细胞周期蛋白D1和热休克转录因子1在卵巢高级别浆液性癌患者癌组织中的表达及与临床病理特征的关系 被引量：1

1

作者 周炜根 徐建勤 +1 位作者 袁军 潘珊 《中国妇幼保健》 2025年第17期3258-3262,共5页

目的检测卵巢高级别浆液性癌患者癌组织中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、热休克转录因子1(HSF1)表达水平,分析Cyclin D1、HSF1与卵巢高级别浆液性癌患者临床病理特征的关系。方法选取2019年6月—2023年10月在嘉兴市妇幼保健院诊治的120例... 目的检测卵巢高级别浆液性癌患者癌组织中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、热休克转录因子1(HSF1)表达水平,分析Cyclin D1、HSF1与卵巢高级别浆液性癌患者临床病理特征的关系。方法选取2019年6月—2023年10月在嘉兴市妇幼保健院诊治的120例卵巢高级别浆液性癌患者作为研究对象,根据患者首次病理诊断结果,选取120例患者的癌组织,同时选取癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)120例。比较癌组织和癌旁组织中Cyclin D1、HSF1表达水平。采用Pearson相关性分析法分析Cyclin D1、HSF1表达水平与卵巢高级别浆液性癌患者临床病理特征的相关性。采用多因素logistic回归模型分析卵巢高级别浆液性癌患者Cyclin D1、HSF1表达水平的影响因素。结果与癌旁组织中Cyclin D1表达水平(1.03±0.14)、HSF1表达水平(1.71±0.42)比较,癌组织中Cyclin D1表达水平(2.03±0.25)、HSF1表达水平(2.24±0.31)均升高,差异均有统计学意义(t=38.231、11.122,均P<0.05)。Cyclin D1、HSF1免疫组化染色均呈棕黄色,癌组织中Cyclin D1、HSF1染色比例均高于癌旁组织。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、首次手术治疗发生淋巴转移、初诊时合并腹水、初次治疗后1年内复发、铂敏感的患者Cyclin D1、HSF1表达水平均高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、首次手术治疗未发生淋巴转移、初诊时未合并腹水、初次治疗后1年内未复发、铂耐药的患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Cyclin D1、HSF1表达水平与卵巢高级别浆液性癌患者的临床分期、首次手术治疗发生淋巴转移、初诊时合并腹水、初次治疗后1年内复发、铂敏感均呈正相关(均P<0.05)。卵巢高级别浆液性癌患者Cyclin D1、HSF1表达水平的影响因素包括临床分期、铂敏感、初诊时合并腹水、初次治疗后1年内复发、首次手术治疗发生淋巴转移(均P<0.05)。结论Cyclin D1、HSF1表达水平升高与卵巢高级别浆液性癌患者的临床病理特征有一定相关性,Cyclin D1、HSF1高表达的卵巢高级别浆液性癌患者更易出现临床分期Ⅲ~Ⅳ期、铂敏感、初诊时合并腹水、初次治疗后1年内复发、首次手术治疗发生淋巴转移。 展开更多

关键词 卵巢高级别浆液性癌 细胞周期蛋白d1 热休克转录因子1 临床病理特征

原文传递

洛克米兰醇调控Cyclin D1抑制乳腺癌细胞增殖的研究

2

作者 周佳钰 李佳瑞 +4 位作者 高议雁 李君兰 孙丽娥 苑春茂 宋佳蕾 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第11期2113-2119,共7页

探讨洛克米兰醇(rocaglaol,Roc)通过调节Cyclin D1影响乳腺癌细胞增殖的作用及机制。采用不同浓度的Roc处理人乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231,MTT法检测Roc对细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期的变化;Western blot分析Roc对细胞周期蛋... 探讨洛克米兰醇(rocaglaol,Roc)通过调节Cyclin D1影响乳腺癌细胞增殖的作用及机制。采用不同浓度的Roc处理人乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231,MTT法检测Roc对细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期的变化;Western blot分析Roc对细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的影响,PCR和q-PCR检测CCND1基因的表达情况;蛋白酶体抑制剂MG132检测Roc调节Cyclin D1的方式。结果表明,Roc抑制人乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231的增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,下调了MCF7和MDA-MB-231细胞Cyclin D1的蛋白表达,但不影响CCND1基因的表达。MG132能够恢复Roc对Cyclin D1表达下调的情况,表明Roc以蛋白酶体降解的方式调节Cyclin D1的表达。以上结果说明Roc在转录后水平调节Cyclin D1的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 洛克米兰醇 乳腺癌 细胞周期 Cyclin d1 转录后调节

