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The catalytic activity of Ca/Fe-rich incineration ash in the pyrolysis of epidemic wood
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作者 Yanjun Hu Zhenxing Luo +4 位作者 Long Jiao Caimeng Yu Jian Li Qianqian Guo Jian Song 《Waste Disposal and Sustainable Energy》 2025年第2期259-272,共14页
The spread of pine nematode disease caused by epidemic wood poses a great challenge to the environment,and there is an urgent need to develop effective processing methods;however,Ca/Fe-rich sludge ash can improve the ... The spread of pine nematode disease caused by epidemic wood poses a great challenge to the environment,and there is an urgent need to develop effective processing methods;however,Ca/Fe-rich sludge ash can improve the pyrolysis properties of biomass.Therefore,this paper focuses on the pyrolysis mechanism of epidemic wood with the addition of Ca/Fe-rich sludge ash.The presence of Ca-rich sludge ash was found to extend the pyrolytic temperature window of epidemic wood,intensify the cracking of its volatile constituents,and extend its reaction duration.At the same time,the Ca-rich sludge reduces the pyrolysis activation energy to 152.39 kJ/mol.The Fe-rich sludge ash demonstrated the capacity to lower the energy barriers during the initial phase of pyrolysis.Concurrently,the Ca-rich sludge ash accelerated the dehydration reaction of the epidemic wood,leading to 21.02%and 30.69%increases in the contents of acids and ketones in the pyrolytic oil,respectively.The Fe-rich sludge ash contributed to a notable 14.52%increase in aromatic compounds in the oil and a 19.14%decrease in alcoholic compounds.Additionally,the Ca-rich sludge ash accelerated the decomposition of lipid organic matter at elevated temperatures,enriching the pyrolytic char with more unsaturated bonds.This research lays a theoretical foundation for the safe and efficacious thermal decomposition of epidemic wood,thereby enhancing its utilization within the forestry industry. 展开更多
关键词 Epidemic wood PYROLYSIS catalysis ca/fe-rich sludge ash Reaction kinetics
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外泌体递送CRISPR/Cas系统在靶细胞内可实现基因编辑
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作者 王白燕 杨树 +5 位作者 王弋鸣 吴梦晴 肖瑀 郭梓璇 张博艺 冯书营 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1839-1849,共11页
背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送... 背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送CRISPR/Cas系统的外泌体来源及工程化策略、外泌体对CRISPR/Cas系统的装载方法、CRISPR/Cas系统的生物形式及其在细胞内的作用途径等方面进行全方面综述,为该领域的研究者提供更直观、更系统的视角。方法:以“exosome,drug delivery systems,delivery,CRISPR/Cas,gene editing,engineered exosomes,targeting”为英文检索词,以“外泌体,药物递送,CRISPR/Cas,工程化”为中文检索词,分别检索Pub Med数据库及中国知网,检索时限为2014-2024年。通过仔细阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入了78篇文献进行归纳和探讨。