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DAAM2促进VHL的泛素化在肾癌发生发展中的作用 被引量:2
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作者 杨航 杨晶欣 +4 位作者 郑兰兰 胡作为 关江锋 覃双来 王兵 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期154-161,共8页
目的探讨蓬乱蛋白相关形态形成活化因子(DAAM2)在肾癌发生发展中的作用。方法采用定量PCR、Western blot、免疫共沉淀等技术系统研究DAAM2基因在肾癌组织中的表达及其对VHL(Von Hippel-Lindau)蛋白稳定性的调节作用;通过CCK8实验和Trans... 目的探讨蓬乱蛋白相关形态形成活化因子(DAAM2)在肾癌发生发展中的作用。方法采用定量PCR、Western blot、免疫共沉淀等技术系统研究DAAM2基因在肾癌组织中的表达及其对VHL(Von Hippel-Lindau)蛋白稳定性的调节作用;通过CCK8实验和Transwell实验研究DAAM2的过表达或干扰对肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭等功能的影响;利用Kaplan-Meier法分析TCGA数据库中肾癌患者肾脏肿瘤组织DAAM2的表达与患者预后的关系。结果定量PCR结果显示DAAM2在肾癌细胞系以及肾癌组织中高表达。体外实验证实DAAM2的过表达促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭,而抑制DAAM2的表达则产生相反的效应。进一步机制研究表明,在肾癌细胞中DAAM2与VHL相互作用,并促进VHL的泛素化降解;在肾癌细胞中共表达VHL能部分逆转DAAM2的作用。Kaplan-Meier曲线提示DAAM2的高表达与肾癌患者的不良预后相关。结论 DAAM2可能通过促进VHL降解在肾癌发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 daam2 VHL蛋白 肾癌 泛素化
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乔松素下调DAAM2/Wnt/β-catenin信号轴对黑色素瘤细胞凋亡和迁移的影响
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作者 廖媛 王羽 +2 位作者 贾龙浩 林婧怡 王丽 《中国比较医学杂志》 2025年第12期65-75,共11页
目的探讨乔松素(Pin)对小鼠黑色素瘤细胞B16凋亡、迁移的影响及其与DAAM2/Wnt/β-catenin信号轴的关系。方法体外通过CCK8法筛选抑制小鼠黑色素瘤细胞B16活力的中药单体;通过流式细胞术和划痕实验检测筛选出的Pin对黑色素瘤细胞B16凋亡... 目的探讨乔松素(Pin)对小鼠黑色素瘤细胞B16凋亡、迁移的影响及其与DAAM2/Wnt/β-catenin信号轴的关系。方法体外通过CCK8法筛选抑制小鼠黑色素瘤细胞B16活力的中药单体;通过流式细胞术和划痕实验检测筛选出的Pin对黑色素瘤细胞B16凋亡和迁移的影响;利用RNA-seq测序结合GEPIA数据库分析Pin可能作用的核心基因,并采用实时荧光定量PCR(q PCR)和Western blot法验证DAAM2和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Axin2、p-GSK3β、p-β-catenin的表达水平。通过转染过表达DAAM2质粒进行回复实验。体内建立小鼠黑色素瘤模型,给予Pin低、高剂量(10 mg/kg、30 mg/kg)灌胃干预,观察小鼠黑色素瘤的生长情况。Western blot检测Pin对黑色素瘤组织中DAAM2、Axin2、β-catenin、p-GSK3β表达的影响,进一步明确Pin对小鼠黑色素瘤进程的影响。结果Pin显著促进黑色素瘤细胞B16的凋亡(P<0.001),抑制其迁移速率(P<0.01,P<0.001);RNA-seq和GEPIA分析提示DAAM2为关键靶点。q PCR和Western blot结果显示Pin能够显著降低DAAM2的mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),并下调Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白p-GSK3β、p-β-catenin和Axin2的表达水平(P<0.001)。体内实验表明,高剂量Pin可明显抑制小鼠黑色素瘤的生长和瘤重,同时降低瘤组织中DAAM2、Axin2、β-catenin、p-GSK3β的表达(P<0.05,P<0.01),DAAM2过表达可逆转Pin对DAAM2/Wnt/β-catenin信号轴的作用。结论Pin可通过下调DAAM2/Wnt/β-catenin信号轴,促进黑色素瘤细胞凋亡、抑制其迁移,并抑制小鼠体内黑色素瘤生长。 展开更多
关键词 乔松素 黑色素瘤 抗肿瘤 daam2 Wnt/β-catenin
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DAAM基因家族在胰腺癌中的表达及其与免疫检查点的相关性
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作者 梅杰 许隽颖 +2 位作者 顾丁一 王惠宇 刘超英 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1681-1686,共6页
目的:探究蓬乱蛋白相关形态形成活化因子(dishevelled-associated activator of morphogenesis,DAAM)1和DAAM2在胰腺癌中的表达及临床意义。方法:购买胰腺癌组织芯片(HPanA120Su02),包含66例癌及54例癌旁样本;采用免疫组织化学法检测DA... 目的:探究蓬乱蛋白相关形态形成活化因子(dishevelled-associated activator of morphogenesis,DAAM)1和DAAM2在胰腺癌中的表达及临床意义。方法:购买胰腺癌组织芯片(HPanA120Su02),包含66例癌及54例癌旁样本;采用免疫组织化学法检测DAAM1、DAAM2在胰腺癌及癌旁组织中的表达水平;下载癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中DAAM1、DAAM2及细胞程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PDL1)等免疫检查点分子的表达谱数据;采用t检验、χ~2检验、log-rank检验、相关性分析等统计学方法分别分析DAAM1、DAAM2在癌与癌旁组织间表达的差异,二者的共表达关系,与临床病理参数、预后的关系,及其与免疫检查点分子表达的相关性。结果:相较于癌旁组织,DAAM1、DAAM2在胰腺癌中的表达均显著上调(P <0.001),且胰腺癌组织中DAAM1与DAAM2的表达呈显著正相关(P <0.001);DAAM1表达水平与肿瘤分化程度(P=0.062)和患者生存状态(P=0.061)存在一定相关性,但差异无统计学意义,与其他临床病理参数无显著相关性(P> 0.05),而DAAM2表达水平与各项临床病理参数均无显著相关性(P> 0.05);TCGA数据库中,DAAM1及DAAM2与PDL1等多个免疫检查点的表达呈显著正相关(P <0.001)。结论:DAAM1、DAAM2在胰腺癌中的表达显著上调,与PDL1等免疫检查点的表达呈正相关,可能是胰腺癌发生、发展及免疫逃避的关键调控因素。 展开更多
关键词 DAAM1 daam2 胰腺癌 预后 免疫检查点
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