暂未订购

PKD1基因特异性敲除对脓毒性心肌病小鼠心肌损伤的抑制作用及机制

3

作者 汪海波 刘新通 +2 位作者 黄志新 刘广交 谭小进 《山东医药》 2025年第5期56-60,共5页

目的探讨心肌细胞中蛋白激酶D1(PKD1)基因特异性敲除对脓毒性心肌病(SCM)小鼠心肌损伤的抑制作用及机制。方法用简单随机抽样法将26只雄性小鼠分为假手术组4只、模型组9只、敲除假手术组4只、敲除模型组9只,并通过Cre-loxP重组系统敲除... 目的探讨心肌细胞中蛋白激酶D1(PKD1)基因特异性敲除对脓毒性心肌病(SCM)小鼠心肌损伤的抑制作用及机制。方法用简单随机抽样法将26只雄性小鼠分为假手术组4只、模型组9只、敲除假手术组4只、敲除模型组9只,并通过Cre-loxP重组系统敲除后两组的PKD1基因。2个月后,模型组、敲除模型组采用盲肠结扎穿孔(CLP)术构建脓毒症小鼠SCM模型。CLP术后24 h,行超声心动图检查,记录心肌损伤指标[心脏重量与胫骨长度的比值(HW/TL)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)];苏木精-伊红染色观察心肌组织病理变化;用Western blotting法检测心肌细胞及其细胞核、细胞质、线粒体中PKD1、信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、STAT3磷酸化位点Tyr705(STAT3 Tyr705)蛋白表达;用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应检测心肌组织中PKD1、细胞因子信号转导抑制分子3(SOCS3)mRNA表达。结果各组HW/T比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与假手术组比较,模型组LVIDs、LVESV高而LVEF、LVFS低(P均<0.05);与模型组比较,敲除模型组LVIDs、LVESV低而LVEF、LVFS高(P均<0.05)。CLP后24 h,模型组小鼠出现明显的心肌纤维断裂,细胞水肿、坏死,中性粒细胞浸润;与模型组比较,敲除模型组小鼠心肌组织病理变化改善。各组小鼠心肌细胞细胞核、细胞质、线粒体中STAT3蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05)。与假手术组比较,模型组心肌细胞细胞核、细胞质中STAT3Tyr705蛋白相对表达量高(P均<0.05);与模型组比较,敲除模型组心肌细胞细胞核中STAT3Tyr705蛋白相对表达量低而细胞质中STAT3Tyr705蛋白表达高(P均<0.05)。与假手术组比较,模型组心肌细胞中SOCS3 mRNA相对表达量高(P均<0.05);与模型组比较,敲除模型组细胞核中SOCS3 mRNA相对表达量低(P均<0.05)。结论PKD1基因敲除可能通过抑制心肌细胞细胞核STAT3蛋白磷酸化,降低SOCS3 mRNA表达,从而抑制SCM小鼠心肌损伤。 展开更多

关键词 脓毒性心肌病 心肌损伤 蛋白激酶d1 信号转导及转录激活蛋白3 细胞因子信号转导抑制分子3 小鼠

暂未订购

异丹叶大黄素下调膀胱癌细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制研究 被引量：5

4

作者 方勇 王章桂 +1 位作者 侯琦 卢瑜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期53-60,共8页

目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定... 目的:探索异丹叶大黄素(ISO)下调肿瘤细胞中细胞周期蛋白D1表达的分子机制。方法:以ISO作用于人源性膀胱癌UMUC3、RT12和RT4细胞后用Western blotting法检测细胞周期蛋白D1表达水平;以RTPCR法检测细胞周期蛋白D1 mRNA的表达水平。稳定转染细胞周期蛋白D1启动子萤光素酶报告基因至UMUC3细胞并筛选后,检测ISO预处理后萤光素酶活性。ISO预处理UMUC3细胞后,提取核蛋白检测核转录因子表达水平的变化。分别稳定转染GFP和GFP-细胞周期蛋白D1表达构建载体,筛选克隆;ISO预处理后,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达水平,贴壁依赖性细胞生长实验法检测细胞生长能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的变化。分别稳定转染人源性细胞周期蛋白D1野生型和-163位点突变型萤光素酶报告基因质粒载体至UMUC3细胞并筛选,ISO预处理后检测细胞的萤光素酶活性。最后利用染色质免疫沉淀的方法,以抗Sp1抗体检测ISO对Sp1与细胞周期蛋白D1启动子结合力的影响。结果:ISO可从mRNA和蛋白水平显著抑制肿瘤细胞的细胞周期蛋白D1水平,并且是从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的转录。ISO可抑制、下调核转录因子Sp1的表达,并抑制Sp1与细胞周期蛋白D1启动子区域的结合力,该结合位点主要位于启动子-92到+27bp的5’-非翻译区。结论:ISO可通过下调Sp1核转录因子表达及其与细胞周期蛋白D1启动子的结合,从内源性转录水平来抑制细胞周期蛋白D1的表达,从而诱导G0/G1细胞周期阻滞并抑制肿瘤细胞增殖。我们的研究将为临床中药单体ISO综合治疗肿瘤提供新的策略。 展开更多

