广藿香内生真菌Cerrena sp.中倍半萜类成分及其细胞毒活性研究 被引量：3

1

作者 谢佳倩 陈玉婵 +5 位作者 孙章华 刘洪新 李赛妮 李浩华 高晓霞 章卫民 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1693-1698,共6页

为了研究广藿香内生真菌Cerrena sp.A593的次级代谢产物及其细胞毒活性,采用正、反相硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、HPLC等色谱方法从菌株A593发酵液中分离得到8个倍半萜类化合物,经波谱数据分析,分别鉴定为chloriolin B(1),chloriolin... 为了研究广藿香内生真菌Cerrena sp.A593的次级代谢产物及其细胞毒活性,采用正、反相硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、HPLC等色谱方法从菌株A593发酵液中分离得到8个倍半萜类化合物,经波谱数据分析,分别鉴定为chloriolin B(1),chloriolin C(2),pleurocybellone A(3),dihydrohypnophilin(4),cucumin F(5),antrodin A(6),10α-hydroxyamorphan-4-en-3-one(7),connatusin A(8),所有化合物均为首次从Cerrena属真菌中分离得到。体外细胞毒活性结果显示:化合物1~3对Hep G-2,SF-268,MCF-7,NCI-H460 4种肿瘤细胞株具有抑制活性,其IC50在20.33~63.13μmol·L^(-1)。 展开更多

关键词 cerrena sp. 内生真菌 广藿香 倍半萜 细胞毒活性

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白腐真菌染料脱色菌株的筛选及一色齿毛菌脱色条件的研究 被引量：39

2

作者 袁海生 戴玉成 +1 位作者 曹云 杨建 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期429-436,共8页

以平皿培养方式对采集自中国和芬兰的白腐真菌菌株降解6种不同结构的人工染料的能力进行了筛选研究。在40株菌株中,黑管孔菌Bjerkandera adusta Y5012,一色齿毛菌Cerrena unicolor Y5002,硬毛粗盖孔菌Funalia trogii Y4997,香栓孔菌Tram... 以平皿培养方式对采集自中国和芬兰的白腐真菌菌株降解6种不同结构的人工染料的能力进行了筛选研究。在40株菌株中,黑管孔菌Bjerkandera adusta Y5012,一色齿毛菌Cerrena unicolor Y5002,硬毛粗盖孔菌Funalia trogii Y4997,香栓孔菌Trametes suaveolens D8325和云芝栓孔菌Trametes versicolor Y4946对刚果红、橙黄G、茜素红、结晶紫、中性红和亚甲基蓝均显示出较强的脱色能力。对一色齿毛菌Cerrena unicolor Y5002的液体培养脱色条件进行了研究,其最适碳源和氮源分别为蔗糖和麦芽浸粉;在不同橙黄G浓度下均获得较高的脱色率,因此浓度为500mg/L的橙黄G未对该菌的脱色能力产生抑制作用,而浓度为400mg/L茜素红则对其脱色作用产生明显抑制。对菌丝生物量和染料脱色率的研究表明,在不同碳源和氮源条件下,两者之间具有明显的正相关性。 展开更多

关键词 生物降解 cerrena unicolor 木生真菌 人工合成染料

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一色齿毛菌漆酶—介体系统在染料脱色中的应用 被引量：9

3

作者 赵丽艳 赵敏 +1 位作者 卢磊 王天女 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期130-135,共6页

本文通过一色齿毛菌LS0547漆酶粗酶液与紫脲酸(VA)或乙酰丁香酮(Ace)组成的漆酶--介体系统对结晶紫、靛红、活性黑KN--B染料进行脱色试验,探索pH、温度、染料浓度和漆酶浓度等条件对其脱色效果的影响。结果表明:在介体乙酰丁香酮(Ace)... 本文通过一色齿毛菌LS0547漆酶粗酶液与紫脲酸(VA)或乙酰丁香酮(Ace)组成的漆酶--介体系统对结晶紫、靛红、活性黑KN--B染料进行脱色试验,探索pH、温度、染料浓度和漆酶浓度等条件对其脱色效果的影响。结果表明:在介体乙酰丁香酮(Ace)作用下,漆酶脱色靛红和活性黑KN--B效率高;在介体紫脲酸(VA)作用下结晶紫脱色效果好。pH4.0、50℃结晶紫的脱色率为95.42%,40℃靛红脱色率为99.86%,且基本不受pH限制;pH6.0、40℃活性黑KN--B脱色率达92.38%,表明一色齿毛菌漆酶在介体参与下可有效用于工业染料废水的处理。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 漆酶 介体 染料 脱色

