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IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响
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作者 郭伟崇 李晨 +4 位作者 胡明振 樊琳 蔡晓航 谭鑫 马金霞 《基础医学与临床》 2026年第2期177-185,共9页
目的探讨IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响。方法体外培养H9c2细胞以及敲低和过表达IKKε的H9c2细胞,建立低氧损伤的H9c2模型,并将细胞分为对照组、急性低氧组、IKKε过表达组、IKKε敲低组、急性低氧+IKKε过表达组、急性... 目的探讨IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响。方法体外培养H9c2细胞以及敲低和过表达IKKε的H9c2细胞,建立低氧损伤的H9c2模型,并将细胞分为对照组、急性低氧组、IKKε过表达组、IKKε敲低组、急性低氧+IKKε过表达组、急性低氧+IKKε敲低组。CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性,Lyso-Tracker检测溶酶体酸化水平,免疫荧光检测Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、IL-1β表达,ELISA检测IL-1β浓度,Western blot检测IKKε、自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3、p62)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Caspase-3、Bax)表达。结果与对照组相比,急性低氧组的H9c2心肌细胞活力减弱,LDH活性明显升高,溶酶体酸化水平明显降低,自噬增强,凋亡增加;与急性低氧组相比,急性低氧+IKKε敲低组H9c2心肌细胞活力增强,LDH活性明显降低,自噬增强,凋亡减少,炎性反应减弱,急性低氧+IKKε过表达组表现与急性低氧+IKKε敲低组相反的结果。结论敲低IKKε可减轻低氧诱导的H9c2心肌细胞损伤,其机制可能与增强自噬、减少凋亡、减弱炎性反应有关。 展开更多
关键词 IKKε激酶 自噬 凋亡 心肌细胞低氧损伤 h9c2细胞
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象草C2H2基因家族鉴定及表达分析
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作者 杨丹 靳雅荣 +8 位作者 毛春力 王碧娴 张雅宁 杨智怡 周芷瑶 杨锐鸣 范恒睿 黄琳凯 严海东 《生物技术通报》 北大核心 2026年第1期251-261,共11页
【目的】鉴定象草(Cenchrus purpureus)C2H2型锌指蛋白基因家族成员,探究其在低温胁迫下的调控作用,为解析C2H2转录因子的功能机制奠定基础。【方法】基于象草全基因组数据,利用生物信息学方法系统鉴定C2H2基因家族成员,结合转录组数据... 【目的】鉴定象草(Cenchrus purpureus)C2H2型锌指蛋白基因家族成员,探究其在低温胁迫下的调控作用,为解析C2H2转录因子的功能机制奠定基础。【方法】基于象草全基因组数据,利用生物信息学方法系统鉴定C2H2基因家族成员,结合转录组数据及RT-qPCR分析了象草C2H2在低温胁迫下的表达情况,并通过酿酒酵母异源表达验证关键基因功能。【结果】在象草中鉴定出144个CpC2H2基因,同时通过系统进化分析发现其可以分为10个亚组。基因结构与保守基序分析表明,同亚组成员的基因结构与保守基序呈现高度保守性;顺式作用元件分析表明,CpC2H2成员的启动子区域有65个携带低温应答相关顺式调控元件。CpC2H2基因家族的表达分析表明,该家族基因在象草中展现出显著的组织表达特异性,其中CpC2H2-33、CpC2H2-107、CpC2H2-108和CpC2H2-131在低温胁迫下显著上调,且通过酿酒酵母异源表达发现这些基因可显著增强酵母的低温耐受性。【结论】共鉴定出144个象草C2H2基因,该家族成员具有显著的组织特异性和低温胁迫表达差异性,其中CpC2H2-33/107/108/131可增强酵母的低温耐受性,暗示其可能在象草低温胁迫响应中发挥关键作用,为深入探讨C2H2家族基因的功能提供有价值的信息。 展开更多
关键词 象草 c2h2基因家族 低温胁迫 生物信息学
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梅花C2H2-ZFP基因家族鉴定及低温应答模式分析
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作者 袁重阳 郭娜娜 +3 位作者 陈可 李雪 张启翔 郑唐春 《河北农业大学学报》 北大核心 2026年第1期46-58,67,共14页
锌指蛋白(zinc-finger protein,ZFP)作为真核生物中重要的转录因子家族,广泛参与植物逆境响应,其中C2H2型ZFP在低温胁迫中具有潜在调控功能。本研究通过生物信息学方法对梅花C2H2-ZFP基因家族进行全基因组鉴定,并分析其进化关系、基因... 锌指蛋白(zinc-finger protein,ZFP)作为真核生物中重要的转录因子家族,广泛参与植物逆境响应,其中C2H2型ZFP在低温胁迫中具有潜在调控功能。本研究通过生物信息学方法对梅花C2H2-ZFP基因家族进行全基因组鉴定,并分析其进化关系、基因结构、保守基序、染色体分布、共线性及启动子顺式作用元件,并结合转录组与qRT-PCR验证其表达模式,筛选与低温应答相关的候选基因。结果表明:梅花全基因组中鉴定出56个PmC2H2-ZFPs,不均匀分布于7条染色体;系统进化分析将其分为3个亚家族;亚细胞定位预测显示该家族成员主要定位于细胞核;启动子顺式元件分析表明PmC2H2-ZFPs含有多种激素响应元件和胁迫响应元件,其中18个成员含有低温响应元件。PmC2H2-ZFPs在梅花不同器官、不同温度处理下呈现组织特异性表达,PmZFP18在各检测组织中均有表达,而PmZFP03/11/37/44等在根中高表达,PmZFP18/49在茎中表达较高;季节动态表达分析表明PmZFP03/11/18/44在冬季表达量最高。人工低温处理下,PmZFP03/11表达变化显著,PmZFP08/16的表达随冷处理时间延长呈持续增强趋势,表明这些家族成员在梅花低温胁迫响应中起关键作用。该研究结果为深入解析梅花C2H2型ZFP家族成员在低温胁迫中的功能提供了理论基础,为梅花抗寒分子育种提供了候选基因资源。 展开更多