结果与结论:(1)外泌体是一种直径30-150 nm的脂质囊泡,具有循环半衰期长、靶向组织的内在能力、良好的生物相容性以及较小的固有毒性等优势,显现出强大的靶向递送能力;(2)CRISPR/Cas系统虽是一种强大的基因编辑工具,然而现有的CRISPR/Cas系统递送载体各有利弊,无法完全满足需求;(3)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要来源于高产外泌体的细胞或组织,但研究者们依然需要根据研究所需进行选择或进一步工程化;(4)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要通过基因工程修饰、化学修饰、外泌体-脂质体杂交等策略实现工程化;(5)外泌体装载CRISPR/Cas系统的方法包括电穿孔、孵育、转染和主动装载途径等,选择合适的装载方法取决于CRISPR/Cas系统的理化性质;(6)外泌体递送CRISPR/Cas系统的生物形式包括质粒和核糖核蛋白复合体,两种形式各具特点,成功递送的CRISPR/Cas系统在靶细胞内实现基因编辑。 展开更多
关键词 外泌体 CRISPR/cas系统 基因编辑 药物负载 靶向递送 工程化
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高职专业群与区域产业集群深度融合的案例研究——基于CAS理论视域
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作者 牛同训 《高等工程教育研究》 北大核心 2026年第1期128-133,139,共7页
产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行... 产教融合是高职院校和产业高质量发展的重要举措。针对高职专业群与区域产业集群“合而不融”等问题,基于复杂适应系统(CAS)理论,分析了集群系统与CAS的相似性,构建了集群系统产教融合分析框架。采用扎根理论方法对9个集群系统案例进行了质性研究,设计了以政府-市场为主的外部环境系统驱动的集群系统产教融合行为产生机理和产教深度融合的机理模型。突破产教融合的静态研究视角,指出在集群系统产教深度融合中,外部环境系统是重要推手、多元主体适应系统是实施关键、“流”系统是重要保障。根据研究结论,提出了发挥外部环境对集群系统产教深度融合的推动作用、发挥产教融合实施主体的关键作用、发挥“流”系统的保障作用等对策建议,引领集群系统深度融合。 展开更多
关键词 高职专业群 区域产业集群 产教融合 caS理论 案例研究
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基于CRISPR/Cas9技术创制优质香味粳稻品系
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作者 段敏 谢留杰 +1 位作者 岳雅妮 黄善军 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期235-243,共9页
【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构... 【目的】香味是水稻重要的食味品质性状。本研究选择优质粳稻品系台20-29为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术对其香味基因Badh2进行编辑,以期获得具有香味的优质粳稻品系。【方法】选择香味基因Badh2第3、第4外显子上的2段序列作靶位点,构建双元表达载体pHUE411-Badh2-gRNA并转入台20-29获得转基因植株。【结果】20株T0植株经过加代、潮霉素标记检测、测序比对,共计获得22个T1代无载体纯合突变株,包括6种突变类型,每种突变体在第3、第4外显子上存在不同程度的碱基变化。6个香味突变体bh62、bh64、bh65、bh67、bh68、bh74在穗长、粒长、粒宽、千粒重等方面与野生型台20-29基本一致,结实率有所下降,每穗粒数稍有提升,稻米品质没有明显变化。利用气相色谱-质谱技术检测突变体bh62、bh64、bh65的糙米中香味物质2-AP含量,结果表明糙米中2-AP含量较台20-29极显著提高,分别达到24.27、33.89、38.96 mg/kg。【结论】对水稻香味基因Badh2进行编辑可以高效获得具有香味的水稻优质品系。 展开更多
关键词 水稻 潮霉素 CRISPR/cas9 香味基因 2-乙酰-1-吡咯啉
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膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与预后的相关性分析
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作者 孟佳丽 林海 孟伟 《医学临床研究》 2026年第1期69-72,共4页
【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预... 【目的】探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平与患者预后的相关性。【方法】检测106例膀胱癌患者(观察组),85例体检健康者(对照组)的血清CEA、CA19-9、β2-MG水平,分析其与膀胱癌患者预后的关系及患者死亡的危险因素。【结果】观察组术前、术后的CEA、CA19-9、β2-MG水平高于对照组,且观察组患者术前CEA、CA19-9、β2-MG水平高于术后(均P<0.05)。随访36个月,106例膀胱癌患者中63例存活(生存组),43例死亡(死亡组)。死亡组TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化的比例,以及CEA、CA19-9、β2-MG表达水平均高于生存组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤低分化,CEA、CA19-9、β2-MG高表达均是膀胱癌患者死亡的危险因素(P<0.05)。CEA、CA19-9、β2-MG高表达组的3年生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。【结论】膀胱癌患者血清CEA、CA19-9、β2-MG水平与患者的预后密切相关,其可作为预测膀胱癌患者预后的指标。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 癌胚抗原 ca19-9抗原 Β2微球蛋白 预后