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一色齿毛菌CB1对活性染料的脱色研究 被引量：6

4

作者 于存 池玉杰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期743-751,共9页

前期工作中采用组织分离法分离、纯化得到一白腐真菌CB1,本研究进一步观察菌株CB1形态特征和培养特性,克隆菌株CB1的ITS基因序列,对菌株CB1的ITS序列进行同源性比对和系统进化分析,完成菌株CB1综合的鉴定。同时对菌株CB1脱色两种活性染... 前期工作中采用组织分离法分离、纯化得到一白腐真菌CB1,本研究进一步观察菌株CB1形态特征和培养特性,克隆菌株CB1的ITS基因序列,对菌株CB1的ITS序列进行同源性比对和系统进化分析,完成菌株CB1综合的鉴定。同时对菌株CB1脱色两种活性染料进行了研究,探讨菌株CB1脱色活性染料的能力。结果表明,菌株CB1形态特征和培养特性与一色齿毛菌Cerrena unicolor特征基本吻合,菌株CB1的系统进化分析表明菌株CB1的ITS序列与一色齿毛菌的ITS序列有较近的进化关系,形态学和分子生物学综合鉴定菌株CB1为C.unicolor CB1。染料脱色结果表明,菌株CB1可以明显脱色活性黑和活性红染料,与脱色活性黑相比,菌株CB1可以更有效地脱色活性红染料,在脱色12d时,菌株CB1对浓度为10、50、100、250、500mg/L的活性黑脱色率分别为96%、93%、65%、55%、40%,菌株CB1对浓度为10、50、100、250、500mg/L的活性红在12d时的脱色率分别为98%、95%、91%、87%、83%。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 白腐菌 内转录间隔区(ITS) 染料脱色 活性染料

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一色齿毛菌产MnP的条件优化及对染料的脱色 被引量：4

5

作者 于存 池玉杰 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第7期121-127,共7页

锰过氧化物酶（MnP）是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条... 锰过氧化物酶（MnP）是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条件进行优化;然后对优化后的胞外酶液进行5种染料的脱色研究。结果表明,一色齿毛菌产MnP的最优组合为：果糖10 g·L^-1、硝酸铵0.2 g·L^-1、Mn2＋2.67 mmol·L^-1、pH 5.5、250 mL三角瓶70 mL装液量、150 r·min^-1摇瓶培养、接种=8 mm的菌片9片、在34℃下培养7天后MnP活性高达95.47 U·L^-1,是初始培养条件最高酶活的5.2倍。染料脱色结果表明,一色齿毛菌对3种结构类型的5种染料都有较大程度的脱色,其中8天时对活性黑的脱色最为彻底,脱色率为98.4%;对中性红、结晶紫、活性红和刚果红的脱色率也高达72.3%-89.4%。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 锰过氧化物酶 优化培养 染料脱色 活性黑

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一色齿毛菌锰过氧化物酶2基因克隆及生物信息学分析 被引量：1