关键词 梅花 c2h2型ZFP 低温胁迫 基因家族分析 表达模式
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C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定
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作者 冯晴晴 陈思沅 +8 位作者 潘静芸 王瑞婷 张纸麟 曾莹 廖俊斌 陈锦贤 陈赣英 林丹蓉 朱伟 《中国病理生理杂志》 北大核心 2026年第2期409-416,共8页
目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微... 目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微镜观察细胞形态变化,并通过油红O染色、免疫荧光法、线粒体探针法以及线粒体电镜技术对分化细胞进行鉴定分析。结果:未分化的C3H10T1/2细胞形态多样,具有突触伸展特征;分化后的细胞逐渐变为圆形或椭圆形,形成环形脂滴;未分化组细胞形态无明显变化。油红O染色显示,未分化组细胞基本无染色,而分化组中约90%的细胞红染,脂滴分布于细胞核周围,吸光度值显著升高(P<0.05)。分化组解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)、过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)辅激活因子1α(PPARγco-activator-1α,PGC-1α)、PPARγ和转录因子PRDM16的相对荧光强度和蛋白表达量显著高于未分化组(P<0.05),且线粒体活性增强。结论:本研究成功诱导C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞,结合细胞形态观察、关键蛋白表达检测及线粒体功能分析进行综合评估,证实了细胞的有效分化及成熟棕色脂肪细胞的功能特性。 展开更多
关键词 c3h10T1/2细胞 棕色脂肪细胞 细胞培养 细胞分化 鉴定
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肝素通过调控线粒体功能减轻氧糖剥夺/复糖复氧诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡
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作者 王法 李小琴 +3 位作者 饶若曦 玄润江 叶青山 王云 《宁夏医学杂志》 2026年第1期1-6,共6页
目的探讨肝素对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞随机分为对照组(NC组)、氧糖剥夺/复糖复氧组(OGD/R组)及肝素干预组(OGD/R+HP组),经氧糖剥夺(OGD)12 h后恢复糖和氧供应2... 目的探讨肝素对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞随机分为对照组(NC组)、氧糖剥夺/复糖复氧组(OGD/R组)及肝素干预组(OGD/R+HP组),经氧糖剥夺(OGD)12 h后恢复糖和氧供应2 h,模拟缺血再灌注损伤。采用CCK-8实验评估细胞存活率并确定最佳肝素剂量;采用TUNEL染色法分析细胞凋亡率;采用JC-1、活性氧(ROS)及三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒分析线粒体膜电位、ROS水平和ATP含量;采用线粒体膜通透性转换孔(mPTP)试剂盒评估线粒体通透性转换孔开放程度;采用Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bax、半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)表达情况。结果肝素最佳浓度为2.0 U/100μL,能够显著提高细胞存活率,降低细胞凋亡率,改善线粒体膜电位,减少ROS生成,提高ATP水平,减少线粒体通透性转换孔的开放,下调Bax表达,上调Bcl-2和Caspase-3的表达。结论肝素通过调控线粒体功能,从而减轻OGD/R诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡;本研究为肝素在心肌缺血再灌注损伤中的潜在应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 肝素 大鼠h9c2心肌细胞 氧糖剥夺/复糖复氧 线粒体功能 细胞凋亡
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6-BA拮抗H2O2诱导下黄瓜离体子叶的衰老研究
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作者 黄艺颖 朱鑫雨 黄胜琴 《种子科技》 2026年第1期22-25,共4页
以黄瓜子叶为材料,探究了外源H2O2诱导植物衰老的机制及植物生长调节剂6-苄基腺嘌呤(6-BA)对H2O2的拮抗作用。研究发现,3%H2O2处理3 d是黄瓜子叶衰老的关键时期,H2O2通过促进细胞中超氧阴离子和内源H2O2的产生与积累导致衰老,而6-BA能... 以黄瓜子叶为材料,探究了外源H2O2诱导植物衰老的机制及植物生长调节剂6-苄基腺嘌呤(6-BA)对H2O2的拮抗作用。研究发现,3%H2O2处理3 d是黄瓜子叶衰老的关键时期,H2O2通过促进细胞中超氧阴离子和内源H2O2的产生与积累导致衰老,而6-BA能有效缓解并逆转H2O2引发的衰老过程,6-BA质量浓度为10 mg/L时,其延缓细胞衰老的效果最为显著。研究结果为作物衰老调控提供了新的理论依据,并为农业生产中作物早衰防控提供了技术参考。 展开更多
