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A New Species of the Genus Garra from Nujiang River Basin, Yunnan, China (Teleostei: Cyprinidae) 被引量:6
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作者 陈自明 赵晟 杨君兴 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期438-444,共7页
A new species of the subfamily Labeoninae, Garra nujiangensis Chen and Yang, sp. nov. is recognized from a secondary branch of Nujiang River (upper Salween) in Zhenkang county, Yunnan province, China. It can be dist... A new species of the subfamily Labeoninae, Garra nujiangensis Chen and Yang, sp. nov. is recognized from a secondary branch of Nujiang River (upper Salween) in Zhenkang county, Yunnan province, China. It can be distinguished from other beardless Garra species by the following combination of characters: 12 - 14 circumpedunele scales; 48 - 50 lateral- line scales; a pair of rudimentary rostral barbels present in little individuals; 8 - 9 branched dorsal-fin rays; 5 - 6 scales between dorsal-fin origin and lateral line and 3 - 4 scales between pelvic-fin origin and lateral line; caudal peduncle relatively stouter; length between snout tip to posterior margin of eye longer than body depth at anal fin origin; head length longer than body depth at dorsal fin origin; prepelvic length 50.0% - 53.7% of standard length; pre-anus length 58.9% - 63.9% of standard length; body width 16.7% - 19.6% of standard length; body depth at dorsal fin 19.2% - 22.6% of standard length. The present study also verified that the presence of tiny barbells is a juvenile character in some beardless Garra species, such as G. nujiangensis and G. alticorpora. 展开更多
关键词 Garra cyprinid New species YUNNAN
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Histopathology and Ultrastructural Pathology of Cyprinid Herpesvirus Ⅱ(CyHV-2) Infection in Gibel Carp, Carassius auratus gibelio 被引量:7
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作者 JIANG Nan XU Jin +4 位作者 MA Jie FAN Yuding ZHOU Yong LIU Wenzhi ZENG Lingbing 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS CSCD 2015年第5期413-420,共8页
Cyprinid herpesvirus II (CyHV-2) infection is identi- fied in cultured gibel carp, Carassius auratus gibelio, with high mortality in China in recent years. Histological pathology includes acute hepatocellular necros... Cyprinid herpesvirus II (CyHV-2) infection is identi- fied in cultured gibel carp, Carassius auratus gibelio, with high mortality in China in recent years. Histological pathology includes acute hepatocellular necrosis, splenic necrosis, kidney necrosis, hyperplasia of the secondary lamellae with focal necrosis. Acute necrotic