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外泌体递送CRISPR/Cas系统在靶细胞内可实现基因编辑
1
作者 王白燕 杨树 +5 位作者 王弋鸣 吴梦晴 肖瑀 郭梓璇 张博艺 冯书营 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1839-1849,共11页
背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送... 背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送CRISPR/Cas系统的外泌体来源及工程化策略、外泌体对CRISPR/Cas系统的装载方法、CRISPR/Cas系统的生物形式及其在细胞内的作用途径等方面进行全方面综述,为该领域的研究者提供更直观、更系统的视角。方法:以“exosome,drug delivery systems,delivery,CRISPR/Cas,gene editing,engineered exosomes,targeting”为英文检索词,以“外泌体,药物递送,CRISPR/Cas,工程化”为中文检索词,分别检索Pub Med数据库及中国知网,检索时限为2014-2024年。通过仔细阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入了78篇文献进行归纳和探讨。结果与结论:(1)外泌体是一种直径30-150 nm的脂质囊泡,具有循环半衰期长、靶向组织的内在能力、良好的生物相容性以及较小的固有毒性等优势,显现出强大的靶向递送能力;(2)CRISPR/Cas系统虽是一种强大的基因编辑工具,然而现有的CRISPR/Cas系统递送载体各有利弊,无法完全满足需求;(3)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要来源于高产外泌体的细胞或组织,但研究者们依然需要根据研究所需进行选择或进一步工程化;(4)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要通过基因工程修饰、化学修饰、外泌体-脂质体杂交等策略实现工程化;(5)外泌体装载CRISPR/Cas系统的方法包括电穿孔、孵育、转染和主动装载途径等,选择合适的装载方法取决于CRISPR/Cas系统的理化性质;(6)外泌体递送CRISPR/Cas系统的生物形式包括质粒和核糖核蛋白复合体,两种形式各具特点,成功递送的CRISPR/Cas系统在靶细胞内实现基因编辑。 展开更多
关键词 外泌体 CRISPR/Cas系统 基因编辑 药物负载 靶向递送 工程化
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高职专业群与区域产业集群深度融合的案例研究——基于CAS理论视域
2
作者 牛同训 《高等工程教育研究》 北大核心 2026年第1期128-133,139,共7页
产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行... 产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行了质性研究,设计了以政府-市场为主的外部环境系统驱动的集群系统产教融合行为产生机理和产教深度融合的机理模型。突破产教融合的静态研究视角,指出在集群系统产教深度融合中,外部环境系统是重要推手、多元主体适应系统是实施关键、“流”系统是重要保障。根据研究结论,提出了发挥外部环境对集群系统产教深度融合的推动作用、发挥产教融合实施主体的关键作用、发挥“流”系统的保障作用等对策建议,引领集群系统深度融合。 展开更多
关键词 高职专业群 区域产业集群 产教融合 CAS理论 案例研究
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零改造的认证迁移方案设计与实现——以中山大学为例
3
作者 王旭 许桂满 关伟豪 《现代信息科技》 2026年第3期122-126,132,共6页
