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识别艰难梭菌谷氨酸脱氢酶中构象B细胞抗原表位的驼源单域抗体的研制
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作者 蔡梦婷 李哲舟 +6 位作者 翟华倩 张凯 沈立军 张锋 胡珲 金大智 罗永能 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第11期1131-1135,共5页
目的研制能够特异性识别艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(CD-GDH)中构象B细胞抗原表位的驼源单域抗体,应用于酶联免疫吸附检测(ELISA)和蛋白斑点印迹杂交(DB)等方法。方法采用重组表达并纯化的CD-GDH作为捕获抗原从驼源天然纳米抗体噬菌体展示库... 目的研制能够特异性识别艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(CD-GDH)中构象B细胞抗原表位的驼源单域抗体,应用于酶联免疫吸附检测(ELISA)和蛋白斑点印迹杂交(DB)等方法。方法采用重组表达并纯化的CD-GDH作为捕获抗原从驼源天然纳米抗体噬菌体展示库中筛选获得特异性结合的噬菌体克隆,阳性克隆经ELISA初筛和WB验证后对其VHH基因序列进行测序分析,随后通过密码子优化策略合成抗体基因并将其克隆至pET-28a表达载体,诱导表达并纯化后用于DB和ELISA检测CD-GDH蛋白。结果获得1个驼源单域抗体阳性克隆GH12,其基因在大肠杆菌中重组表达并纯化。GH12与CD-GDH结合的亲和力良好、EC_(50)为(2.91±0.03)nmol/L用于ELISA和DB都能特异性地识别重组表达和内源性的CD-GDH蛋白。结论成功制备并获得了一株识别CD-GDH蛋白中构象B细胞抗原表位的驼源单域抗体,为检测CD-GDH蛋白提供了一个有效工具。 展开更多
关键词 艰难梭菌 谷氨酸脱氢酶 B细胞抗原表位 驼源 单域抗体
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单域抗体研究进展 被引量:8
2
作者 潘欣 潘伯驹 +4 位作者 蔡家麟 李晗 王颖 蓝乐夫 廖万清 《生命科学》 CSCD 2012年第5期404-410,共7页
近年来用基因工程方法从软骨鱼和骆驼科动物中克隆到的单域抗体(single-domain antibody,sdAb)具有无轻链、单一重链可变区保留了完整的抗原结合活性的特征。这类单域抗体具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、... 近年来用基因工程方法从软骨鱼和骆驼科动物中克隆到的单域抗体(single-domain antibody,sdAb)具有无轻链、单一重链可变区保留了完整的抗原结合活性的特征。这类单域抗体具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的特性,已引起生物技术研究与诊断治疗应用领域的广泛关注,取得了快速发展。综述了这类单域抗体发展历史、分子类别、结构特征、理化特征、分子演化及应用前景。 展开更多
关键词 单域抗体 重链抗体 免疫球蛋白新抗原受体 骆驼科动物 软骨鱼
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单域重链抗体的分子特征 被引量:1
3
作者 潘欣 蔡家麟 王颖 《生物技术通讯》 CAS 2012年第5期741-745,共5页
源于软骨鱼或骆驼科动物的同型重链二聚体无轻链,用基因工程方法获得其单一重链可变区可保留完整的抗原结合活性,称为单域重链抗体。单域重链抗体具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的结构特... 源于软骨鱼或骆驼科动物的同型重链二聚体无轻链,用基因工程方法获得其单一重链可变区可保留完整的抗原结合活性,称为单域重链抗体。单域重链抗体具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的结构特征,近年来在生物技术研究与诊断治疗应用领域得到广泛关注,取得了快速发展。 展开更多
关键词 单域重链抗体 免疫球蛋白新抗原受体 骆驼科动物 软骨鱼
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南美小型驼染色体研究进展
4
作者 张巧灵 董常生 +1 位作者 贺俊平 赫晓燕 《经济动物学报》 CAS 2004年第2期115-121,共7页
为了进一步了解染色体对羊驼的遗传变异、系统演化、性别决定、个体发育及生理过程的平衡控制等 所起的作用,对国外学者有关南美小型驼染色体的研究进展进行了综述,旨在为羊驼的繁育提供一定的理论 依据。
关键词 南美小型驼 染色体 遗传 变异 系统演化
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重组骆驼源单域抗体的原核表达及纯化
5
作者 刘超 彭媛 +1 位作者 宁保安 高志贤 《生物技术通讯》 CAS 2016年第3期354-357,共4页