myocarditis and granulocytes are prominent within the cardiac lumen in infected fish. In addition, necrosis is observed in the submucosa and mucosa epithelium of intestinal tract. Edemas are observed in renal glomerulus, submucosa and mucosa epithe- lium of intestinal tract, myocardial cells and neurons. Transmis- sion electron microscopy indicates the cytoplasmic inclusions in splenocytes, glomerulus cells and hematopoietic tissue cells of kidney, epithelial cells of gills and brain cells. The histopathology and ultrastructural pathology in CyHV-2 infected gibel carp are characterized with extensive necrosis and cytoplasmic inclusions in spleen, kidney, gill and brain, which suggests that CyHV-2 may mainly infect the spleen, kidney, gill and brain of fish. 展开更多
关键词 cyprinid herpesvirus II gibel carp HISTOPATHOLOGY ultrastructural pathology NECROSIS
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Development of cross monoclonal antibodies for cyprinid herpesvirus 3 and cyprinid herpesvirus 2
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作者 Yi Zhou Yihua Zheng +3 位作者 Lupin Zhao Zengkai Wang Liqun Lu Yousheng Jiang 《Aquaculture and Fisheries》 2025年第6期981-988,共8页
Cyprinid herpesvirus 3(CyHV-3)and Cyprinid herpesvirus 2(CyHV-2)both belong to Alloherpesviridae family and bring great harm to koi carp,goldfish and crucian carp industry worldwide.In order to prepare a cross monoclo... Cyprinid herpesvirus 3(CyHV-3)and Cyprinid herpesvirus 2(CyHV-2)both belong to Alloherpesviridae family and bring great harm to koi carp,goldfish and crucian carp industry worldwide.In order to prepare a cross monoclonal antibody(MAb)that can simultaneously detect CyHV-3 and CyHV-2,mice were immunized with purified CyHV-3,and their spleens were taken for cell fusion with SP2/0 cells.Hybridoma cells were detected with purified CyHV-3 and CyHV-2.Western blotting was performed on the screened positive cell lines,and then the supernatant of the screened positive cell lines was used to detect common carp brain(CCB)cells infected with CyHV-3 and caudal fin of Carassius auratus gibelio(GiCF)cells infected with CyHV-2.The results showed that two strains of MAbs 3E11 and 4E4 could recognize CyHV-3 and CyHV-2 by dot blot.MAbs 3E11 and 4E4 could detect viruses in CCB cells infected with CyHV-3 and GiCF cells infected with CyHV-2.In this study,two strains of CyHV-3 and CyHV-2 cross MAbs were prepared to detect CyHV-3 and CyHV-2 simultaneously,providing more technical support for the establishment of detection methods for CyHV-3 and CyHV-2. 展开更多
关键词 cyprinid herpesvirus 2(CyHV-2) cyprinid herpesvirus 3(CyHV-3) Monoclonal antibody