关键词 异丹叶大黄素 膀胱癌 细胞周期蛋白d1 Sp1转录因子 细胞周期阻滞

暂未订购

CCND1基因不同转录本在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量：3

5

作者 钱秀艳 张淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期508-510,共3页

目的探讨CCND1基因长短两种转录本及其蛋白产物cyclinD1在宫颈癌组织中的表达情况及对宫颈癌生物学行为的影响。方法采用实时定量RT-PCR和免疫组化S-P法检测CCND1基因两种转录本及CyclinD1蛋白在宫颈癌组织和正常组织中的表达。结果 CC... 目的探讨CCND1基因长短两种转录本及其蛋白产物cyclinD1在宫颈癌组织中的表达情况及对宫颈癌生物学行为的影响。方法采用实时定量RT-PCR和免疫组化S-P法检测CCND1基因两种转录本及CyclinD1蛋白在宫颈癌组织和正常组织中的表达。结果 CCND1基因的短转录本在正常组织和宫颈癌组织中相对表达量有统计学意义(P<0.05)而长转录本则无统计学意义(P>0.05);并且在宫颈癌组织中发现短转录本转录量在低分化组织中降低明显,有统计学意义(P<0.05);同时发现cyclinD1蛋白在宫颈癌组织中部分高表达(57.14%),在正常宫颈组织中仅在具有分化潜能的基底细胞中有所表达(13.33%)。结论 CCND1基因的短转录本对于宫颈癌可能存在保护作用,同时,CCND1基因的两种转录本的相对表达量的差异不会影响cyclinD1蛋白总的表达量。 展开更多

关键词 宫颈癌 CCNd1 转录本 CYCLINd1

暂未订购

BP1基因和Cyclin D1基因在乳腺癌组织中的表达及意义 被引量：3

6

作者 宋永春 傅四东 +2 位作者 温小鹏 马振华 党诚学 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期709-714,共6页

背景与目的:BP1基因是新近发现的转录因子,属于同源盒基因的DLX家族。近年来的国内外研究显示BP1基因与人乳腺癌的发病密切相关。目前BP1基因与细胞周期控制因子之间的关系未见进一步的研究报道。本研究拟观察人乳腺癌组织中BP1的表达... 背景与目的:BP1基因是新近发现的转录因子,属于同源盒基因的DLX家族。近年来的国内外研究显示BP1基因与人乳腺癌的发病密切相关。目前BP1基因与细胞周期控制因子之间的关系未见进一步的研究报道。本研究拟观察人乳腺癌组织中BP1的表达情况以及BP1与Cyclin D1表达的关系。方法:收集86例乳腺癌组织和20例癌旁组织,用RT-PCR的方法检测乳腺癌组织和癌旁组织中BP1 mRNA表达的情况。合成BP1多抗,用Western blot方法验证BP1多抗的效果,并检测86例乳腺癌组织中BP1和Cyclin D1免疫组化的情况及BP1蛋白和Cyclin D1蛋白有无共表达。结果:86例乳腺癌组织中,60例呈BP1 mRNA阳性(69.8%)。20例癌旁组织中BP1 mRNA均为阴性。乳腺癌组织中BP1 mRNA表达明显高于癌旁组织(P=0.000)。在86例乳腺癌组织中,Cyclin D1 mRNA表达率为64.0%(55/86),与BP1 mRNA共阳性的有52例,共阴性的有23例,BP1 mRNA和Cyclin D1 mRNA存在共表达(P=0.277)。另外,在86例乳腺癌组织免疫组化检测中,43例呈BP1和Cyclin D1共阳性表达,31例呈BP1和Cyclin D1共阴性。经配对χ2检验显示,Cyclin D1与BP1也存在共表达(P=0.146)。结论:BP1基因在人乳腺癌组织中有较高的表达率,BP1基因和Cyclin D1基因在人乳腺癌组织中有共表达。BP1基因可能是通过调节细胞周期控制因子Cyclin D1导致乳腺癌发生的。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 BPl基因 CYCLIN d1基因 基因表达 逆转录聚合酶链反应 免疫组化

暂未订购

信号转导与转录激活因子3、细胞周期素D1在胆管癌组织中的表达及意义 被引量：3

7

作者 王文斌 刘兵 +2 位作者 王天阳 吕海涛 刘学青 《河北医科大学学报》 CAS 2017年第12期1397-1400,1405,共5页

目的检测信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)在胆管癌组织中的表达并分析其临床意义。方法采用免疫组织化学技术检测STAT3、Cyclin D1在70例胆管癌组织和15... 目的检测信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)在胆管癌组织中的表达并分析其临床意义。方法采用免疫组织化学技术检测STAT3、Cyclin D1在70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中的表达情况。结果免疫组织化学结果显示70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中STAT3、Cyclin D1阳性表达率分别为61.4%、33.3%和42.9%、13.3%。STAT3、Cyclin D1蛋白在胆管癌组织中的表达均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.05)。STAT3蛋白表达与胆管癌的临床分期、淋巴结转移和组织学分级明显相关(P<0.05);胆管癌组织中Cyclin D1蛋白表达与淋巴结转移和组织学分级明显相关(P<0.05)。STAT3与Cyclin D1表达呈明显正相关关系(P<0.05)。STAT3、Cyclin D1蛋白共阴性表达组生存时间明显长于共阳性表达组(P<0.01)。结论 STAT3、Cyclin D1可能是反映胆管癌发生发展的重要生物学指标。 展开更多