目的:原核表达重组骆驼源单域抗体并纯化。方法:将雌二醇特异性的单域抗体基因片段克隆到pET32a载体中,经IPTG诱导表达后对形成的包涵体进行纯化,利用间接ELISA法检测获得的单域抗体的活性,并以孕酮、雌酮和雌三醇为对照,鉴定雌二醇单... 目的:原核表达重组骆驼源单域抗体并纯化。方法:将雌二醇特异性的单域抗体基因片段克隆到pET32a载体中,经IPTG诱导表达后对形成的包涵体进行纯化,利用间接ELISA法检测获得的单域抗体的活性,并以孕酮、雌酮和雌三醇为对照,鉴定雌二醇单域抗体的特异性。结果:重组雌二醇单域抗体的相对分子质量约为34×103,通过大肠杆菌BL21(DE3)-p ET32a构建的原核表达体系实现了雌二醇单域抗体的高水平表达,并通过包涵体纯化获得了可溶性的高纯度单域抗体抗体,经间接ELISA检测,该雌二醇特异性抗体的50%抑制浓度(IC50)为20.03 ng/mL,对孕酮和雌酮2种化合物的交叉反应率分别为29.78%和1.63%,特异性较好。结论:通过构建原核表达体系,可以获得功能性的骆驼源单域抗体。 展开更多
关键词 骆驼源单域抗体 原核表达 纯化
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Soil and Vegetation Seasonal Changes in the Grazing Andean Mountain Grasslands
6
作者 MU?OZ María ángeles FAZ ángel 《Journal of Mountain Science》 SCIE CSCD 2014年第5期1123-1137,共15页
Andean grasslands ecosystems are fragile environments with rigorous climatologic conditions and low and variable food for the grazing. The Apolobamba area is located in the Bolivian Andean Mountains. Its high grasslan... Andean grasslands ecosystems are fragile environments with rigorous climatologic conditions and low and variable food for the grazing. The Apolobamba area is located in the Bolivian Andean Mountains. Its high grasslands provide a natural habitat for wild and domestic camelids such as vicuna(Vicugna vicugna) and alpaca(Lama pacos). The botanical diversity plays an essential role in maintaining vital ecosystem functions. The objectives of this research were to determine the seasonal changes in soil properties, to study the vegetation changes during the wet and dry seasons and the influence of soil properties and camelid densities on the vegetation in the Apolobamba grasslands. Four zones with different vicuna populations were selected to be studied. The following soil parameters were determined: total organic carbon, total nitrogen, available phosphorous, cation exchange capacity, exchangeable cations, pH and texture. The vegetation season changes were studied through botanical identification, above-ground biomass, plant cover and species richness. Results showed that some soil properties such as C/N ratio, CEC, silt and clay percentages kept stable against the seasonal changes. Generally, soil nutrients were relatively higher during the dry season in the surface and subsurface. The results did not point out the predominant vegetation growth during the wet season. The seasonal vegetation growth depended on each species. Thegood soil fertility corresponded to the highest plant cover. Soil fertility presented no influence on the above-ground biomass of the collected species. The negative influence of camelid grazing on soil properties could not be assessed. However, overgrazing could affect some plant species. Therefore, protection is needed in order to preserve the biodiversity in the Andean mountain grasslands. 展开更多