文章提出一种基于网关的零改造认证迁移方案,旨在解决复杂系统环境下向新商用认证平台平滑升级的难题。其核心在于通过服务网关动态路由作为枢纽,适配CAS协议请求,结合白名单机制将流量逐步从旧认证系统切换至新商用认证平台,同时利用统... 文章提出一种基于网关的零改造认证迁移方案,旨在解决复杂系统环境下向新商用认证平台平滑升级的难题。其核心在于通过服务网关动态路由作为枢纽,适配CAS协议请求,结合白名单机制将流量逐步从旧认证系统切换至新商用认证平台,同时利用统一LDAP目录服务实现新旧系统的认证。通过多副本网关部署、灰度流量切换和完备回滚机制,确保用户无感知迁移,将业务系统逐步引入新的认证平台。该方案具有普适性,为高校认证系统升级提供了可复用的技术框架,显著降低了迁移成本和业务风险。 展开更多
关键词 CAS认证 服务网关 单点登录 LDAP协议
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基于CRISPR/Cas9技术创制优质香味粳稻品系
4
作者 段敏 谢留杰 +1 位作者 岳雅妮 黄善军 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期235-243,共9页
【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构... 【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构建双元表达载体pHUE411-Badh2-gRNA并转入台20-29获得转基因植株。【结果】20株T0植株经过加代、潮霉素标记检测、测序比对,共计获得22个T1代无载体纯合突变株,包括6种突变类型,每种突变体在第3、第4外显子上存在不同程度的碱基变化。6个香味突变体bh62、bh64、bh65、bh67、bh68、bh74在穗长、粒长、粒宽、千粒重等方面与野生型台20-29基本一致,结实率有所下降,每穗粒数稍有提升,稻米品质没有明显变化。利用气相色谱-质谱技术检测突变体bh62、bh64、bh65的糙米中香味物质2-AP含量,结果表明糙米中2-AP含量较台20-29极显著提高,分别达到24.27、33.89、38.96 mg/kg。【结论】对水稻香味基因Badh2进行编辑可以高效获得具有香味的水稻优质品系。 展开更多
关键词 水稻 潮霉素 CRISPR/Cas9 香味基因 2-乙酰-1-吡咯啉
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复方斑蝥胶囊联合替吉奥+奥沙利铂治疗Ⅲ~Ⅳ期胃癌的疗效观察
5
作者 韩雪 田春阳 孙燕 《实用癌症杂志》 2026年第2期281-284,共4页
目的探究复方斑蝥胶囊联合SOX方案对Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者的疗效及其对患者血清CA724水平及免疫功能的影响。方法采用随机数字表法将Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者(120例)分为对照组(60例,SOX方案)和治疗组(60例,复方斑蝥胶囊联合SOX方案)。比较两组疗效... 目的探究复方斑蝥胶囊联合SOX方案对Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者的疗效及其对患者血清CA724水平及免疫功能的影响。方法采用随机数字表法将Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者(120例)分为对照组(60例,SOX方案)和治疗组(60例,复方斑蝥胶囊联合SOX方案)。比较两组疗效、血清CA724水平及免疫功能。结果治疗组DCR(71.67%)明显高于对照组(53.33%)(P<0.05)。治疗后,两组CA724水平[(48.50±5.02)U/ml、(41.46±4.23)U/ml]、CA19-9水平[(50.66±5.60)U/ml、(41.58±5.42)U/ml]、CEA水平[(20.04±2.25)μg/ml、(17.15±2.04)μg/ml]及CD8^(+)水平均较治疗前[(60.22±6.48)U/ml、(61.30±6.27)U/ml、(82.14±7.56)U/ml、(81.51±7.99)U/ml、(25.62±3.01)μg/ml、(25.80±3.12)μg/ml]下降,且治疗组优于对照组(P<0.05);两组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、KPS评分均较治疗前升高,且治疗组较对照组升高。结论复方斑蝥胶囊联合SOX方案可有效提高Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者免疫功能、改善生存质量,降低血清肿瘤标志物水平,安全性好,效果显著。 展开更多
