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环氧合酶-2反义寡核苷酸对鳞状细胞癌Colo-16细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响 被引量:3
1
作者 魏志平 马杰 刘彦群 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期144-147,共4页
目的:研究环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AsODN)对人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)表达的影响。方法:免疫细胞化学法检测Colo-16细胞中COX-2蛋白表达;免... 目的:研究环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AsODN)对人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)表达的影响。方法:免疫细胞化学法检测Colo-16细胞中COX-2蛋白表达;免疫荧光显微镜观察转染情况;蛋白免疫印迹(Western blot)及半定量反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测Colo-16细胞MMP-2蛋白和MMP-2mRNA表达水平。结果:Colo-16细胞中COX-2蛋白阳性表达,并分布在胞质、胞核;Colo-16细胞胞质和胞核可见荧光标记的COX-2无义寡核苷酸、反义寡核苷酸;Western blot及RT-PCR检测结果显不COX-2反义寡核苷酸作用Colo-16细胞48 h后,MMP-2表达显著下调(P<0.05)。结论:COX-2反义寡核苷酸能有效下调Colo-16细胞MMP-2表达,提示COX-2反义寡核苷酸可能通过抑制MMP-2表达来阻断皮肤鳞状细胞癌的浸润、转移。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 基质金属蛋白酶-2 colo-16细胞 鳞状细胞 皮肤
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Caspase-3对5-ALA诱导鳞状细胞癌Colo-16细胞凋亡效应的影响 被引量:3
2
作者 徐劲 乔丽 +1 位作者 杨志勇 刘玮 《武警医学》 CAS 2017年第3期232-234,共3页
目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)对光敏剂5-氨基酮戊酸(5-ALA)诱导鳞状细胞癌Colo-16细胞凋亡效应的影响。方法取对数生长期的Colo-16细胞用于实验,将细胞分为对照组、5-ALA-光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)组和Caspa... 目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)对光敏剂5-氨基酮戊酸(5-ALA)诱导鳞状细胞癌Colo-16细胞凋亡效应的影响。方法取对数生长期的Colo-16细胞用于实验,将细胞分为对照组、5-ALA-光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)组和Caspase-3抑制剂组(Z-DEVD-FMK),对照组不给予光敏剂和照光处理,5-ALA-PDT组给予0.4 mg/ml的5-ALA避光孵育4 h后,采用(功率密度10 m W/cm2,能量密度2.5 J/cm2)激光照射3 min,之后继续培养12 h。Caspase-3抑制剂组除孵育时同时加入Z-DEVD-FMK(终浓度40μmol),其余处理与5-ALA-PDT组相同。实验后收集各组细胞,通过免疫荧光观察各组细胞胞内Caspase-3荧光强度的变化,通过流式细胞术检测活性Caspase-3阳性细胞百分率和细胞凋亡率。结果免疫荧光结果发现对照组和Caspase-3抑制剂组Colo-16细胞胞浆中有微弱绿色荧光,表明Caspase-3表达量低,而5-ALA-PDT组中绿色荧光显著增强,表明其胞浆内Caspase-3含量显著增高。流式细胞仪的检测结果显示,对照组、5-ALA-PDT组和Caspase-3抑制剂组active-Caspase-3阳性细胞百分率分别为(2.26±0.16)%、(32.16±1.31)%和(3.36±0.31)%,5-ALA-PDT组高于对照组和Caspase-3抑制剂组,差异有统计学差异(P<0.05)。对照组、5-ALA-PDT组和Caspase-3抑制剂组的凋亡率分别为(2.35±0.22)%、(31.55±3.68)%和(11.46±2.25)%,三组之间两两比较,差异都有统计学意义(P<0.01)。结论 5-ALA-PDT可以诱导Colo-16细胞发生凋亡,且这种效应与caspase-3的激活密切相关。 展开更多
关键词 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 鳞状细胞癌 colo-16细胞 5-氨基酮戊酸 细胞凋亡
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雷帕霉素对Colo-16细胞系Stat3表达的影响 被引量:1
3
作者 魏志平 李圆 刘彦群 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期461-463,共3页
