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circNRIP1上调宫颈癌细胞PD-L1表达诱导CD8^(+)T细胞的耗竭研究 被引量：1
1
作者 严铃铃 张小霞 曹晓莉 《国际检验医学杂志》 2025年第12期1485-1491,共7页
目的探究宫颈癌细胞环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)表达对CD8^(+)T细胞的耗竭的影响及机制。方法采用实时定量PCR检测circNRIP1在宫颈上皮细胞HCerEpic和宫颈癌细胞C-33 A、Hela、SiHa、CS121中的表达水平,将C-33 A细胞分为Vec... 目的探究宫颈癌细胞环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)表达对CD8^(+)T细胞的耗竭的影响及机制。方法采用实时定量PCR检测circNRIP1在宫颈上皮细胞HCerEpic和宫颈癌细胞C-33 A、Hela、SiHa、CS121中的表达水平,将C-33 A细胞分为Vector组、circNRIP1组和circNRIP1+miR-138-5p组,CS121细胞分为sh-NC组、sh-circNRIP1组和sh-circNRIP1+miR-138-5p inhibitor。提取人外周血CD8^(+)T细胞,Vector组和circNRIP1组C-33 A细胞与CD8^(+)T细胞共孵育24 h(CD8^(+)T/Vector组和CD8^(+)T/circNRIP1组),sh-NC组和sh-circNRIP1组CS121细胞与CD8^(+)T细胞共孵育24 h(CD8^(+)T/sh-NC组和CD8^(+)T/sh-circNRIP1组)。采用细胞毒性实验检测CD8^(+)T细胞的杀伤能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清白细胞介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞程序性死亡受体1(PD1)、T细胞免疫球蛋白及黏蛋白分子-3(TIM3)、淋巴细胞活化因子3(LAG3)表达水平。利用双荧光素酶报告基因实验验证circNRIP1和miR-138-5p的靶向关系,以及miR-138-5p和PD-L1的靶向关系。结果C-33 A、Hela、SiHa、CS121细胞中circNRIP1表达水平显著高于HCerEpic细胞(P<0.05)。CD8^(+)T细胞对circNRIP1组C-33 A细胞杀伤能力低于其对Vector组细胞的杀伤。CD8^(+)T/circNRIP1组CD8^(+)T细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α水平显著低于CD8^(+)T/Vector组CD8^(+)T细胞(P<0.05),CD8^(+)T/circNRIP1组CD8^(+)T细胞PD-1、LAG-3、TIM-3显著高于CD8^(+)T/Vector组CD8^(+)T细胞(P<0.05)。CD8^(+)T细胞对sh-circNRIP1组CS121细胞杀伤能力高于其对sh-NC组细胞的杀伤(P<0.05)。CD8^(+)T/sh-circNRIP1组CD8^(+)T细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α水平显著高于CD8^(+)T/sh-NC组(P<0.05),CD8^(+)T/sh-circNRIP1组CD8^(+)T细胞PD-1、LAG-3、TIM-3显著低于CD8^(+)T/sh-NC组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-138-5p为circNRIP1的靶基因,PD-L1为miR-138-5p的靶基因。结论circNRIP1可通过上调PD-L1的表达而诱导CD8^(+)T细胞的耗竭。 展开更多
关键词 宫颈癌 circnrip1 CD8^(+)T细胞 耗竭
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探讨血清circNRIP1对宫颈癌的辅助诊断价值
2
作者 葛琴 曹晓莉 贾美群 《四川医学》 CAS 2024年第8期880-885,共6页
目的探讨宫颈癌(CC)患者血清circRNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)的表达水平和临床价值。方法收集2020年7月至2022年6月我院确诊的88例原发性CC患者、50例术后患者、40例复发转移CC患者、80例CIN患者、100例健康者的血清标本。采用... 目的探讨宫颈癌(CC)患者血清circRNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)的表达水平和临床价值。方法收集2020年7月至2022年6月我院确诊的88例原发性CC患者、50例术后患者、40例复发转移CC患者、80例CIN患者、100例健康者的血清标本。采用实时荧光定量PCR的方法检测血清circNRIP1的表达水平,采用Mann-Whitney检验比较不同组间血清circNRIP1表达水平的差异,采用χ^(2)检验分析其与临床病理特征和CC传统辅助诊断指标的相关性,用ROC曲线及AUC评估circNRIP1、CEA、CA125以及SCCA的诊断效能。