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CircACAP2调节miR-139-5p/HOXA9信号轴对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响
1
作者 吴杰 杨宇浩 邱兆友 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1613-1622,共10页
该文探究CircACAP2调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/同源盒基因A9(HOXA9)信号轴对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。收集2020年12月~2024年12月在青岛市胶州中心医院进行治疗的150例脑胶质瘤组织以及150例因为外伤等原因进行颅内减... 该文探究CircACAP2调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/同源盒基因A9(HOXA9)信号轴对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。收集2020年12月~2024年12月在青岛市胶州中心医院进行治疗的150例脑胶质瘤组织以及150例因为外伤等原因进行颅内减压术患者的正常脑组织,并以脑胶质瘤细胞系SW1088为研究对象,分为CK组、沉默-NC组、沉默-CircACAP2组、miRNC组、miR-139-5p mimic组、沉默-CircACAP2+inhibitor NC组、沉默-CircACAP2+miR-139-5p inhibitor组。qRT-PCR检测组织及SW1088细胞中CircACAP2、miR-139-5p和HOXA9 mRNA表达情况;CCK-8法、划痕实验、Transwell法、Western blot法分别检测细胞增殖、迁移、侵袭相关蛋白表达情况;双荧光素酶实验验证miR-139-5p与CircACAP2、HOXA9靶向关系。结果显示,脑胶质瘤组织相比于正常脑组织CircACAP2、HOXA9 mRNA、HOXA9蛋白表达水平升高,miR-139-5p表达水平降低(P<0.05)。沉默-CircACAP2组相比于CK组、沉默-NC组的CircACAP2表达水平、HOXA9表达水平、细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数,以及Ki-67和Vimentin蛋白表达水平降低,miR-139-5p表达水平升高(P<0.05);miR-139-5p mimic组相比于CK组、miR-NC组HOXA9表达水平、细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数,以及Ki-67和Vimentin蛋白表达水平降低,miR-139-5p表达水平升高(P<0.05);沉默-CircACAP2+miR-139-5p inhibitor组相比于沉默-CircACAP2组、沉默-CircACAP2+inhibitor NC组miR-139-5p表达水平降低,HOXA9 mRNA表达水平、细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数,以及Ki-67、Vimentin、HOXA9蛋白表达水平升高(P<0.05);CircACAP2和HOXA9分别与miR-139-5p存在靶向关系。结果表明,沉默CircACAP2可上调miR-139-5p的表达,进而抑制HOXA9的表达,从而抑制脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 circacap2 miR-139-5p/HOXA9信号轴 脑胶质瘤 增殖 迁移 侵袭
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CircACAP2靶向miR-29a-3p/CCNT2轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响
2
作者 屈苗 关欣 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第17期3128-3135,共8页
目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-... 目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-CircACAP2+inhibitor-NC组(si-CircACAP2和inhibitor-NC共转染)、si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组(si-CircACAP2和miR-29a-3p inhibitor共转染);实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测H9c2细胞中CircACAP2、miR-29a-3p的表达水平;四唑盐(MTT)法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测H9c2细胞自噬;乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测H9c2细胞上清中LDH、MDA、SOD水平,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白(Beclin-1、P62)及CCNT2的表达;双荧光素酶报告检测CircACAP2对miR-29a-3p的靶向关系和miR-29a-3p对CCNT2的靶向关系。结果:与Control组比较,Model组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);与Model组比较,si-CircACAP2组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达降低,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达升高(P<0.05);与si-CircACAP2组比较,si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组H9c2细胞中CircACAP2表达差异无统计学意义(P>0.05),凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);CircACAP2靶向调控miR-29a-3p的表达,miR-29a-3p靶向负调控CCNT2的表达。结论:敲低CircACAP2可能通过靶向miR-29a-3p来下调CCNT2表达,进而抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡、自噬能力及氧化应激,促进细胞增殖,发挥保护作用。 展开更多
关键词 缺氧/复氧 circacap2 miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2轴 心肌细胞 实验研究
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