关键词 黄瓜子叶 衰老过程 h2O2 6-苄基腺嘌呤(6-BA)
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植物C2H2锌指蛋白响应盐胁迫的研究进展
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作者 任凡 《林业世界》 2026年第1期145-152,共8页
土壤盐渍化是影响农林业资源生产力的主要原因之一,盐胁迫主要通过引发离子危害、渗透胁迫和次生胁迫等方式,对植物的生产发育、产量、代谢等方面产生严重的迫害。在长期的自然选择过程中,植物形成了多层次的适应逆境胁迫机制,包括清除... 土壤盐渍化是影响农林业资源生产力的主要原因之一,盐胁迫主要通过引发离子危害、渗透胁迫和次生胁迫等方式,对植物的生产发育、产量、代谢等方面产生严重的迫害。在长期的自然选择过程中,植物形成了多层次的适应逆境胁迫机制,包括清除活性氧、调节信号激素、维持细胞内离子平衡、参与激素传导等。本文综述盐胁迫对植物的影响、植物对盐胁迫的响应,锌指蛋白转录因子、并着重分析有关植物C2H2锌指蛋白的耐盐方面机理和相关基因的的分子研究进展,为改善盐碱地现状和耐盐育种提供一定的参考。 展开更多
关键词 c2h2 盐胁迫 耐盐机理 分子基因 研究进展
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SH3BGRL的表达对AngⅡ诱导的H9C2心肌细胞肥大的影响
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作者 高润泽 魏小茗 +3 位作者 韩婉婷 苏莹 彭铁 朱丹 《湖北科技学院学报(医学版)》 2026年第1期44-48,共5页
目的 探讨SH3域结合谷氨酸丰富蛋白样蛋白(SH3BGRL)的表达水平对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法 通过构建H9C2心肌细胞肥大模型,运用Western blot和RT-PCR技术分别检测SH3BGRL水平,RT-PCR技术检测心肌肥大相关标志... 目的 探讨SH3域结合谷氨酸丰富蛋白样蛋白(SH3BGRL)的表达水平对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法 通过构建H9C2心肌细胞肥大模型,运用Western blot和RT-PCR技术分别检测SH3BGRL水平,RT-PCR技术检测心肌肥大相关标志基因ANP、BNP和β-MHC的表达情况。结果 过表达SH3BGRL后,心肌肥大相关标志基因的mRNA表达水平升高(P<0.05);而沉默SH3BGRL后,mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论 SH3BGRL的表达水平与心肌肥大标志基因的表达呈正相关,有望成为治疗心肌肥大的潜在靶点,为深入研究SH3BGRL在心脏中的功能奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 Sh3域结合谷氨酸丰富蛋白样蛋白 心肌肥大 转染 h9c2细胞
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丹酚酸B介导Elovl6/Echs1/Acot1通路调节脂肪酸代谢减轻H9c2细胞OGD/R损伤 被引量:1
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作者 曹策 宋鉴书 +5 位作者 杨丽丽 李浩然 刘子馨 李磊 付建华 刘建勋 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期482-490,共9页
目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)抗H9c2细胞氧糖剥夺/再复(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)损伤机制。方法CCK-8筛选SalB对OGD/R损伤H9c2细胞保护浓度;试剂盒检测SalB对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,L... 目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)抗H9c2细胞氧糖剥夺/再复(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)损伤机制。方法CCK-8筛选SalB对OGD/R损伤H9c2细胞保护浓度;试剂盒检测SalB对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)的影响;转录组测序探索SalB对OGD/R损伤H9c2作用机制;分子对接检测SalB和差异蛋白结合情况;ELISA法检测脂肪酸含量;RT-qPCR和Western blot验证差异基因表达水平;孟德尔随机化验证SalB作用靶点与HF因果关系。结果与模型组相比,SalB可保护OGD/R损伤后H9c2细胞,且明显降低CK、LDH和AST含量;转录组筛选差异基因100个,涉及脂肪酸延长、癌症中心碳代谢、色氨酸代谢通路;分子对接显示SalB与差异蛋白具有良好结合能;核心基因Elovl6、Echs1、Acot1 mRNA和蛋白表达与转录组一致;SalB可降低OGD/R损伤后脂肪酸含量;孟德尔随机化表明SalB可调节脂肪酸代谢,降低HF风险。 结论 SalB下调Elovl6、Echs1、Acot1表达水平,通过脂肪酸代谢通路保护OGD/R损伤后H9c2细胞。 展开更多
关键词 丹酚酸B 转录组高通量测序 h9c2心肌细胞 OGD/R 缺血/再灌注损伤 脂肪酸代谢
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C_2H_6/CO_2组分构成对瓦斯着火延迟时间的影响规律研究 被引量:2