关键词 胆管肿瘤 转录激活因子3 细胞周期素d1

暂未订购

活性维生素D3对大鼠肺纤维化中蛋白激酶D1介导的抗氧化通路的影响 被引量：3

8

作者 倪娜 刘乃国 +3 位作者 高海洋 董洪亮 郑静 王楠 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期534-538,567,共6页

目的：探讨肺纤维化发生发展中蛋白激酶D1（PKD1）介导的线粒体抗氧化通路的作用以及活性维生素D3在纤维化过程中对该通路的影响。方法：雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组。应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋... 目的：探讨肺纤维化发生发展中蛋白激酶D1（PKD1）介导的线粒体抗氧化通路的作用以及活性维生素D3在纤维化过程中对该通路的影响。方法：雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组。应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋白质水平检测大鼠肺组织中PKD1、核转录因子（NF-κB）和锰超氧化物歧化酶（MnSOD）的表达。结果：在第14天，治疗组和模型组中PKD1、NF-κB和MnSOD的表达量都显著低于对照组，而治疗组中3种因子的表达量又明显高于模型组；在第21天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量明显高于对照组。在第28天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量与对照组相比两两之间均没有差异。结论：PKD1-MnSOD线粒体抗氧化通路在博莱霉素引起的大鼠肺纤维化早期发挥重要作用，活性维生素D3能够上调这一抗氧化通路，具有一定的抗氧化作用，对大鼠肺纤维化的发生发展具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 活性维生素D3 蛋白激酶d1 锰超氧化物歧化酶 核转录因子-ΚB 大鼠

暂未订购

STAT3、cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义 被引量：9

9

作者 李敏 周颖 +4 位作者 彭程 冯定庆 李彩荣 凌斌 肖卫华 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第10期745-747,共3页

目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵... 目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵巢组织的蛋白表达阳性率分别为90.6%(29/32)和16.7%(2/12)。卵巢癌组STAT3表达明显高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.01);STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1mRNA在卵巢癌组织的阳性表达率分别为93.75%、87.5%、71.88%,与正常卵巢组阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中STAT3表达升高及活化可能促进了抗凋亡基因cyclinD1、cyclinB1表达,刺激细胞持续异常增殖,导致肿瘤发生。 展开更多

关键词 信号转导和转录激活因子3 卵巢上皮性癌 基因 细胞周期蛋白d1 基因 细胞周期蛋白B1

暂未订购

宫颈鳞癌组织中pSTAT3、Cyclin D1、VEGF表达变化及意义 被引量：1

10

作者 王海清 胡杏军 +2 位作者 林健芳 练晓勤 杨爱莲 《山东医药》 CAS 2013年第40期13-15,共3页

目的观察宫颈鳞癌组织中磷酸化信号转导和转录激活因子3(pSTAT3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测40例宫颈鳞癌(癌症组)、20例宫颈上皮内瘤变(CIN组)和15... 目的观察宫颈鳞癌组织中磷酸化信号转导和转录激活因子3(pSTAT3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测40例宫颈鳞癌(癌症组)、20例宫颈上皮内瘤变(CIN组)和15例正常宫颈鳞状上皮(对照组)组织中的pSTAT3、Cyclin D1和VEGF蛋白。结果在癌症组及CIN组,pSTAT3过表达率分别为20.0%、62.5%(P<0.05),Cyclin D1过表达率分别为30.0%、72.5%(P<0.05),VEGF过表达率分别为40.0%、82.5%(P<0.05);对照组均无过表达者。pSTAT3、Cyclin D1蛋白过表达与宫颈鳞癌病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05),VEGF蛋白过表达与宫颈鳞癌病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05)。宫颈鳞癌组织中,pSTAT3与Cyclin D1及VEGF蛋白过表达呈正相关(r分别为0.531、0.618,P均<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中pSTAT3、Cyclin D1及VEGF蛋白表达增高,三者共同参与了宫颈鳞癌的发生、发展。 展开更多