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CRISPR/Cas基因编辑技术在艾滋病治疗中的研究现状与挑战
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作者 杨灿 刘真 +5 位作者 张敏 张清燕 邓博文 李承乘 李杰 郭会军 《中国艾滋病性病》 北大核心 2026年第1期114-119,共6页
艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作... 艾滋病基因治疗一直是研究者们关注的热点。成簇规律间隔短回文重复序列/CRISPR相关蛋白系统(CRISPR/Cas)设计简单、操作方便、靶向性强、灵敏度高,是新颖有效的第三代“基因组定点编辑技术”。本文综述了CRISPR/Cas系统的历史由来、作用机理及艾滋病治疗中的CRISPR/Cas类型,在此基础之上,聚焦于该系统在艾滋病治疗领域的研究进展和应用,从干扰病毒复制周期,清除潜伏前病毒以及调节宿主免疫三方面进行深入分析。同时提出目前存在的诸多挑战:HIV对CRISPR/Cas系统的逃逸、HIV感染细胞中CRISPR/Cas系统的高效递送、针对HIV的CRISPR/Cas独特且多靶点设计、AIDS患者Cas免疫炎症交错复杂。探讨其可能策略,以期为艾滋病基因治疗的开发和临床应用提供方向。 展开更多
关键词 艾滋病 基因治疗 CRISPR/cas基因编辑
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基于CRISPR/Cas9技术构建猪GRSF1基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析
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作者 杜鹏飞 彭听雨 +3 位作者 范双旗 郑海学 朱紫祥 陈金顶 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期161-167,共7页
利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRI... 利用CRISPR/Cas9技术构建鸟嘌呤富含序列因子1(GRSF1)基因敲除的PK-15细胞并探究GRSF1基因敲除对于细胞活性的影响。首先,设计了4条靶向猪源GRSF1基因的sgRNAs(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3和sgRNA-4),经退火后与慢病毒载体质粒(Lenti-CRISPR v2)连接。随后将构建成功的慢病毒载体与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染人胚胎肾细胞(HEK-293T),获得慢病毒并感染PK-15细胞。最终经嘌呤霉素筛选和梯度稀释法获得GRSF1敲除的PK-15单克隆细胞系。通过Western-blot及测序验证GRSF1的敲除效率,然后进行单克隆细胞活性检测及IL-6水平检测。结果表明,本研究成功获得3株GRSF1基因敲除成功的PK-15单克隆细胞系,并证实GRSF1基因敲除影响PK-15细胞中IL-6表达的上调,为后续研究猪GRSF1的生物学功能提供细胞模型。 展开更多
关键词 GRSF1 PK-15 CRISPR/cas9 基因敲除
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CRISPR/Cas系统在分子诊断领域的应用研究进展
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作者 王珂 陈文慧 +1 位作者 雷春阳 聂舟 《合成生物学》 北大核心 2026年第1期3-31,共29页
CRISPR/Cas系统因其高特异性、可编程性和便捷性,已成为分子诊断领域的重要工具。本文综述了CRISPR/Cas系统的技术原理、诊断平台优化及其在精准医学中的应用进展。概述了CRISPR/Cas系统的作用机制与分类,重点讨论了CRISPR诊断技术的创... CRISPR/Cas系统因其高特异性、可编程性和便捷性,已成为分子诊断领域的重要工具。本文综述了CRISPR/Cas系统的技术原理、诊断平台优化及其在精准医学中的应用进展。概述了CRISPR/Cas系统的作用机制与分类,重点讨论了CRISPR诊断技术的创新优化策略,包括基于核酸预扩增[如SHERLOCK(specific highsensitivity enzymatic reporter unlocking)、DETECTR(DNA endonuclease targeted CRISPR trans reporter)]和免扩增的检测方法。探讨了CRISPR/Cas技术在感染性疾病(病原体筛查、耐药性检测)、肿瘤分子分型(癌症早筛、遗传变异分析)及非核酸标志物检测中的临床应用。最后展望了该技术的未来发展方向,包括微型化设备开发、高通量智能化诊断体系构等,并分析了其在临床转化中面临的关键挑战(如灵敏度标准化、成本控制等)。通过总结目前研究,为CRISPR/Cas技术在分子诊断领域的进一步优化和医学应用提供理论参考。 展开更多
关键词 CRISPR/cas系统 即时检测 临床转化应用 微型化设备 人工智能辅助分子诊断
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利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻新种质
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作者 潘月云 黄雨青 +3 位作者 丁正权 施扬 黄海祥 李白 《浙江农业学报》 北大核心 2026年第1期17-23,共7页
稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger... 稻米直链淀粉含量直接影响其蒸煮食味品质,该性状主要由Waxy(Wx)基因控制。本研究基于Wx基因上SNP的表型关联分析,选择其第3、第4外显子设计编辑靶点。利用CRISPR/Cas9技术,以水稻品种嘉禾香1号为受体,对Wx基因进行编辑。经PCR与Sanger测序验证,获得4个不同类型的双位点纯合突变体。4个双位点纯合T 2代突变体株系的稻米均呈蜡质状,其直链淀粉含量由野生型的16.9%降至0.83%~1.23%,达到糯稻水平。结果表明,利用CRISPR/Cas9技术可快速创制优质香糯型水稻种质资源。 展开更多
