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Bovine Bone Charcoal as Support Material for Immobilization of <em>Bacillus firmus</em>Strain 37 and Production of Cyclomaltodextrin Glucanotransferase by Batch Fermentation in a Fluidized Bed 被引量:1
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作者 Larissa Albunio Silva Bruno Cesar Bieli +3 位作者 Osvaldo Valarini Junior Graciette Matioli Gisella Maria Zanin Flavio Faria Moraes 《Advances in Chemical Engineering and Science》 2018年第1期11-25,共15页
The process described in the present work uses air supplementation in a fluidized bed reactor containing Bacillus firmus strain 37 immobilized on active bovine bone charcoal, to produce by batch fermentation the enzym... The process described in the present work uses air supplementation in a fluidized bed reactor containing Bacillus firmus strain 37 immobilized on active bovine bone charcoal, to produce by batch fermentation the enzyme CGTase (cyclomaltodextrin-glucanotransferase). Three different aeration rates were evaluated. The maximum CGTase activity was achieved after 120 hours of fermentation with aeration rate of 2 vvm and was equal to 2.48 U/mL. When 0.5 and 1 vvm were used the enzymatic activities achieved 1.1 and 0.57 U/mL, respectively. Bovine bone charcoal was characterized in terms of surface area, pore size and volume. To the best of our knowledge, the immobilization of microorganism cells in bovine bone charcoal for CGTase production has not been reported in the literature. Our results showed that fluidized bed reactor allows retaining high concentration of biomass, improving biomass-substrate contact and operation at low residence times, which resulted in improved enzyme production. Therefore, the process as proposed has great potential for industrial development. 展开更多
关键词 BACILLUS firmus Bone Charcoal Matrix Cell IMMOBILIZATION Microbial ENZYME cyclomaltodextrin Glucanotransferase
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A multi-enzymatic cascade reaction for the synthesis of bioactive C-oligosaccharides
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作者 Kebo Xie Qian Zhang +1 位作者 Fei Ye Jungui Dai 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期451-455,共5页
C-Oligosaccharides are rare in nature and possess diverse bioactivities.However,their chemical synthesis faces many challenges.In this work,enzymatic introduction of C-linked sugar chains to target aglycones was succe... C-Oligosaccharides are rare in nature and possess diverse bioactivities.However,their chemical synthesis faces many challenges.In this work,enzymatic introduction of C-linked sugar chains to target aglycones was successfully achieved by multi-enzymatic cascade reactions.A C-glycosyltransferase from Aloe barbadensis was employed to introduce the first C-linked glucose and then a cyclomaltodextrin glucanotransferase from Bacillus licheniformis was used to extend the sugar chain.A total of twenty C-oligosaccharides with 2-6 sugars were synthesized from scale-up reactions and exhibited good water solubility and sodium-dependent glucose transporter 2(SGLT2)inhibitory activity.Furthermore,a glucoamylase was used to control the length of the sugar chain and the C-maltosides were efficiently synthesized.These findings not only expanded the structural diversity of C-oligosaccharides,but also provided a strategy for the modification of C-glycoside drugs to improve the druggability. 展开更多