关键词 宫颈癌 免疫组织化学 磷酸化信号转导和转录激活因子3 细胞周期素d1 血管内皮生长因子

暂未订购

LncRNA MALAT1对骨肉瘤细胞阿霉素耐药性的影响机制研究 被引量：1

11

作者 梁福东 狄淑芳 +2 位作者 罗伟 齐江华 刘利兵 《中国药房》 北大核心 2025年第6期698-703,共6页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与骨肉瘤(OS)细胞阿霉素(DOX)耐药性的关系及作用机制。方法将MG-63和MG-63/DOX细胞用不同浓度DOX(0、0.01、0.05、0.1、1μmol/L)处理后,以CCK-8法检测其存活率和半数抑制... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与骨肉瘤(OS)细胞阿霉素(DOX)耐药性的关系及作用机制。方法将MG-63和MG-63/DOX细胞用不同浓度DOX(0、0.01、0.05、0.1、1μmol/L)处理后,以CCK-8法检测其存活率和半数抑制浓度(IC50);采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测MG-63和MG-63/DOX细胞中LncRNA MALAT1表达。将MG-63/DOX细胞分为Control(对照)组、敲低LncRNA MALAT1的阴性对照(sh-NC)组、sh-MALAT1组、sh-MALAT1+抑制(anti)-NC组、sh-MALAT1+anti-miR-154-5p组。检测各组MG-63/DOX细胞中LncRNA MALAT1、miR-154-5p、细胞周期素D1(CCND1)mRNA相对表达量,采用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验、流式细胞仪分别检测敲低LncRNA MALAT1对MG-63/DOX细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响;采用Western blot法检测MG-63/DOX细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、CCND1蛋白的表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MALAT1与miR-154-5p、miR-154-5p与CCND1之间的相互作用。结果与0μmol/L DOX比较,0.01、0.05、0.1、1μmol/L DOX均能降低MG-63和MG-63/DOX细胞(0.01μmol/L DOX除外)的存活率(P<0.05),IC50分别为0.07、0.13μmol/L。sh-MALAT1组MG-63/DOX细胞存活率、迁移数、侵袭数、划痕愈合率、LncRNA MALAT1 mRNA表达、CCND 1 mRNA和蛋白表达、PCNA蛋白表达均显著低于sh-NC组、Control组,细胞凋亡率和miR-154-5p表达显著高于sh-NC组、Control组(P<0.05);相较于sh-MALAT1组,sh-MALAT1+anti-miR-154-5p组的上述生物学作用均被逆转(P<0.05)。在转染MALAT1-野生型(WT)和CCND1-WT的MG-63/DOX细胞中,miR-154-5p模拟物(mimic)组的荧光素酶活性均显著低于其阴性对照组(P<0.05)。结论敲低LncRNA MALAT1可以抑制OS细胞的DOX耐药性,其机制可能是通过靶向miR-154-5p/CCND1轴实现的。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肺腺癌转移相关转录本1 微小RNA-154-5p 细胞周期蛋白d1 骨肉瘤 阿霉素 耐药性

暂未订购

HMGB1对大鼠类纤维母细胞样滑膜细胞STAT/SOCS/cyclin D1表达的影响 被引量：5

12

作者 郭惠芳 刘淑霞 +3 位作者 张玉军 彭晨星 左连富 郭建文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1208-1213,共6页

目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对大鼠滑膜细胞STAT/SOCS信号通路的调控作用。方法:将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞随机分为正常对照组和10μg/L HMGB1刺激组,分别培养6 h、12 h和24 h后,RT-PCR检测STAT1/3 mRNA的表达,Western b... 目的:探讨高迁移率族蛋白(HMGB)1对大鼠滑膜细胞STAT/SOCS信号通路的调控作用。方法:将常规培养大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞随机分为正常对照组和10μg/L HMGB1刺激组,分别培养6 h、12 h和24 h后,RT-PCR检测STAT1/3 mRNA的表达,Western blotting法检测磷酸化STAT(p-STAT)1/3和STAT1/3蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测p-STAT1/3、SOCS 1/3和cyclin D1蛋白的表达。结果:HMGB1呈时间依赖性上调STAT1 mRNA和蛋白的表达,以及cyclin D1蛋白的表达,并能明显增加p-STAT1的水平(P<0.01),但STAT3的表达以及p-STAT3的量与对照相比无明显差异。HMGB1刺激后还能明显增加细胞SOCS1的蛋白水平,但SOCS3蛋白仅于6 h呈一过性增高。结论:HMGB1能激活STAT1信号转导通路,并上调cyclin D1基因表达,这可能与HMGB1促进滑膜细胞的增殖有关。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白质1 滑膜细胞 信号转导及转录活化因子 细胞因子信号转导抑制蛋白 细胞周期蛋白d1

暂未订购

细胞周期蛋白D1特异性核酶表达载体的构建及其活性

13

作者 夏金荣 黄晓明 +1 位作者 刘乃丰 胡向阳 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第1期122-126,共5页

