益气除痰方调控miR-7-5p/AMBRA1促进弥漫大B细胞淋巴瘤自噬和凋亡的机制研究

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作者 张翠芬 李志超 +4 位作者 杨德宇 陶佳豪 王科 郑创杰 翟林柱 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第21期4001-4009,共9页

目的探究益气除痰方(YQCT)影响弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)自噬和凋亡的具体机制。方法采用CCK8检测YQCT含药血清对DLBCL细胞活性的影响,免疫荧光检测自噬蛋白表达,流式细胞术分析凋亡水平;观察YQCT含药血清或自噬抑制剂羟氯喹(HCQ)作用... 目的探究益气除痰方(YQCT)影响弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)自噬和凋亡的具体机制。方法采用CCK8检测YQCT含药血清对DLBCL细胞活性的影响,免疫荧光检测自噬蛋白表达,流式细胞术分析凋亡水平;观察YQCT含药血清或自噬抑制剂羟氯喹(HCQ)作用后的细胞活性及凋亡蛋白表达,并建立DLBCL重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠荷瘤模型,以YQCT或HCQ处理,检测自噬、凋亡指标及mTOR、AMBRA1、p-c-Myc、c-Myc的表达,验证YQCT对miR-7-5p的调控及HCQ的增效作用。结果不同浓度YQCT含药血清均下调miR-7-5p,其中5%含药血清(5%MS)下调最显著,且AMBRA1表达上调;5%MS对细胞活性的抑制作用强于5%胎牛血清(5%NC)组和10%胎牛血清(10%NC)组。免疫荧光证实5%MS可显著促进细胞自噬,CCK8和流式分析表明其能抑制细胞生长、促进凋亡,而miR-7-5p mimics可逆转该抑制效应。TUNEL实验发现,5%MS可促进凋亡,且加入HCQ后,凋亡作用呈现HCQ剂量依赖性增强。Western blot证实5%MS可上调自噬及凋亡相关蛋白水平;HCQ与5%MS联合干预时,自噬相关蛋白LC3II/I表达下降、p62表达升高,凋亡相关蛋白caspase3表达上升;免疫荧光显示HCQ可下调5%MS诱导的自噬蛋白。体内实验中,YQCT联合HCQ组抑瘤效果最显著,HCQ可增强YQCT的促凋亡能力。结论YQCT可通过调控miR-7-5p靶向AMBRA1,促进DLBCL细胞自噬和凋亡;HCQ可增强YQCT对miR-7-5p的调控效应,使作用更偏向凋亡方向,从而抑制DLBCL细胞生长,miR-7-5p可能成为DLBCL潜在的生物标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 益气除痰方 miR-7-5p AMBRA1 凋亡 自噬

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益气除痰方联合顺铂对肺癌耐药皮下移植瘤生长及Bax、Bcl-2表达的影响 被引量：20

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作者 李元滨 林丽珠 +4 位作者 王超 陈昌明 杨建猛 郗昕 李轶璠 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期755-758,共4页

目的:观察益气除痰方(以下简称中药)联合顺铂对人肺腺癌耐顺铂A549/DDP细胞裸鼠皮下移植瘤生长及组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法:建立人肺腺癌耐顺铂裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,中药低、高剂量组,顺铂组,低、高联合... 目的:观察益气除痰方(以下简称中药)联合顺铂对人肺腺癌耐顺铂A549/DDP细胞裸鼠皮下移植瘤生长及组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法:建立人肺腺癌耐顺铂裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,中药低、高剂量组,顺铂组,低、高联合化疗组;透射电镜观察肿瘤组织细胞超微结构;流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡率;免疫蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果:顺铂组抑瘤率为10.11%,低、高联合化疗组抑瘤率为28.09%、43.82%;与顺铂组比较,低、高联合化疗组瘤重、瘤重指数均显著降低(P<0.01)。透射电镜下各联合化疗组呈典型凋亡形态;流式细胞术检测结果显示:与顺铂组比较,各联合化疗组移植瘤细胞凋亡率显著上升(P<0.01);高联合化疗组Bax、Caspase-3蛋白表达量最高,Bcl-2蛋白表达量最低,Bcl-2/Bax比值降低,与模型组和顺铂组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:益气除痰方与顺铂联用具有显著协同作用,其抗耐药机制可能与上调Bax表达,下调Bcl-2表达,提高A549/DDP细胞对顺铂敏感性,促进耐药肺癌细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 肺癌 顺铂 BAX Bcl-2 Caspase-3 益气除痰方 多药耐药

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益气除痰方对肺癌系列基质金属蛋白酶表达的影响 被引量：19

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作者 王淑美 林丽珠 +2 位作者 熊绍权 周京旭 孙玲玲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-138,共4页

