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猴樟CbP5CS1基因克隆及表达载体构建
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作者 韩浩章 张丽华 +4 位作者 李素华 赵荣 王芳 王晓立 蒋亚华 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第16期5350-5356,共7页
为研究猴樟CbP5CS1蛋白的序列结构和功能,以猴樟转录组数据为基础,采用PCR技术克隆猴樟CbP5CS1基因CDS序列,构建表达载体。结果表明,克隆得到的序列具有一个2163 bp完整的ORF框,编码720个氨基酸,与沉水樟中收录的RWR86140.1基因序列一... 为研究猴樟CbP5CS1蛋白的序列结构和功能,以猴樟转录组数据为基础,采用PCR技术克隆猴樟CbP5CS1基因CDS序列,构建表达载体。结果表明,克隆得到的序列具有一个2163 bp完整的ORF框,编码720个氨基酸,与沉水樟中收录的RWR86140.1基因序列一致性达98.47%,GenBank登录号为MW813958;生物信息学分析结果表明,CbP5CS1蛋白化学分子式为C_(3435)H_(5609)N_(963)O_(1050)S_(22),相对分子量为77.91 kD,理论等电点为6.16,结构稳定,无明显无序化特征,为脂溶性和亲水性蛋白,磷酸化氨基酸位点有95个;CbP5CS1蛋白具有PLN02418家族结构域,具备δ-1-吡咯啉-5-羧酸合成酶的功能,在樟属植物中具有较高的保守性;CbP5CS1蛋白亚细胞定位预测为细胞质,为跨膜蛋白,但不存在信号肽;重组质粒用Xba I酶切后,获得两条带片段,与预期的2226和11516 bp的大小一致,表明目的基因已经成功插入并连接到植物表达载体pCAMBIA1301上。 展开更多
关键词 猴樟 cbp5cs1 基因克隆 表达载体
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