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Identification of serum immunoglobulin M(IgM)of crucian carp(Carassius auratus gibelio)and immune response to cyprinid herpesvirus 2 infection
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作者 Shuran Wang Haotian Wu +5 位作者 Longlong Wang Pinhua Wang Liqun Lu Yousheng Jiang Ye Zhang Dan Xu 《Aquaculture and Fisheries》 CSCD 2024年第2期172-180,共9页
Crucian carp(Carassius auratus gibelio),an extensively cultivated freshwater fish,was one of the model species for the study of fish immunology.Polyclonal antibodies were advantageous molecular tools for studying tele... Crucian carp(Carassius auratus gibelio),an extensively cultivated freshwater fish,was one of the model species for the study of fish immunology.Polyclonal antibodies were advantageous molecular tools for studying teleost immune system.Specifically,polyclonal antibodies reacting with immunoglobulins(Ig)were used successfully in studies of the teleost fishes.In the present study,we produced polyclonal antibody against CH2 domains of crucian carp IgM,and measured the in vivo dynamics of IgM mRNA caused by CyHV-2 infection.The recombinant protein IgM with relative molecular weight about 53 KD was correctly expressed in prokaryotic cells.The specificity of the polyclonal antibody was evaluated by Western blotting and results revealed that the antibody not only specifically recognized crucian carp serum but also cross-reacted with grass carp serum.Quantitative RT-PCR analysis demonstrated the expression of IgM mRNA changed significantly after CyHV-2 infection.The expression of IgM in the kidney increased and reached a maximum at 6 h post-infection(hpi),while dropped to a low level at 5 days post-infection(dpi).In conclusion,the expression of IgM was significantly upregulated in the kidney of crucian carp infected with CyHV-2,indicating that IgM played a potential role in systemic immunity against viral infection.Polyclonal antibody against crucian carp IgM had certain clinical relevance,which might provide insight into the early stage of virus infection and prevention of the disease. 展开更多
关键词 Immunoglobulin M Crucian carp Polyclonal antibody cyprinid herpesvirus 2 IMMUNOPROTECTION
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鲤疱疹病毒2型和3型双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
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作者 陈永聪 方勤美 +1 位作者 柯翎 施少华 《海洋渔业》 北大核心 2025年第5期619-628,共10页