应用mfold程序对锤头状核酶(ribozyme,Rz)和大鼠细胞周期蛋白(cyclin)D1基因的二级结构进行分析,设计合成锤头状Rz基因,通过RT-PCR扩增获得大鼠细胞周期蛋白D1目的基因,将Rz基因和细胞周期蛋白D1基因分别克隆入载体pGEM-3Zf(+)中,体外转... 应用mfold程序对锤头状核酶(ribozyme,Rz)和大鼠细胞周期蛋白(cyclin)D1基因的二级结构进行分析,设计合成锤头状Rz基因,通过RT-PCR扩增获得大鼠细胞周期蛋白D1目的基因,将Rz基因和细胞周期蛋白D1基因分别克隆入载体pGEM-3Zf(+)中,体外转录Rz基因和靶基因并进行切割实验;将Rz基因与逆转录病毒载体pLXSN重组得到Rz真核表达载体pLXSN-Rz,将其转染入HSC-T6细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,用RT-PCR检测细胞周期蛋白D1基因的表达。结果显示:针对目的基因的832位点设计合成了Rz832,成功获得Rz832基因、细胞周期蛋白D1mRNA的体外转录载体pGEM3Zf-Rz832和pGEM3Zf-cD1,经体外转录出Rz832(105nt)及细胞周期蛋白D1mRNA(1079nt)。体外切割实验证实Rz832能够特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA,产生1014nt和65nt的切割产物,切割效率为80%。所构建的pLXSN-Rz832经酶切电泳、PCR鉴定显示,插入的Rz832序列大小约为57bp,与预期结果相同,经测序证实Rz832序列正确。转染pLXSN-Rz832的肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSCs)细胞周期蛋白D1mRNA的表达受到明显抑制,仅为对照组的42.22%(t=-193.443,P<0.01),结果表明:Rz832能够在体外特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA、并在HSC-T6细胞内有效抑制细胞周期蛋白D1基因的表达。 展开更多

关键词 核酶 细胞周期蛋白d1 体外转录 切割

在线阅读 下载PDF 职称材料

PKD1对HeLa细胞中AP1的转录激活作用

14

作者 邹志鹏 许万福 +2 位作者 冯丽 柯志勇 邓凡 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1945-1947,共3页

目的研究蛋白激酶D1(PKD1)对人HeLa细胞中AP1转录激活作用,为探讨PKD1作用的AP1靶基因的功能作用奠定基础。方法首先将对照质粒pcDNA3.1、PKD1野生型质粒(pcDNA-PKD1)或无激酶活性突变型质粒pcDNA-PKD1-DN与AP1转录活性报告质粒pAP1-lu... 目的研究蛋白激酶D1(PKD1)对人HeLa细胞中AP1转录激活作用,为探讨PKD1作用的AP1靶基因的功能作用奠定基础。方法首先将对照质粒pcDNA3.1、PKD1野生型质粒(pcDNA-PKD1)或无激酶活性突变型质粒pcDNA-PKD1-DN与AP1转录活性报告质粒pAP1-luc及内参照报告质粒pRL-SV40共转染人HeLa细胞,同时将对照siRNA(si-CTL)或PKD1 siRNA(siRNA-PKD1)与AP1转录活性报告质粒pAP1-luc及内参照报告质粒pRL-SV40也共转染人HeLa细胞。转染48h后,分别收集细胞裂解液进行Western blot检测外源性PKD1过表达或内源性PKD1敲低状况,并以Promega双报告基因分析试剂盒测定AP1荧光素酶活性,计算AP1相对转录活性。结果 Western blot证实HeLa细胞中外源性pcDNA-PKD1、pcDNA-PKD1-DN过表达,而且siRNA-PKD1明显敲低HeLa细胞中内源性PKD1表达;双色荧光素酶报告基因检测表明,与对照质粒pcDNA3.1比较,pcDNA-PKD1过表达明显增强AP1转录活性(P<0.05),相反,与pcDNA-PKD1比较,pcDNA-PKD1-DN过表达则明显降低AP1转录活性(P<0.05)。与之相符,与si-CTL比较,siRNA-PKD1对内源性PKD1敲低,也明显抑制AP1转录活性(P<0.01)。结论 PKD1表达和激酶活性增强HeLa细胞中AP1转录激活,提示PKD1可能通过AP1调控相关靶基因表达。 展开更多

关键词 蛋白激酶d1 AP1 SIRNA 转录激活

暂未订购

转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原在尖锐湿疣中的表达及其意义 被引量：1

15

作者 胡友红 《现代诊断与治疗》 CAS 2014年第8期1691-1693,共3页

目的转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原在尖锐湿疣中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测了40例尖锐湿疣(CA)组织及25例正常包皮组织中转录激活因子3(Stat 3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖性细胞核抗原(proliferati... 目的转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原在尖锐湿疣中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测了40例尖锐湿疣(CA)组织及25例正常包皮组织中转录激活因子3(Stat 3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖性细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果 Stat 3试验组阳性35例,阳性率87.5%,对照组显色10例25.0%,χ2=17.23,P<0.05。Cyclin D1试验组阳性34例,阳性率85.0%,对照组阳性9例,为36.0%,χ2=21.01,P<0.05。PCNA阳性35例,阳性率87.5%,对照组阳性14例,56.0%,χ2=11.67,P<0.05。阳性表达率差异均有统计学意义。结论转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原可能促进人乳头瘤病毒(HPV)感染细胞的增殖参与尖锐湿疣其发病机制。 展开更多