关键词 Ⅲ~Ⅳ期胃癌 SOX方案 复方斑蝥胶囊 CA724 免疫功能
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膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与预后的相关性分析
6
作者 孟佳丽 林海 孟伟 《医学临床研究》 2026年第1期69-72,共4页
【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预... 【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预后的关系及患者死亡的危险因素。【结果】观察组术前、术后的CEA、CA19-9、β2-MG水平高于对照组,且观察组患者术前CEA、CA19-9、β2-MG水平高于术后(均P<0.05)。随访36个月,106例膀胱癌患者中63例存活(生存组),43例死亡(死亡组)。死亡组TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化的比例,以及CEA、CA19-9、β2-MG表达水平均高于生存组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化,CEA、CA19-9、β2-MG高表达均是膀胱癌患者死亡的危险因素(P<0.05)。CEA、CA19-9、β2-MG高表达组的3年生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。【结论】膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与患者的预后密切相关,其可作为预测膀胱癌患者预后的指标。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 癌胚抗原 CA19-9抗原 Β2微球蛋白 预后
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国际体育仲裁案件可受理性的多维解构与理论形塑
7
作者 向会英 《上海体育大学学报》 北大核心 2026年第2期1-13,共13页
可受理性在国际体育仲裁中具有独立价值,其对强制程序扩张的控制作用至关重要。尽管学界对其概念范畴界定存在分歧,但国际体育仲裁实践已建立了较为完善的适用规则。通过案例分析、比较研究等方法解析其概念内涵,系统化探讨其实践判例... 可受理性在国际体育仲裁中具有独立价值,其对强制程序扩张的控制作用至关重要。尽管学界对其概念范畴界定存在分歧,但国际体育仲裁实践已建立了较为完善的适用规则。通过案例分析、比较研究等方法解析其概念内涵,系统化探讨其实践判例并剖析难点问题,进而揭示其理论基础。结果发现:国际体育仲裁案件可受理性区别于管辖权与可仲裁性以及商事仲裁的可受理性,具有独特属性;不可受理事由主要包括逾期上诉、未用尽内部救济、无可上诉决定及无效申请;实践难点源于“可上诉决定”“用尽内部救济”与可受理性和管辖权的双重关系;其理论基础融合程序正义理论、仲裁自治理论及体育行业自治需求,形成独特逻辑构架。 展开更多
关键词 体育仲裁 可受理性 解构 国际体育仲裁院 仲裁实践
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复杂适应系统视角下高校学科专业调整优化的机制与路径
8
作者 尹怡 毛国羽 《重庆高教研究》 北大核心 2026年第2期65-76,共12页
面对《教育强国建设规划纲要(2024—2035年)》提出的战略要求,我国高校学科专业调整亟待破解适应性滞后困境。以复杂适应系统理论为分析视角,揭示学科专业调整优化的核心在于有效响应由结构性需求、异质性需求与前沿性需求构成的多维需... 面对《教育强国建设规划纲要(2024—2035年)》提出的战略要求,我国高校学科专业调整亟待破解适应性滞后困境。以复杂适应系统理论为分析视角,揭示学科专业调整优化的核心在于有效响应由结构性需求、异质性需求与前沿性需求构成的多维需求系统,并弥合由此衍生的结构适配缺口、跨界协同缺口与前沿进化缺口。围绕三大缺口,构建“结构调适—边界整合—演化更新”三重优化机制,修复缺口、提升系统适应性。三重优化机制相互嵌套、协同联动,形成驱动学科专业调整持续优化的系统动力。高校应构建以敏捷适应为导向的学科调整模式,建立以价值共创为核心的评价激励机制,塑造以生态思维为基础的战略布局理念。 展开更多