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作者 贾宝山 李春苗 +3 位作者 胡如霞 金珂 李守国 李宗翔 《火灾科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-13,共13页
为进一步研究多种不同性质的气体对瓦斯着火过程的影响,采用CHEMKIN-PRO Release软件,选择CH_4燃烧化学反应机理USC Mech 2.0模型对不同组分构成的C_2H_6/CO_2与甲烷混合气体进行数值模拟,然后分析不同组分下瓦斯着火延迟时间的变化趋势... 为进一步研究多种不同性质的气体对瓦斯着火过程的影响,采用CHEMKIN-PRO Release软件,选择CH_4燃烧化学反应机理USC Mech 2.0模型对不同组分构成的C_2H_6/CO_2与甲烷混合气体进行数值模拟,然后分析不同组分下瓦斯着火延迟时间的变化趋势,并利用SENKIN程序对其进行敏感性分析。计算结果表明:当C_2H_6百分比小于CO_2百分比时,随着CO_2百分比的增加,瓦斯着火延迟时间略有增加,且其在T=1200K下延长了17.0%,在T=2200K下延长了8.4%,同时抑制CH_4生成的关键反应步敏感性系数下降幅度略大,其协同抑制瓦斯爆炸;当C_2H_6百分比大于CO_2百分比时,随着C_2H_6百分比的增加,瓦斯着火延迟时间大幅缩短,且其在T=1200K下缩短了63.7%,在T=2200K下缩短了35.5%,同时促进CH_4生成的关键反应步敏感性系数下降幅度大,其协同促进瓦斯爆炸。 展开更多
关键词 c2h6/co2组分构成 着火延迟时间 关键反应步 敏感性系数 数值模拟
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022Cr19Ni10不锈钢与H62黄铜材料焊接工艺试验研究
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作者 杨林杰 袁野 +6 位作者 刘铭跃 陈叙江 张冬梅 曾敬山 马锐 赵立龙 杨明 《热加工工艺》 北大核心 2025年第11期101-107,共7页
某试验件采用022Cr19Ni10不锈钢和H62黄铜异种材料焊接而成。在分别采用锡黄铜、硅青铜焊材进行焊接试验时,由于材料的化学成分不同、晶体结构的各向异性,热影响区受Cu_(2)O的影响,导致焊缝出现裂纹和气孔缺陷。采用铝镍青铜焊材进行了0... 某试验件采用022Cr19Ni10不锈钢和H62黄铜异种材料焊接而成。在分别采用锡黄铜、硅青铜焊材进行焊接试验时,由于材料的化学成分不同、晶体结构的各向异性,热影响区受Cu_(2)O的影响,导致焊缝出现裂纹和气孔缺陷。采用铝镍青铜焊材进行了022Cr19Ni10不锈钢/H62黄铜对接结构的焊接工艺试验,使022Cr19Ni10不锈钢与H62黄铜之间相互熔合,解决焊缝金属晶体结构受Cu_(2)O影响形成的气孔和裂纹问题;结合脉冲TIG焊接方法,以合适的焊接参数控制焊接过程中的电弧张力,解决异种材料之间无法熔融焊接及Cr_(23)C_(6)造成的晶间腐蚀问题。对焊接试样分别进行射线检测、拉伸、弯曲力学试验、显微组织观察、能谱分析以及晶间腐蚀试验。结果表明:焊缝显微组织晶粒细化,焊接试样的各项力学性能指标优良,试验件具有良好的耐晶间腐蚀性能。 展开更多
关键词 022cr19Ni10不锈钢 h62黄铜 cu_(2)O cr_(23)c_(6) 铝镍青铜
原文传递
基于MALDI-TOF MS技术检测CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性方法的建立
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作者 吴文慧 蒋析文 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第4期683-687,共5页
目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术开发一种CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性检测的新方法。方法针对本次选取的CYP2D6*10、CYP2C19*2、HTR1A rs6295序列设计特异性质谱引物和测序引物,利用结合MALDI-TOF M... 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术开发一种CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性检测的新方法。方法针对本次选取的CYP2D6*10、CYP2C19*2、HTR1A rs6295序列设计特异性质谱引物和测序引物,利用结合MALDI-TOF MS技术建立检测方法并对准确性、检测限、特异性和重复性做性能分析与验证。采用一代测序作为对比方法,对81例未知型别的临床外周血样本,对三个基因多态性检测结果一致性进行分析。结果该方法可准确区分出CYP2D6*10、CYP2C19*2和HTR1A rs6295位点所有型别。检测上下限分别为90 ng/μL和5ng/μL,该方法具有良好的准确性、特异性和重复性。质谱结果与测序结果突变型别一致率达到100%。结论本研究开发的方法能够准确地检测CYP2D6*10、CYP2C19*2和HTR1A rs6295的基因型,适用于临床推广。 展开更多
关键词 MALDI-TOF MS cYP2D6*10 cYP2c19*2 hTR1A 基因多态性
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Unraveling the reaction mechanism of high reversible capacity CuP_(2)/C anode with native oxidation PO_(x) component for sodium-ion batteries