为快速、高效鉴别鲤疱疹病毒2型(cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)和3型(cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3),针对鲤疱疹病毒基因组的保守序列,设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测CyHV-2和CyHV-3的双重TaqMan qPCR方法,并对... 为快速、高效鉴别鲤疱疹病毒2型(cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)和3型(cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3),针对鲤疱疹病毒基因组的保守序列,设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测CyHV-2和CyHV-3的双重TaqMan qPCR方法,并对该方法特异性、灵敏度和重复性进行了评价。同时利用该方法对实验室保存的金鱼(Carassius auratus var.)和锦鲤(Cryprinus carpiod haematopterus)临床样品进行检测。结果显示,该方法能特异性检测CyHV-2和CyHV-3,而对水产养殖中其他常见DNA或RNA病毒无交叉反应;敏感性实验显示,该方法的最低检测量为10 copies·μL^(-1),表明该方法具有较高的灵敏度;测定结果在组内和组间重复变异系数均小于3%,重复性良好。使用该方法对实验室保存的37份金鱼和78份锦鲤临床样品进行检测,病毒检出结果与用国家标准(GB/T 36194-2018)和行业标准(SC/T 7212.1-2011)方法检测的结果一致。对5份CyHV-2(金鱼样品)和5份CyHV-3(锦鲤样品)阳性的临床样品进行混合后检测,结果均为CyHV-2和CyHV-3双阳性。研究表明,本研究建立的双重TaqMan qPCR检测方法具有特异性强、灵敏度高和重复性好等优点,可以为临床上CyHV-2和CyHV-3的快速定量检测和鉴别诊断提供新的工具和方法。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒2型 鲤疱疹病毒3型 双重TaqMan qPCR
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Ⅱ型鲤疱疹病毒研究进展
6
作者 林润鑫 李活 +1 位作者 郑佩明 张婧 《黑龙江水产》 2025年第3期271-275,共5页
鲫(Cyprinus auratus)作为重要的水产养殖品种,近年来因Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirusⅡ, CyHV-Ⅱ)引发的造血器官坏死病面临严重威胁,其暴发可导致80%~90%的死亡率,对产业造成巨大经济损失。文章系统综述了CyHV-Ⅱ的病原学特性... 鲫(Cyprinus auratus)作为重要的水产养殖品种,近年来因Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirusⅡ, CyHV-Ⅱ)引发的造血器官坏死病面临严重威胁,其暴发可导致80%~90%的死亡率,对产业造成巨大经济损失。文章系统综述了CyHV-Ⅱ的病原学特性、传播机制、宿主免疫应答及防控策略的研究进展,以期为该病的综合防控提供理论依据。CyHV-Ⅱ属异样疱疹病毒科,为双链DNA病毒,直径约90 nm~120 nm,表面含gB、gL等关键膜糖蛋白。病毒通过水平(水体)和垂直(亲代至子代)传播扩散,其中gB蛋白与宿主鳃组织Nectin受体结合是其入侵宿主细胞的关键步骤。病毒在宿主细胞内利用DNA聚合酶完成复制,并通过出芽释放新病毒粒子。研究发现,30 d龄异育银鲫感染后致死率高达90%~100%,而180 d龄个体则表现为典型病理症状,如肝组织黄化、体表充血等。宿主免疫机制方面,鲫通过先天性免疫(Toll样受体识别病毒DNA、干扰素通路激活)和适应性免疫(T/B淋巴细胞介导的抗体产生及细胞凋亡)双重途径抵御感染。然而,黑鲫等品种因炎症因子表达不足导致免疫应答延迟,易感性较高。针对病毒免疫逃逸,研究鉴定出ORF92、ORF25等8种免疫原性蛋白,为疫苗研发提供了靶点。检测技术方面,基于ELISA和PCR的方法已广泛应用。巢式PCR技术灵敏度达3×10~2 bp/μL,可实现早期快速诊断。防控策略以免疫增强剂和疫苗为核心:甘露寡糖、紫锥菊提取物等通过激活Toll样受体通路提升宿主免疫力;灭活疫苗、重组口服疫苗(如展示ORF132的酵母疫苗)可使存活率提升至64%~71.4%。药物治疗中,穿心莲、黄芪等中草药及小檗碱通过调节免疫显著降低死亡率,其中穿心莲定制饲料投喂60 d后存活率达85%。未来研究需聚焦以下方向:1)解析CyHV-Ⅱ基因组特性及进化规律,比较不同毒株遗传差异;2)探究水质、温度等环境因子对病毒传播及宿主免疫的影响;3)开发高灵敏度检测技术;4)优化疫苗设计以提高保护效价。通过多学科交叉攻关,有望为鲫鱼健康养殖及CyHV-Ⅱ的精准防控提供新思路。 展开更多
关键词 鲫(Cyprinus auratus) Ⅱ型鲤疱疹病毒(cyprinid herpesvirusⅡ CyHV-Ⅱ) 造血器官坏死病 免疫机制 疫苗开发 综合防控
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锦鲤疱疹病毒RAA荧光检测方法的建立与初步应用 被引量:1
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作者 徐博文 张洪 +9 位作者 杨素 蒋晓霞 周傲白雪 邵建宏 黄海超 赵福振 沙才华 廖秀云 罗宝正 陈轩 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第2期224-232,共9页