目的研究益气除痰方对人肺腺癌A549细胞及LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促肿瘤转移因子表达的影响。方法 :培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测... 目的研究益气除痰方对人肺腺癌A549细胞及LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促肿瘤转移因子表达的影响。方法 :培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP1、MMP2、MMP9、MMP14 mRNA基因表达的影响。建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,治疗组每日予益气除痰方3.0 g.kg-1处理,灌胃21 d后,处死,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,并用免疫组化法比较各组肿瘤组织MMP2、MMP14的表达。结果 :20%益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力,并能降低MMP2、MMP14转录水平基因的表达,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),MMP1、MMP9 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);益气除痰方3.0 g.kg-1组LEWIS肺癌小鼠肿瘤体积、重量、肺转移灶数明显降低,肿瘤组织MMP2、MMP14的表达降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 :益气除痰方能抑制肺腺癌A549细胞的侵袭和转移,降低MMP2、MMP14 mRNA转录水平的表达;能抑制LEWIS肺癌小鼠肿瘤肺转移,降低其肿瘤组织MMP2、MMP14的表达,抗转移可能是益气除痰方治疗肺癌的作用机制之一。 展开更多

关键词 益气除痰方 LEWIS肺癌 人肺腺癌A549 MMP2 MMP14

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益气除痰方对耐顺铂肺癌移植瘤生长及下调UPR诱导细胞凋亡的研究 被引量：12

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作者 李元滨 林丽珠 +4 位作者 杨建猛 方若鸣 李佳殷 张景涛 杨文娟 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期3906-3910,共5页

目的:研究益气除痰方(以下简称中药)对耐顺铂肺癌移植瘤生长及内质网应激相关蛋白的影响。方法:建立耐顺铂肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、中药低、高剂量组;绘制各组移植瘤生长曲线,计算瘤重指数、抑瘤率;HE染色法、透射电镜观察... 目的:研究益气除痰方(以下简称中药)对耐顺铂肺癌移植瘤生长及内质网应激相关蛋白的影响。方法:建立耐顺铂肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、中药低、高剂量组;绘制各组移植瘤生长曲线,计算瘤重指数、抑瘤率;HE染色法、透射电镜观察各组瘤组织形态学,流式细胞术测定细胞凋亡率;免疫蛋白印迹法检测GRP78/Bip、PDI、PERK、p-PERK、e IF2α、p-e IF2α蛋白表达。结果:与模型组比较,中药高剂量组能明显抑制肿瘤生长,促进瘤细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),并可明显下调GRP78/Bip、PDI、p-PERK、p-e IF2α蛋白表达(P<0.01);而PERK、e IF2α各组表达无统计学差异。结论:益气除痰方浓度依赖性抑制耐顺铂肺癌裸鼠移植瘤生长,其作用机制可能与其下调GRP78/Bip、PDI、p-PERK、p-e IF2α蛋白表达,弱化内质网未折叠蛋白反应,启动内质网凋亡通路有关。 展开更多

关键词 肺癌 移植瘤 益气除痰方 凋亡 内质网未折叠蛋白反应

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益气化痰法为主中医药治疗方案对老年非小细胞肺癌中位生存期的影响:一项多中心、前瞻性临床队列研究 被引量：56

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作者 周岱翰 林丽珠 +12 位作者 田华琴 吴万垠 贾英杰 张军一 刘魁凤 邓力 胡作为 徐天舒 谢强 邓运宗 林清 谢德荣 王树堂 《世界中医药》 CAS 2014年第7期833-838,844,共7页

目的:观察以益气化痰法为主的中医综合治疗方案在延长III、IV期老年非小细胞肺癌(NSCLC)生存期中的作用,建立老年晚期非小细胞肺癌的中医药综合治疗方案。方法:采用多中心、临床前瞻性队列研究的临床研究方法,以Ⅲ、Ⅳ期老年NSCLC患者... 目的:观察以益气化痰法为主的中医综合治疗方案在延长III、IV期老年非小细胞肺癌(NSCLC)生存期中的作用,建立老年晚期非小细胞肺癌的中医药综合治疗方案。方法:采用多中心、临床前瞻性队列研究的临床研究方法,以Ⅲ、Ⅳ期老年NSCLC患者作为研究对象,采用益气除痰法为主治疗,针药并用,辨病与辨证相结合治疗,用K-M法分析中位疾病进展时间、中位生存期,并按既往接受过抗肿瘤治疗与否及不同病理类型等进行分层分析。结果:共纳入合格病例315例,其中中医队列完成纳入167例,化疗队列148例。采用K-M法进行生存分析,中医队列、化疗队列中位生存期分别为385 d、305 d(P=0.331);中位TTP分别为114.0 d、116.5 d(P=0.452)。进一步分层分析表明,对于初治患者中医队列、化疗队列中位生存期分别为291 d、331 d(P=0.308),对于复治患者分别为477 d、264 d(P=0.025);对于鳞癌患者中医队列、化疗队列中位生存期分别为267 d、389 d(P=0.042),腺癌患者分别为428 d、234 d(P=0.150),其他肺癌患者分别为287 d、146 d(P=0.050)。结论:益气化痰法为主的中医药综合治疗在延长III、IV期老年NSCLC的中位生存期与控制肿瘤进展方面,均与化疗作用相当,对于老年晚期非小细胞肺癌患者是一种有效替代治疗方案。分层分析提示对于复治患者和非鳞癌患者,中医药治疗有可能较化疗具有更好的疗效,值得进一步研究。 展开更多