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作者 Huixin Chen Chen Zhao +4 位作者 Hongjun Yue Guiming Zhong Xiang Han Liang Yin Ding Chen 《Chinese Chemical Letters》 2025年第1期574-578,共5页
Phosphorus-based anode is a promising anode for sodium-ion batteries(SIBs)due to its high specific capacity,however,suffers from poor electronic conductivity and unfavorable electrochemical reversibility.Incorporating... Phosphorus-based anode is a promising anode for sodium-ion batteries(SIBs)due to its high specific capacity,however,suffers from poor electronic conductivity and unfavorable electrochemical reversibility.Incorporating metals such as copper(Cu)into phosphorus has been demonstrated to not only improve the electronic conductivity but also accommodate the volume change during cycling,yet the underline sodiation mechanism is not clear.Herein,take a copper phosphide and reduced graphene oxide(CuP_(2)/C)composite as an example,which delivers a high reversible capacity of>900 mAh/g.Interestingly,it is revealed that the native oxidation PO_(x)components of the CuP_(2)/C composite show higher electrochemical reversibility than the bulk Cu P_(2),based on a quantitative analysis of high-resolution solid-state^(31)P NMR,ex-situ XPS and synchrotron X-ray diffraction characterization techniques.The sodiation products Na_(3)PO_(4) and Na_(4)P_(2)O_(7) derived from PO_(x) could react with Na-P alloys and regenerate to PO_(x) during charge process,which probably accounts for the high reversible capacity of the Cu P_(2)/C anode.The findings also illustrate that the phosphorus transforms into nanocrystalline Na_(3)P and Na_(x)P alloys,which laterally shows crystallization-amorphization evolution process during cycling. 展开更多
关键词 cuP_(2)/c composite POx component Reaction mechanism Solid-state NMR Sodium-ion batteries
原文传递
LncRNA HIST1H2AG-6通过JNK信号通路对胰岛β细胞功能的调控研究
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作者 姜惠 王丽 吴静 《中国医药指南》 2025年第18期44-47,共4页
目的 探讨长链非编码RNAHIST1H2AG-6对胰岛β细胞功能的影响和潜在机制。方法 培养小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6细胞,转染HIST1H2AG-6质粒至MIN6细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)方法测定细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验方法测量胰岛素分泌,蛋... 目的 探讨长链非编码RNAHIST1H2AG-6对胰岛β细胞功能的影响和潜在机制。方法 培养小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6细胞,转染HIST1H2AG-6质粒至MIN6细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)方法测定细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验方法测量胰岛素分泌,蛋白质免疫印迹测定c-Jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化水平,并检测LncRNA HIST1H2AG-6过表达对JNK激动剂Anisomycin促胰岛素分泌的影响。结果 过表达HIST1H2AG-6抑制MIN6细胞活性(P=0.001)并且可抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌(P=0.031)。结论 LncRNA HIST1H2AG-6可能通过JNK通路调控胰岛β细胞活性和胰岛素分泌。 展开更多
关键词 LncRNA hIST1h2AG-6 JNK信号通路 胰岛Β细胞 调控
