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Zn^(2+) loading as a critical contributor to the circ_0008553-mediated oxidative stress and inflammation in response to PM_(2.5) exposures
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作者 Jingzhou Wang Jianbo Jia +5 位作者 Dujia Wang Xiujiao Pan Haiyan Xiong Chengjun Li Yiguo Jiang Bing Yan 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第2期451-461,共11页
Inflammation is a major adverse outcome induced by inhaled particulate matter with a diameter of≤2.5μm(PM_(2.5)),and a critical trigger ofmost PM_(2.5) exposure-associated diseases.However,the key molecular events r... Inflammation is a major adverse outcome induced by inhaled particulate matter with a diameter of≤2.5μm(PM_(2.5)),and a critical trigger ofmost PM_(2.5) exposure-associated diseases.However,the key molecular events regulating the PM_(2.5)-induced airway inflammation are yet to be elucidated.Considering the critical role of circular RNAs(circRNAs)in regulating inflammation,we predicted 11 circRNAs that may be involved in the PM_(2.5)-induced airway inflammation using three previously reportedmiRNAs through the starBasewebsite.A novel circRNA circ_0008553 was identified to be responsible for the PM_(2.5)-activated inflammatory response in human bronchial epithelial cells(16HBE)via inducing oxidative stress.Using a combinatorial model PM_(2.5) library,we found that the synergistic effect of the insoluble core and loaded Zn^(2+)ions at environmentally relevant concentrations was the major contributor to the upregulation of circ_0008553 and subsequent induction of oxidative stress and inflammation in response to PM2.5 exposures.Our findings provided new insight into the intervention of PM_(2.5)-induced adverse outcomes. 展开更多
关键词 PM(2.5) Toxic composition Combinatorial model PM_(2.5)library circ_0008553 INFLAMMATION
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circ_0000144在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
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作者 张洁 张芳芳 +3 位作者 王靖楠 李泽宇 宋颖 李娜 《山东大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期35-42,共8页
目的探究circ_0000144在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)实验检测49例乳腺癌及配对癌旁正常乳腺组织标本中... 目的探究circ_0000144在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)实验检测49例乳腺癌及配对癌旁正常乳腺组织标本中的circ_0000144表达水平,并分析circ_0000144的表达水平与乳腺癌患者临床病理特征的关系;以正常乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,RT-qPCR法检测乳腺癌细胞系(T47D、MCF-7、MDA-MB-231)中circ_0000144表达;以MCF-7细胞为研究对象,将转染si-circ_0000144组设为实验组(si-circ_0000144组),将转染si-NC组设为生理盐水对照组(si-NC组),同时设置空白对照组(Control组),细胞不进行任何转染操作,用常规培养基进行培养,通过CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验、Transwell实验检测乳腺癌细胞中细胞增殖、迁移和侵袭的能力,Western blotting法检测相关蛋白CyclinD1、p21、Bax、Bcl-2、E-cadherin和N-cadherin表达。结果与癌旁正常组织比较,乳腺癌组织中circ_0000144表达显著升高(P<0.001),且与TNM分期和淋巴结转移呈密切正相关(P=0.003,P=0.007);与正常乳腺上皮细胞MCF-10A比较,乳腺癌细胞系中circ_0000144表达上调(P<0.001);与Control组或si-NC组比较,si-circ_0000144组增殖、迁移和侵袭能力降低(P均<0.001),凋亡率升高(P均<0.001),CyclinD1、Bcl-2和N-cadherin蛋白表达水平降低(P均<0.001),而p21、Bax和E-cadherin蛋白表达水平升高(P均<0.001)。结论circ_0000144在乳腺癌组织及细胞系中呈高表达,下调circ_0000144可阻碍乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,而促进其凋亡,circ_0000144有望成为治疗乳腺癌的分子靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 circ_0000144 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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Circ_0022382/let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞增殖和迁移 被引量:1
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作者 刘伟 张俊 +6 位作者 张佳雯 叶雨 诸健琴 虞绮雯 李涛 孙晓春 陈华标 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期145-153,共9页