6

作者 于存 池玉杰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1366-1373,共8页

锰过氧化物酶(manganese peroxidase,Mn P)是由一系列同功酶组成的木质素降解酶。我们前期工作克隆了一色齿毛菌(Cerrena unicolor)Mn P1基因序列。在此基础上,本研究采用简并PCR、染色体步移和RACE等技术对C.unicolor mnp2基因(Cu-mnp2... 锰过氧化物酶(manganese peroxidase,Mn P)是由一系列同功酶组成的木质素降解酶。我们前期工作克隆了一色齿毛菌(Cerrena unicolor)Mn P1基因序列。在此基础上,本研究采用简并PCR、染色体步移和RACE等技术对C.unicolor mnp2基因(Cu-mnp2)序列进行克隆。同时,采用生物信息学软件对Cu-mnp2的基因结构、Cu-Mn P2的蛋白质结构及多物种Mn Ps蛋白质序列的系统进化关系进行分析。克隆得到3 053 bp的Cu-mnp2 DNA序列(Gen Bank:JX270806.1)和1 429 bp的Cu-mnp2 c DNA序列(Gen Bank:JQ782580.1)。序列分析结果显示,Cu-mnp2 DNA序列包含14个外显子和13个内含子,启动子区域包含TATA-BOX、SP1和AP1等作用元件;Cu-mnp2 c DNA序列包含71 bp的5'UTR、230 bp的3'UTR以及1 128 bp的开放阅读框(ORF)。Cu-mnp2 ORF序列的BLAST比对结果表明,Cu-mnp2与Trametes versicolor FP-101664 SS1 mnp序列覆盖度为53%,序列相似性为65%;与Heterobasidion irregulare mnp、C.unicolor mnp1等c DNA序列都有较高的序列相似性。Cu-mnp2的ORF编码(Gen Bank:AFK91530.1)由340个氨基酸残基组成的多肽链(CuMn P2)。Cu-Mn P2蛋白质序列的BLAST比对和蛋白质三维结构均显示,Cu-Mn P2包含Mn2+、Ga2+、血红素及芳香底物结合位点。对包含Cu-Mn P1、Cu-Mn P2蛋白质序列在内的多物种Mn Ps蛋白质序列的系统发育分析表明,多物种的Mn Ps分为两大类群,分别为包含4个二硫键的短Mn Ps和包含5个二硫键的长Mn Ps。其中,Cu-Mn P1与Cu-Mn P2均属于短Mn Ps,Cu-Mn P2与Trametes versicolor Mr P的蛋白质序列亲缘关系最近。通过Cu-mnp2基因的克隆和序列分析,对继续研究C.uniclor的Mn P同工酶基因结构和功能奠定基础。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 锰过氧化物酶 染色体步移 c DNA末端快速扩增(RACE) 生物信息学

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齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究 被引量：5

7

作者 郑邦晓 余湘萍 +2 位作者 叶秀云 林娟 杨捷 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第2期285-292,共8页

通过简并PCR、TAIL-PCR、SiteFinding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因（包括启动子）序列,将其cDNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS（2,2-azinobis-（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid））... 通过简并PCR、TAIL-PCR、SiteFinding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因（包括启动子）序列,将其cDNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS（2,2-azinobis-（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid））为底物测定温度和pH对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60％,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶rLac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·mL-1;酶学性质研究发现,rLac的最适作用温度和pH值分别为55℃和3.0,且在pH 4～10及20 ～ 40℃有较好的稳定性;rLac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果. 展开更多

关键词 齿毛菌 漆酶 克隆 异源表达 酶学性质 脱色

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一色齿毛菌对刚果红的脱色优化及其毒性变化研究 被引量：3

8

作者 姚英 于存 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期272-280,共9页

一色齿毛菌Cerrena unicolor是分离自野外的一株能够降解木质素的白腐真菌。为明确一色齿毛菌对染料的脱色能力及脱色前后染料毒性的变化,本研究利用一色齿毛菌对固体条件下4种染料进行脱色能力的检测,筛选出较易脱色的染料后,对该染料... 一色齿毛菌Cerrena unicolor是分离自野外的一株能够降解木质素的白腐真菌。为明确一色齿毛菌对染料的脱色能力及脱色前后染料毒性的变化,本研究利用一色齿毛菌对固体条件下4种染料进行脱色能力的检测,筛选出较易脱色的染料后,对该染料的脱色条件进行优化,并以3种豆类发芽率为指标测定该染料脱色前后的毒性变化。结果表明,一色齿毛菌对4种染料均可脱色,其中对刚果红的脱色效果最为明显;一色齿毛菌对刚果红脱色条件的优化结果为:20g/L麦芽糖,1g/L硝酸铵,1mmol/L硫酸镁,接种9块直径1cm菌饼,10mg/L染料浓度,pH7时脱色效果最好;刚果红染料脱色前后毒性测试结果显示:染料脱色前发酵液毒性>染料脱色后发酵液毒性>清水处理毒性,表明刚果红染料存在一定的毒性,但在被一色齿毛菌脱色后,染料毒性有所降低。本研究为一色齿毛菌在染料废水脱色方面的应用及降低染料废水毒性提供一定的参考依据。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 染料脱色 毒性 刚果红