Kaplan-Meier生存曲线分析circNRIP1表达水平与CC患者预后的关系。结果原发性CC患者血清circNRIP1的相对表达量显著高于CIN患者和健康对照(P均<0.001),CIN患者高于健康对照者(P<0.001)。CC术后患者血清circNRIP1相对表达量明显低于术前患者(P<0.0001),复发和转移的CC患者血清circNRIP1相对表达量明显高于原发性CC患者和术后CC患者(P=0.0392;P<0.0001)。CC患者血清circNRIP1相对表达量与CEA、SCCA之间有相关性(r^(2)=0.145,P=0.0003;r^(2)=0.163,P=0.0001),且与患者的FIGO分期、淋巴结转移差异有统计学意义(P均<0.05)。CC患者和健康对照者比较,当circNRIP1、CEA、CA125以及SCCA四个指标联合检测时,敏感度高达98.9%,AUC为0.971。随访期间,CC患者血清circNRIP1的相对表达量术后呈明显下降趋势。Kaplan-Meier生存曲线显示血清circNRIP1高表达CC患者的总体生存率明显低于血清circNRIP1低表达患者(P=0.0466)。结论circNRIP1相对表达量可成为CC患者早期辅助诊断的标志物及疾病的恶性程度和进展的辅助观察指标,并对患者的预后判断有一定意义。 展开更多
关键词 宫颈癌 circnrip1 RT-QPCR
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circNRIP1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响研究
3
作者 葛琴 蔡平 +1 位作者 张玲玲 曹晓莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第7期847-852,共6页
目的探讨环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在宫颈癌组织中的表达,并初步考察其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测circNRIP1在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达水平,并通过细胞增殖实验(MTS法)... 目的探讨环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在宫颈癌组织中的表达,并初步考察其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测circNRIP1在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达水平,并通过细胞增殖实验(MTS法)、细胞划痕实验和Transwell Matrigel实验分别考察circNRIP1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果与癌旁组织相比,circNRIP1在宫颈癌组织中的表达显著升高(P<0.001);circNRIP1在HeLa细胞系中表达水平最低,在SiHa细胞系中表达水平最高,与其他细胞系circNRIP1表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.001)。在SiHa细胞系中,与NC组比较,shRNA1、shRNA2、shRNA3慢病毒均可显著降低circNRIP1的表达水平,其中shRNA2的敲低能力最高,在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,circNRIP1在OV-cNRIP1组的表达水平更高(P<0.01)。MTS实验结果显示,在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞增殖能力更高(P<0.001);在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞增殖能力更低(P<0.001)。划痕实验结果显示,在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞迁移能力更低(P<0.001);在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞迁移能力显著增强(P<0.001);Transwell Matrigel实验结果显示,在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞穿膜数显著减少(P<0.001);在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞穿膜数显著增多(P<0.001)。结论circNRIP1在宫颈癌组织中的表达上调,circNRIP1能显著促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 宫颈癌 circnrip1 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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CircNRIP1调节miR-136-5p/RAC1轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响 被引量：3