目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测... 目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测差异表达的circRNA所结合的miRNA,最后通过韦恩图对circRNA结合的miRNA和GEO数据库预测的miRNA取交集,得到交集的miRNA及其对应的circRNA。②分别予以收敛引物和发散引物对乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的互补DNA(cDNA)和基因组DNA(gDNA)进行PCR,并通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR产物进行分离以验证circ_0022382的环形结构。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,乳腺癌组织和癌旁组织中circ_0022382表达水平。④在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染si-NC、si-circ_0022382,采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移;qRT-PCR检测let-7a-5p的表达水平;在si-circ_0022382组中分别转染let-7a-5p inhibitor NC、let-7a-5p inhibitor,克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移。⑤通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析let-7a-5p的下游信号通路;在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染let-7a-5p NC、let-7a-5p mimic,蛋白质印迹法和细胞荧光免疫法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达,蛋白质印迹法检测let-7a-5p inhibitor和si-circ_0022382共转染后乳腺癌细胞p-AKT表达。结果:①GSE165884差异分析得到37个高表达的circRNA,GSE45498差异分析得到6个低表达的miRNA,37个高表达的circRNA中,circ_0022382对应的miRNA和6个低表达的miRNA有交集基因let-7。②乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的cDNA既可以通过发散引物又可以通过收敛引物来扩增,而gDNA只能通过收敛引物来扩增。③与MCF-10A细胞相比,circ_0022382在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中均显著高表达(P均<0.001);乳腺癌组织中circ_0022382表达亦明显高于癌旁组织(P<0.05)。④下调circ_0022382表达后,MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力均显著下降(P均<0.001),let-7a-5p的表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05);在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移能力的下降(P<0.01和P<0.001)。⑤KEGG信号通路富集分析结果显示,PI3K-AKT和mTOR信号通路显著富集;与let-7a-5p NC组相比,let-7a-5p mimic组的p-AKT、p-PI3K和mTOR的蛋白水平显著下降;在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞中p-AKT表达水平的降低。结论:circ_0022382在乳腺癌中高表达,通过靶向let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其有可能作为乳腺癌治疗和诊断的潜在靶点。 展开更多
关键词 circ_0022382 let-7a-5p PI3K/AKT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系
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作者 翟渊鹏 王谦 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期56-61,共6页
目的:探讨circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系。方法:取58例肝癌患者术中切除肝癌组织及癌旁正常肝组织,qRT-PCR法检测circ_0044516、miR-338-3p的相对表达量;分析circ_0044516表达与肝癌患者临床病... 目的:探讨circ_0044516与miR-338-3p在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞转移的关系。方法:取58例肝癌患者术中切除肝癌组织及癌旁正常肝组织,qRT-PCR法检测circ_0044516、miR-338-3p的相对表达量;分析circ_0044516表达与肝癌患者临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier法分析circ_0044516表达与肝癌患者预后的关系。双荧光素酶报告实验检测circ_0044516与miR-338-3p的靶向调控作用。体外培养人肝癌细胞Huh-7,分为小干扰circ_0044516(si-circ_0044516)组及其阴性对照(si-NC)组2组,si-circ_0044516+miR-338-3p抑制剂组、si-circ_0044516+抑制剂阴性对照(I-NC)组2组;分别采用CCK-8法、Transwell实验检测细胞增殖率、迁移细胞数及侵袭细胞数。结果:与癌旁正常肝组织比较,肝癌组织中circ_0044516的相对表达量升高,miR-338-3p的相对表达量降低(P<0.05)。circ_0044516高表达肝癌患者门静脉侵犯占比高、Edmondson分级增加、TNM分期升高(P<0.05)。circ_0044516低表达患者预后较好(P=0.021)。circ_0044516可靶向调控miR-338-3p的表达。干扰circ_0044516表达可降低细胞增殖率,减少迁移及侵袭细胞数;与si-circ_0044516+I-NC组比较,si-circ_0044516+miR-338-3p抑制剂组细胞增殖率升高,迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05)。结论:干扰circ_0044516表达可通过促进miR-338-3p表达而抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 肝癌 circ_0044516 miR-338-3p 细胞增殖 迁移 侵袭
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干扰circ_0072088对鼻咽癌细胞生物学行为的影响
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作者 李新华 李军 +1 位作者 裴卓 栾红娟 《河北医药》 2025年第9期1446-1449,1455,共5页
目的探讨干扰环状RNA 0072088(circ_0072088)对鼻咽癌细胞生物学行为的影响和可能机制。方法实时定量PCR(RT-qPCR)分析鼻咽癌患者和健康对照者血清中circ_0072088和微小RNA(miR)-223的相对水平。将鼻咽癌C666-1细胞分为对照(con)组、小... 目的探讨干扰环状RNA 0072088(circ_0072088)对鼻咽癌细胞生物学行为的影响和可能机制。方法实时定量PCR(RT-qPCR)分析鼻咽癌患者和健康对照者血清中circ_0072088和微小RNA(miR)-223的相对水平。将鼻咽癌C666-1细胞分为对照(con)组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组和circ_0072088小干扰RNA(si-circ_0072088)组。噻唑蓝法、集落形成实验检测C666-1细胞增殖;流式细胞术检测C666-1细胞凋亡率;划痕愈合实验检测C666-1细胞迁移;Transwell实验检测C666-1细胞侵袭。双萤光素酶报告实验分析circ_0072088和miR-223的靶向关系。结果与健康对照者比较,鼻咽癌患者血清中circ_0072088的相对水平显著升高(P<0.05),miR-223的相对水平显著降低(P<0.05)。与con组、si-NC组比较,si-circ_0072088组C666-1细胞增殖抑制率、凋亡率、miR-223的相对水平显著升高(P<0.05),集落形成数、划痕距离、侵袭数显著降低(P<0.05)。双萤光素酶报告实验证实circ_0072088直接结合miR-223。结论干扰circ_0072088可抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,其机制可能与靶向上调miR-223表达有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 circ_0072088 miR-223 细胞增殖 迁移 侵袭