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2型糖尿病患者白细胞介素6、C反应蛋白、中性粒细胞与淋巴细胞比值和血管病变的关系 被引量:1
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作者 牛启兵 黄亚龙 +1 位作者 陈泉 周聪 《血管与腔内血管外科杂志》 2025年第2期150-154,共5页
目的探讨白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)这些炎症标志物和2型糖尿病(T2DM)患者合并血管病变的关系及其在临床诊断中的价值。方法收集2020年9月至2023年12月于甘肃省人民医院就诊的130例T2DM患者的... 目的探讨白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)这些炎症标志物和2型糖尿病(T2DM)患者合并血管病变的关系及其在临床诊断中的价值。方法收集2020年9月至2023年12月于甘肃省人民医院就诊的130例T2DM患者的临床资料,根据是否伴有血管病变将患者分为血管病变组[n=60,动脉内膜中层厚度(CIMT)≥0.9 mm,超声显示血管壁突入管腔]和无血管病变组(n=70,CIMT﹤0.9 mm)。分析T2DM患者合并血管病变的危险因素,并利用受试者工作特征(ROC)曲线评估炎症标志物对T2DM患者合并血管病变的诊断价值。结果血管病变组患者IL-6水平﹥9 pg/ml的比例、CRP水平和NLR均明显高于无血管病变组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,IL-6水平、CRP水平和NLR为T2DM患者合并血管病变的危险因素(P﹤0.05)。相关性分析结果显示,CRP水平与NLR呈正相关(r=0.858,P﹤0.05),NLR与IL-6水平亦呈正相关(r=0.254,P﹤0.05),且CRP水平与NLR的相关性最显著。ROC曲线分析结果显示,IL-6水平、CRP水平和NLR预测T2DM患者是否合并血管病变的曲线下面积分别为0.644(95%CI:0.550~0.738)、0.625(95%CI:0.528~0.722)和0.687(95%CI:0.597~0.778)。结论IL-6、CRP和NLR是T2DM患者合并血管病变的危险因素,在临床诊断中具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 白细胞介素6 c反应蛋白 中性粒细胞与淋巴细胞比值 2型糖尿病 血管病变
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左归降糖舒心方调控TLR4/NF-κB/NLRP3通路抑制H9C2心肌细胞炎性损伤机制 被引量:1
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作者 黄娟 黄湘宁 +7 位作者 王屹菲 李美英 刘晶晶 王瑾茜 刘林劵 林湘东 王婷婷 喻嵘 《陕西中医》 2025年第11期1454-1461,共8页
目的:探讨左归降糖舒心方对于脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护机制。方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,随机分为空白血清组、模型组、左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组。除空白血清组外,其余各组均以LPS诱导损伤,构建心... 目的:探讨左归降糖舒心方对于脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护机制。方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,随机分为空白血清组、模型组、左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组。除空白血清组外,其余各组均以LPS诱导损伤,构建心肌细胞炎症损伤体外模型。通过CCK-8法筛选含药血清干预浓度,ELISA法及免疫荧光法检测细胞IL-1β、TNF-α、IL-6含量及蛋白表达;Hoechst/PI双染检测细胞焦亡水平;AO/EB双染检测细胞膜通透性;Western Blot法检测TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65及NLRP3蛋白表达;RT-PCR技术检测IL-1β、Caspase-1及GSDMD mRNA表达。结果:通过CCK-8法筛选,确定10%的左归降糖舒心方含药血清浓度为后续实验的干预浓度。与空白血清组相比,模型组H9C2细胞释放的TNF-α、IL-6、IL-1β含量和相对荧光强度增加(P<0.01)。PI染色细胞数量明显增多,EB橘红色荧光比例上升,TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达升高,IL-1β、Caspase-1及GSDMD mRNA表达增高(均P<0.01)。与模型组相比,左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组细胞中的TNF-α、IL-6、IL-1β含量及相对荧光强度降低(P<0.01)。PI染色细胞数量减少,左归降糖舒心方组AO/EB染色的EB橘红色荧光比例缩小。中药含药血清及TAK-242可抑制细胞的TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达和Caspase-1、GSDMD mRNA表达。结论:左归降糖舒心方含药血清能抑制LPS诱导的H9C2心肌细胞炎症反应,减轻心肌细胞焦亡,这与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 左归降糖舒心方 h9c2心肌细胞 TLR4/NF-κB/NLRP3通路 炎性损伤 细胞焦亡
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香蕉枯萎病菌C2H2型锌指转录因子FocFlbC的功能研究