为建立一种快速、灵敏且适用于现场即时检验(POCT)锦鲤疱疹病毒(KHV)的方法,本研究根据KHVTK基因的保守序列,遵循荧光RAA引物及探针设计原则,设计多套KHV特异性引物及1条探针,通过试验筛选出最佳引物对,建立了KHV的重组酶介导等温扩增(R... 为建立一种快速、灵敏且适用于现场即时检验(POCT)锦鲤疱疹病毒(KHV)的方法,本研究根据KHVTK基因的保守序列,遵循荧光RAA引物及探针设计原则,设计多套KHV特异性引物及1条探针,通过试验筛选出最佳引物对,建立了KHV的重组酶介导等温扩增(RAA)荧光检测方法,并对该方法进行敏感性、特异性、重复性及临床样本测试。结果显示,本方法最低检测限为7.01×10^(2) copies/μL,与WOAH推荐的TK基因PCR检测方法一致(同为7.01×10^(2) copies/μL),高于Sph基因PCR检测方法(7.01×10^(3) copies/μL),低于KHV real-time PCR检测方法(7.01×10^(1) copies/μL)。RAA荧光方法特异性良好,与鲤春病毒血症病毒(SVCV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、金鱼造血器官坏死病毒(CyHV-2)、鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)均无交叉反应,临床样本检测结果与WOAH推荐的两种检测方法结果一致,且仅需20 min。结果表明,锦鲤疱疹病毒RAA荧光检测方法具有简单快捷、敏感性高、特异性好等优点,可为实验室条件有限的养殖场及海关监管现场的快速病原筛查提供有效的技术手段,满足生产一线的疫病监测需求。 展开更多
关键词 KHV RAA 锦鲤疱疹病毒 重组酶介导等温扩增 快速检测方法
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In vivo effects of neomycin sulfate on non-specific immunity,oxidative damage and replication of cyprinid herpesvirus 2 in crucian carp(Carassius auratus gibelio) 被引量:1
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作者 Penghui Sun Fei Yu +4 位作者 Jianfei Lu Minli Zhang Hao Wang Dan Xu Liqun Lu 《Aquaculture and Fisheries》 2019年第2期67-73,共7页
Neomycin belongs to the family of 2-deoxystreptamine-containing aminoglycoside antibiotics.It is widely used for bacterial infections,targeting most gram-negative and some gram-positive bacteria.Neomycin has also been... Neomycin belongs to the family of 2-deoxystreptamine-containing aminoglycoside antibiotics.It is widely used for bacterial infections,targeting most gram-negative and some gram-positive bacteria.Neomycin has also been reported to show antiviral activity.Here,we evaluated the toxicity of neomycin sulfate,and investigated its effect on non-specific immunity and viral infection in crucian carp(Carassius auratus gibelio).The safe concentration of neomycin sulfate for crucian carp was determined to be 102.9 mg/kg in vivo.In oxidative damage assays,neomycin sulfate increased superoxide dismutase and catalase activity and decreased malondialdehyde in the liver of crucian carp.In non-specific blood immune assays,the white blood cell count and complement 3 content significantly increased after neomycin sulfate treatment,while no significant changes were observed in antibacterial or lysozyme activity.In a challenge test,neomycin sulfate protected the crucian carp from cyprinid herpesvirus 2(CyHV-2)infection and inhibited CyHV-2 replication.In cytotoxicity assays,low concentrations of neomycin sulfate had no cytotoxicity on cells from the fins of crucian carp.The results of the present study indicate that oral administration of neomycin sulfate reduced oxidative damage,enhanced immunity and provided protection against CyHV-2 in crucian carp. 展开更多
关键词 Neomycin sulfate Non-specific immunity Oxidative damage Crucian carp cyprinid herpesvirus 2