关键词 水稻 WX基因 CRISPR/cas9 直链淀粉
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水稻抗ACCase抑制剂类除草剂两系不育系种质资源的创制
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作者 郭金梦 陶开亮 +10 位作者 朱俊 赵学宇 李康 甘泉 林翠香 汪楠胜 于豪 宋丰顺 李娟 石英尧 倪大虎 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第2期223-234,共12页
【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙... 【目的】创制抗除草剂水稻新种质是培育抗除草剂水稻新品种的前提。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以安9S不育系为材料,编辑乙酰辅酶A羧化酶OsACC1基因,创制具有抗除草剂特性的两系不育系水稻新种质。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙酰辅酶A羧化酶OsACC1为靶基因,构建单碱基突变载体e PE2-ACC-I1879V,以安9S为转化材料,利用农杆菌介导法转化获得转基因植株,通过对转基因植株的突变位点进行测序结合除草剂喷施试验、农艺性状分析,鉴定基因型及表型。【结果】经分子水平检测验证,T_(0)代获得ACC1^(I1879V)突变植株24株;经分离筛选,T_(1)代24个株系共获得96株纯合突变单株,均具有除草剂抗性。高通量测序结果显示,三个试验组株系(NS512、NS513、NS514)均不含外源转基因成分,且喷施4%甲禾灵存活率仍达到100%。与对照安9S相比,NS512株系株高增加,剑叶变宽;NS513株系株高增高,剑叶变长变宽;NS514株系剑叶变窄;三个试验组株系的育性未发生改变,单株有效穗数、穗长、均没有显著差异。转基因安全性评价分析表明,OsACC1基因编码蛋白与已知毒蛋白、抗营养因子及过敏原均无相似序列,不存在毒性、致敏性问题。【结论】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,能够获得具有抗ACCase抑制剂类除草剂特性、稳定遗传、不含转基因成分、育性不发生改变、安全无害的纯合株系,可为水稻抗除草剂育种提供材料基础。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 基因编辑 乙酰辅酶A羧化酶 不育系
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基于CRISPR/Cas9技术的西方蜜蜂AmBgb敲除及功能分析
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作者 赖雨 许瑞鑫 +8 位作者 朱雅楠 傅云熙 田林艳 吴胜利 陈志杰 单简 付艳芳 苏松坤 聂红毅 《昆虫学报》 北大核心 2026年第1期34-41,共8页
【目的】核心结合因子(core binding factor,CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子,在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用,但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中... 【目的】核心结合因子(core binding factor,CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子,在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用,但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中的生理功能。【方法】克隆西方蜜蜂Bgb(big brother)基因AmBgb的编码序列(coding sequence,CDS),并进行生物信息学分析;运用qRT-PCR检测AmBgb在西方蜜蜂不同发育发育阶段(1-3日龄工蜂卵,1,3和5日龄工蜂幼虫,工蜂预蛹,1,3,5,7和9日龄工蜂蛹,刚出房工蜂,10日龄哺育蜂以及21日龄采集蜂)的表达量;采用CRISPR/Cas9敲除西方蜜蜂卵中AmBgb,监测卵的发育和存活情况,并通过PCR和测序的方法检测靶位点,验证AmBgb在西方蜜蜂中的生理功能。【结果】西方蜜蜂AmBgb的CDS全长为759 bp,编码252个氨基酸,第39-201位氨基酸存在1个CBFβ结构域;AmBgb分子量为28982.37 D,无信号肽和跨膜结构,预测其为胞内蛋白;系统进化树显示西方蜜蜂AmBgb与东方蜜蜂A.cerana的Bgb高度同源(氨基酸序列一致性为99.21%),且亲缘关系最密切。AmBgb在2和3日龄工蜂卵中的表达量明显高于其他发育阶段的。基于CRISPR/Cas9处理的西方蜜蜂43粒卵中,有5粒卵孵化为幼虫且AmBgb靶位点无突变;随机对7粒死亡卵进行检测,发现6粒卵中AmBgb的靶位点出现基因编辑,包括不同长度插入、缺失或替换。【结论】西方蜜蜂AmBgb在2和3日龄卵中高量表达,敲除AmBgb导致卵不能正常孵化为幼虫。这些结果表明AmBgb在西方蜜蜂胚胎发育过程中发挥重要作用,这将为其他膜翅目(Hymenoptera)昆虫中该基因的生理功能研究提供理论指导。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 核心结合因子β亚基 基因克隆 时期表达谱 CRISPR/cas9
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基于CRISPR/Cas9技术提高番茄果实中番茄红素含量
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作者 张光智 史寒琪 +2 位作者 吴保唐 刘涛 祝建波 《江苏农业科学》 北大核心 2026年第1期27-34,共8页