4
作者 董路 李明 +1 位作者 徐建立 许艳华 《局解手术学杂志》 2024年第5期383-387,共5页
目的探讨CircNRIP1调节miR-136-5p/Ras相关C3肉毒素底物1(RAC1)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。方法qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞MCF10A、乳腺癌MCF-7细胞和紫杉醇(PTX)耐药细胞株MCF-7/PTX中CircNRIP1、miR-136-5p、RA... 目的探讨CircNRIP1调节miR-136-5p/Ras相关C3肉毒素底物1(RAC1)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响。方法qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞MCF10A、乳腺癌MCF-7细胞和紫杉醇(PTX)耐药细胞株MCF-7/PTX中CircNRIP1、miR-136-5p、RAC1 mRNA表达。将MCF-7/PTX细胞分为CK组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircNRIP1组(转染si-CircNRIP1)、si-CircNRIP1+inhibitorNC组(转染si-CircNRIP1和inhibitorNC)、si-CircNRIP1+miR-136-5pinhibitor组(转染si-CircNRIP1和miR-136-5p inhibitor)。CCK-8法检测各组细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;qRT-PCR法检测各组细胞CircNRIP1、miR-136-5p、RAC1 mRNA表达;Western blot检测各组细胞Ki-67、Bax、Bcl-2、RAC1蛋白表达量;双荧光素酶实验验证miR-136-5p与CircNRIP1、RAC1的靶向关系。结果与正常乳腺上皮细胞MCF10A相比,MCF-7和MCF-7/PTX细胞中CircNRIP1、RAC1的表达升高(P<0.05),而miR-136-5p的表达降低(P<0.05);与MCF-7细胞相比,MCF-7/PTX细胞中CircNRIP1、RAC1的表达升高(P<0.05),miR-136-5p的表达降低(P<0.05)。与CK组和si-NC组相比,si-CircNRIP1组MCF-7/PTX细胞增殖率,CircNRIP1和RAC1 mRNA表达,Bcl-2、Ki-67、RAC1蛋白表达降低(P<0.05),细胞凋亡率、miR-136-5p和Bax表达升高(P<0.05)。敲低miR-136-5p表达可减弱沉默CircNRIP1对MCF-7/PTX细胞的抑制作用(P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-136-5p与CircNRIP1和RAC1存在靶向关系。结论沉默CircNRIP1表达可抑制MCF-7/PTX细胞恶性生物学行为,降低其PTX耐药性,可能与调控miR-136-5p/RAC1轴有关。 展开更多
关键词 circnrip1 miR-136-5p/RAC1轴 乳腺癌 化疗耐药 紫杉醇
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血清circNRIP1表达在胃癌诊疗中的临床意义 被引量：4
5
作者 陈婧 张荣 +1 位作者 王浩斌 邱昌伟 《胃肠病学》 北大核心 2021年第1期39-42,共4页
背景:环状RNA(circRNA)与恶性肿瘤的发生、发展存在关联,最近研究表明部分circRNA在胃癌的早期诊断、治疗靶点筛选和预后判断中具有重要的临床转化价值。目的:探讨circNRIP1在胃癌患者血清中的表达及其对胃癌诊断、治疗和预后的临床意... 背景:环状RNA(circRNA)与恶性肿瘤的发生、发展存在关联,最近研究表明部分circRNA在胃癌的早期诊断、治疗靶点筛选和预后判断中具有重要的临床转化价值。目的:探讨circNRIP1在胃癌患者血清中的表达及其对胃癌诊断、治疗和预后的临床意义。方法:选取2016年9月—2019年9月都江堰市人民医院收治的76例病理确诊的胃癌患者,以63名健康体检者设置为健康对照组。运用实时荧光定量PCR法检测血清circNRIP1表达,并分析胃癌患者血清circNRIP1表达与临床病理特征的关系,ROC曲线分析circNRIP1的诊断效能。结果:胃癌患者血清circNRIP1表达显著高于健康对照组(P<0.01)。胃癌circNRIP1表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期具有相关性(P<0.05)。胃癌患者术后血清circNRIP1表达较术前显著降低(P<0.05)。术后随访2年发现,胃癌存活组血清circNRIP1表达明显低于死亡组(P<0.05)。ROC曲线显示血清circNRIP1表达诊断胃癌的敏感性为88.9%,特异性为88.2%,AUC为0.876。结论:检测胃癌患者血清circNRIP1表达有利于胃癌的早期诊断以及对胃癌患者治疗效果和预后的评估。 展开更多