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集群对草鱼、鲢幼鱼克流上溯行为的影响 被引量:4
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作者 石小涛 石尚上 +4 位作者 罗佳 林晨宇 张金玉 向露露 常文娟 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第1期33-46,共14页
为修复河湖中鱼类的洄游通道和栖息生境,国内外已建设各型护鱼措施并开展大量水力学与生态学相关研究。集群作为一种广泛存在的生物种群行为,解析其在鱼类洄游过程中的作用机制意义重大。本研究营造低湍动能、非均匀流场,针对我国重要... 为修复河湖中鱼类的洄游通道和栖息生境,国内外已建设各型护鱼措施并开展大量水力学与生态学相关研究。集群作为一种广泛存在的生物种群行为,解析其在鱼类洄游过程中的作用机制意义重大。本研究营造低湍动能、非均匀流场,针对我国重要淡水经济鱼种草鱼(Ctenopharyngodon idella)和鲢(Hypophthalmichthys molitrix)展开研究。本研究通过在3种流速工况(0.25~0.50m/s、0.30~0.60 m/s、0.35~0.70 m/s)下,考察5尾处理组和单尾处理组的实验鱼持久上溯能力及上溯行为特征,量化集群对其克流能力的影响并解析原因。研究显示,集群对草鱼持久上溯能力的影响因流速而异,当流速为0.30~0.60m/s和0.35~0.70m/s时,5尾组持久上溯能力分别显著高于(P=0.030)和低于(P=0.048)单尾组;而集群能够普遍提高鲢的持久上溯能力,当流速为0.25~0.50 m/s(P=0.004)和0.35~0.70 m/s(P<0.001)时,5尾组持久上溯能力提升显著。集群多数情况会增加2种鱼的上溯耗时,只有当流速为0.35~0.70m/s时,鲢的首次上溯时长在集群时显著下降(P<0.001)。集群能够帮助草鱼节能上溯,却会增加鲢的上溯累积耗能。综上所述,集群既可提高也可抑制鱼类上溯能力,其对上溯行为的影响主要体现在能耗、视觉反应及克流能力等方面,研究结果可为鱼类保护设施的设计、运行进一步提供可靠支持。 展开更多
关键词 鲤科鱼类 集群行为 克流能力 上溯轨迹
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鲤疱疹病毒2型orf153基因编码蛋白的可溶性表达及多克隆抗体的制备
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作者 王娜 张舟 +2 位作者 张旻 景宏丽 吴绍强 《水产学杂志》 2024年第6期53-58,96,共7页
为制备鲤疱疹病毒2型(CyHV-2)ORF153蛋白多克隆抗体,经分析优化合成orf153基因片段,并将其克隆至pSUMO-Mut载体中,构建pSUMO-Mut-orf153原核表达质粒,然后将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,经IPTG低温诱导,获得可溶性的重组蛋白ORF... 为制备鲤疱疹病毒2型(CyHV-2)ORF153蛋白多克隆抗体,经分析优化合成orf153基因片段,并将其克隆至pSUMO-Mut载体中,构建pSUMO-Mut-orf153原核表达质粒,然后将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,经IPTG低温诱导,获得可溶性的重组蛋白ORF153。SDS-PAGE电泳和Western blot实验结果表明,表达的可溶性重组蛋白与His单抗产生特异性反应,反应原性良好。将鉴定正确的重组蛋白亲和纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗CyHV-2 ORF153蛋白的多克隆抗体。采用ORF153蛋白和感染CyHV-2的阳性组织液为抗原的间接ELISA方法,分别检测纯化后抗体的效价不低于1∶256000和1∶32000,多克隆抗体能特异性识别重组蛋白和感染CyHV-2的组织上清。本实验可为ORF153蛋白功能研究及CyHV-2血清学诊断方法建立奠定基础。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒2型 ORF153蛋白 可溶性表达 类泛素蛋白修饰分子(small ubiquitin-like modifier SUMO)标签 多克隆抗体
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鲤上皮瘤细胞两种转染试剂的条件优化及应用 被引量:1
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作者 李尚琪 徐梓明 +3 位作者 赵然 孙晓晴 张研 李炯棠 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期252-263,共12页
鲤上皮瘤细胞是常用的鱼类细胞系,广泛使用在各种病毒学和基因功能研究中。利用细胞转染技术在鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究时,转染试剂和DNA的剂量以及取样时间没有统一的数据支持。为解决该问题,选取两种常用转染试剂Lipofectamine&#... 鲤上皮瘤细胞是常用的鱼类细胞系,广泛使用在各种病毒学和基因功能研究中。利用细胞转染技术在鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究时,转染试剂和DNA的剂量以及取样时间没有统一的数据支持。为解决该问题,选取两种常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD,分别对荧光蛋白标记的多种质粒进行多配组转染试验,多温度、多时间节点追踪记录转染效率。