关键词 尖锐湿疣 转录激活因子 细胞周期素d1 增殖性细胞核抗原

暂未订购

当归补血汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠PKD1/NF-κB/MnSOD信号通路的影响 被引量：30

16

作者 刘娜 王杰鹏 +5 位作者 鲁辰希 李伟 王硕 方倩 方芳 方朝义 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期66-72,共7页

目的:观察当归补血汤对博莱霉素致肺纤维化模型大鼠肺组织病理及蛋白激酶D1(PKD1)/核转录因子-κB(NF-κB)/锰超氧化物歧化酶(MnSOD)介导的氧化应激通路的影响,探讨该方干预肺纤维化作用机制。方法:32只雄性SPF级SD大鼠,随机分为假手术... 目的:观察当归补血汤对博莱霉素致肺纤维化模型大鼠肺组织病理及蛋白激酶D1(PKD1)/核转录因子-κB(NF-κB)/锰超氧化物歧化酶(MnSOD)介导的氧化应激通路的影响,探讨该方干预肺纤维化作用机制。方法:32只雄性SPF级SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、当归补血汤组、泼尼松组,每组8只。除假手术组外,其余各组气管内滴注博莱霉素制备肺纤维化大鼠模型。造模24 h后,当归补血汤组给予当归补血汤水溶液(0.81 g·kg^-1)灌胃,泼尼松组给予泼尼松水溶液(0.005 g·kg^-1)灌胃,假手术组、模型组予等体积生理盐水灌胃。于用药14 d后,股动脉采血并分离血清,剖胸取肺。苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察大鼠肺组织病理改变,并行Szapiel评分和Ashcroft评分;测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测PKD1,NF-κB,MnSOD mRNA及蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组Szapiel评分和Ashcroft评分明显升高(P<0.05),血清MDA含量显著升高,SOD,CAT,GSH-Px活性显著降低,肺组织PKD1,NF-κB,MnSOD mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,当归补血汤组明显下降Szapiel评分和Ashcroft评分(P<0.05),显著降低血清MDA含量,明显升高SOD,CAT,GSH-Px活性,明显降低肺组织PKD1,NF-κB,MnSOD mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:当归补血汤可通过调节PKD1/NF-κB/MnSOD线粒体核抗氧化通路,提高机体抗氧化能力,从而减轻肺纤维化程度。 展开更多

关键词 肺纤维化 当归补血汤 氧化应激 蛋白激酶d1(PKd1)/核转录因子-κB(NF-κB)/锰超氧化物歧化酶(MnSOD)通路

原文传递

细胞周期素D1对HBV转录和复制的影响 被引量：3

17

作者 彭思雯 关贵文 +3 位作者 张婷 鲁凤民 刘佳 陈香梅 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期316-324,共9页

目的 探究细胞周期素D1(cyclin D1,基因名CCND1)对HBV复制的影响及其机制。方法 利用GSE84044数据集,采用Spearman秩相关分析HBV相关肝纤维化患者肝组织基因表达水平与血清HBV DNA载量之间的相关性。在HBV细胞复制模型中瞬时表达cyclin... 目的 探究细胞周期素D1(cyclin D1,基因名CCND1)对HBV复制的影响及其机制。方法 利用GSE84044数据集,采用Spearman秩相关分析HBV相关肝纤维化患者肝组织基因表达水平与血清HBV DNA载量之间的相关性。在HBV细胞复制模型中瞬时表达cyclin D1及cyclin D1持续激活突变体(T286A)蛋白,使用时间分辨免疫荧光及实时荧光定量PCR实验分别检测细胞培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平,Western blot检测细胞内HBV core蛋白,反转录-实时荧光定量PCR法检测细胞内HBV RNA,双荧光素酶报告基因实验检测cyclin D1对HBV基本核心启动子(BCP)活性的影响。利用GSE83148数据集,分析CCND1与HBV相关调控因子表达的相关性。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验;非正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果 在GSE84044数据中,HBV相关肝纤维化患者的肝组织中有7个细胞周期调控基因与HBV DNA载量呈显著负相关(r值均<-0.3,P值均<0.05),其中包括CCND1基因(r=-0.474,P<0.001)。外源表达cyclin D1及cyclin D1 T286A突变体能降低HBV复制细胞模型培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV DNA水平,以及细胞内core蛋白和HBV RNA水平;外源表达cyclin D1显著抑制了HBV BCP的转录活性;且慢性乙型肝炎患者肝组织中CCND1表达水平与抑制HBV复制的APOBEC3G(r=0.575,P<0.001)、SMC5(r=0.341,P<0.001)和FOXM1(r=0.333,P<0.001)表达呈显著正相关,而与HBV进入受体NTCP(r=-0.511,P<0.001)和HBV复制正向调控转录因子HNF1α(r=-0.430,P<0.001)表达呈显著负相关。在HepG2细胞中过表达cyclin D1降低HNF1α及NTCP转录水平。结论 cyclin D1抑制HBV的转录和复制,可能与其下调HNF1α及NTCP表达有关。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 细胞周期蛋白d1 病毒复制 基因转录