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三叶苷通过调控circ_0060745表达对缺氧复氧诱导心肌细胞损伤的作用及机制研究
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作者 裴艳琴 张文娟 +3 位作者 王晓蕾 周萍 伊力哈木江·克尤木 邢娟 《河北中医》 2025年第8期1324-1328,共5页
目的观察三叶苷对缺氧复氧(H/R)诱导心肌细胞凋亡的影响及分子机制。方法心肌细胞H9C2随机分为对照组、H/R组、H/R+三叶苷15、30、60μmol/L组、H/R+si-circ_0060745组、H/R+si-NC组、H/R+三叶苷60μmol/L+pcDNA-circ_0060745组,分别进... 目的观察三叶苷对缺氧复氧(H/R)诱导心肌细胞凋亡的影响及分子机制。方法心肌细胞H9C2随机分为对照组、H/R组、H/R+三叶苷15、30、60μmol/L组、H/R+si-circ_0060745组、H/R+si-NC组、H/R+三叶苷60μmol/L+pcDNA-circ_0060745组,分别进行相应处理。采用CCK-8法、流式细胞术检测心肌细胞活力与凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达;NBT核黄素比色法和TBA微板法分别检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circ_0060745表达。结果与对照组比较,H/R组心肌细胞活力、Bcl-2蛋白水平、SOD活性降低,凋亡率、Bax蛋白水平和MDA含量、circ_0060745水平升高(P<0.05)。与H/R组比较,三叶苷15、30、60μmol/L组细胞活力、Bcl-2蛋白水平、SOD活性升高,凋亡率、Bax蛋白水平和MDA含量、circ_0060745水平降低(P<0.05)。抑制circ_0060745表达后,细胞活力、Bcl-2蛋白水平、SOD活性升高,细胞凋亡率、Bax蛋白水平和MDA含量降低(P<0.05)。过表达circ_0060745可逆转三叶苷对心肌细胞的影响。结论三叶苷可能通过下调circ_0060745表达,抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激。 展开更多
关键词 三叶苷 circ_0060745 缺氧复氧 心肌细胞 药理实验 凋亡
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circ_0006089与miR-217在奥沙利铂耐药胃癌细胞中的表达及其对耐药细胞转移活性的影响
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作者 张旗林 李园园 +2 位作者 许琦华 廖冰灵 周颖 《国际检验医学杂志》 2025年第8期1015-1019,共5页
目的探讨circ_0006089与微小RNA(miR)-217在奥沙利铂耐药的胃癌细胞(MGC803/L-OHP细胞)中的作用。方法采用实时荧光定量PCR检测奥沙利铂耐药的胃癌细胞(MGC803/L-OHP细胞)和非耐药的胃癌细胞(MGC803细胞)中circ_0006089与miR-217的表达... 目的探讨circ_0006089与微小RNA(miR)-217在奥沙利铂耐药的胃癌细胞(MGC803/L-OHP细胞)中的作用。方法采用实时荧光定量PCR检测奥沙利铂耐药的胃癌细胞(MGC803/L-OHP细胞)和非耐药的胃癌细胞(MGC803细胞)中circ_0006089与miR-217的表达。将MGC803/L-OHP细胞随机分为4组:si NC组、si circ_0006089组、miR NC组和miR-217 mimic组。采用集落试验分析MGC803/L-OHP细胞的增殖能力;通过Transwell试验分析MGC803/L-OHP细胞的侵袭能力;通过流式细胞术分析MGC803/LOHP细胞的凋亡率;通过StarBase预测circ_0006089与miR-217的结合位点。通过双荧光素酶报告基因检测与实时荧光定量PCR分析MGC803/L-OHP细胞中circ_0006089与miR-217的靶向调控关系。结果与非耐药的胃癌组织和细胞比较,奥沙利铂耐药的胃癌组织和细胞中的circ_0006089水平增加(P<0.05),miR-217水平降低(P<0.05)。与si NC组和miR NC组的MGC803/L-OHP细胞比较,si circ_0006089组和miR-217 mimic组的MGC803/L-OHP细胞的增殖活性、侵袭能力减弱、凋亡率增加(P<0.05)。StarBase预测显示,circ_0006089与miR-217存在结合位点。荧光素酶活性比较显示,与miR NC组比较,在circ_0006089 WT组中转染miR-217 mimic后荧光素酶活性降低(P<0.05),实时荧光定量PCR结果显示,在MGC803/L-OHP细胞中过表达circ_0006089后,miR-217水平降低(P<0.05)。结论在奥沙利铂耐药的胃癌组织和细胞中,circ_0006089高表达而miR-217低表达,并且circ_0006089能够靶向抑制miR-217的表达。通过下调circ_0006089或增加miR-217的表达能够抑制奥沙利铂耐药的胃癌细胞的增殖、侵袭,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-217 circ_0006089 奥沙利铂 胃癌
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乙肝大表面抗原通过调控circ_0060263的表达促进肝癌细胞迁移与侵袭
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作者 许达峰 宋嘉 +5 位作者 王雨 肖巍 李繁树 刘秋梦 郑进方 何松青 《中华实验外科杂志》 2025年第10期1917-1920,共4页
目的探索乙肝大表面抗原(LHBs)对肝癌细胞迁移与侵袭的影响及其机制。方法2023年1月至2023年12月,基于前期建立的特异性敲除乙肝表面抗原(HBsAg)表达的HepG2-2.15细胞系(HepG2-2.15-KO-HBsAg-3#)与稳定过表达LHBs的HepG2细胞系(HepG2-LH... 目的探索乙肝大表面抗原(LHBs)对肝癌细胞迁移与侵袭的影响及其机制。方法2023年1月至2023年12月,基于前期建立的特异性敲除乙肝表面抗原(HBsAg)表达的HepG2-2.15细胞系(HepG2-2.15-KO-HBsAg-3#)与稳定过表达LHBs的HepG2细胞系(HepG2-LHBs),分别设置对照组(HepG2-2.15或HepG2-Vector),通过功能性获得和功能性缺失体内外实验,研究LHBs对肝癌侵袭与转移的影响。进一步利用环状RNA(circRNA)-Seq技术检测LHBs表达对肝癌细胞circRNA表达谱的影响,通过差异分析筛选出受LHBs调控的候选circRNA,并经回复实验验证其功能。两组间比较采用双尾Student’s t检验,多组间比较则采用单因素方差分析,并进行Tukey矫正。结果HepG2-LHBs组的迁移与侵袭细胞数均高于对照组(迁移细胞数:886.7±22.5比388.3±23.5,t=26.5,P<0.01;侵袭细胞数:693.0±27.5比175.3±48.5,t=16.1,P<0.01);HepG2-2.15-KO-HBsAg-3#组的迁移与侵袭细胞数均低于对照组(迁移细胞数:211.7±26.4比808.7±20.6,t=30.9,P<0.01;侵袭细胞数:49.7±14.5比171.7±12.2,t=11.2,P<0.01)。经CircRNA-Seq筛选和实验验证发现,HepG2-LHBs组circ_0060263的水平高于对照组(13.4±3.0比1.0±0.1,t=8.3,P<0.01)。经RNA干扰和回复实验发现,转染了si-NC的HepG2-LHBs组迁移与侵袭细胞数均高于转染si-NC的对照组以及转染si-circ_0060263的HepG2-LHBs组(迁移细胞数:1076.0±89.3比469.0±17.4、480.3±27.5,F=120.3,P<0.01;侵袭细胞数:537.0±13.1比134.7±27.4、135.3±13.7,F=436.5,P<0.01)。结论LHBs通过上调circ_0060263的表达水平,显著增强肝癌细胞的迁移与侵袭能力。 展开更多