关键词 中医药治疗 益气除痰法 非小细胞肺癌 临床队列研究

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益气除痰方对脾虚Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、生存期及PRDX-1、PRDX-6表达的影响 被引量：26

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作者 林丽珠 王淑美 周京旭 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期99-103,共5页

目的观察益气除痰方对脾虚C57BL/6J小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、肺转移、生存期及肿瘤组织中过氧化物氧化还原酶PRDX-1、PRDX-6表达的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型30只,脾虚Lewis肺癌模型90只,分为4组,Lewis组(对照组)、脾虚Le... 目的观察益气除痰方对脾虚C57BL/6J小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、肺转移、生存期及肿瘤组织中过氧化物氧化还原酶PRDX-1、PRDX-6表达的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型30只,脾虚Lewis肺癌模型90只,分为4组,Lewis组(对照组)、脾虚Lewis组(模型组)、益气除痰方低剂量组、高剂量组,每组30只,对照组、模型组予生理盐水0.5mL、治疗组予益气除痰方1.0及3.0g/kg处理,每天1次,灌胃21天后,每组各处死10只检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,并用免疫组化法比较各组肿瘤组织PRDX-1,PRDX-6的表达,其余荷瘤鼠观察生存期。结果益气除痰方高剂量组Lewis肺癌小鼠肿瘤体积、瘤重、肺转移灶明显下降,分别为(1.14±0.30)cm3、(0.83±0.26)g、(6.20±2.53)个,而对照组分别为(2.83±0.35)cm3、(2.08±0.28)g、(8.60±1.84)个,模型组分别为(2.29±0.49)cm3、(1.67±0.33)g、(8.70±2.00)个;高剂量组小鼠中位生存期为(29.00±0.89)天,平均生存时间为(29.60±0.53)天,与对照组(22.00±0.75)天、(22.90±0.50)天,模型组(21.00±0.53)天、(20.95±0.44)天比较生存期明显延长;高剂量组免疫组化肿瘤组织PRDX-1、PRDX-6表达量明显下降,分别为0.15±0.03、0.12±0.02,对照组分别为0.52±0.07、0.43±0.06,模型组分别为0.61±0.09、0.56±0.07。高剂量组与对照组、模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。高剂量组抑瘤率为50.30%,生命延长率为41.29%,优于低剂量组(P<0.05)。结论益气除痰方能抑制脾虚小鼠Lewis肺癌的生长,延长生存期,其机制可能与降低PRDX-1,PRDX-6的过量表达有一定关系。 展开更多

关键词 益气除痰方 脾虚证 LEWIS肺癌 生存期 过氧化物酶-1 过氧化物酶-6

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益气除痰方对小鼠lewis肺癌细胞凋亡的影响 被引量：9

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作者 方若鸣 林丽珠 +1 位作者 杨文娟 杨建猛 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期147-151,共5页

目的探讨益气除痰方对小鼠Lewis肺癌生长的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,将96只接种Lewis肺癌的小鼠随机分为6组:益气除痰方高、低剂量组,顺铂对照组,顺铂联合中药高、低剂量组,模型组,每组16只。给药1... 目的探讨益气除痰方对小鼠Lewis肺癌生长的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,将96只接种Lewis肺癌的小鼠随机分为6组:益气除痰方高、低剂量组,顺铂对照组,顺铂联合中药高、低剂量组,模型组,每组16只。给药1周后停药观察1周,其中一半动物处死观察细胞凋亡相关指标,另一半动物用于观察生存期。结果与模型组比较,益气除痰方高、低剂量组均能明显降低瘤质量指数,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。益气除痰方低剂量组肺转移抑制率为28%、高剂量组为52%,顺铂对照组为50%,顺铂联合低剂量组为40%、高剂量组为50%,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,益气除痰方组高、低剂量组和顺铂对照组、联合用药组均能明显提高肿瘤细胞凋亡率,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。与模型组比较,益气除痰方低剂量组及顺铂对照组能有效延长模型小鼠的生存期,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论益气除痰方有抑制肿瘤生长、延长肿瘤动物生存期及促进Lewis肺癌细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 益气除痰方 细胞凋亡 LEWIS肺癌 小鼠

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除痰解毒方通过EMT途径逆转肺癌吉非替尼耐药 被引量：18

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作者 罗杨 童冰杰 +3 位作者 赵宾 刘启欧 魏玉林 王淑美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期34-40,共7页