目的研究雷帕霉素对皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞系Stat3表达的影响。方法用不同浓度的雷帕霉素处理Colo-16细胞,Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;Western-blotting法检测Colo-16细胞Stat3,P-Stat3蛋白表达水平。结果雷... 目的研究雷帕霉素对皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞系Stat3表达的影响。方法用不同浓度的雷帕霉素处理Colo-16细胞,Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;Western-blotting法检测Colo-16细胞Stat3,P-Stat3蛋白表达水平。结果雷帕霉素能够诱导Colo-16细胞凋亡,荧光染色可见细胞核染色质凝聚、核裂解的形态学改变;在雷帕霉素作用后Colo-16细胞Stat3,P-Stat3表达显著下调。结论雷帕霉素能诱导Colo-16细胞凋亡,其作用机制可能与Stat3表达下调有关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 皮肤鳞状细胞癌 colo-16细胞 Star3 P-Star3
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REV3基因低表达对COLO-205细胞增殖的影响 被引量:2
4
作者 隋御 李元杰 +1 位作者 黄金娟 徐方 《宁夏医科大学学报》 2012年第6期572-575,F0003,共5页
目的检测REV3基因低表达后对COLO-205细胞增殖的影响情况。方法采用RNA干扰技术特异性的下调人类结肠癌细胞(COLO-205)中REV3基因的表达情况:实验组细胞加入的培养基中包含脂质体及降低REV3基因表达的质粒,阴性对照组细胞加入的培养基... 目的检测REV3基因低表达后对COLO-205细胞增殖的影响情况。方法采用RNA干扰技术特异性的下调人类结肠癌细胞(COLO-205)中REV3基因的表达情况:实验组细胞加入的培养基中包含脂质体及降低REV3基因表达的质粒,阴性对照组细胞加入的培养基中包含脂质体及空质粒,空白对照组细胞只加入培养基。实时荧光定量PCR技术检测不同细胞REV3基因的相对表达量,通过细胞计数和MTT检测,比较REV3基因表达量不同的细胞生长增殖情况。结果 REV3基因的表达量降低后,COLO-205实验组细胞的增殖速度与对照组细胞相比较明显降低,差别有统计学意义(P<0.05);而阴性对照组和空白对照组的细胞增殖情况虽然有一定的差异,但差别没有统计学意义。结论特异性的下调REV3基因在COLO-205中的表达量,可能对该细胞的生长与增殖均具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 REV3基因 RNA干扰 结肠癌细胞(colo-205) 荧光实时定量PCR 细胞增殖
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重组人生长激素对体外人结肠癌COLO-320细胞生长的影响 被引量:2
5
作者 魏寿江 王崇树 +1 位作者 王严庆 赵国刚 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2003年第6期572-575,共4页
目的 探讨重组人生长激素 (rhGH)对体外人结肠癌COLO 3 2 0细胞生长的影响。方法 取对数生长期的人结肠癌细胞株COLO 3 2 0细胞 ,分别在有血清 (血清组 )和无血清 (无血清组 )条件下培养 ,以不同浓度的rhGH和(或 )羟基喜树碱 (CPT)培... 目的 探讨重组人生长激素 (rhGH)对体外人结肠癌COLO 3 2 0细胞生长的影响。方法 取对数生长期的人结肠癌细胞株COLO 3 2 0细胞 ,分别在有血清 (血清组 )和无血清 (无血清组 )条件下培养 ,以不同浓度的rhGH和(或 )羟基喜树碱 (CPT)培养COLO 3 2 0细胞 ,分别培养 2 4h、48h及 72h ,然后用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定结肠癌细胞生长抑制率。结果 不同浓度的rhGH作用不同时间对人结肠癌细胞株COLO 3 2 0细胞的生长均无明显影响 (P>0 .0 5 ) ;单用CPT或rhGH联合CPT使用时对该细胞生长的抑制率均明显高于单用rhGH(P<0 .0 1) ,但前两者间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论 体外条件下rhGH对人结肠癌细胞株COLO 3 2 0细胞的生长既无促进作用 ,也无抑制作用 ,且不影响CPT对人结肠癌细胞株COLO 3 2 0细胞的抑制作用。 展开更多
关键词 重组人生长激素 体外 结肠癌 colo-320 细胞生长
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消银解毒饮及拆方对角质形成细胞COLO-16增殖的调控作用 被引量:3
6
作者 段行武 任映 +3 位作者 张云璧 张霞 瞿幸 李曰庆 《中国麻风皮肤病杂志》 2009年第8期597-599,共3页
探讨消银解毒饮是否对角质形成细胞的增殖具有直接作用;以及消银解毒饮中凉血、解毒、祛风除湿等三组主要成分在治疗银屑病中所起的作用。本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象;用四唑盐比色法观察了消银解毒饮及拆方后各组药物血清... 探讨消银解毒饮是否对角质形成细胞的增殖具有直接作用;以及消银解毒饮中凉血、解毒、祛风除湿等三组主要成分在治疗银屑病中所起的作用。本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象;用四唑盐比色法观察了消银解毒饮及拆方后各组药物血清对COLO-16细胞增殖的影响。结果表明消银解毒组和凉血方组体外培养COLO-16细胞的存活率明显降低,而且存活率与含药血清浓度呈负相关。 展开更多
关键词 消银解毒饮 colo-16 细胞
