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CircRAD18通过miR-185-5p/HDGF轴调节急性髓系白血病细胞的柔红霉素耐药性
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作者 孙慧 杨菲菲 唐浩 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第5期1318-1326,共9页
目的:研究环状RNA RAD18(CircRAD18)通过miR-185-5p/肝癌衍生生长因子(HDGF)轴调节急性髓系白血病(AML)细胞柔红霉素(DNR)耐药性的机制。方法:通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人AML细胞系HL-60、U937和人AML耐药细胞系KG1 a中Cir... 目的:研究环状RNA RAD18(CircRAD18)通过miR-185-5p/肝癌衍生生长因子(HDGF)轴调节急性髓系白血病(AML)细胞柔红霉素(DNR)耐药性的机制。方法:通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人AML细胞系HL-60、U937和人AML耐药细胞系KG1 a中CircRAD18、miR-185-5p、HDGF表达。体外培养KG1 a细胞并随机分为对照组、DNR组、DNR+阴性对照组、DNR+CircRAD18敲低组、DNR+CircRAD18敲低+miR-185-5p inhibitor组,分组转染后通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测各组细胞CircRAD18、miR-185-5p、HDGF表达,CCK-8法、Ki-67免疫荧光染色检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫印迹实验检测各组细胞增殖、凋亡与耐药相关蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测KG1 a细胞CircRAD18对miR-185-5p及miR-185-5p对HDGF的靶向调节。结果:与HL-60、U937细胞相比,KG1 a细胞CircRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达均明显升高(均P<0.05),miR-185-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DNR+CircRAD18敲低组细胞Cir-cRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-gp蛋白表达均明显降低(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显升高(均P<0.05);DNR组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与DNR组相比,DNR+CircRAD18敲低组细胞CircRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、PCNA、Bcl-2、BCRP、P-gp蛋白表达均明显降低(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显升高(均P<0.05);DNR+阴性对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与DNR+CircRAD18敲低组相比,DNR+CircRAD18敲低+miR-185-5p inhibitor组细胞HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、PCNA、Bcl-2、BCRP、P-gp蛋白表达均明显升高(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。CircRAD18可靶向下调KG1 a细胞miR-185-5p表达,且miR-185-5p可靶向下调HDGF表达。结论:敲低CircRAD18可通过上调miR-185-5p来降低HDGF表达,从而减弱AML细胞DNR耐药性,抑制DNR处理下的KG1 a细胞增殖并促使其凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA RAD18 miR-185-5p/HGDF轴 急性髓系白血病 柔红霉素 耐药性
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