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作者 卢松茂 林秀香 +5 位作者 林亚琪 林晓兰 杨帅 郑文辉 云英子 鲁国东 《植物病理学报》 北大核心 2025年第4期649-662,共14页
由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转... 由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转录因子FlbC是调控分生孢子发育的关键因子。本研究在Foc TR4中鉴定到FlbC的同源基因FocFlbC,利用原生质体介导的遗传转化技术构建了其敲除突变体(ΔFocFlbC)和回补菌株,并分析了该蛋白的亚细胞定位和生物学功能。结果显示,FocFlbC定位于菌丝和分生孢子的细胞核。与野生型相比,ΔFocFlbC突变体在麦芽糖培养基上的菌丝生长速率显著降低,但在其他碳源培养基上无明显差异;该突变体在不同碳源培养基上的产孢量均显著降低,其中在麦芽糖培养基上野生型与突变体的产孢量比率最高,显著高于其他碳源培养基。虽然FocFlbC缺失突变对Foc TR4生物量累积和分生孢子萌发无显著影响,但与野生型相比,该突变体表现出:细胞壁和盐胁迫耐受性降低;α-淀粉酶、滤纸酶及β-1,4-D-葡聚糖酶活性下降,且相应水解酶基因的表达水平下调;以及致病力减弱。上述表型缺陷均可被回补菌株恢复。综上,FocFlbC不仅调控Foc TR4在麦芽糖培养基上的菌丝生长与产孢,还参与调控细胞壁完整性、盐胁迫响应、水解酶合成以及致病力等多个重要生物学过程,为深入揭示Foc TR4生长发育和致病分子机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病菌 c2h2型锌指结构域 转录因子 碳源利用 胁迫响应 水解酶活性 致病性
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绿豆C2H2型锌指蛋白转录因子家族鉴定及非生物胁迫下的表达分析
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作者 张均 郭飞翔 +2 位作者 田文仲 李春霞 马超 《核农学报》 北大核心 2025年第9期1875-1885,I0008-I0010,共14页
C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其... C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其理化性质、系统进化、染色体定位、共线性、启动子顺式作用元件及基因结构做了预测分析,并通过绿豆转录组数据和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了其在不同组织与非生物胁迫下的表达模式。结果表明,共鉴定到60个C2H2转录因子成员,其中53个分布于9条染色体,7个成员染色体信息未知;Motif1和Motif3是绿豆C2H2转录因子家族所特有的保守基序,Motif3则是部分C2H2转录因子家族成员所特有的一段保守序列“QALGGH”;编码155~1 581个氨基酸,均为亲水性蛋白且均定位在细胞核中;系统进化将绿豆C2H2转录因子家族分为7个亚组(V1~V7)。共线性分析表明,片段复制事件均进行了纯化选择;启动子顺式作用元件分析表明,绿豆C2H2基因启动子区含有大量与生长发育、逆境胁迫和激素相关的响应元件;基因表达分析表明,叶柄、叶片、下胚轴、籽粒种皮中表达量较高(FPKM值大于10)的基因分别占25.0%、26.7%、20.0%、26.7%;qRT-PCR分析发现,VrC2H2-22和VrC2H2-46对于温度胁迫具有特异性的调控作用,VrC2H2-51对干旱胁迫的响应程度较强。本研究结果为进一步对绿豆C2H2锌指转录因子家族的功能研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 绿豆 c2h2锌指蛋白转录因子 生物信息学 共线性分析 基因表达
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玉朗伞查尔酮对血管紧张素Ⅱ诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响及机制研究
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作者 梁杏梅 农慧亮 +5 位作者 廖乃英 刘安韬 蒙泔竹 黄仁彬 张婷 傅鹏 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第12期31-39,共9页
目的探讨玉朗伞查尔酮(YLSC)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及可能机制。方法将H9c2心肌细胞分为空白对照组、模型组、YLSC低、中、高剂量组,YLSC干预后,以浓度为1μmol/L的AngⅡ诱导细胞损伤模型。细胞计数法(... 目的探讨玉朗伞查尔酮(YLSC)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及可能机制。方法将H9c2心肌细胞分为空白对照组、模型组、YLSC低、中、高剂量组,YLSC干预后,以浓度为1μmol/L的AngⅡ诱导细胞损伤模型。细胞计数法(CCK-8)检测细胞活力,单丹磺酰尸胺染色法(MDC)检测细胞自噬体的形成,2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测细胞活性氧(ROS)水平,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测心肌细胞三磷酸腺苷(ATP)含量,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测Bcl2-腺病毒E1B 19 k Da相互作用蛋白3(Bnip-3)及自噬相关蛋白5(Atg5)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬标记蛋白p62、Beclin1及LC3Ⅱ/LC3I表达。