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消银解毒饮及拆方对角质形成细胞COLO-16凋亡的调控作用 被引量:3
7
作者 段行武 赵立军 +2 位作者 张霞 瞿幸 李曰庆 《中国麻风皮肤病杂志》 2010年第4期256-258,共3页
本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象,用流式细胞仪分析了消银解毒饮及其拆方后的凉血、解毒和祛风除湿等三组主要成份含药血清对其凋亡的诱导作用。结果表明消银解毒饮能诱导COLO-16细胞的凋亡,诱导角质形成细胞的凋亡可能是其治... 本研究以角质形成细胞株COLO-16为研究对象,用流式细胞仪分析了消银解毒饮及其拆方后的凉血、解毒和祛风除湿等三组主要成份含药血清对其凋亡的诱导作用。结果表明消银解毒饮能诱导COLO-16细胞的凋亡,诱导角质形成细胞的凋亡可能是其治疗银屑病的机制之一。 展开更多
关键词 消银解毒饮 colo-16细胞 凋亡
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他扎罗汀对Colo-16细胞体外增殖的影响及其机制的研究
8
作者 魏志平 李圆 刘彦群 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期635-638,共4页
目的:研究他扎罗汀对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞体外增殖的影响,并探讨其机制。方法:用不同浓度的他扎罗汀处理Colo-16细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Colo-16细胞增殖活性;免疫组化染色技术及免疫印迹法分别测定Colo-1... 目的:研究他扎罗汀对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞体外增殖的影响,并探讨其机制。方法:用不同浓度的他扎罗汀处理Colo-16细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Colo-16细胞增殖活性;免疫组化染色技术及免疫印迹法分别测定Colo-16细胞Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:不同浓度的他扎罗汀对Colo-16细胞体外增殖均具有抑制作用,其抑制作用呈明显的时效和量效关系(P<0.05);他扎罗汀作用Colo-16细胞后,Bcl-2蛋白表达明显下调,Bax表达明显增强。结论:他扎罗汀能抑制皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞的增殖,其机制与Bcl-2蛋白表达下调和Bax表达增加有关。 展开更多
关键词 他扎罗汀 鳞状细胞 colo-16细胞 蛋白 Bcl-2 蛋白 BAX
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COX-2反义寡核苷酸对Colo-16细胞生长及c-myc基因表达的影响
9
作者 马杰 魏志平 刘彦群 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期551-553,共3页
目的探讨脂质体介导环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AsODN)对皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞生长及对c-myc表达的影响。方法将COX-2无义(Nonsense oligodeoxynucleotide,NsODN)、反义寡核苷酸用脂质体... 目的探讨脂质体介导环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AsODN)对皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞生长及对c-myc表达的影响。方法将COX-2无义(Nonsense oligodeoxynucleotide,NsODN)、反义寡核苷酸用脂质体分别导入Colo-16细胞中。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察COX-2反义寡核苷酸对Colo-16细胞体生长曲线的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测c-myc蛋白表达的变化。结果COX-2反义寡核苷酸作用于Colo-16细胞后,细胞增殖能力受到抑制,荧光染色可见细胞核染色质边集、固缩、核碎裂的凋亡形态学改变;c-myc表达明显下调。结论COX-2反义寡核苷核酸能够抑制Colo-16细胞体外增殖,诱导Colo-16细胞凋亡,并能显著下调c-myc表达。 展开更多
关键词 COX-2 反义寡核苷酸 C-MYC colo-16细胞 皮肤鳞状细胞癌
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他扎罗汀体外诱导Colo-16细胞凋亡的研究
10
作者 李圆 魏志平 刘彦群 《中国麻风皮肤病杂志》 2008年第9期677-679,共3页
