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双重TaqMan探针实时荧光聚合酶链式反应快速鉴别肉质金腰和长梗金腰
1
作者 米雪 解盈盈 +6 位作者 达娃卓玛 孙仟 颜琪 崔伟亮 郑健 汪冰 林永强 《中国药学杂志》 北大核心 2025年第18期1908-1915,共8页
目的建立肉质金腰及其近缘物种长梗金腰的双重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法。方法以ITS2序列为基础,根据肉质金腰及长梗金腰序列特点,寻找单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,... 目的建立肉质金腰及其近缘物种长梗金腰的双重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法。方法以ITS2序列为基础,根据肉质金腰及长梗金腰序列特点,寻找单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,分别设计肉质金腰和长梗金腰的特异性引物及探针,通过对引物探针浓度、退火温度、循环次数等关键参数优化,建立双重实时荧光PCR反应条件;此外还对该方法的精密度、重复性、特异性、灵敏度等指标进行了评估。结果所建立的双重TaqMan探针实时荧光PCR方法的重复性良好。当掺入比例低至1%时,该方法均有典型荧光扩增曲线,进一步表明该方法灵敏度较高,特异性较强。结论本研究所建立的双重TaqMan探针实时荧光PCR方法特异性强、灵敏度高,可同时检测肉质金腰及近缘物种长梗金腰,为肉质金腰及长梗金腰的鉴别提供一种专属性更强的技术手段参考。 展开更多
关键词 肉质金腰 长梗金腰 双重实时荧光聚合酶链式反应 TAQMAN探针 藏药
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濒危肉叶金腰内生真菌Cladosporiumsp.J6次级代谢产物研究 被引量：4
2
作者 马延红 蒋思萍 +3 位作者 徐爱国 普布多吉 陈彬 王军 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期84-86,共3页
研究濒危藏药肉叶金腰内生真菌Cladosporium sp.J6次级代谢产物。采用硅胶、LH-20凝胶、C-18反相硅胶及HPLC等柱色谱技术对Cladosporium sp.J6的次级代谢产物进行研究;采用波谱分析及与文献比对等方法进行化合物结构鉴定;结果从肉叶金... 研究濒危藏药肉叶金腰内生真菌Cladosporium sp.J6次级代谢产物。采用硅胶、LH-20凝胶、C-18反相硅胶及HPLC等柱色谱技术对Cladosporium sp.J6的次级代谢产物进行研究;采用波谱分析及与文献比对等方法进行化合物结构鉴定;结果从肉叶金腰内生真菌Cladosporium sp.J6的发酵提取物中分离得到5个化合物,分别鉴定为alternariol(1)、alternariol 5-O-methyl ether(2)、β-咔啉(3)、尿嘧啶(4)和尿嘧啶核苷(5)。关于金腰属植物内生真菌次级代谢产物研究是首次报道。 展开更多
关键词 肉叶金腰 内生真菌 分离鉴定 化学成份
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高效液相色谱法测定藏药亚吉玛(肉质金腰)中金腰乙素含量 被引量：1
3
作者 郭丽萍 次旦多吉 +2 位作者 任刚 邱毅 尼珍 《中国药业》 CAS 2024年第5期83-86,共4页
目的建立测定藏药亚吉玛(肉质金腰)中金腰乙素含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Inertsustain C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(40∶60,V/V),流速为1.2 mL/min,检测波长为350 nm,柱温为35℃,进样量为10μL... 目的建立测定藏药亚吉玛(肉质金腰)中金腰乙素含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Inertsustain C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(40∶60,V/V),流速为1.2 mL/min,检测波长为350 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果金腰乙素的进样量在0.04~5μg范围内与峰面积线性关系良好(R2=0.9990,n=8);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6);平均加样回收率为95.39%,RSD为1.64%(n=6)。样品中金腰乙素含量为0.1323%~0.6127%(n=3)。结论所建立的方法结果准确,精密度、重复性及耐用性均良好,可用于肉质金腰中金腰乙素的含量测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 肉质金腰 金腰乙素 含量测定
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