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一色齿毛菌对直接大红4BS染料的脱色 被引量：1

9

作者 徐红云 于存 苏帮 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第4期78-83,共6页

为避免染料废水处理造成二次污染,采用生物法对直接染料进行脱色处理,通过观察接种一色齿毛菌后染料固体培养基颜色的变化,评价一色齿毛菌对5种直接染料的脱色效果;利用单因素和正交试验对一色齿毛菌脱色直接大红4BS的条件进行优化,得... 为避免染料废水处理造成二次污染,采用生物法对直接染料进行脱色处理,通过观察接种一色齿毛菌后染料固体培养基颜色的变化,评价一色齿毛菌对5种直接染料的脱色效果;利用单因素和正交试验对一色齿毛菌脱色直接大红4BS的条件进行优化,得到优化条件:葡萄糖质量浓度为20 g/L,硝酸铵质量浓度为1 g/L,硫酸镁浓度为1.5 mmol/L,每50 mL反应体系接菌量为2片(直径为1 cm)。结果表明:一色齿毛菌对5种直接染料均有脱色能力,其中对直接大红4BS染料的脱色更为彻底;在优化条件下,一色齿毛菌对直接大红4BS脱色13 d时的脱色率达92.00%,与优化前的脱色率相比提高了50.82%。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 直接染料 直接大红4BS 脱色 染料废水

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不同搅拌器类型对齿毛菌发酵产漆酶的影响

10

作者 余孙靖 王国增 +2 位作者 叶秀云 吕橄 林娟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2362-2368,共7页

【目的】白腐菌Cerrena unicolor Y-G07是一种不产孢子的丝状真菌,其漆酶合成与生长相偶联。应用于单细胞微生物发酵的搅拌器并不适用于白腐真菌。在此,综合考虑溶氧效果和剪切力作用,研究不同搅拌器类型对白腐菌Cerrena unicolor Y-G0... 【目的】白腐菌Cerrena unicolor Y-G07是一种不产孢子的丝状真菌,其漆酶合成与生长相偶联。应用于单细胞微生物发酵的搅拌器并不适用于白腐真菌。在此,综合考虑溶氧效果和剪切力作用,研究不同搅拌器类型对白腐菌Cerrena unicolor Y-G07发酵生产漆酶产量的影响。【方法】针对Y-G07菌株生长过程需氧量大,且对剪切力敏感的特性,订制5种不同类型的搅拌器(径向流、轴向流等),在通气已控制在设备最大量程及转速优化的前提下,研究Y-G07在发酵生产过程中使用不同类型搅拌器对菌丝生长形态、生长速度、溶氧情况、糖代谢和漆酶合成的影响。【结果】Cerrena unicolor Y-G07菌株对不同类型搅拌器产生的发酵液流态性质和剪切力敏感,表现在菌丝体的生长形态、细胞浓度差异较大,且生长周期改变,从而影响漆酶的合成。采用六折叶DT602搅拌器最有利于该菌株形成致密度合适的网状菌丝体,菌丝体细胞浓度高,断裂少、生长状况好,漆酶的单位产量可达690 U/m L,相对于普通使用的六叶平直叶搅拌器(448 U/m L)提高了54%。【结论】选择合适的搅拌器类型有利于好氧但对剪切力敏感的微生物发酵。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 丝状真菌 漆酶 剪切力 搅拌器