目的:研究他扎罗汀诱导体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞的凋亡。方法:用不同浓度的他扎罗汀处理Colo-16细胞,流式细胞术检测Colo-16细胞早期凋亡率;Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;印迹杂交法测定caspase ... 目的:研究他扎罗汀诱导体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞的凋亡。方法:用不同浓度的他扎罗汀处理Colo-16细胞,流式细胞术检测Colo-16细胞早期凋亡率;Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;印迹杂交法测定caspase 3蛋白表达水平;半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定caspase 3 mRNA的表达。结果:他扎罗汀显著增加Colo-16细胞的早期凋亡,且Colo-16细胞早期凋亡率与他扎罗汀呈浓度依赖性(P<0.05);荧光染色可见细胞核染色质固缩、核破碎;活化的caspase 3表达显著增强,caspase 3 mRNA表达显著增强。结论:他扎罗汀在体外可诱导Colo-16细胞凋亡,caspase 3的活化参与此凋亡过程。 展开更多
关键词 他扎罗汀 皮肤鳞状细胞癌 colo-16细胞 凋亡 CASPASE 3
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Colo-renal fistula:An unusual cause of hematochezia
11
作者 John D Wysocki Virendra Joshi +1 位作者 John W Eiser Naveed Gil 《World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology》 CAS 2010年第3期106-108,共3页
A 76 year old woman with bloody stools and symp-tomatic anemia presented to the Emergency Department approximately 2 wk after computed tomography (CT)-guided cryoablation to a 4.5 cm renal cell car-cinoma on her left ... A 76 year old woman with bloody stools and symp-tomatic anemia presented to the Emergency Department approximately 2 wk after computed tomography (CT)-guided cryoablation to a 4.5 cm renal cell car-cinoma on her left posterior kidney. The patient was initially prepped for a colonoscopy to view possible causes of lower gastrointestinal bleeding. However, the patient had a CT with PO contrast that revealed a variation of a renoalimentary fistula. The patient was subsequently brought to the operating room, and it was discovered that a colo-renal fistula had formed, with transmural perforation of the posterior descending colon. A left nephrectomy, left colectomy with colostomy and Hartmann's pouch was performed. 展开更多
关键词 colo-renal FISTULA Renocolic FISTULA Hema- tochezia CRYOABLATION Alimentary FISTULA
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Migrating Lump in Abdomen—Ileo-Colo-Colic Intussusception Up to the Rectum with Hypermobile Caecum and Ascending Colon
12
作者 Kalpesh Patil Tushar Khachane Pankaj Bharambe 《Open Journal of Pediatrics》 2017年第1期37-43,共7页
In pediatric age group, Intussusception is the most common cause of acute intestinal obstruction. They present with the classic clinical triad of colicky abdominal pain, vomiting and bloody stools. But clinically very... In pediatric age group, Intussusception is the most common cause of acute intestinal obstruction. They present with the classic clinical triad of colicky abdominal pain, vomiting and bloody stools. But clinically very few patients (20%) present with this classical symptoms. This article highlights an importance of suspecting intussusception by physician and rare presentations of intussusception lump in abdomen in a child with abdominal pain, gastrointestinal symptoms. Here a case reported of 16-year-old male child who presented with migrating lump in abdomen on and off with varied clinical presentation every time in single admission. Patient underwent laparotomy and manual reduction of intussusception was done. It is advisable to have high suspicion of intussusception while dealing with such cases. 展开更多