目的:从上皮-间充质转化(EMT)途径探讨除痰解毒方逆转肺癌分子靶向耐药的机制。方法:建立人肺腺癌耐药细胞株H1975裸鼠模型(n=60),随机分为:模型组,吉非替尼(0. 04 g/kg)组,除痰解毒方低、中、高剂量(13. 52 g/kg、27. 04 g/kg和54. 08 ... 目的:从上皮-间充质转化(EMT)途径探讨除痰解毒方逆转肺癌分子靶向耐药的机制。方法:建立人肺腺癌耐药细胞株H1975裸鼠模型(n=60),随机分为:模型组,吉非替尼(0. 04 g/kg)组,除痰解毒方低、中、高剂量(13. 52 g/kg、27. 04 g/kg和54. 08 g/kg)组,除痰解毒方中剂量(27. 04 g/kg)联合吉非替尼(0. 04 g/kg)组,每组10只。治疗2周,检测瘤体积和瘤质量,计算抑瘤率,采用免疫组织化学法、Western blot法和real-time PCR法检测各组肿瘤组织中E-cadherin、Snail和vimentin蛋白及m RNA的变化。结果:与模型组及吉非替尼组比较,除痰解毒方中、高剂量组及联合用药组瘤体积和瘤质量显著降低(P <0. 05)。免疫组织化学法、Western blot法及realtime PCR法结果均显示除痰解毒方中剂量组和联合用药组E-cadherin蛋白及m RNA的表达水平显著上调,Snail和vimentin蛋白及m RNA表达水平较模型组与吉非替尼组显著下调(P <0. 05)。结论:除痰解毒方可抑制H1975细胞裸鼠移植瘤的生长,逆转肺癌对吉非替尼的耐药,其作用机制可能与调控EMT相关标志蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 除痰解毒方 上皮-间充质转化 吉非替尼 耐药性 肺癌

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益气除痰方对BALB/c-nu裸小鼠A549肺癌转移的抑制作用及其机制探索 被引量：17

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作者 陈昌明 孙玲玲 林丽珠 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期513-519,共7页

目的研究益气除痰方对BALB/c-nu裸小鼠A549肺癌肿瘤生长及转移的抑制作用并初步探讨其作用机制。方法构建裸鼠A549肺癌移植瘤模型,随机分为空白对照组和益气除痰方组(15.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续灌胃给药21 d,期间每3天测体... 目的研究益气除痰方对BALB/c-nu裸小鼠A549肺癌肿瘤生长及转移的抑制作用并初步探讨其作用机制。方法构建裸鼠A549肺癌移植瘤模型,随机分为空白对照组和益气除痰方组(15.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续灌胃给药21 d,期间每3天测体质量和瘤体体积;21 d后脱颈处死小鼠,剥取瘤体测瘤质量,计算抑瘤率;摘取肺组织,固定后观察肺表面转移灶个数,计算肺转移抑制率;采用免疫组化法检测瘤体组织上皮间质转化(EMT)标志物及相关信号蛋白表达。结果与空白对照组比较,益气除痰方组小鼠的瘤体体积和瘤质量明显下降(P<0.05),抑瘤率为27.6%,提示益气除痰方对肿瘤的生长具有一定的抑制作用;益气除痰方组小鼠肺转移结节明显少于对照组(P<0.05),其转移抑制率为39.6%,提示益气除痰方在体内可抑制肺癌的转移;益气除痰方组瘤体组织的上皮标志蛋白E-cadherin较对照组升高(P<0.05),而EMT关键标志蛋白vimentin和fibronectin明显下降(P<0.05),提示益气除痰方可抑制EMT的发生,从而降低肿瘤细胞的侵袭转移能力;益气除痰方组的GRP78、smad2/3、SRC、P38、ERK、JNK的表达及其磷酸化激活程度均较对照组下降(P<0.05),提示益气除痰方抑制肿瘤生长及其抑制EMT的作用可能与其多靶点抑制GRP78、smad2/3、SRC、P38、ERK、JNK等信号蛋白有关。结论益气除痰方可抑制肺癌肿瘤细胞的生长并抑制肺癌的转移,其抑制肿瘤转移的机制与其抑制细胞EMT的发生有关。益气除痰方可能通过多靶点的抑制GRP78、smad2/3、SRC、MAPK(JNK、P38、ERK)等信号通路来实现对EMT的逆转作用。 展开更多

关键词 益气除痰方 A549细胞 肺癌转移 上皮间质转化

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益气除痰方通过抑制Akt信号通路诱导顺铂耐药肺癌细胞凋亡的作用及分子机制研究 被引量：14

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作者 张恩欣 周岱翰 侯超 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期365-371,共7页

目的探讨益气除痰方诱导顺铂耐药肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法制备益气除痰方含药血清,采用Annexin V/PI双染结合流式细胞术检测益气除痰方对人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP1细胞凋亡的影响。采用Caspase分光光度法检测试剂... 目的探讨益气除痰方诱导顺铂耐药肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法制备益气除痰方含药血清,采用Annexin V/PI双染结合流式细胞术检测益气除痰方对人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP1细胞凋亡的影响。采用Caspase分光光度法检测试剂盒检测益气除痰方对A549/DDP细胞内Caspase-8和Caspase-3激酶活性的影响。采用Western blotting检测益气除痰方对A549/DDP细胞Akt/FoxO信号通道相关蛋白的影响。结果与空白血清对照组比较,A549/DDP细胞经不同浓度益气除痰方作用后,凋亡相关蛋白Caspase-8和Caspase-3激酶活性增强(P<0.05),呈剂量依赖性效应。益气除痰方能明显抑制Akt的磷酸化(P<0.05),随着剂量的增加,其抑制作用增强,而Akt总蛋白的水平基本未受影响;相对应FoxO3a蛋白磷酸化水平逐渐降低(P<0.05),而Fox O3a总蛋白的水平基本未受影响;并且经益气除痰方作用后,FoxO3a下游的Bim的表达显著升高(P<0.05),均呈现明显的剂量依赖性效用。结论益气除痰方可能通过抑制Akt/FoxO信号转导从而激活内源性凋亡通路,诱导肿瘤细胞凋亡,进而逆转肺癌细胞顺铂耐药。 展开更多