关键词 复杂适应系统 学科专业结构 学科专业调整机制 优化机制
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报告噬菌体T6::Nluc的构建与诊断性能评估:一种快速检测大肠杆菌尿路感染的新方法 被引量：1
9
作者 郝治云 赵强 +3 位作者 李民伟 李绵洋 王驰 王成彬 《陆军军医大学学报》 北大核心 2026年第2期147-157,共11页
目的 构建大肠杆菌特异性的报告噬菌体T6::Nluc,并评估其在尿路感染大肠杆菌快速诊断中的性能。方法 采用CRISPR/Cas9系统联合同源重组技术,构建报告噬菌体T6::Nluc。比较T6与T6::Nluc的最佳感染复数、一步生长曲线和裂解效率等生物学... 目的 构建大肠杆菌特异性的报告噬菌体T6::Nluc,并评估其在尿路感染大肠杆菌快速诊断中的性能。方法 采用CRISPR/Cas9系统联合同源重组技术,构建报告噬菌体T6::Nluc。比较T6与T6::Nluc的最佳感染复数、一步生长曲线和裂解效率等生物学特性。通过测定时间-发光曲线,确认T6::Nluc的检测限、尿液基质对检测的影响。将T6::Nluc与非大肠杆菌病原菌共培养后测定发光信号,探究检测特异性。从临床收集104株尿液分离的大肠杆菌,分析T6::Nluc的检测覆盖率。收集437例临床尿液样本进行临床检测验证。结果 T6::Nluc构建成功,其一步生长曲线、最佳感染复数与T6存在差异,但裂解效率相似。T6::Nluc可在40 min内检出≥10~4 CFU/mL的大肠杆菌标准菌株BL21,不受尿液基质影响,且表现出高度的检测特异性,可检出104株临床尿液大肠杆菌分离株中的51株(49.04%),在临床尿液样本中的检测灵敏度为48.84%,特异度为100.00。结论 成功构建了报告噬菌体T6::Nluc,并且可以灵敏、特异地检出尿路感染大肠杆菌,显著缩短了检测时间,有效提升了检测效率与准确性。 展开更多
关键词 报告噬菌体 大肠杆菌 尿路感染 CRISPR/Cas9 病原菌检测
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CRISPR/Cas基因编辑技术在艾滋病治疗中的研究现状与挑战
10
作者 杨灿 刘真 +5 位作者 张敏 张清燕 邓博文 李承乘 李杰 郭会军 《中国艾滋病性病》 北大核心 2026年第1期114-119,共6页
艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作... 艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作用机理及艾滋病治疗中的CRISPR/Cas类型,在此基础之上,聚焦于该系统在艾滋病治疗领域的研究进展和应用,从干扰病毒复制周期,清除潜伏前病毒以及调节宿主免疫三方面进行深入分析。同时提出目前存在的诸多挑战:HIV对CRISPR/Cas系统的逃逸、HIV感染细胞中CRISPR/Cas系统的高效递送、针对HIV的CRISPR/Cas独特且多靶点设计、AIDS患者Cas免疫炎症交错复杂。探讨其可能策略,以期为艾滋病基因治疗的开发和临床应用提供方向。 展开更多
关键词 艾滋病 基因治疗 CRISPR/Cas基因编辑
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石灰消化制备高比表面氢氧化钙及其铅吸附性能研究
11
作者 陈建军 李力 +5 位作者 刘来宝 张岱宇 姜晨曦 竹含真 王辅 廖其龙 《无机盐工业》 北大核心 2026年第1期99-106,共8页
为探究不同烷醇胺改性剂对Ca(OH)_(2)理化性质和微观结构的影响,以及所制备的高比表面积Ca(OH)_(2)对铅吸附性能的影响,分别以三异丙醇胺(TIPA)、二乙醇单异丙醇胺(DEIPA)、三乙醇胺(TEA)为改性剂,生石灰为原料,采用消化法制备出片层状... 为探究不同烷醇胺改性剂对Ca(OH)_(2)理化性质和微观结构的影响,以及所制备的高比表面积Ca(OH)_(2)对铅吸附性能的影响,分别以三异丙醇胺(TIPA)、二乙醇单异丙醇胺(DEIPA)、三乙醇胺(TEA)为改性剂,生石灰为原料,采用消化法制备出片层状、高比表面积氢氧化钙,将其应用于含铅废水的处理。利用X射线衍射仪、高真空气体吸附分析仪、激光粒度仪、场发射扫描电镜对制备的Ca(OH)_(2)进行表征分析,结果表明,以TEA为改性剂获得的片层状Ca(OH)_(2)性能最佳,其比表面积、孔体积和平均孔径分别为53.94 m^(2)/g、0.208 cm^(3)/g和11.66 nm。