关键词 Ileo-colo-Colic INTUSSUSCEPTION in Children Hypermobile CECUM and Ascending Colon Migrating Lump in ABDOMEN
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表皮生长因子受体特异性shRNA对Colo-16细胞凋亡的影响及其机制 被引量:1
13
作者 赵东利 魏志平 +2 位作者 李竹茜 张豫凤 王慧 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期559-563,共5页
目的探讨用特异性短发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达对鳞状细胞癌Colo-16细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法构建EGFR特异性shRNA表达载体并转染Colo-16细胞,Wester... 目的探讨用特异性短发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达对鳞状细胞癌Colo-16细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法构建EGFR特异性shRNA表达载体并转染Colo-16细胞,Western blot检测细胞内EGFR,Akt及NF-κB的表达水平;流式细胞仪检测Colo-16细胞的凋亡变化。结果成功构建EGFR特异性shRNA表达载体并转染Colo-16细胞。转染特异性shRNA后,Colo-16细胞EGFR表达量的灰度值为0.42±0.03,与正常对照组(0.94±0.06)相比降低了55.57%,其差异具有统计学意义(P<0.05)。流式分析显示,下调EGFR表达可诱导Colo-16细胞凋亡,其凋亡率为12.65%,与对照组[凋亡率(0.11±0.03)%,(1.86±0.38)%和(2.26±0.25)%]比较差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,抑制EGFR表达还下调了PI3K/AKT信号通路蛋白Akt和NF-κB的表达。结论用特异性shRNA抑制EGFR表达可能是一种有潜力的抗皮肤鳞癌的治疗策略。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体(EGFR) SHRNA 皮肤鳞状细胞癌 Colo一16细胞 凋亡
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Détection de la Mutation du Gène hMLH1 Dans le Cancer Colo-rectal Parélectrophorèse Capilailre Associée a la Fluorescence Laser-Induite
14
作者 FENG Bo, ZHENG Min-hua, LU Ai-guo, LI Jian-wen, JIANG Wei-na, WANG Ming-liang, MA Jun-jun, DONG FengService de chirurgie, l’hoital Ruijin, l’université médicale numéro 2 de Shanghai, Institut Chirurgical Digestif de Shanghai, Shanghai 200025, ChineSHI Xian-zhe, XU Guo-wangInstitut physico-chimique de Dalian, Dalian 116011, Chine 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期403-403,共1页
Résumé: Objectif Lobjectif de ce travail est detablir une méthode danalyse du polymorphisme de la conformation monochaine (PCMC), capable de détecter la mutation ponctuelle du gène hMLH1 dans ... Résumé: Objectif Lobjectif de ce travail est detablir une méthode danalyse du polymorphisme de la conformation monochaine (PCMC), capable de détecter la mutation ponctuelle du gène hMLH1 dans le cancer colique en utilisant l l ctrophor se capillaire associée a la fluorescence laser-induite (FLI-EC). Méthodes Les exons 12 du gène hMLH1 du sang périphérique de 42 patients de cancer colo-rectal sporadique et 20 sujets sains témoins sont amplifiés par la PCR. Le PCMC des produits du PCR est analysé par FLI-EC. Les échantillons anormaux ont été confirmés par séquen age EC. Les effets de la concentration du milieu (LPA), de la température de séparationet du voltage de séparation sur le comportement de EC ont été aussi etudiés. Résultats Lanalyse de PCMC par la methode FLI-EC a retrouvé une mutation hétérozygote chez 4 des 42 patients. La mutation ponctuelle de T1151A a été objectivée par la séquen age EC de ces échantillons, aucune mutation na été retrouvée chez les 20 sujets sains témoins. La séparation des pics dADN monochainaux a été facilitée par une légère augmentation de la concentration de LPA (4%-6%), une légère baisse de la température de séparation (20℃) et une légère élévation du voltage de séparation (9kV). Conclusion Une concentration adéquate de LPA, une température de séparation appropriée et un voltage de séparation bien approprié améliorent considérablement l’efficacité du FLI-EC. L’application de cette méthode pour détecter la mutation ponctuelle du gène hMLH1 est d’une rapidité, d’une efficacité, et d’uneéreproductivit consid rables. Cette méthode de réalisation facile reste très prometteur pour le dépistage rapide et massive des mutations génétiques. 展开更多
关键词 HMLH1 直肠癌 基因 PCMC
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大黄素和大黄酸对Colo-16细胞株的影响 被引量:15
15
作者 徐丽敏 陈学荣 +2 位作者 毛舒和 殷金珠 郑俊华 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期47-48,共2页
关键词 肝肿瘤 大黄素 大黄酸 colo-16细胞
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依维莫司对顺铂产生抗人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞效应的增效作用研究 被引量:1
16
作者 丁敏 徐松 +6 位作者 李莉 毕素云 周之海 李岷 杨海平 陈旭 顾恒 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期421-425,共5页
目的探讨依维莫司是否增加顺铂对人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的杀伤效应。方法分别用50、100、200nmol/L的依维莫司和25μmol/L顺铂处理人皮肤鳞状细胞癌系COLO-16细胞12、24h,用AO标记自噬体囊泡并结合溶酶体酶抑制剂分析自噬和自... 目的探讨依维莫司是否增加顺铂对人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的杀伤效应。方法分别用50、100、200nmol/L的依维莫司和25μmol/L顺铂处理人皮肤鳞状细胞癌系COLO-16细胞12、24h,用AO标记自噬体囊泡并结合溶酶体酶抑制剂分析自噬和自噬流水平。Western印迹分析自噬标记性分子LC3.Ⅰ→LC3-Ⅱ转化、Caspase3和PARP剪切;LDH释放实验分析细胞死亡;AnnexinV.EGFP染色分析细胞凋亡。结果50、100、200nmol/L的依维莫司处理COLO.16细胞后,12hLC3.Ⅰ→Lc3-Ⅱ转换值分别为3.52±0.21、4.03±0.39、5.05±0.22,两两之间比较,差异无统计学意义(P〉0.05),与未用药物处理的对照组(2.07±0.05)比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。24hLC3-Ⅰ→LC3-Ⅱ转换值分别为3.38±0.26、3.29±0.06、6.57±0.16,两两之间比较,差异无统计学意义(P〉0.05),与对照组(2.61%±0.16%)比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。