暂未订购

蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用 被引量：4

18

作者 牛晓璐 许万福 +4 位作者 李松玉 柯志勇 曾方银 罗深秋 邓凡 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期351-355,共5页

目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分... 目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子(1×105CFU/ml)于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc荧光素酶报告基因及内参照报告质粒海肾荧光素酶(pRL-SV40)共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果 Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激的A549细胞和HEK293细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激活活性。结论 PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。 展开更多

关键词 蛋白激酶d1 烟曲霉分生孢子 NF-ΚB 转录激活 磷酸化

暂未订购

儿童急性白血病survivin、cyclin D1基因的表达 被引量：1

19

作者 谭丽珍 刘壮 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期570-573,共4页

目的探讨基因survivin、cyclin D1的表达与儿童急性白血病(AL)的关系。方法采用RT-PCR方法对42例初发或复发AL患儿和13例完全缓解AL(AL-CR)患儿及15例非恶性疾病患儿骨髓单个核细胞进行基因survivin、cyclinD1表达的检测。结果①AL组sur... 目的探讨基因survivin、cyclin D1的表达与儿童急性白血病(AL)的关系。方法采用RT-PCR方法对42例初发或复发AL患儿和13例完全缓解AL(AL-CR)患儿及15例非恶性疾病患儿骨髓单个核细胞进行基因survivin、cyclinD1表达的检测。结果①AL组survivin、cyclinD1mRNA的阳性率分别为78.6%和42.9%,高于AL-CR组和对照组(P<0.01);完全缓解组和对照组差异无统计学意义(P<0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)组和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组之间表达差异无统计学意义。AL复发组cyclin D1 mRNA阳性率明显高于初发组。②儿童AL初发者survivin与cyclin D1的阳性表达差异无统计学意义。③cyclin D1 mRNA阳性者缓解率低。结论儿童AL中存在survivin、cyclin D1异常表达,两者阳性表达差异无统计学意义;cyclin D1高表达者可降低AL的化疗敏感性,cyclin D1对AL有判断疗效和预后的价值。 展开更多

关键词 急性白血病 SURVIVIN基因 CYCLIN d1基因 逆转录多聚酶链反应

暂未订购

STAT3、Cyclin D1在大鼠肝癌组织中的表达变化及意义 被引量：1

20

作者 买热艳木.艾尔肯 热沙来提.阿不都瓦衣特 +3 位作者 王岩蛟 依马木.买买提明 日斯拉特.艾力木 斯坎德尔.白克力 《山东医药》 CAS 2014年第24期16-18,I0001,共4页

目的观察信号转导和转录活化因子3(STAT3)和细胞周期素D1(Cyclin D1)在大鼠肝癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法将72只大鼠随机分为模型组和对照组各36只,模型组自由饮用0.1 mg/mL的二乙基亚硝胺(DEN)溶液,对照组饮用等量灭菌蒸馏... 目的观察信号转导和转录活化因子3(STAT3)和细胞周期素D1(Cyclin D1)在大鼠肝癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法将72只大鼠随机分为模型组和对照组各36只,模型组自由饮用0.1 mg/mL的二乙基亚硝胺(DEN)溶液,对照组饮用等量灭菌蒸馏水,连续饮用20周。处死大鼠取癌组织,用RT-PCR法检测STAT3、Cyclin D1 mRNA,Western blot法和免疫组化法检测STAT3、Cyclin D1蛋白。结果对照组STAT3、Cyclin D1mRNA表达水平分别为0.32±0.12、0.18±0.05,模型组分别为0.72±0.25、0.57±0.15,P均<0.05。Western blot法检测模型组STAT3、Cyclin D1蛋白表达量分别为0.58±0.25、0.65±0.14,对照组分别为0.32±0.19、0.41±0.15,P均<0.05。免疫组化法检测模型组STAT3、Cyclin D1蛋白IOD分别为2 373.87±258.79、668.44±63.10,对照组分别为487.81±55.31和138.86±31.50,P均<0.05。结论 STAT3、Cyclin D1在肝癌大鼠癌组织中表达上调,二者可促进肝癌的发生和发展。 展开更多

关键词 肝肿瘤 原发性肝细胞癌 二乙基亚硝胺 信号转导和转录活化因子3 细胞周期素d1 大鼠

暂未订购