关键词 益气除痰方 顺铂耐药肺癌细胞 细胞凋亡 Akt/Fox O

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益气除痰方调控内质网应激反应抑制H1650肺癌生长的研究 被引量：9

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作者 孙玲玲 方若鸣 +1 位作者 张景涛 林丽珠 《广州中医药大学学报》 CAS 北大核心 2014年第4期573-577,共5页

【目的】探讨益气除痰方对肺腺癌H1650细胞的抑瘤作用及机制。【方法】细胞实验采用流式细胞术测定益气除痰方含药血清对H1650细胞凋亡的影响,Western blot法检测益气除痰方含药血清对H1650细胞生长阻滞和DNA损害诱导基因153(CHOP/GADD1... 【目的】探讨益气除痰方对肺腺癌H1650细胞的抑瘤作用及机制。【方法】细胞实验采用流式细胞术测定益气除痰方含药血清对H1650细胞凋亡的影响,Western blot法检测益气除痰方含药血清对H1650细胞生长阻滞和DNA损害诱导基因153(CHOP/GADD153)、生长阻滞和DNA损害诱导基因34(GADD34)表达的影响。动物实验通过复制BALB/C裸鼠H1650肺癌种植瘤模型,随机分为模型组、中药低剂量组(剂量为9.1 g·kg-1·d-1)、中药高剂量组(剂量为27.3 g·kg-1·d-1),测定各组瘤体体积与质量,Western blot法检测各组肺癌组织CHOP/GADD153、GADD34蛋白的表达。【结果】体积分数15%、30%含药血清组H1650细胞的凋亡率分别为(8.14±1.10)%、(18.21±3.07)%(P<0.05),30%含药血清组CHOP/GADD153、GADD34蛋白表达依次为空白对照组的1.46倍、1.53倍。中药低、高剂量组均可显著抑制BALB/C裸鼠H1650肺癌种植瘤瘤体生长(P<0.05),抑瘤率分别为19.54%、47.03%。中药高、低剂量组CHOP/GADD153蛋白表达分别为模型组的1.59倍、1.44倍(P<0.05),GADD34蛋白表达量分别为模型组的1.98倍、1.49倍(P<0.05)。【结论】益气除痰方可抑制肺腺癌H1650种植瘤瘤体增长,促进H1650肺腺癌细胞凋亡,其机制可能与其能调控CHOP/GADD153、GADD34在内的内质网应激反应相关。 展开更多

关键词 益气除痰方 药理学 肺癌 中药疗法 细胞凋亡 内质网应激反应 疾病模型 动物 裸鼠

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益气除痰方对肺癌A549移植瘤细胞凋亡途径Caspase-4及DNA-PK的影响 被引量：9

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作者 李舒 王淑美 +1 位作者 杨洋博君 刘启欧 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1247-1250,共4页

目的:探讨益气除痰方是否通过内质网UPR介导的细胞凋亡途径发挥抗肿瘤作用。方法:建立40只肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,于接种第7天将小鼠随机分为模型组(生理盐水组)、顺铂注射液组(0.002 g/kg)、益气除痰方(3.0 g/kg)+顺铂注射液(0.00... 目的:探讨益气除痰方是否通过内质网UPR介导的细胞凋亡途径发挥抗肿瘤作用。方法:建立40只肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,于接种第7天将小鼠随机分为模型组(生理盐水组)、顺铂注射液组(0.002 g/kg)、益气除痰方(3.0 g/kg)+顺铂注射液(0.002 g/kg)组及益气除痰方低、高剂量组(3.0、6.0 g/kg),每组8只。中药灌胃给药,1次/d,连用21 d。顺铂注射液腹腔注射,1次/d,连用7 d。干预第22天,处死所有小鼠,测量瘤体质量、体积,采用免疫组化及Western blot法检测肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK的表达。结果:与模型组比较,益气除痰方各剂量组及益气除痰方+顺铂注射液组肿瘤体积、肿瘤质量显著降低,肿瘤组织中Caspase-4、DNA-PK表达均显著升高(P<0.01);益气除痰方+顺铂注射液组效果优于顺铂注射液组(P<0.05)。结论:益气除痰方对小鼠A549肺癌有一定抑制作用,其机制可能与通过升高Caspase-4、DNA-PK蛋白的表达介导细胞凋亡途径有关。 展开更多

关键词 益气除痰方 肺癌 细胞凋亡 Caspase-4 DNA-PK

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益气除痰方防治化疗相关性疲劳的疗效观察 被引量：8

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作者 关洁珊 欧阳明子 +2 位作者 肖志伟 林丽珠 曾科学 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期1211-1213,共3页