关键词 乙肝大表面抗原 原发性肝癌 Circ_0060263 迁移 侵袭
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circ_0000467通过靶向miR-508-3p对卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响
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作者 齐丽宁 王琪 +4 位作者 朱继红 耿艳红 葛新苗 魏旭静 刘彩辉 《中国细胞生物学学报》 2025年第1期68-76,共9页
该文旨在探讨circ_0000467调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。收集2021年3月至2022年6月保定市第一中心医院收治的37例患者的卵巢癌组织及其癌旁组织,体外培养IOSE80人正常卵巢上皮细胞株及人卵巢癌细胞A2780、OVCAR3、SK... 该文旨在探讨circ_0000467调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。收集2021年3月至2022年6月保定市第一中心医院收治的37例患者的卵巢癌组织及其癌旁组织,体外培养IOSE80人正常卵巢上皮细胞株及人卵巢癌细胞A2780、OVCAR3、SKOV3,采用qRT-PCR法检测circ_0000467、miR-508-3p的表达量,并分析circ_0000467、miR-508-3p表达与卵巢癌患者临床病理特征的相关性;将si-circ_0000467、si-NC、miR-NC、miR-508-3p分别转染至SKOV3细胞,并用si-circ_0000467与anti-miR-NC和anti-miR-508-3p分别共转染SKOV3细胞;通过CCK-8、平板克隆形成实验测定细胞增殖情况;划痕实验测定细胞迁移情况;Transwell实验测定细胞侵袭情况;通过双荧光素酶实验检测miR-508-3p过表达对野生型与突变型载体(WT-circ_0000467、MUTcirc_0000467)荧光素酶活性的影响。与癌旁组织相比,circ_0000467在卵巢癌组织中上调表达(P<0.05),miR-508-3p下调表达(P<0.05)。与IOSE80细胞相比,A2780、OVCAR3、SKOV3细胞中circ_0000467表达水平升高(P<0.05),miR-508-3p表达水平下降(P<0.05)。circ_0000467和miR-508-3p表达与卵巢癌患者FIGO分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。敲低circ_0000467可降低细胞活力、划痕愈合率、细胞克隆形成数及侵袭细胞数(P<0.05);miR-508-3p过表达可降低WT-circ_0000467的荧光素酶活性(P<0.05);转染miR-508-3p可降低细胞活力、划痕愈合率、细胞克隆形成数和侵袭细胞数(P<0.05);转染anti-miR-508-3p可逆转转染si-circ_0000467对细胞增殖、迁移、侵袭的影响(P<0.05)。干扰circ_0000467表达可通过增加miR-508-3p的表达水平抑制卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 circ_0000467 miR-508-3p 增殖 迁移 侵袭
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益气补肾方调控环状RNA circ_0051246抗胃癌干细胞增殖和迁移的机制研究
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作者 徐叶峰 邓明慧 +3 位作者 姚勇伟 严卿莹 程淼 刘云霞 《浙江中医药大学学报》 2025年第4期391-400,共10页
[目的]探讨益气补肾方抗胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)增殖和迁移的作用机制。[方法]采用免疫磁珠法分选CD44、上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)双阳性标记的SGC-7901 GCSCs。筛选出的CD44+Ep... [目的]探讨益气补肾方抗胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)增殖和迁移的作用机制。[方法]采用免疫磁珠法分选CD44、上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)双阳性标记的SGC-7901 GCSCs。筛选出的CD44+EpCAM+SGC-7901细胞传代培养后,分别稳定转染环状RNA circ_0051246 control、pcDNA circ_0051246、si-circ_0051246。将上述4组细胞(包括未转染的细胞)各自再分成空白对照组、阴性对照组和益气补肾方组3个亚组,并进行分组药物干预:空白对照组正常传代培养,阴性对照组用空白血清干预,益气补肾方组用益气补肾方含药血清干预。分别采用激光共聚焦显微镜及透射电镜观察各组细胞的形态结构;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)及细胞克隆实验检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞CD44及EpCAM的阳性率及细胞凋亡率;细胞划痕、transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组circ_0051246的表达。[结果]与各自的阴性对照组比较,益气补肾方组各组细胞中线粒体嵴数量明显减少,内质网明显肿胀。与各自的空白对照组比较,益气补肾方各组细胞骨架结构肌动蛋白表达量明显降低。与各自的阴性对照组比较,益气补肾方各组细胞增殖能力减弱(P<0.05,P<0.01),CD44、EpCAM双阳性细胞比例均显著降低(P<0.01),克隆能力均显著降低(P<0.01),凋亡率均显著升高(P<0.01),24、48 h迁移率均显著降低(P<0.05,P<0.01),迁移、侵袭数量均显著减少(P<0.01),circ_0051246的表达水平显著降低(P<0.01)。[结论]益气补肾方可能通过抑制circ_0051246的表达,降低SGC-7901 GCSCs表面标志物CD44及EpCAM的表达,从而发挥抗GCSCs增殖和迁移的作用,为胃癌的治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤干细胞 增殖 迁移 circ_0051246 细胞转染 益气补肾方 机制研究
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circ_0039411通过miR-423-5p/IL-8促进中性粒细胞胞外诱捕网的形成以促进胃癌细胞的侵袭
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作者 徐琦 倪娇娇 +1 位作者 李晶晶 韦青 《医学研究杂志》 2025年第7期66-71,90,共7页