关键词 Biodiversity camelid grazing High grasslands Plant communities Soil properties
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单域抗体的研究和应用进展 被引量:4
7
作者 康晓圳 曹佳莉 +1 位作者 张保惠 袁权 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1974-1984,共11页
传统IgG抗体分子一般由轻链和重链组成,轻链包含1个可变区(VL)和1个恒定区(CL),重链包含1个可变区(VH)和3个恒定区(CH1,CH2,CH3)。单域抗体(Single domain antibody,sdAb),是指缺失抗体轻链而只有重链可变区的一类抗体,因其分子量小,也... 传统IgG抗体分子一般由轻链和重链组成,轻链包含1个可变区(VL)和1个恒定区(CL),重链包含1个可变区(VH)和3个恒定区(CH1,CH2,CH3)。单域抗体(Single domain antibody,sdAb),是指缺失抗体轻链而只有重链可变区的一类抗体,因其分子量小,也被称为纳米抗体(Nanobody)。20世纪90年代,单域抗体最早在骆驼科动物中被发现,之后在护士鲨、大星鲨和鳐鱼等软骨鱼纲动物中也发现了类似的抗体。单域抗体虽然结构简单,但仍然可以达到与传统抗体相当甚至更高的与特异抗原结合的亲和力。相比于传统抗体,单域抗体具有分子量小、稳定性强、易于重组表达等优点。近年来在生物学基础研究和医学临床应用方面均备受关注并被广泛应用。文中将从单域抗体的结构特征、理化性质、筛选方法及其在生物医学领域的重要应用进展进行综述。 展开更多
关键词 重链抗体 单域抗体 骆驼 纳米抗体
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细胞内单域抗体的研究及应用进展
8
作者 潘永刚 刘晓志 +1 位作者 高健 王志明 《实用药物与临床》 CAS 2018年第4期457-463,共7页
来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比... 来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比,sd Ab是体外和体内都稳定的非聚合分子。与sc Fv片段不同,sd Ab是细胞质/细胞核蛋白质的新型抑制剂,并可以在细胞质中正确折叠。sd Ab能特异性抑制翻译后修饰,如磷酸化位点,构象异构体或蛋白质的相互作用区域,这些区域不适合使用基因敲除及RNAi技术进行研究。作为细胞质/细胞核蛋白质的抑制剂,使用sd Ab的研究数量持续增加,同时使用无需免疫动物的合成单域抗体文库中,研究者筛选出一些有成药应用前景的药物分子。目前,研究涉及的抗原靶点包括病毒蛋白、癌相关蛋白、毒素、神经系统相关蛋白、植物和果蝇蛋白等,可以针对几乎所有的细胞质/细胞核中的抗原表位,进行功能性sd Ab的筛选。逃逸蛋白结构和细胞穿透肽的高效转染的研究,拓宽了sd Ab的应用领域。新一代细胞特异性纳米颗粒,将携带细胞质/细胞核sd Ab作为蛋白抑制剂,开拓病毒感染及癌症新的治疗领域。 展开更多
关键词 胞内抗体 单域抗体 scFv片段 细胞质/细胞核内抗体 骆驼源VHH 鲨鱼源vNAR 人重链可变区 人轻链可变区
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探讨驼人喉罩与气管插管用于全麻腹腔镜胆囊手术对患者血流动力学和气道阻力的影响 被引量:3
9
作者 朱晨 《系统医学》 2022年第20期99-102,共4页
目的探讨对全麻腹腔镜胆囊手术患者分别采用驼人喉罩以及气管插管方法进行麻醉后对其气道阻力以及血流动力学产生的影响。方法选取2018年1月—2021年2月江阴市人民医院收治的66例全麻腹腔镜胆囊手术患者进行麻醉研究;随机分为常规组(采... 目的探讨对全麻腹腔镜胆囊手术患者分别采用驼人喉罩以及气管插管方法进行麻醉后对其气道阻力以及血流动力学产生的影响。方法选取2018年1月—2021年2月江阴市人民医院收治的66例全麻腹腔镜胆囊手术患者进行麻醉研究;随机分为常规组(采用气管插管方式进行麻醉)和研究组(采用驼人喉罩方式进行麻醉),每组33例。比较两组患者气道阻力、血流动力学水平、不良反应总发生率。结果研究组T1、T2、T3时的平均气道压和气道峰压均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);与T0比较,T1时研究组DBP、SBP显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与T0比较,T3时研究组DBP及SBP均呈现出一定程度增高,但在正常范围内,差异无统计学意义(P>0.05);同T0比较,常规组T1、T2、T3及T4时HR、DBP及SBP均显著提高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组T1、T2、T3及T4时血流动力学指标显著低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组不良反应总发生率(9.09%)低于常规组(39.39%),差异有统计学意义(χ^(2)=8.250,P<0.05)。结论同气管插管麻醉比较,驼人喉罩麻醉方式有效应用可显著改善患者气道阻力以及血流动力学指标,可促进全麻腹腔镜胆囊手术患者总体预后水平提高。 展开更多
关键词 全麻腹腔镜胆囊手术 驼人喉罩 气管插管 气道阻力 血流动力学