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白腐真菌锰过氧化物酶酶活性测定条件优化 被引量：3

11

作者 杨慧 武宸睿 +3 位作者 陈桂东 张雅蕊 张会娟 尚洁 《宁夏农林科技》 2021年第2期67-70,共4页

白腐真菌锰过氧化物酶酶活性的测定方法很多,不同研究方法之间的锰过氧化物酶酶活性没有统一的衡量标准,无法进行有效的比较与分析。本试验选用白腐真菌一色齿毛菌,对锰过氧化物酶酶活性测定条件进行了研究,结果表明锰过氧化物酶酶活性... 白腐真菌锰过氧化物酶酶活性的测定方法很多,不同研究方法之间的锰过氧化物酶酶活性没有统一的衡量标准,无法进行有效的比较与分析。本试验选用白腐真菌一色齿毛菌,对锰过氧化物酶酶活性测定条件进行了研究,结果表明锰过氧化物酶酶活性最佳测定条件为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液(pH 3.5)0.1 mol/L,2,6-DMP 10 mmol/L,MnSO_(4)10 mmol/L,H_(2)O_(2)0.01 mol/L。 展开更多

关键词 一色齿毛菌 锰过氧化物酶 优化

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一色齿毛菌漆酶LacT-1的分离纯化与性质研究 被引量：4

12

作者 田嘉慧 封佳丽 +4 位作者 卢俊桦 毛林静 胡著然 王莹 楚杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期186-194,共9页

漆酶可以与多种底物反应,具有广阔的应用前景,但不同漆酶其性质有一定差异。本文研究的漆酶,由一色齿毛菌(Cerrena unicolor)发酵上清经过(NH_(4))_(2)SO_(4)沉淀、疏水层析(phenyl sepharose)、离子交换层析(DEAE sepharose)和凝胶层析... 漆酶可以与多种底物反应,具有广阔的应用前景,但不同漆酶其性质有一定差异。本文研究的漆酶,由一色齿毛菌(Cerrena unicolor)发酵上清经过(NH_(4))_(2)SO_(4)沉淀、疏水层析(phenyl sepharose)、离子交换层析(DEAE sepharose)和凝胶层析(TSK gel G2000SWxl)纯化得到,命名为LacT-1。该酶分子量约为65 kD,比活力为41.31 U/mg,回收率为6.57%,纯化倍数为21.86。通过对LacT-1进行酶学性质研究发现:该酶最适温度为60℃,最适pH为4.8,酶活在低于30℃和pH为5.4-8时较稳定;三氯乙酸(TCA)对漆酶酶活有促进作用;LacT-1催化底物ABTS的米氏常数K_(m)值为0.075 mmol/L,V_(max)为250000 mmol/(L·min);对甲基橙、酸性红1、活性黑5、考马斯亮蓝、孔雀石绿、结晶紫和溴酚蓝的降解率在71.64%-95.17%之间。研究结果表明该酶具有较强的pH稳定性,并且与ABTS的结合力较强,可以有效降解一些常见的染料,具有一定的实际应用价值。 展开更多

关键词 漆酶 一色齿毛菌 分离纯化 酶学性质 降解染料

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齿毛菌原生质体的制备与转化 被引量：2

13

作者 王正娟 苏柳如 +2 位作者 叶秀云 林娟 杨捷 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第1期129-135,共7页

探究菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶质量浓度、酶解温度、酶解时间和再生培养基对齿毛菌原生质体制备及再生的影响,并利用PEG介导原生质体转化.结果表明:以0.6 mol·L^(-1)甘露醇为稳渗剂,20 mg·m L^(-1)溶壁酶于30℃酶解48 h菌龄... 探究菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶质量浓度、酶解温度、酶解时间和再生培养基对齿毛菌原生质体制备及再生的影响,并利用PEG介导原生质体转化.结果表明:以0.6 mol·L^(-1)甘露醇为稳渗剂,20 mg·m L^(-1)溶壁酶于30℃酶解48 h菌龄的菌丝3 h,所得原生质体形成数最多,为1×108个·m L^(-1);所得原生质体在0.8 mol·L^(-1)蔗糖为稳渗剂的2号培养基中再生率最高,为0.1%; PEG介导原生质体转化,经潮霉素B抗性平板筛选获得2个转化子.实验建立的齿毛菌原生质体制备及转化体系,为其遗传操作及分子生物学研究奠定基础. 展开更多

关键词 齿毛菌 原生质体 制备 再生 转化

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