关键词 胃肿瘤 环状RNAs circnrip1 诊断 预后
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CircNRIP1在肺腺癌中的表达意义及其促进肺腺癌细胞增殖和转移的作用机制 被引量：3
6
作者 石红 陈盈 杨晓燕 《南昌大学学报（医学版）》 2022年第2期7-13,共7页
目的研究环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在肺腺癌组织中的表达及临床意义,并探讨circNRIP1对肺腺癌细胞增殖和转移能力的影响和发挥作用的分子机制。方法采用qRT-PCR检测circNRIP1在肺腺癌组织和癌旁组织中的表达,并分析circNR... 目的研究环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在肺腺癌组织中的表达及临床意义,并探讨circNRIP1对肺腺癌细胞增殖和转移能力的影响和发挥作用的分子机制。方法采用qRT-PCR检测circNRIP1在肺腺癌组织和癌旁组织中的表达,并分析circNRIP1的表达与肺腺癌患者临床病理参数的关系及对肺腺癌患者预后的影响。常规培养肺腺癌细胞A549,转染circNRIP1 siRNA,分为si-NC组和si-circNRIP1-1组、si-circNRIP1-2组,qRT-PCR检测各组细胞中circNRIP1的表达,MTS检测各组细胞增殖能力,平板克隆实验检测各组细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测各组细胞周期,Transwell实验检测各组细胞转移能力;Western blotting检测circNRIP1对PI3K/AKT信号通路关键蛋白表达影响。结果与癌旁组织相比,circNRIP1在肺腺癌组织中的表达显著升高(P<0.05),circNRIP1高表达与肺腺癌肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05),高表达circNRIP1的肺腺癌患者预后较差。与si-NC组相比,si-circNRIP1-1组和si-circNRIP1-2组肺腺癌细胞中circNRIP1的表达显著降低(P<0.05),肺腺癌细胞增殖、平板克隆形成能力和转移能力显著降低(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05)。干扰circNRIP1表达显著抑制肺腺癌细胞PI3K/AKT信号通路关键蛋白pPI3K和pAKT的表达及其下游靶蛋白cyclinD1和MMP2的表达。结论circNRIP1可能通过调控PI3K/AKT信号通路促进肺腺癌细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 肺腺癌 circnrip1 增殖 转移 PI3K/AKT信号通路
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CircNRIP1调节miR-193b-3p/STMN1轴对胃癌细胞顺铂耐药性的影响 被引量：1
7
作者 边浩鹏 董英辉 +2 位作者 张静 潘静 孙远 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第5期348-353,共6页
目的:探究CircNRIP1调节miR-193b-3p/STMN1轴对胃癌细胞AGS顺铂(DDP)耐药的影响。方法:培养AGS与AGS/DDP细胞,比较两种细胞增殖抑制率以及CircNRIP1、mi R-193b-3p、STMN1表达情况;将AGS/DDP细胞分为AGS/DDP组、sh NC组、sh CircNRIP1组... 目的:探究CircNRIP1调节miR-193b-3p/STMN1轴对胃癌细胞AGS顺铂(DDP)耐药的影响。方法:培养AGS与AGS/DDP细胞,比较两种细胞增殖抑制率以及CircNRIP1、mi R-193b-3p、STMN1表达情况;将AGS/DDP细胞分为AGS/DDP组、sh NC组、sh CircNRIP1组、sh CircNRIP1+inhibitor NC组、sh CircNRIP1+mi R-193b-3p inhibitor组,测定各组AGS/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率、侵袭能力以及STMN1蛋白水平;测定mi R-193b-3p与CircNRIP1、STMN1靶向关系。结果:与AGS细胞比较,AGS/DDP细胞CircNRIP1、STMN1 m RNA与蛋白水平升高,细胞增殖抑制率、miR-193b-3p降低(P<0.05);与AGS/DDP组相比,sh CircNRIP1组细胞增殖抑制率、凋亡率、mi R-193b-3p升高,侵袭细胞数、CircNRIP1、STMN1 m RNA与蛋白减少(P<0.05);与sh CircNRIP1组相比,sh CircNRIP1+miR-193b-3p inhibitor组细胞增殖抑制率、凋亡率、miR-193b-3p降低,侵袭细胞数、CircNRIP1、STMN1 m RNA与蛋白升高(P<0.05);miR-193b-3p与CircNRIP1、STMN1均存在靶向关系。结论:沉默AGS/DDP细胞中CircNRIP1表达,可靶向mi R-193b-3p/STMN1抑制AGS/DDP细胞增殖、侵袭,促进AGS/DDP细胞凋亡,实现AGS/DDP细胞对DDP耐药的逆转。 展开更多