旨在采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对番茄中番茄红素代谢相关的关键基因进行定向编辑,从而提高番茄果实中番茄红素的含量。以石番43亲本为试验材料,基于CRISPR/Cas9系统,构建Sl LCY-E、Sl LCY-B基因的双元表达载体,用农杆菌介导的遗传转... 旨在采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对番茄中番茄红素代谢相关的关键基因进行定向编辑,从而提高番茄果实中番茄红素的含量。以石番43亲本为试验材料,基于CRISPR/Cas9系统,构建Sl LCY-E、Sl LCY-B基因的双元表达载体,用农杆菌介导的遗传转化法获得15株番茄再生苗。经PCR检测发现,有9株番茄植株呈阳性,阳性转化率为60%;对阳性植株的靶序列进行测序发现,有7株番茄发生了基因编辑,编辑效率约为77.8%,其中有4株番茄在2个靶位点均发生了基因突变。此外,Sl LCY-E、Sl LCY-B基因之间的编辑效率也存在差异,分别为55.6%、66.7%。基因编辑类型包括碱基缺失、插入。对成熟期番茄进行检测发现,在突变株果实中,番茄红素的含量均高于野生型果实,且不影响其他农艺性状,其中,12号植株果实中的番茄红素含量最高,为野生型的3.2倍。qRT-PCR结果表明,突变株中Sl LCY-E、Sl LCY-B基因的相对表达量多较野生型显著降低。综上,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制了番茄红素环化酶基因的表达,成功提高了果实中番茄红素的含量,同时证明Sl LCY-E、Sl LCY-B基因表达量与番茄红素积累量呈负相关。 展开更多
关键词 番茄 CRISPR/cas9 SlLCY-E SlLCY-B 番茄红素
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类食品乳杆菌LBM 12001基于CRISPR/Cas9技术多基因编辑平台的构建
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作者 黄宗潇 侯倩 +2 位作者 徐岩 黄卫宁 穆晓清 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期11-19,共9页
作为传统发酵食品的核心功能菌株,类食品乳杆菌(Lactobacillus paralimentarius)的代谢调控网络解析常受限于低效的遗传操作体系。该研究旨在开发一种高效、无痕的CRISPR/Cas9基因编辑平台,以解决类食品乳杆菌多基因编辑的技术瓶颈。通... 作为传统发酵食品的核心功能菌株,类食品乳杆菌(Lactobacillus paralimentarius)的代谢调控网络解析常受限于低效的遗传操作体系。该研究旨在开发一种高效、无痕的CRISPR/Cas9基因编辑平台,以解决类食品乳杆菌多基因编辑的技术瓶颈。通过优化质粒大小以及引入λ-Red重组酶辅助同源重组,构建了双质粒系统(pCRI01/pCRI02)。实验结果表明,该系统显著提升了转化效率[单基因敲除转化子达(63±11)个,阳性突变率75%],并实现了三基因同步敲除[转化子(57±8)个,突变率(46±7)%]。创新性整合BioBricks模块化组装、温度敏感型复制子及自靶向诱导型sgRNA技术,使多基因编辑周期缩短40%以上。该体系突破了传统方法的效率限制,成功实现多基因无痕编辑,为构建类食品乳杆菌高效细胞工厂提供了关键性技术支撑。 展开更多
关键词 类食品乳杆菌 CRISPR/cas9 多基因编辑 λ-Red重组酶 BioBricks组装
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Effect of trace Zr and V on 3 D morphology of Fe-rich phase and mechanical properties in recycled Al-Mg-Si alloy
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作者 SONG Dong-fu ZHAO Yu-liang +4 位作者 CAI Yue-hua YANG Dong-yang XIE Zheng-chao WANG Xiang-jie ZHANG Wei-wen 《Journal of Central South University》 2025年第6期2022-2037,共16页
Trace amounts of Zr and V can increase the recrystallization temperature of Al-Mg-Si wrought aluminum alloys,which is expected to regulate the recrystallization grain.In this paper,trace amounts of V and Zr were added... Trace amounts of Zr and V can increase the recrystallization temperature of Al-Mg-Si wrought aluminum alloys,which is expected to regulate the recrystallization grain.In this paper,trace amounts of V and Zr were added to recycled Al-Mg-Si alloys,and their e ffects on the microstructure and mechanical properties of the cast alloys were studied by scanning electron microscopy(SEM)and synchrotron radiation X-ray tomography(SRXT).The results show that the addition of Zr significantly increases the grain sizes due to the“Zr poisoning”;V addition has no significant effect on the grain size.The morphology of Fe-rich phase gradually changes from the large Chinese-script shape to the fine short rod and curved long strip shape,and the distribution uniformity is improved with the combined