关键词 C-Oligosaccharides C-Glycosyltransferase cyclomaltodextrin glucanotransferase GLUCOAMYLASE Enzymatic synthesis SGLT2 inhibitory activity
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一株产环糊精葡萄糖基转移酶的地衣芽孢杆菌的选育、产酶条件及酶学特性 被引量:20
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作者 陈龙然 袁康培 +1 位作者 冯明光 王雅芬 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期97-101,共5页
从土壤分离物中筛选到一株环糊精葡萄糖基转移酶 (CGTase)产生菌 4 0 3,96h发酵酶活为 0 95U mL。经紫外辐射和硫酸二乙酯复合诱变而获得突变株CLS4 0 3,96h发酵酶活达 1 36U mL ,提高 4 3%。该突变菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌 (Bacillus... 从土壤分离物中筛选到一株环糊精葡萄糖基转移酶 (CGTase)产生菌 4 0 3,96h发酵酶活为 0 95U mL。经紫外辐射和硫酸二乙酯复合诱变而获得突变株CLS4 0 3,96h发酵酶活达 1 36U mL ,提高 4 3%。该突变菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis) ,产CGTase的最佳碳源为可溶性淀粉 ,最佳氮源为硝酸铵 ,最适初始pH为 6 5 ,最适培养温度为 35℃ ,发酵期间CGTase的产生高峰 (第 96h)滞后于菌体生物量高峰 (第 4 8h) 2d。菌株所产CGTase的最适反应pH为 6 0 ,最适温度为 5 5℃ ,在pH 6 0~ 7 5间和 5 0℃下保持 1h后的剩余酶活均达 90 %以上 ;酶液中适量添加Ca2 + 能大幅提高CGTase在 5 5℃下的稳定性。经高效液相色谱分析 ,CGTase作用于淀粉后的产物以α 环糊精为主 ,β 环糊精为次 ,二者比例为 2 4 7∶1,环糊精总产率达 2 9 8% ,但产物中不含γ 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 菌种选育 环糊精葡萄糖基转移酶 酶学特性
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高产环糊精葡萄糖基转移酶的枯草芽孢杆菌选育、产酶与酶学特性 被引量:13
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作者 胡静 陈育如 +1 位作者 魏霞 刘友芬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期97-102,共6页
选育了一株高产环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)的芽孢杆菌Sx菌株,经16SrRNA测序分析,结合菌体及菌落的形态特征,鉴定该茵株为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。对其产酶条件与酶学特性进行了研究。结果表明,以1g/dL玉米淀粉和2g... 选育了一株高产环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)的芽孢杆菌Sx菌株,经16SrRNA测序分析,结合菌体及菌落的形态特征,鉴定该茵株为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。对其产酶条件与酶学特性进行了研究。结果表明,以1g/dL玉米淀粉和2g/dL豆粕粉为碳氮源,pH6.5,30℃,220r/min,60h的条件下,菌株所产CGTase酶活性可达5596U/mL;该酶在30~50℃,pH5.5-9.0下保持稳定,在50℃,180r/min,PH6.5,CGTase酶活力为1107U/mL的条件下对20mg/mL甜菊甙转化48h,甜菊甙溶液中的莱鲍迪甙与甜菊甙的比值(RA/SS)从转化前的0.45上升到0.53。 展开更多
关键词 环糊精葡萄糖基转移酶 甜菊甙 莱鲍迪甙 16S RRNA 枯草芽孢杆菌
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环糊精及环糊精葡萄糖基转移酶特性研究 被引量:5
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作者 王月明 孙万刚 +4 位作者 张斌 秦岭 谷卫刚 刘林臣 赵风鸣 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第27期8430-8431,8434,共3页
环糊精以其独特的理化特性广泛应用于制药、食品、农业及化妆品等领域,环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)是合成环糊精的关键酶。综述了环糊精葡萄糖基转移酶的筛选策略、CGTase的定位、催化机制、环糊精的生产过程及其在生产中的具体应用。
关键词 环糊精 葡萄糖基转移酶 催化机制
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CGTase合成γ-环糊精的酶促反应条件优化 被引量:1
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作者 曹新志 刘芳 +1 位作者 明红梅 金征宇 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第2期196-198,215,共4页