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Variation in placentophagy in golden snub-nosed monkeys(Rhinopithecus roxellana)reflects nutritional constraints
10
作者 Shiyu JIN Qi GAO +9 位作者 Derek WDUNN Haitao ZHAO Zuomin LIANG Meirong LI Yang ZHAO Zujin CHEN Genggeng GAO Gang HE Baoguo LI Songtao GUO 《Integrative Zoology》 2025年第2期419-428,共10页
INTRODUCTION.Placentophagy is the consumption by peripartum females of all or some placental components soon after giving birth(Kristal 1980).It is a widespread behavior across eutherian mammals with the exception of ... INTRODUCTION.Placentophagy is the consumption by peripartum females of all or some placental components soon after giving birth(Kristal 1980).It is a widespread behavior across eutherian mammals with the exception of cetaceans and domesticated camelids(Kristal 1980;Vaughan&Tibary 2006).Another notable exception is in humans but is a culturally determined practice due to health benefits(Farr et al.2018)and traditional medicine(Ober 1979).In nonhuman primates,placentophagy has been recorded across diverse taxa—from great apes(chimpanzee,e.g.Goodall&Athumani 1980;Fujisawa et al.2016,bonobo,Douglas 2014,gorilla,Stewart 1984,and orangutan,Galdikas 1982),gibbons(Hylobatidae)(Hayssen et al.2019),old world monkeys(Cercopithecidae)(Turner et al.2010;Yao et al.2012;Ding et al.2013)to new world monkeys(Callitrichidae,Hayssen et al. 展开更多
关键词 Rhinopithecus roxellana placental components placentophagy peripartum females eutherian mammals golden snub nosed monkeys nutritional constraints domesticated camelids kristal
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识别艰难梭菌谷氨酸脱氢酶线性B细胞抗原表位的驼源单域抗体的研制与应用
11
作者 翟华倩 李哲舟 +5 位作者 蔡梦婷 张凯 沈立军 罗永能 金大智 胡珲 《中华微生物学和免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期629-635,共7页
目的研制和筛选识别艰难梭菌(Clostridium difficile)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,CD-GDH)线性B细胞抗原表位的驼源单域抗体,并将其应用于Western blot和ELISA等检测方法。方法以重组表达并纯化的CD-GDH作为诱饵,从噬菌体展... 目的研制和筛选识别艰难梭菌(Clostridium difficile)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,CD-GDH)线性B细胞抗原表位的驼源单域抗体,并将其应用于Western blot和ELISA等检测方法。方法以重组表达并纯化的CD-GDH作为诱饵,从噬菌体展示驼源天然纳米抗体库中筛选阳性噬菌体克隆。经Western blot验证后测定抗体基因序列,然后密码子优化合成抗体基因序列并克隆至pET28a载体中构建表达载体。经诱导表达和纯化后应用于Western blot和ELISA检测CD-GDH蛋白。结果共获得6个驼源单域抗体阳性克隆,其中克隆GA4被选择在大肠埃希菌中重组表达并纯化。GA4与CD-GDH结合的亲和力良好,K_(d)值为3 nmol/L,应用于Western blot和ELISA都能特异性地识别重组表达和内源性的CD-GDH蛋白。结论成功制备并获得了1株识别CD-GDH蛋白中线性B细胞抗原表位的驼源单域抗体,为检测CD-GDH蛋白提供了有效工具。 展开更多
关键词 艰难梭菌 谷氨酸脱氢酶 抗原表位 驼源 单域抗体
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