50、100、200nmol/L的依维莫司联合E64d、pepstatin处理COLO-16细胞12h后,LC3-Ⅱ与B肌动蛋白的比值分别为1.26±0.40、1.16±0.34、1.21±0.39,与E64d、pepstatin单独处理细胞组(1.19±0.27)比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。100nmol/L依维莫司联合E64d、pepstatin自噬体囊泡表达阳性率2.06-4-0.61,与E64d、pepstatin单独处理细胞组(1.68±0.62)比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。依维莫司与顺铂联合处理24h细胞死亡率42.58%±0.93%,高于顺铂单独处理的细胞(死亡率18.20%±1.46%),差异有统计学意义。依维莫司联合顺铂处理与顺铂单独处理细胞相比,Caspase3和PARP剪切、AnnexinV标记细胞数以及LC3-Ⅱ形成均无统计学差异(P〉0.05)。结论依维莫司增强顺铂诱导COLO-1细胞死亡,这种效应不依赖于凋亡和自噬调控。 展开更多
关键词 顺铂 细胞凋亡 自噬 colo-16细胞 依维莫司
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西罗莫司体外诱导Colo-16细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 李圆 魏志平 刘彦群 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期670-673,共4页
目的研究西罗莫司对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞凋亡的影响。方法用不同浓度的西罗莫司处理Colo-16细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖的影响;AnnexinV-FITC和PI双染检测Colo-16细胞凋... 目的研究西罗莫司对体外培养的皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞凋亡的影响。方法用不同浓度的西罗莫司处理Colo-16细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖的影响;AnnexinV-FITC和PI双染检测Colo-16细胞凋亡率;Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定Bcl-2、Bax mRNA的表达。结果不同浓度的西罗莫司对Colo-16细胞体外增殖均具有抑制作用,这种抑制作用与西罗莫司的作用时间和剂量呈明显的依赖关系(P〈0.05)。西罗莫司显著增加Colo-16细胞的早期凋亡,西罗莫司(50,100,150,200nmol/L)作用48h后诱导Colo-16细胞的早期凋亡率分别为7.26%±0.26%、8.34%±0.19%、9.86%±0.14%、11.92%±0.15%,与对照组1.53%±0.09%比较,差异有统计学意义(P〈0.05),且Colo-16细胞早期凋亡率与西罗莫司浓度呈剂量依赖关系(r=0.955,P=0.000)。荧光染色可见细胞核染色质凝聚、边集、核裂解的形态学改变;Bcl-2 mRNA表达显著下调而Bax mRNA的表达显著增强。结论西罗莫司在体外能诱导Colo-16细胞凋亡,其发生机制可能与其调节Bcl-2、Bax等凋亡调控基因的表达有关。 展开更多
关键词 西罗莫司 鳞状细胞 colo-16细胞 细胞凋亡
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依维莫司与顺铂协同损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞机制的初步研究
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作者 丁敏 徐松 +5 位作者 李莉 毕素云 周之海 李岷 陈旭 顾恒 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期738-741,共4页
目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法 依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司... 目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法 依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司、25 μmol/L顺铂、50 nmol/L依维莫司 + 25 μmol/L顺铂处理细胞组4组。通过Western印迹进行mTOR、Akt、DNA损伤相关信号以及Chk通路分析。结果 50、100、200 nmol/L依维莫司处理COLO-16细胞12、24 h后,mTOR 2448位点和2481位点的磷酸化水平降低,Rictor 1135位点磷酸化水平也降低。然而,下游信号ULK1蛋白的ser757位点的磷酸化水平、P70 S6激酶的thr389位点的磷酸化水平以及PKCα的thr638/641位点磷酸化水平的变化并不显著。依维莫司处理对Akt的总蛋白水平和磷酸化水平无明显影响。顺铂处理COLO-16细胞12、24 h后,Rictor的thr1135位点磷酸化水平和Chk1的ser345位点磷酸化水平明显升高,但依维莫司单独处理无类似效应。当依维莫司与顺铂联合处理后12和24 h,相对于顺铂单独处理的细胞,上调的Chk1和Rictor磷酸化水平受到明显抑制。结论 COLO-16细胞mTOR信号对依维莫司处理敏感,但其下游信号并非同步产生级联反应。依维莫司可能通过抑制检测点激酶1的激活增强顺铂诱导COLO-16细胞死亡,但无加重顺铂所导致的DNA损伤。 展开更多