目的 探讨circ_0039411通过miR-423-5p/白介素-8(interleukin-8,IL-8)调控中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)对胃癌细胞的影响。方法 采用定量实时反转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transc... 目的 探讨circ_0039411通过miR-423-5p/白介素-8(interleukin-8,IL-8)调控中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)对胃癌细胞的影响。方法 采用定量实时反转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HGC-27、SNU-16和AGS)和人胃黏膜细胞(GSE-1)中circ_0039411和miR-423-5p的表达水平。选取HGC-27建立circ_0039411低表达模型,设立实验组(转染circ_0039411的siRNA)和空白对照组(转染对照的siRNA)。在实验组细胞中建立miR-423-5p低表达模型,设立inhibitor组(转染miR-423-5p的抑制物)和NC组(转染空载)。使用佛波肉豆蔻醋酸(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)诱导NETs的形成,设立PMA组(经PMA诱导)和对照组(未经PMA诱导)。构建胃癌细胞与中性粒细胞的共培养模型。采用CCK-8检测胃癌细胞的活性,采用Transwell和划痕检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测IL-8表达水平,采用免疫荧光检测NETs的形成。结果 胃癌细胞HGC-27、SNU-16和AGS中circ_0039411和IL-8的表达水平高于人胃黏膜细胞GSE-1,miR-423-5p的表达水平低于人胃黏膜细胞GSE-1,差异有统计学意义(P<0.05)。相比于空白对照组,实验组细胞的活性、迁移能力、侵袭能力及分泌的IL-8水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05),NETs的形成减少。相比于NC组,inhibitor组细胞的活性、迁移能力、侵袭能力及分泌的IL-8水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05),NETs的形成增加。相比于对照组,PMA组胃癌细胞的活性、迁移能力和侵袭能力均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circ_0039411能够通过miR-423-5p/IL-8轴促进NETs的形成,并进一步促进胃癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胃癌 circ_0039411 miR-423-5p IL-8 中性粒细胞胞外诱捕网
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缺氧诱导的circ_0007766表达在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用
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作者 赵梓岐 张敏 +4 位作者 杨涛 杨丽 廖国玲 张玮 楚元奎 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第5期460-468,共9页
目的:探讨环化自erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)基因的circ_0007766分子在前列腺癌(PCa)细胞中的作用及缺氧对其表达调控的影响。方法:qRT-PCR检测circ_0007766分子在PCa细胞及组织中的表达;分别转染circ0007766的siRNA至PCa细胞DU145和... 目的:探讨环化自erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)基因的circ_0007766分子在前列腺癌(PCa)细胞中的作用及缺氧对其表达调控的影响。方法:qRT-PCR检测circ_0007766分子在PCa细胞及组织中的表达;分别转染circ0007766的siRNA至PCa细胞DU145和PC3中,平板克隆实验、CCK-8实验和Transwell实验检测circ_0007766敲低对PCa细胞克隆形成、增殖、迁移和侵袭能力的影响;厌氧袋法建立DU145和PC3细胞的缺氧细胞模型,WB法检测缺氧通路关键分子HIF-1α的蛋白表达,qRT-PCR检测缺氧模型细胞中circ_0007766分子的表达,WB检测RNA结合蛋白真核翻译起始因子4A3(EIF4A3)的蛋白水平表达,RNA免疫沉淀(RIP)法检测缺氧条件下EIF4A3与circ_0007766的结合,qRT-PCR进一步检测缺氧条件下敲低EIF4A3对circ_0007766表达的影响。结果:circ_0007766在PCa细胞(P<0.01)及PCa组织(P<0.05)中呈高表达;敲低circ_0007766(P<0.05或P<0.01)能显著抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。缺氧条件下HIF-1α蛋白表达增加,表明缺氧细胞模型建立成功。qRT-PCR检测结果显示,相较于常氧组,缺氧组circ_0007766的表达显著升高(P<0.01),WB法检测结果显示缺氧组细胞中EIF4A3的蛋白表达增强。RIP实验结果显示,circ_0007766在EIF4A3富集组高度富集(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,缺氧可显著促进circ_0007766的表达,同时,敲低EIF4A3分子可显著降低缺氧诱导的circ_0007766的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:circ_0007766在PCa细胞中扮演着促癌分子的角色,其表达形成与缺氧条件下EIF4A3分子的调控有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 circ_0007766 缺氧 EIF4A3 增殖 迁移 侵袭
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Circ_0085315通过miR-149-5p/IRGQ通路对Treg介导的结肠癌免疫逃逸的机制探讨
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作者 廖汉琪 唐羿 +1 位作者 胡凯 姜耕 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期915-924,共10页
目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-... 目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-PCR检测组织和细胞中Circ_0085315表达水平。以CC细胞系SW480细胞为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证Circ_0085315、miR-149-5p、IRGQ三者间的关系,qRT-PCR检测细胞中Circ_0085315、miR-149-5p和IRGQ mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中IRGQ、Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达,ELISA检测CC细胞与Treg共培养体系中免疫相关细胞因子水平,流式细胞术检测CC细胞与Treg共培养体系中FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)、FOXP3^(+)CD8^(+)比例。通过小鼠成瘤实验验证Circ_0085315对CC肿瘤生长、miR-149-5p/IRGQ通路以及免疫相关细胞因子的影响。结果:Circ_0085315在CC组织和细胞系中过表达。经生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RIP实验验证,miR-149-5p可能是Circ_0085315的下游靶点,IRGQ可能是miR-149-5p的一个靶基因。