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茶树光敏色素互作因子CsPIF3a的克隆及其与光温逆境的响应
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作者 班秋艳 赵鑫月 +7 位作者 迟文静 黎俊生 王琼 夏瑶 梁丽云 贺巍 李叶云 赵广山 《生物技术通报》 北大核心 2025年第4期256-265,共10页
【目的】PIFs(phytochrome interacting factors)是光敏色素介导光温信号中的核心成员。研究茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)PIF3的功能,为利用光信号途径避免或缓解逆境对茶树造成的危害提供重要的理论指导。【方法】利用同源克... 【目的】PIFs(phytochrome interacting factors)是光敏色素介导光温信号中的核心成员。研究茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)PIF3的功能,为利用光信号途径避免或缓解逆境对茶树造成的危害提供重要的理论指导。【方法】利用同源克隆方法从茶树中克隆CsPIF3a,并对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析其在不同组织及不同光温处理的表达差异,同时,利用烟草瞬时表达和酵母双杂技术观察其蛋白定位和转录活性。【结果】CsPIF3a开放阅读框长度为2163 bp,编码721个氨基酸,蛋白分子相对质量为76.97 kD,理论等电点为5.70,具有亲水性;系统发育树分析表明,CsPIF3a与毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Bentham.)关系最近;CsPIF3a蛋白含有1个bHLH结构域、1个APB结构域和1个APA结构域;二级结构中含α-螺旋18.17%、β-折叠结构6.80%、β-转角1.53%、无规则卷曲73.51%,此外,还含无序化区域46.87%;CsPIF3a蛋白被定位于细胞核中,并具有转录活性。RT-qPCR分析表明,CsPIF3a在老叶和茎中表达水平较高,响应温度胁迫表达,且表达量与光照强度相关。【结论】CsPIF3a位于细胞核中,具有转录活性。CsPIF3a响应温度胁迫,表达量与光照强度有关。 展开更多
关键词 cspif3a 基因克隆 生物信息学分析 亚细胞定位 转录活性 表达分析
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