关键词 circnrip1 miR-193b-3p/STMN1 顺铂 胃癌细胞
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circNRIP1调控miR-190a-5p对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响
8
作者 童诚 徐康 +2 位作者 陈冲 崔建华 吴钢 《国际免疫学杂志》 2024年第6期594-600,共7页
目的探讨circNRIP1对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及可能机制。方法收集2020年2月至2021年7月江苏省东台市人民医院收治的70例食管癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用实时定量PCR法检测circNRIP1、miR-190a-5p的表达;Pearson法... 目的探讨circNRIP1对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及可能机制。方法收集2020年2月至2021年7月江苏省东台市人民医院收治的70例食管癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用实时定量PCR法检测circNRIP1、miR-190a-5p的表达;Pearson法分析食管癌组织中circNRIP1、miR-190a-5p表达量的相关性;体外培养人食管癌细胞EC9706随机分为si-NC组、si-circNRIP1组、miR-NC组、miR-190a-5p mimic组、si-circNRIP1+anti-miR-NC组、si-circNRIP1+miR-190a-5p Inhibitor组;CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移;双荧光素酶报告实验检测circNRIP1与miR-190a-5p的靶向关系。结果食管癌组织中circNRIP1表达水平较癌旁组织升高(t=32.68,P<0.05),而miR-190a-5p表达水平低于癌旁组织(t=26.01,P<0.05);circNRIP1与miR-190a-5p呈负相关(r=-0.89,P<0.05);circNRIP1、miR-190a-5p表达与淋巴结转移、肿瘤-淋巴结-转移(tumor-node-metastasis,TMM)分期密切相关(χ^(2)值分别为6.03、6.49、31.97、15.68,P值均<0.05);与si-NC组比较,si-circNRIP1组miR-190a-5p的表达升高[(2.68±0.13)比(1.00±0.00),t=36.77,P<0.05],细胞增殖抑制率和细胞凋亡率升高[%:(44.90±2.05)比(0.00±0.00),(21.97±1.14)比(8.05±0.56),t值分别为65.71、32.89,P值均<0.05],迁移细胞数减少[个:(84.11±2.77)比(175.22±5.65),t=43.44,P<0.05];circNRIP1可靶向调控miR-190a-5p的表达;与miR-NC组比较,miR-190a-5p mimic组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高且迁移细胞数量降低[%:(58.68±2.48)比(0.00±0.00),(23.15±1.70)比(7.92±0.92),(65.89±2.88)比(171.89±8.84),t值分别为70.98、23.64、34.20,P值均<0.05];与si-circNRIP1+anti-miR-NC组比较,si-circNRIP1+miR-190a-5p Inhibitor组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显降低且迁移细胞数均明显增多[%:(14.43±1.40)比(44.73±2.37),(12.93±0.81)比(21.94±1.85),个:(157.78±8.11)比(80.89±5.43),t值分别为33.02、13.38、23.63,P值均<0.05]。结论沉默circNRIP1可通过靶向调控miR-190a-5p表达而抑制食管癌细胞增殖及迁移,并可诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 circnrip1 miR-190a-5p 细胞增殖 迁移
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