沉默Circ_0085315可降低CC细胞中IRGQ mRNA和蛋白表达水平、提高miR-149-5p表达水平(P<0.05);降低CC细胞存活率并提高细胞凋亡率,同时降低Ki-67、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,提高Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);还可降低CC细胞与Treg共培养体系中IL-10、TGF-β含量及FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)比例,提高IL-2、IFN-γ含量及FOXP3^(+)CD8^(+)比例(P<0.05)。进一步研究结果显示,抑制miR-149-5p表达可提高IRGQ mRNA表达水平,并减弱沉默Circ_0085315对CC细胞增殖、凋亡以及免疫逃逸的影响。体内小鼠成瘤实验显示,沉默Circ_0085315后肿瘤中IRGQ mRNA表达水平以及肿瘤体积、重量降低,而miR-149-5p表达水平升高(P<0.05);此外,外周血血清中IL-10、TGF-β含量降低,IL-2、IFN-γ含量升高(P<0.05)。结论:沉默Circ_0085315通过调控miR-149-5p/IRGQ通路不仅可抑制CC细胞增殖并诱导细胞凋亡,还可抑制Treg介导的CC免疫逃逸。 展开更多
关键词 Circ_0085315 miR-149-5p 免疫相关GTP酶Q TREG 结肠癌 免疫逃逸
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circ_0044556靶向调控miR-338-3p/BRD4轴对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学行为的调节作用及其分子机制
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作者 董兴娟 张亚丽 +3 位作者 兴伟 朱莹莹 程永里 于萍 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第9期1146-1153,共8页
目的 探讨circ_0044556靶向调控miR-338-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物行为的调节作用及其分子机制。方法 采用TargetScan在线网站预测circ_0044556与miR-338-3p、miR-338-3p与BRD4的结合位点。双荧光素酶... 目的 探讨circ_0044556靶向调控miR-338-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物行为的调节作用及其分子机制。方法 采用TargetScan在线网站预测circ_0044556与miR-338-3p、miR-338-3p与BRD4的结合位点。双荧光素酶报告基因实验测定MDA-MB-231细胞中circ_0044556、miR-338-3p、BRD4的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测人TNBC细胞系MDA-MB-231、人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中circ_0044556、miR-338-3p、BRD4蛋白的表达情况。将MDA-MB-231细胞分为NC组、si-NC组(转染si-NC)、si-circ_0044556组(转染si-circ-004455)、si-circ_0044556+inhibitor NC组(转染si-circ_0044556和inhibitor NC)及si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组(转染sicirc_0044556和miR-338-3p inhibitor),采用qRT-PCR检测circ_0044556、miR-338-3p的表达,Western blotting检测BRD4、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力。将30只裸鼠随机分为NC组(尾静脉注射生理盐水)、si-NC组(尾静脉注射LV-NC)、si-circ_0044556组(尾静脉注射LV-circ_0044556)、si-circ_0044556+inhibitor NC组(尾静脉注射LV-circ_0044556和antiagomir NC)及si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组(尾静脉注射LV-circ_0044556和antiagomir miR-338-3p),每组6只。裸鼠皮下注射MDA-MB-231细胞构建异种移植瘤模型,测定肿瘤体积和质量。结果 TargetScan预测结果显示,circ_0044556的下游miRNA为miR-338-3p,miR-338-3p下游的靶基因可能是BRD4。与转染mimic NC比较,转染miR-338-3p mimic后MDA-MB-231细胞中WT-circ_0044556荧光素酶活性(0.34±0.03 vs. 1.00±0.15,P<0.05)、WT-BRD4荧光素酶活性(0.41±0.05 vs. 1.05±0.13,P<0.05)明显降低。与MCF-10A细胞比较,MDA-MB-231细胞中circ_0044556、BRD4蛋白表达水平明显增高,miR-338-3p表达水平明显降低(P<0.05)。与NC组、si-NC组比较,si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组MDA-MB-231细胞中circ_0044556表达水平,BRD4、N-cadherin、波形蛋白表达水平,以及OD_(450)值明显降低(P<0.05),迁移、侵袭细胞数明显减少(P<0.05),miR-338-3p表达水平、E-cadherin蛋白表达水平升高,细胞凋亡率明显增高(P<0.05);而miR-338-3p下调挽救了circ_0044556敲低对MDA-MB-231细胞侵袭、迁移和增殖的阻滞作用。与NC组、si-NC组比较,si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组小鼠肿瘤体积明显减小,肿瘤质量明显降低(P<0.05);与si-circ_0044556组、si-circ_0044556+inhibitor NC组比较,si-circ_0044556+miR-338-3p inhibitor组肿瘤体积明显增大,肿瘤质量明显增高(P<0.05)。结论 circ_0044556可能通过miR-338-3p/BRD4轴促进TNBC细胞恶性生物学行为的发生。 展开更多
关键词 circ_0044556 miR-338-3p 溴结构域蛋白4 三阴性乳腺癌 增殖 迁移 侵袭
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circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的H9C2细胞氧化应激和凋亡的影响
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作者 陈施羽 肖鹏 +1 位作者 汪鑫 靳鑫 《解剖学研究》 2025年第4期303-308,316,共7页