目的:观察益气除痰方防治恶性肿瘤患者化疗相关性疲劳的临床疗效,以寻求治疗化疗相关性疲劳的有效方法。方法:将符合纳入标准的63例患者,随机分为治疗组32例,对照组31例。两组病例的化疗方案基本相同。治疗组在化疗基础上加益气除痰方... 目的:观察益气除痰方防治恶性肿瘤患者化疗相关性疲劳的临床疗效,以寻求治疗化疗相关性疲劳的有效方法。方法:将符合纳入标准的63例患者,随机分为治疗组32例,对照组31例。两组病例的化疗方案基本相同。治疗组在化疗基础上加益气除痰方。治疗2周期后,观察治疗前后疲劳评分、生活质量评分、血细胞三系的变化。结果:益气除痰方组较对照组化疗相关性疲劳程度轻(P<0.05);益气除痰方组在生活质量的角色功能、情绪功能、社会功能、总健康状况、疲倦、恶心呕吐、失眠、食欲丧失、便秘腹泻领域评分优于对照组(P<0.05);益气除痰方组白细胞下降较对照组低(P<0.05)。结论:益气除痰方可以防治恶性肿瘤患者的化疗相关性疲劳,减轻癌症治疗相关证候群,提高患者生活质量。 展开更多

关键词 益气除痰方 化疗相关性疲劳

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益气除痰方下调MALAT-1表达对肺癌细胞发生上皮间质转化的影响 被引量：12

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作者 蒋梅 张晶 +1 位作者 张恩欣 成东茹 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第11期2592-2596,共5页

目的:研究益气除痰方对肺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的抑制作用及可能的分子机制。方法:聚合酶链式反应(PCR)检测并筛选出MALAT-1明显上调的肺癌细胞系H1229,及相对表达偏低的A549,用含益气除痰方的培养基分别进行干预。通过CCK8(Cell... 目的:研究益气除痰方对肺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的抑制作用及可能的分子机制。方法:聚合酶链式反应(PCR)检测并筛选出MALAT-1明显上调的肺癌细胞系H1229,及相对表达偏低的A549,用含益气除痰方的培养基分别进行干预。通过CCK8(Cell Counting Kit-8)试剂盒比色法检测肿瘤细胞的增殖能力;细胞划痕实验以及Transwell侵袭小室实验检测细胞的侵袭转移能力;用蛋白质免疫印记法(Western-blot)检测上皮间质转化相关蛋白转录是否上调;聚合酶链式反应(PCR)检测MALAT-1表达情况;并用蛋白质印记法检测TGF诱导的相关通路蛋白Smad2/3磷酸化水平。结果:与空白对照组相比,益气除痰方可抑制不同肺癌细胞株的增殖,抑制作用与MALAT-1表达上调与否关系不大,但是可在较低浓度即可对侵袭转移能力有明显抑制,抑制作用对MALAT-1上调的细胞株更明显,提示抑制水平与MALAT-1的表达下调有关,进一步检测发现益气除痰方可以下调TGF诱导的Smad2/3蛋白磷酸化。结论:益气除痰方抑制肺癌细胞侵袭转移的机制可能是通过下调MALAT-1,抑制Smad2/3磷酸化,从而抑制肺癌细胞发生上皮间质转化的进程。 展开更多

关键词 益气除痰方 肺癌细胞 MALAT-1 上皮间质转化

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除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠Twist、Fibronectin表达的影响 被引量：6

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作者 罗杨 王淑美 +3 位作者 童冰杰 赵宾 刘启欧 魏玉林 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1319-1324,1366,共7页

本文研究除痰解毒方(Chutan Jiedu Decoction,CJD)联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠移植瘤twist、fibronectin表达的影响,从上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)角度探讨其抗肿瘤作用机制。建立人肺腺癌H1975耐药细... 本文研究除痰解毒方(Chutan Jiedu Decoction,CJD)联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠移植瘤twist、fibronectin表达的影响,从上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)角度探讨其抗肿瘤作用机制。建立人肺腺癌H1975耐药细胞荷瘤裸鼠模型,随机分为模型组,吉非替尼组,除痰解毒方低、中、高剂量组,除痰解毒方中剂量联合吉非替尼组,每组10只,各组予以相应的药物灌胃2周。检测瘤体积和瘤质量,计算抑瘤率,采用免疫组织化学法、Western blot法、荧光定量PCR法检测各组肿瘤组织twist、fibronectin蛋白及基因的表达。结果显示,联合用药组抑瘤率为61.92%,明显高于模型组、吉非替尼组,除痰解毒方低、中、高剂量组(P<0.01)。免疫组织化学法、Western blot法及荧光定量PCR法结果均显示除痰解毒方中剂量、高剂量及联合用药组均能下调twist和fibronectin的表达,且联合用药组下调作用高于单独用药组(P<0.01)。研究结果表明除痰解毒方联合吉非替尼对肺腺癌H1975荷瘤小鼠移植瘤生长及twist、fibronectin表达的抑制作用优于除痰解毒方单药及吉非替尼组,其协同增效作用可能与逆转EMT增强吉非替尼的敏感性有关。 展开更多

关键词 除痰解毒方 肺癌 H1975 TWIST FIBRONECTIN

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益气除痰方对Lewis肺癌小鼠种植瘤细胞周期调控相关因子的影响 被引量：10