28℃,以35 mm培养皿铺板,16μL Lipofectamine®2000和4μg DNA在转染后48 h达到最高转染效率(5.92±0.52)%;12μL FuGENE®HD和4μg DNA在转染72 h后转染效率达到(9.81±0.33)%。为验证该条件,构建一个鲤高不饱和脂肪酸合成相关转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体蛋白α(PPARα)的EGFP标签载体,该载体利用两种转染试剂分别获得了约4%和约8%的转染效率。以实时荧光定量PCR检测该转录因子对下游脂肪酸去饱和酶2(fads2)基因的转录调控效应,虽然两种转染试剂本身可导致下游基因的上调,但与空载质粒组相比,两种转染试剂高表达转录因子均对下游靶基因产生了转录激活效应。本试验获得了常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD在鲤上皮瘤细胞细胞转染时的最适转染试剂和DNA剂量和最优取样时间,并在一转录调控实例中进行了验证,试验结果为后续充分利用鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究提供了数据支持,有助于更好地服务于渔业种质资源育种创新。 展开更多
关键词 鲤上皮瘤细胞 细胞转染效率 高不饱和脂肪酸生物合成
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鲤疱疹病毒二型(CyHV-Ⅱ)疫苗研究进展 被引量:1
12
作者 吴琳娇 孙丽芳 +4 位作者 朱春华 张红 董盼盼 陈磊清 吴允昆 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期137-144,共8页
鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-Ⅱ)对任何发育时期的金鱼、鲫鱼及其杂交品种均具有感染能力,能够引起金鱼疱疹病(goldfish haematopoietic necrosis, GFHN),是一种传染性强且死亡率极高的疫病,给我国金鱼和鲫鱼养殖业造... 鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-Ⅱ)对任何发育时期的金鱼、鲫鱼及其杂交品种均具有感染能力,能够引起金鱼疱疹病(goldfish haematopoietic necrosis, GFHN),是一种传染性强且死亡率极高的疫病,给我国金鱼和鲫鱼养殖业造成巨大经济损失,鱼用疫苗的研发是预防和治疗该疫病最有效的办法。综述了CyHV-Ⅱ灭活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗和纳米递送疫苗的研究进展,并对鱼用疫苗纳米材料的应用前景进行了探讨,以期为金鱼疱疹病害防治和鱼用疫苗研究提供新技术方法和新思路策略。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒二型(CyHV-Ⅱ) 免疫途径 纳米材料 疫苗类型
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荷包红鲤、彭泽鲫和萍乡红鲫肌间骨的比较分析
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作者 张琴 王洪 +3 位作者 陈煜 赵大显 盛军庆 张万昌 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期767-774,共8页
将荷包红鲤、彭泽鲫和萍乡红鲫放入锅中煮沸,取出肌间骨各部位,比较分析肌间骨数目、形态、类型和分布规律。结果显示:荷包红鲤的肌间骨数目为70~99(x=88)根,彭泽鲫肌间骨数目为78~92(x=85)根,萍乡红鲫的肌间骨数目为62~89(x=77)根;荷... 将荷包红鲤、彭泽鲫和萍乡红鲫放入锅中煮沸,取出肌间骨各部位,比较分析肌间骨数目、形态、类型和分布规律。结果显示:荷包红鲤的肌间骨数目为70~99(x=88)根,彭泽鲫肌间骨数目为78~92(x=85)根,萍乡红鲫的肌间骨数目为62~89(x=77)根;荷包红鲤和彭泽鲫肌间骨数目不存在显著性差异,荷包红鲤和萍乡红鲫肌间骨数目存在显著性差异(P<0.01),彭泽鲫和萍乡红鲫肌间骨数目也存在显著性差异(P<0.01);3种鱼肌间骨均存在髓弓小骨和脉弓小骨,但未见椎体小骨。肌间骨的类型均为简单型(“I”型、“卜”型、“Y”型)、中间型(一端多叉型、两端两叉型)和复杂型(两端多叉型、树枝型),简单型数目最多;3种鱼身体两侧的肌间骨数量不完全一致,不同部位肌间骨类型分布存在差异,左右两侧的肌间骨分布不同,但无显著差异。试验结果可为进一步研究其肌间骨时空发育规律,培育少或无肌间骨的鲤、鲫新品系提供基础资料。 展开更多
关键词 鲤科鱼类 肌间骨 分布 形态
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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72单克隆抗体的制备及应用
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作者 徐超楠 孙雨雨 +3 位作者 王佳 郭宝琴 魏畅 李强 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期598-605,共8页