目的 探讨circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和凋亡的影响。方法 用150μmol/L H_(2)O_(2)处理H9C2细胞建立氧化损伤模型。共分为Con、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-NC、H_(2)O_(2)+sicirc_0037128、H_... 目的 探讨circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和凋亡的影响。方法 用150μmol/L H_(2)O_(2)处理H9C2细胞建立氧化损伤模型。共分为Con、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-NC、H_(2)O_(2)+sicirc_0037128、H_(2)O_(2)+miR-NC、H_(2)O_(2)+miR-1184、H_(2)O_(2)+si-circ_0037128+anti-miR-NC、H_(2)O_(2)+si-circ_0037128+antimiR-1184组。比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量以及培养液中乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)活性。流式细胞术评估细胞凋亡情况。双荧光素酶报告实验确定circ_0037128和miR-1184的靶向关系。结果 与Con组比较,H_(2)O_(2)组细胞circ_0037128表达水平、MDA、LDH、凋亡率升高(P<0.05),而miR-1184表达、SOD活性降低(P<0.05)。相对于H_(2)O_(2)+si-NC组,MDA、LDH、凋亡率在H_(2)O_(2)+si-circ_0037128组中升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。相对于H_(2)O_(2)+miR-NC组,MDA、LDH、凋亡率在H_(2)O_(2)+miR-1184组中升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。circ_0037128和miR-1184直接结合。miR-1184沉默缓解了干扰circ_0037128对H_(2)O_(2)介导的MDA、LDH、凋亡率、SOD的影响(P<0.05)。结论 下调circ_0037128表达通过促进miR-1184表达能够减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡,减缓细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌细胞 circ_0037128 miR-1184 过氧化氢 凋亡 氧化应激 H9C2细胞
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环状RNA hsa_circ_0117530通过miR-874/ZEB1轴促进宫颈癌细胞生长和转移
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作者 郑晨旸 赵玲军 +3 位作者 沈亲亲 吕一帆 史慧薇 王毅军 《武汉大学学报(医学版)》 2025年第3期335-342,共8页
目的:探讨环状RNA hsa_circ_0117530促进宫颈癌发展的机制。方法:通过免疫组织化学方法检测ZEB2在宫颈癌组织中的表达,利用circBase和circInteractome数据库进行分析,筛选出环状RNA hsa_circ_0117530。随后,敲低和过表达hsa_circ_01175... 目的:探讨环状RNA hsa_circ_0117530促进宫颈癌发展的机制。方法:通过免疫组织化学方法检测ZEB2在宫颈癌组织中的表达,利用circBase和circInteractome数据库进行分析,筛选出环状RNA hsa_circ_0117530。随后,敲低和过表达hsa_circ_0117530,利用CCK-8法检测宫颈癌细胞增殖活力。此外,使用CircInteractome数据库预测可能与hsa_circ_0117530结合的miRNA并使用StarBase数据库预测miR-874在宫颈癌细胞中的下游靶基因。采用荧光素酶报告基因实验验证并进一步分析其下游的靶点。结果:证实ZEB2在宫颈癌组织中显著上调,发现hsa_circ_0117530分子源自ZEB2基因,并在宫颈癌组织中的表达显著增高。进一步检测结果显示敲低hsa_circ_0117530抑制了宫颈癌细胞系的生长、增殖和迁移,而过表达则产生相反作用。双荧光素酶报告实验表明hsa_circ_0117530与miR-874相互作用,且miR-874直接靶向ZEB1基因。结论:hsa_circ_0117530通过调控miR-874/ZEB1轴促进了宫颈癌细胞的生物功能。 展开更多
关键词 环状RNA circ_0117530 miR-874 ZEB1 宫颈癌
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Circ_0007444通过miR-6838-5p/CEP55轴促进MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移
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作者 叶雨 张佳雯 +2 位作者 诸健琴 华晶雯 孙晓春 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1532-1541,共10页
该研究旨在阐明circ_0007444调控乳腺癌进展的分子机制,为乳腺癌的临床诊断、治疗和预后提供新的方向。通过生物信息学分析筛选出乳腺癌组织中差异表达的circRNAs。利用Sanger测序、RNase R实验和琼脂糖凝胶电泳法验证circ_00074444的... 该研究旨在阐明circ_0007444调控乳腺癌进展的分子机制,为乳腺癌的临床诊断、治疗和预后提供新的方向。通过生物信息学分析筛选出乳腺癌组织中差异表达的circRNAs。利用Sanger测序、RNase R实验和琼脂糖凝胶电泳法验证circ_00074444的环形结构。通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测乳腺癌组织及其匹配的邻近正常组织、正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞系(MDA-MB-231和MCF-7)中circ_0007444的表达水平。通过RNA FISH实验对MDA-MB-231和MCF-7细胞中circ_0007444进行定位。采用平板克隆形成实验及Transwell实验评估转染si-circ_0007444后对细胞增殖和迁移能力的影响。通过Starbase、CircBank和Circular RNA Interactome三个公共数据库预测筛选circ_0007444所靶向的miRNAs。利用双荧光素酶报告系统验证circ_00074444与miR-6838-5p的靶向互作关系,并通过平板克隆形成实验及Transwell实验探究si-circ_0007444和miR-6838-5p inhibitor共转染对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。通过数据库(Starbase、mi RWalk、miRTarBase、GEPIA)预测miR-6838-5p调控的下游靶基因并取交集。RT-qPCR、蛋白质印迹法检测下游靶蛋白中心体蛋白55(centrosomal protein 55,CEP55)在MCF-10A、MDA-MB-231和MCF-7中的表达水平。通过RT-qPCR和蛋白质印迹法验证敲低和过表达miR-6838-5p后CEP55的mRNA和蛋白质表达水平。通过平板克隆形成实验及Transwell实验探究OE-CEP55和si-circ_0007444共转染对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。结果表明circ_0007444在乳腺癌细胞中显著高表达(P<0.001)。细胞功能实验证实敲低circ_0007444可抑制细胞增殖活性和迁移能力。机制研究表明circ_0007444通过海绵化miR-6838-5p上调CEP55,进而促进乳腺癌进展。总之,该研究首次阐明circ_0007444/miR-6838-5p/CEP55调控轴在乳腺癌进展中的作用模式,为开发基于环状RNA的分子靶向治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 circ_0007444 miR-6838-5p CEP55 增殖 迁移
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circ_0004390对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响 被引量:1
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作者 李伟 孟云 +2 位作者 李玲 刘文成 吕志军 《河北医药》 2025年第3期368-374,共7页