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作者 孙玲玲 林丽珠 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1846-1848,共3页

目的:观察益气除痰方对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及细胞周期调控相关因子P16、p21/WIF1/CIP1、蛋白激酶C(PKC)、c-myc的影响。方法:建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌种植瘤模型30只,随机分为Lewis肺癌模型组、益气除痰方低剂量组、高剂量组3组,每... 目的:观察益气除痰方对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及细胞周期调控相关因子P16、p21/WIF1/CIP1、蛋白激酶C(PKC)、c-myc的影响。方法:建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌种植瘤模型30只,随机分为Lewis肺癌模型组、益气除痰方低剂量组、高剂量组3组,每组10只。灌胃21d后,处死小鼠,检测肿瘤体积、重量,并用免疫组化法观察各组肿瘤组织P16、p21/WIF1/CIP1、PKC、c-myc的表达。结果:各组Lewis肺癌小鼠肿瘤体积、瘤重两两比较差异有统计学意义。其中高剂量组、低剂量组瘤体组织P16相对含量与模型组对比均显著增高(P<0.05,P<0.01);高剂量组与模型组、低剂量组对比p21/WIF1/CIP1含量显著增高(P<0.05,P<0.01)。三组PKC含量两两比较差异均有统计学意义。结论:益气除痰方能抑制小鼠Lewis肺癌的生长,其机制可能与其能通过上调P16、p21/WIF1/CIP1、下调PKC表达引起细胞周期阻滞,延长肿瘤细胞倍增时间相关。 展开更多

关键词 益气除痰方 LEWIS肺癌 P16 p21 WIF1 CIP1 蛋白激酶C

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益气除痰方含药血清对顺铂耐药肺癌细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：6

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作者 张恩欣 周岱翰 侯超 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第6期13-15,共3页

目的观察益气除痰方食药血清对顺铂耐药肺癌细胞A549/DDP增殖和细胞周期的影响。方法制备益气除痰方含药血清和空白血清。分别用0(空白血清)、0.5%、1%、2.5%、5%、10%、20%、30%益气除痰方含药血清培养肺癌A549/DDP细胞,用MTT比色法测... 目的观察益气除痰方食药血清对顺铂耐药肺癌细胞A549/DDP增殖和细胞周期的影响。方法制备益气除痰方含药血清和空白血清。分别用0(空白血清)、0.5%、1%、2.5%、5%、10%、20%、30%益气除痰方含药血清培养肺癌A549/DDP细胞,用MTT比色法测算增殖抑制率和半数抑制浓度(IC50)。用0、50%IC50、100%IC50浓度益气除痰方含药血清培养肺癌A549/DDP细胞,用流式细胞术测算G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例。结果0.5%、1%、2.5%、5%、10%、20%、30%益气除痰方含药血清培养A549/DDP细胞48 h后,细胞增殖抑制率分别为5.80%±0.95%、9.97%±1.26%、27.10%±3.22%、43.03%±2.02%、73.70%±4.69%、86.13%±1.59%、91.77%±1.65%,随着益气除痰方含药血清浓度增加,A549/DDP细胞增殖抑制率升高(P均<0.05),益气除痰方含药血清对A549/DDP细胞的IC50为8.56%。与益气除痰方含药血清浓度为0者比较,50%IC50和100%IC50浓度益气除痰方含药血清培养的A549/DDP细胞G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例降低,且药物浓度越高变化越显著(P均<0.05)。结论益气除痰方含药血清可抑制顺铂耐药肺癌A549/DDP细胞增殖,这可能与其阻滞A549/DDP细胞从G1期进入S期有关。 展开更多

关键词 肺癌细胞 益气除痰方 顺铂耐药 细胞增殖 细胞周期

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益气除痰方通过caspase-4途径诱导人肺腺癌A549细胞凋亡 被引量：4

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作者 李元滨 林丽珠 +1 位作者 陈昌明 杨建猛 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第9期1972-1976,2017,共6页

目的:研究益气除痰方血清(YQCT)对人肺腺癌A549细胞促凋亡作用并探讨其通过caspase-4途径诱导凋亡的机制。方法:运用血清药理学方法,予YQCT与人肺腺癌A549细胞共同孵育后,MTT法检测细胞生长状况;Hoechst 33258荧光法、流式细胞术Annexin... 目的:研究益气除痰方血清(YQCT)对人肺腺癌A549细胞促凋亡作用并探讨其通过caspase-4途径诱导凋亡的机制。方法:运用血清药理学方法,予YQCT与人肺腺癌A549细胞共同孵育后,MTT法检测细胞生长状况;Hoechst 33258荧光法、流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况;透射电镜观察细胞超微结构改变;免疫印迹法检测caspase-4、IRE1α、TRAF2、calpain-2、caspase-7蛋白表达情况;并采用化学抑制剂抑制caspase-4表达。结果:30%YQCT血清作用A549细胞24 h生长率为(92.09±4.39)%,48 h达(85.69±4.31)%,与同浓度空白组比较有统计学差异;24 h凋亡率为(14.12±1.41)%,48 h达(23.68±1.74)%,与同浓度空白组比较有统计学差异;荧光显微镜(×10)下细胞呈现凋亡形态学改变,透射电镜(×9700)下核周间隙加大,粗面内质网扩张,空泡形成;线粒体肿胀,嵴断裂;免疫印迹法检测30%YQCT血清作用A549细胞48 h后,calpain-2、caspase-7、caspase-4蛋白表达上升,IRE1α、TRAF2表达改变不明显;抑制caspasse-4表达后,Z-LEVD-FMK(+)组细胞凋亡率有所下降,与Z-LEVD-FMK(-)组比较仍有统计学差异。结论:益气除痰方可抑制肺癌细胞生长,诱导细胞凋亡,部分通过激活calpain-2、caspase-7,启动caspase-4起始的内质网特异性凋亡途径发挥其抗肺癌作用。 展开更多

