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共表达内质网响应蛋白HAC1对α-半乳糖苷酶在毕氏酵母中表达的影响
1
作者
钟开新
陈丽芝
李阳源
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期184-189,共6页
为提高毕氏酵母(Pichia pastoris)中重组α-半乳糖苷酶的表达,将来源于P.pastoris GS115的hac1基因构建至pPIC9K表达载体中,转化到重组P.pastoris中与α-半乳糖苷酶共表达。研究结果表明,在AOX1启动子控制下,HAC1过表达提高了重组P.past...
为提高毕氏酵母(Pichia pastoris)中重组α-半乳糖苷酶的表达,将来源于P.pastoris GS115的hac1基因构建至pPIC9K表达载体中,转化到重组P.pastoris中与α-半乳糖苷酶共表达。研究结果表明,在AOX1启动子控制下,HAC1过表达提高了重组P.pastoris中α-半乳糖苷酶蛋白表达含量,使α-半乳糖苷酶活性提高了2.2倍。经PCR产物鉴定,结果表明重组P.pastoris基因组中插入hac1基因。经50 L发酵罐甲醇诱导168 h,Gal-HAC1-4#工程菌最终酶活达到6 560 U/mL,比Gal-21#工程菌提高了27%。甲醇诱导后Gal-HAC1-4#发酵液中粗蛋白浓度均高于Gal-21#工程菌。表明共表达HAC1蛋白可提高毕氏酵母产α-半乳糖苷酶蛋白的能力。
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关键词
HAC1
Α-半乳糖苷酶
毕氏酵母
共表达
UPR反应
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职称材料
题名
共表达内质网响应蛋白HAC1对α-半乳糖苷酶在毕氏酵母中表达的影响
1
作者
钟开新
陈丽芝
李阳源
机构
广东溢多利生物科技股份有限公司
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期184-189,共6页
文摘
为提高毕氏酵母(Pichia pastoris)中重组α-半乳糖苷酶的表达,将来源于P.pastoris GS115的hac1基因构建至pPIC9K表达载体中,转化到重组P.pastoris中与α-半乳糖苷酶共表达。研究结果表明,在AOX1启动子控制下,HAC1过表达提高了重组P.pastoris中α-半乳糖苷酶蛋白表达含量,使α-半乳糖苷酶活性提高了2.2倍。经PCR产物鉴定,结果表明重组P.pastoris基因组中插入hac1基因。经50 L发酵罐甲醇诱导168 h,Gal-HAC1-4#工程菌最终酶活达到6 560 U/mL,比Gal-21#工程菌提高了27%。甲醇诱导后Gal-HAC1-4#发酵液中粗蛋白浓度均高于Gal-21#工程菌。表明共表达HAC1蛋白可提高毕氏酵母产α-半乳糖苷酶蛋白的能力。
关键词
HAC1
Α-半乳糖苷酶
毕氏酵母
共表达
UPR反应
Keywords
HAC1 α-galactosidase
P. pastoris
co-exprssion
UPR
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
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1
共表达内质网响应蛋白HAC1对α-半乳糖苷酶在毕氏酵母中表达的影响
钟开新
陈丽芝
李阳源
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
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