目的探讨circ_0004390对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的调控作用及机制。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time pcr,qRT-PCR)检测口腔鳞癌组织和细胞中circ_0004390的表达。采用Cell counting kit-8(CCK8)实验、克隆... 目的探讨circ_0004390对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的调控作用及机制。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time pcr,qRT-PCR)检测口腔鳞癌组织和细胞中circ_0004390的表达。采用Cell counting kit-8(CCK8)实验、克隆形成实验和EdU实验检测细胞增殖能力。采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位。采用Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白表达。采用CCK8实验检测不同浓度顺铂对细胞增殖的影响。通过在线数据库starBase分析circ_0004390的潜在靶miRNA及其下游靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证基因的靶向关系。结果circ_0004390在口腔鳞癌组织和细胞中均呈高表达(P<0.05)。与si-NC组比较,si-circ_0004390组细胞的增殖活性和细胞克隆形成能力降低(P<0.05),细胞中EdU阳性率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞中凋亡抑制蛋白Bcl2和Survivin表达明显减少(P<0.05),而促凋亡蛋白Bax、Cleaved-PARP和Cleaved-caspase3表达明显增多(P<0.05),且细胞对顺铂的敏感性增强(P<0.05)。过表达circ_0004390则表现出相反的作用。机制上,circ_0004390能够与miR-196b-5p靶向结合,且高迁移率蛋白A2(High mobility group AT-hook protein,HMGA2)是miR-196-5p的一个靶基因。结论沉默circ_0004390可抑制癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,增强细胞的顺铂敏感性。miR-196b-5p/HMGA2轴可能是circ_0004390的下游调控机制。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 circ_0004390 miR-196b-5p HMGA2 增殖 凋亡
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circ_0061140靶向miR-548b-3p调控胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 牛涛 庄唯 伍苏娟 《蚌埠医科大学学报》 2025年第3期298-303,308,共7页
目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相... 目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相对水平。将circ_0061140的小干扰RNA、miR-548b-3p模拟物、circ_0061140的小干扰RNA+miR-548b-3p抑制物分别转染到SNU-1细胞,通过CCK-8实验检测SNU-1细胞活力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布。采用双荧光素酶报告实验、RIP实验和RT-qPCR分析circ_0061140和miR-548b-3p靶向调控关系。结果:与GES1细胞比较,SNU-1、AGS、HS-746T细胞中circ_0061140相对水平升高(P<0.05~P<0.01),miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05~P<0.01)。干扰circ_0061140表达后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.05),凋亡率、G0/G1期比例、miR-548b-3p相对水平升高(P<0.05)。过表达miR-548b-3p后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.01),凋亡率、G0/G1期比例升高(P<0.01)。过表达circ_0061140后SNU-1细胞miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05)。circ_0061140与miR-548b-3p直接特异性结合。抑制miR-548b-3p表达明显减弱干扰circ_0061140对SNU-1细胞活力、周期分布以及凋亡的影响(P<0.01)。结论:胃癌细胞中circ_0061140表达上调,miR-548b-3p表达下调。干扰circ_0061140通过上调miR-548b-3p能够抑制胃癌细胞增殖,使细胞阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞增殖 细胞周期 凋亡 circ_0061140 miR-548b-3p
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circ_0001588/miR-362-3p/SLC7A5轴对三阴性乳腺癌恶性进展的影响
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作者 官芮 赵倩 《中国医药导报》 2025年第23期31-37,共7页
目的探讨circ_0001588通过调控mi R-362-3p/SLC7A5轴在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物学行为中的作用及其机制。方法本研究纳入于2023年7月至2025年3月在新疆医科大学附属肿瘤医院治疗的70例TNBC患者的肿瘤和癌旁正常组织,RT-qPCR法检... 目的探讨circ_0001588通过调控mi R-362-3p/SLC7A5轴在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞恶性生物学行为中的作用及其机制。方法本研究纳入于2023年7月至2025年3月在新疆医科大学附属肿瘤医院治疗的70例TNBC患者的肿瘤和癌旁正常组织,RT-qPCR法检测TNBC组织、正常乳腺组织、TNBC细胞及正常人乳腺上皮细胞中circ_0001588的表达水平。调节MCF-10A、MDA-MB-468、BT-549和MDA-MB-231细胞中circ_0001588、mi R-362-3p和SLC7A5的表达。MTT、Transwell、EdU法检测TNBC细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)能力。双萤光素酶报告实验验证circ_0001588和mi R-362-3p之间、mi R-362-3p和SLC7A5之间的靶向关系。RT-qPCR、Western blot法检测TNBC组织和细胞中mi R-362-3p、SLC7A5的表达水平。结果circ_0001588在TNBC细胞中表达升高(P<0.05)。敲低circ_0001588抑制TNBC细胞增殖、侵袭和EMT(P<0.05)。circ_0001588和mi R-362-3p在TNBC患者组织中表达呈负相关(r=-0.8162,P<0.01);SLC7A5在TNBC患者组织中与mi R-362-3p表达呈负相关(r=-0.7489,P<0.01)。结论circ_0001588通过调控mi R-362-3p/SLC7A5轴,影响TNBC细胞的增殖、侵袭、EMT过程,调控TNBC恶性进展的机制。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 circ_0001588 miR-362-3p SLC7A5 恶性生物学行为
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