结果YLSC能减轻AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞损伤,CCK-8检测提示YLSC能提高心肌细胞的活力(P<0.05或P<0.01),MDC染色法提示YLSC能促使自噬体形成,DCFH-DA荧光探针法检测结果显示YLSC能减少ROS的生成(P<0.01),Hoechst 33342染色法检测结果显示YLSC能减少细胞凋亡(P<0.01),ELISA检测结果显示YLSC能提高细胞ATP水平(P<0.05或P<0.01),RT-PCR检测结果显示YLSC能促进Bnip-3和Atg5的基因表达(P<0.05或P<0.01),Western blot检测结果显示YLSC能降低p62的表达并提高Beclin1及LC3Ⅱ/LC3I的表达(P<0.05或P<0.01)。结论YLSC能有效抑制AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞损伤及凋亡,其机制可能与启动心肌自噬程序、激活自噬相关因子表达以及清除凋亡细胞等有关。 展开更多
关键词 玉朗伞查尔酮 心肌细胞损伤 自噬 h9c2心肌细胞
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外泌体通过NRF2/SLC7A11/GPX4通路调控铁死亡治疗小鼠缺血性脑卒中
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作者 徐英韬 王蒙蒙 +3 位作者 林平 迟海涛 王怡 白鹰 《实验动物与比较医学》 2026年第1期20-31,共12页
目的通过电凝法阻断小鼠大脑中动脉构建中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)来源的外泌体(exosome,EXO)改善缺血性脑卒中及调控神经细胞铁死... 目的通过电凝法阻断小鼠大脑中动脉构建中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)来源的外泌体(exosome,EXO)改善缺血性脑卒中及调控神经细胞铁死亡(ferroptosis)损伤的作用机制。方法将32只6~8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、模型+生理盐水组(MCAO+NaCl)、模型+外泌体组(MCAO+EXO),每组8只。使用电凝法建立小鼠大脑MCAO模型,Sham组暴露大脑中动脉但不实施电凝;在电凝造模24 h前,向MCAO+EXO组小鼠尾静脉注射100µL来自hAMSCs培养上清液的外泌体(9.5×1011个/mL),向MCAO+NaCl组小鼠尾静脉注射同体积生理盐水。造模24 h后,采用Longa神经功能缺损评分法评价各组小鼠的运动神经功能损害程度;通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法评估各组小鼠脑梗死体积占比差异;通过HE染色法评估各组小鼠缺血部位脑组织中神经细胞形态学差异。通过微量比色法评估各组小鼠脑梗死区及其周围组织中亚铁离子(Fe2+)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总谷胱甘肽(total glutathione,total GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量差异。通过实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中铁死亡相关因子包括核因子-红细胞系2相关因子2(nuclear factorerythroid 2-related factor 2,NRF2)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的mRNA表达水平。通过蛋白质印迹法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中NRF2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平。结果相较于MCAO组,MCAO+EXO组的Longa评分显著降低(P<0.01)。MCAO组小鼠脑组织出现明显梗死灶,MCAO+EXO组相较MCAO组的脑梗死体积占比显著减少(P<0.001)。与Sham组相比,MCAO组出现神经细胞空泡变性,细胞核固缩、碎裂,细胞核结构不清晰,神经细胞排列杂乱。相较于MCAO组,MCAO+EXO组小鼠的神经细胞结构较为完整,细胞核大而规整,位于细胞中央。MCAO组小鼠的脑梗死区及周围组织中Fe2+和MDA含量较Sham组显著增加(P<0.001),MCAO+EXO组的Fe2+和MDA含量较MCAO组显著减少(P<0.01)。相较于Sham组,MCAO模型组小鼠的total GSH、GSSG、GSH含量均显著减少(P<0.01);相较于MCAO组,MCAO+EXO组小鼠的total GSH、GSH含量显著增加(P<0.001),GSSG含量无显著变化(P>0.05)。相较于Sham组,MCAO组小鼠的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.001);相较于MCAO组,MCAO+EXO组的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论在小鼠MCAO模型中,尾静脉注射hAMSCs来源的外泌体可以改善小鼠运动功能,减少梗死面积,保护神经细胞形态,降低神经损伤程度。外泌体可能通过激活NRF2/SLC7A11/GPX4通路,减少MCAO模型小鼠的脑神经细胞铁死亡而发挥保护作用。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 大脑中动脉闭塞 铁死亡 外泌体 NRF2/SLc7A11/GPX4通路 c57BL/6J小鼠
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