采用筛选到的一株嗜碱芽孢杆菌,研究它所产生的环糊精糖基转移酶生产环糊精的工艺条件,重点探讨酶促反应条件对环糊精糖基转移酶生产γ-环糊精的影响。结果表明:环糊精糖基转移酶生产γ-环糊精的最佳工艺为反应体系的pH 8.0,温度60℃,... 采用筛选到的一株嗜碱芽孢杆菌,研究它所产生的环糊精糖基转移酶生产环糊精的工艺条件,重点探讨酶促反应条件对环糊精糖基转移酶生产γ-环糊精的影响。结果表明:环糊精糖基转移酶生产γ-环糊精的最佳工艺为反应体系的pH 8.0,温度60℃,环糊精糖基转移酶的酶量500U/g.淀粉,甘草酸浓度2%,淀粉的DE值6~11,在该条件下制备的产品得率最高;蕉藕淀粉和木薯淀粉在生产γ-环糊精时是环糊精糖基转移酶比较合适的底物;普鲁蓝酶对γ-环糊精的产量增加作用有限。 展开更多
关键词 嗜碱芽孢杆菌 环糊精糖基转移酶 Γ-环糊精
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一株枯草芽孢杆菌环状糊精葡糖基转移酶的提取、纯化和性质 被引量:1
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作者 朱德艳 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期83-87,共5页
枯草芽孢杆菌SC3-2是一株高产环状糊精葡糖基转移酶(CGTase)的菌株,将其发酵液通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-纤维素(DEAE-cellulose-52)离子交换层析和Sephadex S-200凝胶层析进行纯化。经过几步纯化后CGTase比活力达到4 923 U/mg... 枯草芽孢杆菌SC3-2是一株高产环状糊精葡糖基转移酶(CGTase)的菌株,将其发酵液通过(NH4)2SO4分级沉淀、DEAE-纤维素(DEAE-cellulose-52)离子交换层析和Sephadex S-200凝胶层析进行纯化。经过几步纯化后CGTase比活力达到4 923 U/mg,纯化倍数达11.37倍,回收率为20%。通过对酶性质的测定,结果表明:在pH6.5,30℃条件下,菌种产酶量最高;在pH5.5-7.5,40℃以内该酶较为稳定;Mn^2+和Ca^2+对酶活具有一定的促进作用;EDTA、Na^+、Fe^3+、Cr^3+、Zn^2+、Cu^2+对酶活影响不大;SDS、Ag^+和Hg^+使酶几乎失去活性。本研究为环状糊精葡糖基转移酶的应用提供了依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 环状糊精葡糖基转移酶 纯化与性质
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嗜碱细菌环状糊精葡糖基转移酶的纯化和性质 被引量:8
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作者 张庆波 严自正 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期98-102,共5页
嗜碱细菌52—2除去菌体的培养液经硫酸铵沉淀和DEAE-纤维素离子交换柱层析,得到凝胶电泳均一的环状糊精葡糖基转移酶,纯化了11.5倍,酶活力回收为5.7%。用浓度梯度PAGE测分子量为151700。酶反应最适温度为65℃,50℃以下比较稳定。... 嗜碱细菌52—2除去菌体的培养液经硫酸铵沉淀和DEAE-纤维素离子交换柱层析,得到凝胶电泳均一的环状糊精葡糖基转移酶,纯化了11.5倍,酶活力回收为5.7%。用浓度梯度PAGE测分子量为151700。酶反应最适温度为65℃,50℃以下比较稳定。酶反应最适pH为7.0,在6.0~9.0范围内稳定。Zn2+、Hg2+、Pb2+、Al3+、Cu2+、Ag+和Fe2+强烈抑制酶活力。紫外光谱在270nm和244nm处分别有最大和最小吸收。荧光光谱的最大激发波长和发射波长分别为283nm和335nm。用NBS、NEM、NAI、DEP和EDC对酶进行了化学修饰,初步推测组氨酸和色氨酸残基可能为酶活力必需基因,羧基与酶活力有一定关系。 展开更多
关键词 嗜碱细菌 环糊精葡糖基转移酶 纯化与性质
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高产β-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的筛选、产酶条件优化及酶学性质研究 被引量:5
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作者 张兴荣 李峰 +4 位作者 贺连智 徐慧 谭少君 杨丹 黄艳红 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第11期85-91,共7页
采用透明圈法从酱醪中筛选高产β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase)菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,采用单因素及响应面试验对该菌的产酶培条件进行优化,分析发酵温度及时间对产酶的影响,并对该菌所产的β-CGTase... 采用透明圈法从酱醪中筛选高产β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase)菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,采用单因素及响应面试验对该菌的产酶培条件进行优化,分析发酵温度及时间对产酶的影响,并对该菌所产的β-CGTase酶学性质进行研究。结果表明,从酱醪中筛选得到一株高产β-CGTase的菌株D5,被鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae),其产β-CGTase的最佳培养基组成为淀粉2.5%、酵母膏1.85%、Na2CO30.35%、K2HPO40.02%、MgSO4·7H2O 0.02%,最佳发酵温度为30℃,发酵时间为72 h,在此最优发酵条件下,β-CGTase活力为3208.01 U/mL。β-CGTase的最适反应温度为50℃、最适反应pH值为8.5,除Ca^2+外,Mn^2+、Fe^2+、Cu^2+、Zn^2+对该酶的活力有抑制作用,其抑制程度的大小为Zn^2+>Mn^2+>Cu^2+>Fe^2+。 展开更多
关键词 酱醪 β-环糊精葡萄糖基转移酶 筛选 鉴定 响应面法 酶学性质
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