关键词 益气除痰方 A549细胞 凋亡 caspase-4

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益气除痰方治疗脾虚型肺癌作用机制探讨 被引量：3

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作者 魏玉林 王淑美 +1 位作者 刘启欧 罗杨 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2097-2101,共5页

目的:从内质网应激(ERS)角度探讨益气除痰方治疗脾虚型肺癌的作用机制。方法:将60只成功建模的脾虚Lewis肺癌小鼠随机分为模型组,顺铂注射液(1 mg/kg)阳性对照组及益气除痰方低(2 g/kg)、中(4 g/kg)、高(8 g/kg)剂量组,联合用药组(益气... 目的:从内质网应激(ERS)角度探讨益气除痰方治疗脾虚型肺癌的作用机制。方法:将60只成功建模的脾虚Lewis肺癌小鼠随机分为模型组,顺铂注射液(1 mg/kg)阳性对照组及益气除痰方低(2 g/kg)、中(4 g/kg)、高(8 g/kg)剂量组,联合用药组(益气除痰方4 g/kg+顺铂注射液1 mg/kg),每组10只。给药14 d后处死小鼠,检测肿瘤体积和质量;HE染色观察肿瘤组织病理学改变;免疫组织化学法、Western blot法检测肿瘤组织中CHOP、DR5蛋白表达。结果:与模型组比较,除益气除痰方低剂量组外各给药组肿瘤体积、肿瘤质量显著降低(P<0.01),各给药组肿瘤组织中肿瘤细胞大量坏死,内质网应激蛋白CHOP、DR5表达显著升高(P<0.01),其中以联合用药组作用最佳。结论:益气除痰方和化疗对肺癌具有不同程度的抑制作用,联合用药效果更好,其作用机制可能与上调内质网应激蛋白CHOP、DR5表达介导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 益气除痰方 脾虚证 肺癌 CHOP DR5

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益气除痰散结法对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用研究 被引量：8

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作者 代兴斌 李丹青 +1 位作者 邢明远 吴玉生 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期27-31,共5页

目的观察益气除痰散结法对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制。方法复制转移性Lewis小鼠肺癌模型,将模型小鼠随机分为益气除痰散结法中药复方高、中、低(21.45,85.80,171.60 g·kg^(-1))剂量组,环磷酰胺组(CTX,0.02 g·kg^(-1))... 目的观察益气除痰散结法对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制。方法复制转移性Lewis小鼠肺癌模型,将模型小鼠随机分为益气除痰散结法中药复方高、中、低(21.45,85.80,171.60 g·kg^(-1))剂量组,环磷酰胺组(CTX,0.02 g·kg^(-1))和模型组,每组各10只,观察肿瘤增长体积、瘤体质量、免疫器官指数、肺转移率,并采用免疫组化方法结合计算机图像析技术,观察小鼠肿瘤组织中的血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异。结果模型组小鼠平均瘤体质量为(2.44±0.52)g,提示肿瘤接种成功且生长良好;接种Lewis肺癌瘤株细胞后各组小鼠皮下肿瘤体积随时间增长而变化,其中中药复方高剂量组、环磷酰胺组的肿瘤体积增长显著低于模型组和中药复方低剂量组(P<0.01)。与模型组比较,中药复方高、中剂量组均有抑瘤作用(P<0.01,P<0.05),且明显增加胸腺及脾脏指数(P<0.01),对肺转移灶也有抑制作用(P<0.05,P<0.01)。从HE染色的病理切片中发现,在应用益气除痰散结法中药复方治疗后,小鼠肿瘤组织的病理学表现与模型组比较有明显的差异。免疫组化法检测,肿瘤微血管内皮细胞被染成棕黄色,VEGF主要表达肿瘤细胞核和胞浆内,肿瘤细胞亦有少量染色,阳性染色的肿瘤细胞大多位于液化坏死区,浸润的淋巴细胞有表达,血管内皮细胞呈弱阳性染色。但益气除痰散结法中药复方高、中、低剂量组VEGF值与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气除痰散结法能明显抑制荷瘤小鼠局部肿瘤的生长及肺转移,其抗肺癌作用的机理可能与促进肿瘤细胞凋亡、提高细胞分化程度,增强免疫力有关,但与VEGF靶点的关系不大。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 益气除痰散结法 中医药疗法 实验研究

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