addition of V and Zr.The three-dimensional(3 D)morphology of Fe-rich phase includes granular,short rod-like,simple branch and multi-branch structures.The individual addition of V and Zr has no significant effect on the morphology of Fe-rich phase;but the combined addition of V and Zr significantly increases the number and volume fraction of Fe-rich phase with small size(diameter£15μm),the number of branches in the largest Fe-rich phase is significantly reduced,resulting in the improvement of elongation.This work provides a theoretical basis for the development of new recycled Al-Mg-Si alloys in industrial application. 展开更多
关键词 Al-Mg-Si alloy fe-rich phases Zr and V synchrotron X-ray tomography
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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建番茄SlGATA1突变体
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作者 姜杏 刘永胜 +2 位作者 吴子睿 徐雨 苗敏 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期226-232,共7页
GATA作为一类广泛存在于真核生物中的转录因子,在植物各生长发育阶段和逆境胁迫响应过程中发挥着至关重要的作用。为探究转录因子SlGATA1在番茄植株生长发育和逆境胁迫响应中的具体生物学功能,文章通过实时荧光定量聚合酶链式反应(polym... GATA作为一类广泛存在于真核生物中的转录因子,在植物各生长发育阶段和逆境胁迫响应过程中发挥着至关重要的作用。为探究转录因子SlGATA1在番茄植株生长发育和逆境胁迫响应中的具体生物学功能,文章通过实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对SlGATA1基因表达模式进行分析,并利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对SlGATA1基因进行编辑。结果表明:SlGATA1基因在各组织中均有表达,在种子中的表达量最高;SlGATA1基因的表达受高盐、干旱、高温及病原菌丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,Pst DC3000)的影响;通过根癌农杆菌介导的遗传转化体系和CRISPR/Cas9基因编辑技术获得4株稳定遗传的SlGATA1基因敲除突变体,为番茄品种改良提供新的遗传材料。该研究为探究SlGATA1基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 番茄 SlGATA1基因 基因编辑 CRISPR/cas9 逆境胁迫
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血清miR-421、CA724联合检测对胃癌的临床诊断价值
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作者 张馨予 刘圆圆 +3 位作者 王远识 马瑛泽 程同双 关晓辉 《北华大学学报(自然科学版)》 2026年第1期72-77,共6页
目的探讨胃癌患者血清中微小RNA(miR)-421、CA724的表达水平及其与肿瘤浸润程度、有/无淋巴结转移的相关性,并分析二者单独及联合检测对胃癌的临床诊断价值。方法以内镜和病理检查结果确诊为胃癌的患者185例(早期胃癌97例、进展期胃癌88... 目的探讨胃癌患者血清中微小RNA(miR)-421、CA724的表达水平及其与肿瘤浸润程度、有/无淋巴结转移的相关性,并分析二者单独及联合检测对胃癌的临床诊断价值。方法以内镜和病理检查结果确诊为胃癌的患者185例(早期胃癌97例、进展期胃癌88例)为胃癌组,以同期的86名健康体检者为对照组。两组参与者均采集空腹状态下的肘静脉血清样本,并提取RNA;采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清中miR-421的表达水平,采用电化学发光法测定血清中糖类抗原724(CA724)的表达水平。根据有/无淋巴结转移将胃癌组患者分为淋巴结转移组和无淋巴结转移组,对比两组患者血清miR-421、CA724表达水平。通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)及比较曲线下面积(AUC),评估血清miR-421及CA724表达水平对胃癌的诊断价值。结果与对照组比较,胃癌组患者血清miR-421、CA724的表达水平明显升高(P<0.001);在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组中,患者血清miR-421、CA724的表达水平比较差异具有统计学意义(P<0.001);ROC曲线分析显示,血清miR-421、CA724表达水平联合检测在胃癌中的AUC均高于单一指标的AUC。结论血清miR-421、CA724在胃癌组患者中的表达水平对胃癌具有一定的诊断价值;胃癌患者血清miR-421、CA724的表达水平和有/无淋巴结转移存在显著相关性;血清miR-421、CA724水平的联合检测在胃癌的诊断中表现出比单一指标更高的诊断效能。 展开更多
关键词 微小RNA miR-421 ca724 血清标志物 胃癌
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基于环介导等温扩增和CRISPR/Cas系统的转基因玉米和大豆快速准确现场检测