同时,揭示高比表面积片层状Ca(OH)_(2)可能的形成机理。此外,Ca(OH)_(2)对铅的吸附过程更符合Langmuir模型(R^(2)=0.992 5)和准二级动力学模型(R^(2)=0.999 7),主要是以化学吸附为主的单分子吸附过程,同时伴随着少量物理吸附,其对水中铅的吸附率达99.54%,残留铅的质量浓度≤0.46 mg/L,远低于排放限值,证实烷醇胺改性Ca(OH)_(2)在含铅废水处理方面有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 高比表面积Ca(OH)_(2) 石灰消化 吸附铅 烷醇胺改性剂
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基于CRISPR/Cas9技术构建猪GRSF1基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析
12
作者 杜鹏飞 彭听雨 +3 位作者 范双旗 郑海学 朱紫祥 陈金顶 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期161-167,共7页
利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRI... 利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRISPR v2)连接。随后将构建成功的慢病毒载体与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染人胚胎肾细胞(HEK-293T),获得慢病毒并感染PK-15细胞。最终经嘌呤霉素筛选和梯度稀释法获得GRSF1敲除的PK-15单克隆细胞系。通过Western-blot及测序验证GRSF1的敲除效率,然后进行单克隆细胞活性检测及IL-6水平检测。结果表明,本研究成功获得3株GRSF1基因敲除成功的PK-15单克隆细胞系,并证实GRSF1基因敲除影响PK-15细胞中IL-6表达的上调,为后续研究猪GRSF1的生物学功能提供细胞模型。 展开更多
关键词 GRSF1 PK-15 CRISPR/Cas9 基因敲除
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猪VIM基因的引导编辑与效率优化
13
作者 李韬 艾新洁 +4 位作者 倪梦茹 吴望军 李平华 侯黎明 黄瑞华 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期677-690,共14页
旨在建立高效的猪细胞基因编辑技术体系,为引导编辑(prime editing,PE)系统在猪遗传育种上的应用奠定基础。本研究从VIM基因编码区选取多个候选位点,严格遵循CRISPR/Cas9系统的靶位点设计原则,进行sgRNA设计。通过生物信息学工具对候选s... 旨在建立高效的猪细胞基因编辑技术体系,为引导编辑(prime editing,PE)系统在猪遗传育种上的应用奠定基础。本研究从VIM基因编码区选取多个候选位点,严格遵循CRISPR/Cas9系统的靶位点设计原则,进行sgRNA设计。通过生物信息学工具对候选sgRNA进行评分,筛选出评分最高的两条sgRNA序列,以上述优选的两条sgRNA为基础,进一步设计对应的pegRNA。利用药物hydroxyurea和nocodazole处理细胞使其停留在G1/S或G2/M时期,并将nCas9-RT融合蛋白编辑器载体和pegRNA表达载体电转染进细胞,48 h后提取混合细胞基因组DNA,PCR扩增靶位点后进行二代测序,利用CRISPResso2分析编辑结果。结果表明,PE2系统在PK15细胞中的编辑效率为0.16%~14.03%。在IPEC-J2细胞中的编辑效率为0.08%~0.58%。PEmax系统在PK15细胞上的编辑效率为0.63%~23.25%。而PE4和PE4max系统在PK15细胞中的编辑效果较差,编辑效率最高分别为0.7%和0.36%。调控细胞周期可以提升PE2系统对猪VIM基因单碱基替换和单碱基缺失两者编辑类型的编辑效率,前者编辑效率提升了1.4倍,后者编辑效率提升了2.6倍。结果显示,PE技术能够对猪VIM基因进行多种不同类型的精确编辑且通过细胞周期调控能够提升其编辑效率。可以为下一步结合体细胞克隆技术制备生产性能改良较高的猪群体提供技术参考。 展开更多