关键词 顺铂 细胞凋亡 colo-16细胞 依维莫司 检测点激酶1
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环氧合酶-2反义寡核苷酸对Colo-16细胞增殖及环氧合酶-2表达的影响
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作者 马杰 魏志平 刘彦群 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期835-838,共4页
目的研究环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(AsODN)对人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞体外增殖的抑制作用及COX一2表达的影响。方法人工合成COX-2AsODN,利用脂质体将不同浓度(50,100,200,400nmol/L)反义寡核苷酸转染入Colo-16... 目的研究环氧合酶(COX)-2反义寡核苷酸(AsODN)对人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞体外增殖的抑制作用及COX一2表达的影响。方法人工合成COX-2AsODN,利用脂质体将不同浓度(50,100,200,400nmol/L)反义寡核苷酸转染入Colo-16细胞,免疫荧光显微镜观察转染情况;采用噻唑蓝(MTT)法检On,4Colo-16细胞的增殖情况;Western印迹及半定量逆转录PCR检测Colo-16细胞COX-2蛋白和mRNA表达水平。结果不同浓度的COX-2AsODN对Colo-16细胞体外增殖均具有抑制作用(P〈0.05),400nmol/L反义组在48h抑制率最高,达60.3%;COX-2AsODN转染Colo-16细胞后,COX-2蛋白和mRNA表达明显下调,50、100、200、400nmol/L组COX-2蛋白灰度值分别为0.763±0.070、0.600±0.065、0.430±O.074、0.251±0.045,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05);COX-2mRNA表达量随COX-2AsODN浓度的增加而减少,50、100、200、400nmol/L组COX-2mRNA灰度值分别是0.778±0.025、0.602±0.041、0.417±0.031、0.297±0.051,各组间COX一2mRNA表达差异有统计学意义(F:132.48,P〈0.01)。结论COX-2AsODN对Colo-16细胞的体外增殖有抑制作用,并能下调COX-2蛋白及其mRNA在Colo-16细胞中的表达,提示COX-2AsODN有潜在治疗皮肤鳞状细胞癌的作用。 展开更多
关键词 鳞状细胞 环氧合酶2 寡核苷酸类 反义 细胞系 肿瘤 colo-16细胞
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结直肠恶性肿瘤切除术继发急性肾损伤的危险因素及预测模型
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作者 张佳琪 刘增英 满晓朏 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第1期84-90,共7页
目的探讨结直肠恶性肿瘤切除术继发急性肾损伤(AKI)的危险因素。方法纳入2339例接受结直肠恶性肿瘤切除术的病人为研究对象,收集其临床资料,应用Logistic回归分析结直肠恶性肿瘤切除术后AKI的独立危险因素;构建Nomogram预测模型、Poisso... 目的探讨结直肠恶性肿瘤切除术继发急性肾损伤(AKI)的危险因素。方法纳入2339例接受结直肠恶性肿瘤切除术的病人为研究对象,收集其临床资料,应用Logistic回归分析结直肠恶性肿瘤切除术后AKI的独立危险因素;构建Nomogram预测模型、Poisson回归模型,用受试者工作特征(ROC)曲线和一致性曲线评价和检验模型的准确性,并用决策曲线分析(DCA)对模型进行临床适用度评价。结果2339例病人结直肠恶性肿瘤切除术后AKI的发生率为4.28%(100/2339)。多因素Logistic分析显示,收缩压(OR=1.01,P<0.05)、血肌酐水平(OR=1.01,P<0.05)、氯离子水平(OR=1.08,P<0.01)、围手术期使用血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB类药物)(OR=2.74,P<0.01)、围手术期使用碳青霉烯类药物(OR=4.12,P<0.01)、预防性回结肠造口(OR=1.85,P<0.05)是发生AKI的独立危险因素,手术方式为腹腔镜(OR=0.39,P<0.01)是独立保护性因素。用上述指标构建列线图,训练集ROC曲线下面积(AUC)为0.695,验证集AUC为0.794。多因素Poisson回归分析显示,收缩压(OR=1.01,P<0.05)、氯离子水平(OR=1.08,P<0.01)、围手术期使用ARB类药物(OR=2.53,P<0.01)、围手术期使用碳青霉烯类药物(OR=3.70,P<0.01)、预防性回结肠造口(OR=1.71,P<0.05)是本手术后发生AKI的独立危险因素,手术方式为腹腔镜是保护性因素(OR=0.41,P<0.01)。Poisson回归模型训练集AUC为0.702,验证集AUC为0.767。结论本研究构建的Nomogram预测模型、Poisson回归模型预测结直肠恶性肿瘤切除术后AKI的准确度较高。 展开更多
关键词 急性肾损伤 结直肠肿瘤 结直肠外科手术 危险因素 列线图 回归分析
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