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作者 朱媛媛 杨天怡 +9 位作者 杜俊刚 马斯韩 陈艳菊 刘海荣 叶合肥 严忠军 黄之斌 虞子锋 杨群清 吴坚 《食品科学》 北大核心 2026年第2期21-29,共9页
为应对基于核酸扩增的分子生物学检测转基因粮食方法所面临操作复杂、检测时间长和设备昂贵等挑战,本研究以玉米和大豆为主要研究对象,研发了一种高效快速、无需纯化或稀释的核酸提取方法。同时筛选了高效、特异的转基因标签引物,建立... 为应对基于核酸扩增的分子生物学检测转基因粮食方法所面临操作复杂、检测时间长和设备昂贵等挑战,本研究以玉米和大豆为主要研究对象,研发了一种高效快速、无需纯化或稀释的核酸提取方法。同时筛选了高效、特异的转基因标签引物,建立了针对转基因玉米和大豆的转基因快速环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)体系和防污染体系。此外,建立了一种基于规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)系统的可视化快速检测方法。该检测方法可在45 min内完成转基因检测,对转基因大豆和玉米的代表性转基因成分检测限达0.1%。该方法可实现转基因粮食的快速精准检测,有助于提高粮食监管水平,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 转基因粮食 核酸提取 现场检测 环介导等温扩增 CRISPR/cas系统
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Facile Fabrication of Ceramic-resin Coatings on C/CA Composites for Oxidation Protection at Medium Temperatures
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作者 TIAN Hongwang LUO Longfei +4 位作者 HU Chenglong YAN Meng PANG Shengyang LI Jian TANG Sufang 《无机材料学报》 北大核心 2026年第3期401-408,I0008-I0011,共12页
Carbon fiber-reinforced carbon aerogel(C/CA)composites are one of the most promising candidates for applications requiring both thermal insulation and load bearing capabilities.The preparation of anti-oxidation coatin... Carbon fiber-reinforced carbon aerogel(C/CA)composites are one of the most promising candidates for applications requiring both thermal insulation and load bearing capabilities.The preparation of anti-oxidation coatings on C/CA to address its susceptibility to oxidation is a feasible approach to promote its application in oxidative environments.However,the currently reported coatings on C/CA mainly focus on improving the ablation performance and coating preparation process typically necessitating high-temperature heat treatment.This procedure can increase its thermal conductivity and reduce its thermal insulation ability.In this study,a series of ceramic-resin coatings were fabricated on C/CA through a simple slurry brushing-drying approach at room temperature.The effects of phenolic resin content on the coating structure,residual stress,thermal shock,and oxidation behaviors were investigated.Due to the adhesive properties and curing-induced shrinkage,the PR-7.5 coating(containing 7.5%(in mass)phenolic resin in the slurry)exhibits bonding strength close to fracture strength of the substrate and residual compressive stress of 0.853 GPa,which is beneficial for resisting thermal shock cracking.However,excessive resin content(PR-10.0 containing 10.0%(in mass)phenolic resin in the slurry)induces tensile stress due to uneven curing shrinkage,thereby leading to thermal shock cracking.Meanwhile,oxidation tests reveal significantly reduced weight losses for PR-7.5(17.46%at 800℃/100 min,8.15%at 1000℃/120 min,3.15%at 1200℃/120 min)versus uncoated C/CA’s 44.60%loss at 800℃/20 min.This work provides a brand-new and simple approach to improving the anti-oxidation performance of C/CA and expands its application in mild oxidative environments. 展开更多