关键词 猪 CRISPR/Cas9技术 PE技术 VIM基因
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CRISPR/Cas系统在分子诊断领域的应用研究进展
14
作者 王珂 陈文慧 +1 位作者 雷春阳 聂舟 《合成生物学》 北大核心 2026年第1期3-31,共29页
CRISPR/Cas系统因其高特异性、可编程性和便捷性,已成为分子诊断领域的重要工具。本文综述了CRISPR/Cas系统的技术原理、诊断平台优化及其在精准医学中的应用进展。概述了CRISPR/Cas系统的作用机制与分类,重点讨论了CRISPR诊断技术的创... CRISPR/Cas系统因其高特异性、可编程性和便捷性,已成为分子诊断领域的重要工具。本文综述了CRISPR/Cas系统的技术原理、诊断平台优化及其在精准医学中的应用进展。概述了CRISPR/Cas系统的作用机制与分类,重点讨论了CRISPR诊断技术的创新优化策略,包括基于核酸预扩增[如SHERLOCK(specific highsensitivity enzymatic reporter unlocking)、DETECTR(DNA endonuclease targeted CRISPR trans reporter)]和免扩增的检测方法。探讨了CRISPR/Cas技术在感染性疾病(病原体筛查、耐药性检测)、肿瘤分子分型(癌症早筛、遗传变异分析)及非核酸标志物检测中的临床应用。最后展望了该技术的未来发展方向,包括微型化设备开发、高通量智能化诊断体系构等,并分析了其在临床转化中面临的关键挑战(如灵敏度标准化、成本控制等)。通过总结目前研究,为CRISPR/Cas技术在分子诊断领域的进一步优化和医学应用提供理论参考。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas系统 即时检测 临床转化应用 微型化设备 人工智能辅助分子诊断
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猪源TRAF3基因编辑细胞系的构建及缺失表型研究
15
作者 邵文华 杨帆 +6 位作者 曹伟军 陈创伟 王伟 郑海学 张伟 朱紫祥 赵宗胜 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期33-39,共7页
本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TRAF3基因敲除的PK-15细胞模型,该模型为阐明TRAF3在口蹄疫病毒(FMDV)复制中的调控作用提供试验材料。针对猪TRAF3基因的编码区序列,设计并筛选出2条高效特异的单向导RNA(sgRNA),并将其分别克隆至CRISPR... 本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TRAF3基因敲除的PK-15细胞模型,该模型为阐明TRAF3在口蹄疫病毒(FMDV)复制中的调控作用提供试验材料。针对猪TRAF3基因的编码区序列,设计并筛选出2条高效特异的单向导RNA(sgRNA),并将其分别克隆至CRISPR/Cas9载体pX459中。通过脂质体介导的转染技术将重组质粒导入PK-15细胞后,采用嘌呤霉素梯度筛选和有限稀释法相结合的策略,成功获得单克隆细胞系。采用DNA测序结合蛋白质免疫印迹技术对构建的细胞系进行验证,结果显示,TRAF3基因存在特异性碱基缺失突变,且未检测到相应蛋白表达,由此确认TRAF3基因敲除细胞模型构建成功。为探究该基因缺失对FMDV复制的调控作用,通过Western-blot、实时定量PCR(RT-qPCR)及半数组织培养感染剂量(TCID_(50))等多维度检测发现,TRAF3基因的稳定敲除可增强FMDV的复制能力。本研究结果不仅为阐明TRAF3的生物学功能提供了工具细胞系,更为后续研究该基因在病毒-宿主相互作用中的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 TNF受体关联蛋白3 细胞系 口蹄疫病毒
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利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻新种质
16
作者 潘月云 黄雨青 +3 位作者 丁正权 施扬 黄海祥 李白 《浙江农业学报》 北大核心 2026年第1期17-23,共7页
稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger... 稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger测序验证,获得4个不同类型的双位点纯合突变体。4个双位点纯合T 2代突变体株系的稻米均呈蜡质状,其直链淀粉含量由野生型的16.9%降至0.83%~1.23%,达到糯稻水平。结果表明,利用CRISPR/Cas9技术可快速创制优质香糯型水稻种质资源。 展开更多
关键词 水稻 WX基因 CRISPR/Cas9 直链淀粉
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生长抑素信号通过抑制软骨内骨化来调节骨量
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作者 刘璐 于茜 +1 位作者 袁辉明 陈洁 《生物学杂志》 北大核心 2026年第1期79-85,共7页
生长抑素(somatostatin, SST)是一种功能多样的肽,也是内分泌生长轴中的一类十分重要的调控因子,具有广泛的内分泌和外分泌功能,一些证据表明生长抑素(SST)可能在骨生理学中发挥作用。本研究旨在探究生长抑素信号通路在斑马鱼骨骼发育... 生长抑素(somatostatin, SST)是一种功能多样的肽,也是内分泌生长轴中的一类十分重要的调控因子,具有广泛的内分泌和外分泌功能,一些证据表明生长抑素(SST)可能在骨生理学中发挥作用。本研究旨在探究生长抑素信号通路在斑马鱼骨骼发育中的调控作用。通过Somatostatin1.2(sst1.2)基因敲除的斑马鱼模型,综合运用阿利新蓝软骨染色、茜素红硬骨染色、微型CT扫描、钙黄绿素标记以及关键成骨基因表达分析等多重技术手段评估SST信号对骨骼发育的影响。实验结果显示,sst1.2缺失未显著影响软骨发育和脊柱的膜内骨化过程,但使得斑马鱼突变体头骨骨量明显增加;鳞片发育未受干扰;组织学分析和成骨基因表达证实骨量增加源于软骨内骨化增强。以上结果揭示了在斑马鱼成骨过程中,SST信号通过抑制斑马鱼软骨内骨化进而调节骨量。这可为深入解析鱼类骨骼发育提供新的理论基础,也为建立更精准的骨骼发育异常疾病模型(如骨代谢障碍性疾病)开辟新思路。 展开更多
关键词 生长抑素 骨量 软骨内骨化 斑马鱼 CRISPR/Cas9
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基于导管消融术治疗房颤的治疗型医疗器械经济性评估
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作者 廖博玮 胡敏 +1 位作者 解君 陈文 《中国医学装备》 2026年第1期95-100,共6页
目的:通过评估导管消融(CA)术治疗房颤的经济价值,分析治疗型医疗器械经济价值评估的可行性。方法:检索中国知网(CNKI)、万方及美国Pubmed、英国Cochrane、荷兰Embase和我国SinoMed等中英文数据库中CA术治疗房颤的相关文献,关键词限定... 目的:通过评估导管消融(CA)术治疗房颤的经济价值,分析治疗型医疗器械经济价值评估的可行性。方法:检索中国知网(CNKI)、万方及美国Pubmed、英国Cochrane、荷兰Embase和我国SinoMed等中英文数据库中CA术治疗房颤的相关文献,关键词限定为中文和英文,文献检索时间为2015年1月至2025年1月,分析国内外已有CA术经济学评价对我国当前CA术治疗房颤决策实践的可参考性,并基于离散事件模拟(DES)模型,从我国卫生体系视角,对主流CA术治疗房颤的治疗型医疗器械经济性进行评估。结果:共检索出CA术治疗房颤的相关研究文献35篇,排除非经济性评估研究等,最终筛选出15篇文献进行CA术治疗房颤的经济学评价。CA术相比抗心律失常药物(AADs)是一种具有成本效果的房颤治疗方式,使用thermocool smarttouch导管联合消融指数技术(STAI)进行射频消融(RFCA)和二代冷冻球囊消融(CB-2)与AADs是我国当下主流的消融技术。结论:使用RFCA相比AADs治疗房颤和冷冻球囊消融技术(CB-2)更具有经济性。治疗型医疗器械的经济价值评估具有“环境特异性”和“较短保质期”,当外部环境未能反映当前支付制度、价格水平及临床应用模式时,需针对当下决策环境,选择可靠的研究方法重新开展经济性研究,以保证评估结果的可靠性和适用性。 展开更多
关键词 治疗型医疗器械 经济性评价 导管消融(CA) 房颤 参考性
