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Transformation of Cabbage(Brassica oleracea L.var.capitata) with Bt cry1Ba3 Gene for Control of Diamondback Moth 被引量:11
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作者 YI Deng-xia CUI Lei LIU Yu-mei ZHUANG Mu ZHANG Yang-yong FANG Zhi-yuan YANG Li-mei 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2011年第11期1693-1700,共8页
To obtain transgenic cabbage line with broad insect resistance, a new synthetic Bacillus thuringiensis crylBa3 gene was introduced into white cabbage via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation and 37 transf... To obtain transgenic cabbage line with broad insect resistance, a new synthetic Bacillus thuringiensis crylBa3 gene was introduced into white cabbage via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation and 37 transformants were obtained. Polymerase chain reaction (PCR) and Southern blot analyses confirmed that crylBa3 was successfully inserted into the genome of cabbage. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) demonstrated that crylBa3 was expressed. Western blot results confirmed the production of insecticidal protein encoded by crylBa3. Insect bioassays showed that transgenic cabbages effectively controlled both susceptible and CrylAc-resistant diamondback moth (DBM) larvae. 展开更多
关键词 Bacillus thuringiensis crylba3 CABBAGE diamondback moth resistance
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转cry3Aa7和cry1Ba3双价基因抗虫马铃薯和工程菌的研制 被引量:1
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《农业科技通讯》 北大核心 2003年第1期40-40,共1页
马铃薯甲虫是世界上著名的毁灭性检疫害虫,常年造成马铃薯减产30%-50%,发生严重年份损失达90%以上,培育转基因抗虫马铃薯对我国马铃薯生产具有极其重要的意义。 本研究克隆了对鞘翅目害虫高毒力的cry3A基因和对鞘翅目、鳞翅目害虫高... 马铃薯甲虫是世界上著名的毁灭性检疫害虫,常年造成马铃薯减产30%-50%,发生严重年份损失达90%以上,培育转基因抗虫马铃薯对我国马铃薯生产具有极其重要的意义。 本研究克隆了对鞘翅目害虫高毒力的cry3A基因和对鞘翅目、鳞翅目害虫高毒的cryIB基因。 展开更多
关键词 cry3Aa7 crylba3 双价基因 抗虫马铃薯 工程菌 转基因
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苏云金芽胞杆菌Cry1Ba3蛋白定点突变对杀小菜蛾活性的影响 被引量:2
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作者 林承喜 束长龙 +3 位作者 翟元娜 林毅 宋福平 张杰 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期75-81,101,共8页
Cry1Ba3是由本实验室发掘的对小菜蛾有高毒力的杀虫晶体蛋白。为了寻找对杀虫活性有重要影响的氨基酸,为杀虫机理研究和改造杀虫蛋白提供理论依据,本研究利用Ple Bio-Informatique Lyonnais数据库对Cry1Ba3的二级结构进行模拟;采用Bio... Cry1Ba3是由本实验室发掘的对小菜蛾有高毒力的杀虫晶体蛋白。为了寻找对杀虫活性有重要影响的氨基酸,为杀虫机理研究和改造杀虫蛋白提供理论依据,本研究利用Ple Bio-Informatique Lyonnais数据库对Cry1Ba3的二级结构进行模拟;采用BioEdit软件分析Cry1Ba3的疏水区;将Cry1Ba3与Cry1Aa1、Cry2Aa1、Cry3Aa1以及Cry4Ba1进行多序列比对,从而确定了20个氨基酸突变位点。利用半重叠引物PCR的方法对Cry1Ba3进行定点突变,将突变体在大肠杆菌BL21中进行诱导表达。通过浸叶法对各个突变蛋白杀小菜蛾的生物活性进行测定。获得的20个Cry1Ba3突变体均能在大肠杆菌BL21中表达,并以包涵体形式存在。杀虫活性测定结果表明M6(R192L)、M10(W303A)、M19(H485G)对小菜蛾的活性明显降低,二级结构预测表明活性降低的突变蛋白的构象均发生明显变化,其余17种突变蛋白的活性和二级结构都没有明显变化。说明第192位的精氨酸、第303位的色氨酸和第485位的组氨酸对Cry1Ba3的杀小菜蛾活性有重要影响,上述3个位点氨基酸突变引起的蛋白活性减低可能与毒素的空间结构变化有关。 展开更多
关键词 Cry1Ba3 定点突变 生物活性测定 小菜蛾
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