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牛结节性皮肤病病毒Cycleave PCR检测方法的建立 被引量：5
1
作者 南文龙 巩明霞 +7 位作者 陆游 李金明 王永杰 哈达 李林 杜秋明 陈义平 吴晓东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1145-1148,1174,共5页
将GenBank中牛结节性皮肤病病毒与同属的山羊痘病毒和绵羊痘病毒全基因组进行比较,筛选设计特异性引物和探针,建立Cycleave PCR检测方法。结果显示,建立的方法在40 min内即可特异性地检出牛结节性皮肤病病毒核酸,与山羊痘病毒、绵羊痘... 将GenBank中牛结节性皮肤病病毒与同属的山羊痘病毒和绵羊痘病毒全基因组进行比较,筛选设计特异性引物和探针,建立Cycleave PCR检测方法。结果显示,建立的方法在40 min内即可特异性地检出牛结节性皮肤病病毒核酸,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒、口蹄疫病毒、牛病毒性腹泻/黏膜病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应,该方法的最低检出限为1.13拷贝/μL。平行检测89份临床样本,与国标荧光定量PCR方法相比,本方法敏感性100.0%,特异性90.0%,总符合率为95.5%。结果表明,本试验建立的Cycleave PCR检测方法敏感、特异且操作简便,适用于牛结节性皮肤病病毒的高通量、快速检测。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 cycleave pcr ORF024基因
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羊痘病毒属病毒通用Cycleave PCR检测方法的建立 被引量：1
2
作者 南文龙 巩明霞 +8 位作者 陆游 李金明 王永杰 哈达 吴发兴 李林 王英丽 陈义平 吴晓东 《中国动物检疫》 CAS 2022年第8期107-111,共5页
为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在4... 为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在40 min内即可检出CaPVs,与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应;灵敏性结果显示,最低检出限为4.98 copies/μL;重复性结果显示,批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现,该方法与世界动物卫生组织(WOAH)推荐的常规PCR方法相比,敏感性为100%,特异性为91.55%,总符合率为95.42%。以上结果表明,本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好,且操作简便,适用于CaPVs的高通量、快速检测。 展开更多
关键词 羊痘病毒属病毒 cycleave pcr 检测
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鸭瘟病毒Cycleave荧光PCR检测方法的建立
3
作者 于新友 李天芝 苗立中 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期106-110,共5页
为建立一种敏感、快速和特异的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,本研究根据NCBI收录的DPV UL6基因序列,设计了1对特异性引物和1条Cycling探针,通过优化反应条件,建立了检测DPV的Cycleave荧光PCR检测方法。结果显示:该方法特异性高,不与其他常见... 为建立一种敏感、快速和特异的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,本研究根据NCBI收录的DPV UL6基因序列,设计了1对特异性引物和1条Cycling探针,通过优化反应条件,建立了检测DPV的Cycleave荧光PCR检测方法。结果显示:该方法特异性高,不与其他常见鸭病病原体发生交叉反应,检测DPV灵敏度可达6.5拷贝/μL,批内与批间的变异系数均小于2%。研究表明,建立的DPV Cycleave荧光定量PCR方法特异性高、敏感性高、重复性好,可用于临床样品检测,为鸭瘟的诊断和防控奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 Cycling探针 cycleave荧光pcr 检测
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