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基于CRISPR/CasX介导的水稻基因组编辑技术的建立
1
作者 李雪琪 张素杰 +2 位作者 于曼 黄金光 周焕斌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期40-48,共9页
Cas蛋白作为核酸酶发挥其切割活性需要识别特定的PAM序列,如SpCas9识别NGG PAM位点,LbCas12a识别TTTV PAM。已挖掘到新的能够识别TTCN PAM序列的蛋白—CasX蛋白,扩展了基因组编辑技术的编辑范围。本研究利用CasX的两个衍生型蛋白PlmCasX... Cas蛋白作为核酸酶发挥其切割活性需要识别特定的PAM序列,如SpCas9识别NGG PAM位点,LbCas12a识别TTTV PAM。已挖掘到新的能够识别TTCN PAM序列的蛋白—CasX蛋白,扩展了基因组编辑技术的编辑范围。本研究利用CasX的两个衍生型蛋白PlmCasX和DpbCasX,建立基于CRISPR/CasX介导的水稻基因编辑系统。通过PEG介导的水稻原生质体瞬时表达分析其编辑活性发现,PlmCasX和DpbCasX两个蛋白能够对水稻内源基因OsCPK16实现有效编辑。后通过水稻稳定遗传转化进一步验证,在TTCA PAM识别位点,DpbCasX蛋白对水稻内源基因OsCPK21的编辑效率为17.5%,PlmCasX蛋白对水稻内源基因OsCPK21的编辑效率为66.07%;在TTCG PAM识别位点,PlmCasX蛋白对OsCPK4的编辑效率为23.21%,而DpbCasX蛋白不能实现有效的基因编辑。并且基于MIDAS方法对PlmCasX蛋白的优化并不能提高其编辑活性。本研究证明了CRISPR/CasX系统在水稻中具有编辑活性,且其能识别TTCR PAM这一特性,扩大了基因编辑技术在水稻中的应用范围。 展开更多
关键词 水稻 基因组编辑 CRISPR casx
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地下水化学类型对硫系还原剂去除Cr(Ⅵ)的影响 被引量：3
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作者 朱帅 张旭 李广贺 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期6205-6211,共7页
为研究铬污染地下水化学类型对硫系还原剂除铬的影响,采用批实验的方式,分别比较了3种还原剂焦亚硫酸钠(Na_2S_2O_5)、连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)、多硫化钙(Ca Sx)对SO_4-Na型、SO_4-Ca型、Cl-Na型和HCO_3-Ca型4种地下水中去除Cr(VI)的... 为研究铬污染地下水化学类型对硫系还原剂除铬的影响,采用批实验的方式,分别比较了3种还原剂焦亚硫酸钠(Na_2S_2O_5)、连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)、多硫化钙(Ca Sx)对SO_4-Na型、SO_4-Ca型、Cl-Na型和HCO_3-Ca型4种地下水中去除Cr(VI)的效果。结果表明,在20℃有氧条件下,4种地下水环境中还原剂的除铬能力受到了不同程度的抑制,其中HCO_3-Ca型地下水中的抑制作用最大。但当Na_2S_2O_5、Na_2S_2O_4、Ca Sx投加量分别为理论投加量的30.8、21.7和2.4倍时,4种地下水中Cr(VI)的去除率均大于90%。Na_2S_2O_5投加量与水中HCO-3含量的摩尔比大于0.5时,Cr(VI)才可能被还原去除;Na_2S_2O_4对Cr(VI)的去除率由高到低排序是:SO_4-Na型>Cl-Na型>SO4-Ca型>HCO_3-Ca型;Ca Sx的除铬效果在不同地下水化学类型中的差异最小。地下水的HCO-3含量越高,缓冲能力越强,抑制作用越明显,所需还原剂投加量越多。 展开更多
关键词 地下水化学 六价铬(Cr(Ⅵ)) 焦亚硫酸钠(Na2S2O5) 连二亚硫酸钠(Na2S2O4) 多硫化钙(casx)
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以Cas X为例简述新型CRISPR-Cas系统的基本属性和研究方法 被引量：1
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作者 王康康 王艳丽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1227-1238,共12页
在细菌与古菌中广泛存在的CRISPR-Cas系统,作为目前发现的原核生物唯一的适应性免疫系统,抵御着病毒和质粒的入侵。自20世纪80年代首次被发现至今,CRISPR-Cas系统的基本情况逐渐清晰,包括名称缩写、分类、进化关系等方面。近年来,由于... 在细菌与古菌中广泛存在的CRISPR-Cas系统,作为目前发现的原核生物唯一的适应性免疫系统,抵御着病毒和质粒的入侵。自20世纪80年代首次被发现至今,CRISPR-Cas系统的基本情况逐渐清晰,包括名称缩写、分类、进化关系等方面。近年来,由于第二类CRISPR-Cas系统作为一种有潜力的基因编辑工具而逐渐成为应用研究被关注,对CRISPR-Cas系统的基础研究热度也持久不衰。为了使此类基因编辑工具在实际应用领域更加安全便捷,针对已发现的CRISPR-Cas系统在根据基础研究领域的成果进行优化的同时,对新型CRISPR-Cas系统的发掘工作也同等重要。本文以2017年发现的CasX为例,简要概述针对一种新发现的CRISPR-Cas系统需要研究确定的基本属性及相关研究方法。 展开更多
关键词 CRISPR casx 基因编辑工具
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CaS_x-合成沸石联用处理高浓度含铬废水试验研究 被引量：2
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作者 李喜林 张颖 +5 位作者 孙彤彤 赵雪 刘艺 吕云燕 张震 苗永庆 《硅酸盐通报》 CAS 北大核心 2019年第5期1538-1544,共7页
以某电镀工业园区高浓度混合酸性废水为研究对象,采用动静态相结合的试验方法,以CaSx为还原剂、粉煤灰合成沸石为吸附剂进行联合处理。静态试验分析了CaSx投加量和CaSx反应时间对Cr(Ⅵ)的还原影响,在此基础上探讨了动态柱中吸附剂种类... 以某电镀工业园区高浓度混合酸性废水为研究对象,采用动静态相结合的试验方法,以CaSx为还原剂、粉煤灰合成沸石为吸附剂进行联合处理。静态试验分析了CaSx投加量和CaSx反应时间对Cr(Ⅵ)的还原影响,在此基础上探讨了动态柱中吸附剂种类、吸附层高度及进水流速对混合废水的去除效果的影响,并分析了吸附机理、选取了适合的吸附动力学方程。试验结果表明,在CaSx投入量为1.75倍理论量、反应时间为1.5h时,Cr(Ⅵ)的还原效果较好;粉煤灰合成沸石为最佳吸附剂,且在吸附层高度为15cm,进水流速为2mL/min时对混合废水的处理效果最好;Yoon-Nelson模型能够很好的拟合粉煤灰合成沸石对含铬废水的吸附过程。 展开更多
关键词 含铬废水 casx 粉煤灰合成沸石 吸附机理 Yoon-Nelson模型
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