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水稻抗ACCase抑制剂类除草剂两系不育系种质资源的创制
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作者 郭金梦 陶开亮 +10 位作者 朱俊 赵学宇 李康 甘泉 林翠香 汪楠胜 于豪 宋丰顺 李娟 石英尧 倪大虎 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期223-234,共12页
【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙... 【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙酰辅酶A羧化酶OsACC1为靶基因,构建单碱基突变载体e PE2-ACC-I1879V,以安9S为转化材料,利用农杆菌介导法转化获得转基因植株,通过对转基因植株的突变位点进行测序结合除草剂喷施试验、农艺性状分析,鉴定基因型及表型。【结果】经分子水平检测验证,T_(0)代获得ACC1^(I1879V)突变植株24株;经分离筛选,T_(1)代24个株系共获得96株纯合突变单株,均具有除草剂抗性。高通量测序结果显示,三个试验组株系(NS512、NS513、NS514)均不含外源转基因成分,且喷施4%甲禾灵存活率仍达到100%。与对照安9S相比,NS512株系株高增加,剑叶变宽;NS513株系株高增高,剑叶变长变宽;NS514株系剑叶变窄;三个试验组株系的育性未发生改变,单株有效穗数、穗长、均没有显著差异。转基因安全性评价分析表明,OsACC1基因编码蛋白与已知毒蛋白、抗营养因子及过敏原均无相似序列,不存在毒性、致敏性问题。【结论】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,能够获得具有抗ACCase抑制剂类除草剂特性、稳定遗传、不含转基因成分、育性不发生改变、安全无害的纯合株系,可为水稻抗除草剂育种提供材料基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑 乙酰辅酶A羧化酶 不育系
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POP基因敲除PK-15细胞系的建立及其对口蹄疫病毒增殖的影响
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作者 卢炳州 李建斌 +10 位作者 王姿逸 杨洋 赵陇和 李亚军 刘华南 李明桂 马坤 郑海学 郭建宏 茹毅 郝荣增 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期27-32,共6页
为探索脯氨酰寡肽酶(POP)缺失对口蹄疫病毒(FMDV)增殖的影响,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过慢病毒包装、嘌呤霉素筛选及有限稀释法单克隆培养,构建POP基因敲除的PK-15细胞系(POP-KO),并以野生型PK-15(WT-PK-15)细胞为对照,接种FMDV... 为探索脯氨酰寡肽酶(POP)缺失对口蹄疫病毒(FMDV)增殖的影响,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过慢病毒包装、嘌呤霉素筛选及有限稀释法单克隆培养,构建POP基因敲除的PK-15细胞系(POP-KO),并以野生型PK-15(WT-PK-15)细胞为对照,接种FMDV后采用实时荧光定量RT-PCR检测FMDV RNA水平,通过Western-blot分析病毒结构蛋白VP1表达量及病毒滴度测定(TCID50)方法综合评估POP缺失对FMDV增殖的影响。结果表明,与WT-PK-15细胞相比,POP-KO细胞中VP1蛋白表达水平显著降低(P<0.001),病毒滴度降低了1.24 lg TCID50/m L(P<0.001),FMDV RNA拷贝数显著低于对照细胞(P<0.001)。本研究成功建立了POP基因敲除的PK-15细胞系,证实POP缺失可显著抑制FMDV的增殖,揭示POP是FMDV复制的关键宿主促进因子。 展开更多
关键词 脯氨酰寡肽酶 CRISPR/Cas9 基因敲除 口蹄疫病毒 病毒增殖
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