载体细胞行脑内移植治疗胶质瘤,如何证实其为最好的药物载体?目的:将DAPI标记的大鼠骨髓间充质干细胞移植入模型鼠脑内,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的迁徙与定位。方法:体外培养骨髓间充质干细胞。利用立体... 背景:骨髓间充质干细胞作为载体细胞行脑内移植治疗胶质瘤,如何证实其为最好的药物载体?目的:将DAPI标记的大鼠骨髓间充质干细胞移植入模型鼠脑内,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的迁徙与定位。方法:体外培养骨髓间充质干细胞。利用立体定向仪将培养好的C6细胞注入大鼠脑内,建立大鼠脑内胶质瘤模型。将DAPI标记于培养好的骨髓间充质干细胞上,利用微量注射器注入模型鼠脑内;移植后第3,7天处死大鼠,利用共聚焦显微镜观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的分布及与肿瘤细胞的关系。结果与结论:实验成功建立了大鼠脑内胶质瘤模型。以DAPI标记的骨髓间充质干细胞。在模型鼠脑内主动聚集于肿瘤血管周围,并能与肿瘤细胞发生融合。结果证实骨髓间充质干细胞可以作为肿瘤基因治疗的良好载体。 展开更多
关键词 胶质瘤 骨髓间充质干细胞 大鼠 DAPI标记 脑
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一种用于DAPI染色的方法——Steedman's wax包埋切片法 被引量：9
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作者 安丽华 尤瑞麟 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1367-1372,共6页
以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman swax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman swax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片.Steedman s... 以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman swax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman swax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片.Steedman swax包埋的切片能成功地进行DAPI染色.与用压片法和Technovit7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedman swax包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡 PCD 的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能. 展开更多
关键词 Steedman’s WAX 组织切片 DAPI 细胞核
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