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RNA结合蛋白CELF2在小鼠胚胎造血发育中的功能研究
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作者 李帅丽 宁小伟 +1 位作者 刘兵 周杰 《癌症》 SCIE CAS 2021年第4期167-174,共8页
背景与目的在前期研究中我们发现,RNA结合蛋白CELF2在造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)前体(pre-HSC)阶段高表达。本研究旨在探究Celf2基因敲除是否影响小鼠胚胎造血干/祖细胞(hematopoietic stem progenitor cell,HSPC)的发育... 背景与目的在前期研究中我们发现,RNA结合蛋白CELF2在造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)前体(pre-HSC)阶段高表达。本研究旨在探究Celf2基因敲除是否影响小鼠胚胎造血干/祖细胞(hematopoietic stem progenitor cell,HSPC)的发育。方法基于单细胞转录组测序数据分析,我们选择Celf2基因作为研究靶标,并利用CRISPR/Cas9技术构建了Celf2基因敲除小鼠模型。以胚胎期(Embryo day,E)第11.5 d(简称E11.5)的Celf^(2+/+)或Celf^(2+/-)小鼠胚胎为对照组,Celf^(2-/-)胚胎为实验组进行实验。对主动脉–性腺–中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区和卵黄囊(yolk sac,YS)细胞进行体外造血细胞集落培养(colony forming units-culture,CFU-C),计数其产生造血集落的种类和数量。将对照组和实验组小鼠AGM区细胞分别移植到致死剂量辐照的受体小鼠,分别在移植后的4周、8周和12周检测供体来源细胞的外周血嵌合情况。结果与对照组相比,Celf^(2-/-)胚胎AGM及YS区细胞产生造血集落的种类和数量无显著差异(P值分别为0.1065,0.4683)。Celf^(2-/-)胚胎和对照组胚胎AGM区移植后,受体的外周血均发生了造血重建。结论Celf2敲除不影响E11.5时AGM区和YS组织造血干/祖细胞(hematopoietic progenitor cells,HPCs)的数量和功能,且Celf2敲除后AGM区仍能产生功能性的HSC。 展开更多
关键词 celf2 HSC发育 CFU-C AGM区细胞移植
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