关键词 C/ca composite coating OXIDATION residual stress interfacial bonding
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基于重组酶聚合酶扩增和CRISPR/Cas12a系统的2种快速检测奇异变形杆菌的方法
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作者 江艺浩 唐田 +6 位作者 余婕 甘善萍 谢轶 何秋蓉 杨罗 田绿波 汪川 《微生物学通报》 北大核心 2026年第1期519-535,共17页
【背景】奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)是一种重要的致病菌,能够引起人类和动物感染。目前针对该菌的快速检测技术研究较为匮乏,这为临床早期诊断和精准防治工作带来挑战。【目的】基于不同原间隔序列临近基序(protospacer adjacent ... 【背景】奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)是一种重要的致病菌,能够引起人类和动物感染。目前针对该菌的快速检测技术研究较为匮乏,这为临床早期诊断和精准防治工作带来挑战。【目的】基于不同原间隔序列临近基序(protospacer adjacent motif,PAM)序列策略,构建基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和CRISPR/Cas12a系统的2种检测平台,实现对奇异变形杆菌的快速检测。【方法】针对奇异变形杆菌保守基因建立基于RPA和CRISPR/Cas12a系统的一步法和两步法检测平台。一步法平台在39℃条件下同时进行RPA与CRISPR/Cas12a反应,实时收集荧光信号;两步法平台则首先在39℃条件下进行RPA扩增,扩增完成后通过瞬时离心将CRISPR/Cas12a体系移至管底,继续在39℃条件下进行反应以产生荧光信号。优化反应条件后,评估2种方法对奇异变形杆菌临床分离株及其他常见细菌样本的检测灵敏度和特异性。【结果】成功建立了基于RPA和CRISPR/Cas12a的2种检测平台,均可在30 min内检测到最低2.8 copies/μL的标准质粒。在使用热裂解法对样本进行预处理时,一步法灵敏度为10~6 CFU/mL,而两步法灵敏度为10~3 CFU/mL;在对模拟样本进行基因组DNA提取后,一步法和两步法灵敏度分别为10~2 CFU/mL和10~1 CFU/mL。两种方法在30例临床分离株样本中均表现出良好的检出能力,与其他常见致病菌无交叉反应,具有良好的特异性。【结论】本研究基于不同的PAM序列设计策略,构建了针对奇异变形杆菌的RPA-CRISPR/Cas12a一步法和两步法检测平台,具有快速、灵敏、特异的优点,有望在奇异变形杆菌现场检测中应用。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 重组酶聚合酶扩增 CRISPR/cas12a 次优PAM序列
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Ca^(2+)/Mg^(2+)对(Y_(2)O_(3)+ZrO_(2))-YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)NTC陶瓷电学性能影响
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作者 谭健 蔡冰 +5 位作者 唐良颖 吴聪 黄婷 刘华臣 向正飞 邓腾飞 《陶瓷学报》 北大核心 2026年第1期78-84,共7页
本文通过在(54 mol%Y_(2)O_(3)+6 mol%ZrO_(2))-40 mol%YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)中掺入4 mol%~8 mol%的Ca^(2+)/Mg^(2+),经两步烧结制备负温度系数(Negative Temperature Coefficient,NTC)热敏陶瓷。所有掺杂样品均保持Y_(2)O_(3)与正交... 本文通过在(54 mol%Y_(2)O_(3)+6 mol%ZrO_(2))-40 mol%YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)中掺入4 mol%~8 mol%的Ca^(2+)/Mg^(2+),经两步烧结制备负温度系数(Negative Temperature Coefficient,NTC)热敏陶瓷。所有掺杂样品均保持Y_(2)O_(3)与正交钙钛矿相YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)双相结构,Ca^(2+)/Mg^(2+)主要固溶于钙钛矿相,显微结构呈“海岛”状分布且致密性良好。电学性能方面,Ca^(2+)能显著降低电阻率,当Ca^(2+)掺杂量为8 mol%时,电阻率较未掺杂样品降低约82%。相比之下,Mg^(2+)掺杂仅将电阻率降至5.14×10^(4)Ω·cm,且对应B值较高。XPS分析表明,掺杂Ca^(2+)/Mg^(2+)后,Mn^(4+)/Cr^(4+)比例上升,Ca^(2+)会取代Y^(3+)引发空穴补偿及小极化子跳跃增强,Mg^(2+)会取代半径接近Cr^(3+)/Mn^(3+),导致改性效果不佳。老化实验显示,Ca^(2+)/Mg^(2+)会增大电阻漂移率,但Zr^(4+)的存在通过提升致密度和细化晶粒抑制空位迁移,使漂移率降低1%~2%。综上,结果表明:Ca^(2+)可优化(Y_(2)O_(3)+ZrO_(2))-YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3)NTC陶瓷的电阻率、B值及稳定性,具备实际应用潜力。 展开更多
关键词 NTC热敏陶瓷 YCr_(0.5)Mn_(0.5)O_(3) ca^(2+)/Mg^(2+)掺杂 电阻率调控
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