鲤疱疹病毒Ⅱ型是引起鲫造血器官坏死病的重要病原。为建立基于抗原水平的免疫检测方法,通过原核表达方法制备鲤疱疹病毒Ⅱ型核衣壳蛋白ORF72,将纯化的ORF72蛋白免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术筛选获得单克隆抗体1B3、4B1、4C2、5F4和5H... 鲤疱疹病毒Ⅱ型是引起鲫造血器官坏死病的重要病原。为建立基于抗原水平的免疫检测方法,通过原核表达方法制备鲤疱疹病毒Ⅱ型核衣壳蛋白ORF72,将纯化的ORF72蛋白免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术筛选获得单克隆抗体1B3、4B1、4C2、5F4和5H9。免疫印迹分析显示,上述5株单抗均可特异性识别重组蛋白ORF72;免疫荧光分析显示,仅单抗4C2可与感染鲤疱疹病毒Ⅱ型的鲫脾脏发生阳性反应。利用单抗4C2通过间接免疫荧光技术对鲤疱疹病毒Ⅱ型感染鎏金金鱼鳍条细胞系(RyuF-2)后ORF72蛋白表达情况进行检测,结果显示,感染后36 h可检测到阳性信号,并且随着感染时间的延长,细胞中ORF72的表达量明显增加。本试验制备的单克隆抗体4C2为体外进一步探究鲤疱疹病毒Ⅱ型在细胞内的复制机制及建立病鱼免疫检测手段奠定了基础。 展开更多
关键词 异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF72 单克隆抗体 间接免疫荧光
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几种常见鲤科养殖鱼类肌间刺的初步研究 被引量:38
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作者 董在杰 黄代中 +5 位作者 李丽娟 袁新华 缪为民 陈奇渠 陆志兵 张炳良 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期425-429,共5页
对鲢、鳙、团头鲂和异育银鲫肌间刺的数目、形态和分布进行分析研究,结果显示:鲢的肌间刺数目在117~124之间,鳙的肌间刺数目在116~133之间,团头鲂的肌间刺数目在114~129之间,异育银鲫的肌间刺数目在79~87之间。每条鱼左右两侧... 对鲢、鳙、团头鲂和异育银鲫肌间刺的数目、形态和分布进行分析研究,结果显示:鲢的肌间刺数目在117~124之间,鳙的肌间刺数目在116~133之间,团头鲂的肌间刺数目在114~129之间,异育银鲫的肌间刺数目在79~87之间。每条鱼左右两侧的肌间刺数目不完全相等,但总体上两侧肌间刺的数目接近。不同部位的肌间刺数目也有差异:躯干部轴上肌中的肌间刺数目最多,尾部轴上肌与轴下肌中的肌间刺数目基本相等。鲢、鳙、鲫和团头鲂的肌间刺形态都在10种以上。这几种鱼每条鱼的躯干部轴上肌中都有一根很细很短的“l”形刺,这根最短刺的长度在不同规格的鱼上差别并不大。 展开更多
关键词 鲤科鱼类 肌间刺 形态 数目 分布
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鲤疱疹病毒2型武汉株的分离与鉴定 被引量:32
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作者 徐进 曾令兵 +4 位作者 杨德国 张辉 马杰 江南 范玉顶 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1303-1309,共7页
采用细胞培养、超薄切片电镜观察、巢式PCR检测以及病毒DNA克隆与测序分析等技术。从湖北武汉一循环水养殖系统中患出血病异育银鲫(Carassius auratusgibelio)体内分离鉴定了一株鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus2,CyHV-2)病毒... 采用细胞培养、超薄切片电镜观察、巢式PCR检测以及病毒DNA克隆与测序分析等技术。从湖北武汉一循环水养殖系统中患出血病异育银鲫(Carassius auratusgibelio)体内分离鉴定了一株鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus2,CyHV-2)病毒,命名为鲤疱疹病毒2型武汉株(CyHV-2.WH)。患病鱼组织匀浆液接种锦鲤鳍条细胞系(Koi.Fin)可产生典型的细胞病变效应。用患病鱼组织匀浆液与细胞培养物分别人工感染异育银鲫,均可重复出与自然发病相同的症状,死亡率达100%。患病鱼脾与肾脏组织超薄切片电镜观察结果显示,病毒为具囊膜的球形病毒,囊膜直径为170-200am,病毒衣壳直径为110~120nm,病毒在细胞核内复制、组装。采用CyHV-2的特异引物对病鱼样本和感染细胞培养物样本进行巢式PCR检测,均能扩增出357bp的目的条带,将该扩增产物进行测序与比对分析后发现,其与GenBank中已报道的CyHV-2毒株的DNA解旋酶基因高度同源(99.44%以上)。与鲤疱疹病毒3型(CyHV-3)也有较高的同源性(81.55%)。系统进化分析结果显示,CyHV-2.WH株与JS2012、H.Fukuda、YCll0907等CyHV-2病毒株属同一分支。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒2型 异育银鲫 病毒分离 病毒鉴定 潜伏感染
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金鱼鲤疱疹病毒Ⅱ型的分子诊断 被引量:27
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作者 李莉娟 罗杨志 +2 位作者 刘学芹 顾泽茂 袁军法 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期92-96,共5页
针对国内市场上流通的金鱼,开展CyHV-2的流行病学调查,并比较CyHV-2不同分离株的分子特征。结果显示:无明显临床症状的金鱼带毒率较高(13.89%),表明我国已有CyHV-2的分布。分子生物学研究显示,我国金鱼和异育银鲫来源的CyHV-2编码的解... 针对国内市场上流通的金鱼,开展CyHV-2的流行病学调查,并比较CyHV-2不同分离株的分子特征。结果显示:无明显临床症状的金鱼带毒率较高(13.89%),表明我国已有CyHV-2的分布。分子生物学研究显示,我国金鱼和异育银鲫来源的CyHV-2编码的解旋酶基因部分序列一致,表明异育银鲫来源的CyHV-2和金鱼来源的CyHV-2极可能为同一种病毒。同日本分离株(H.Fukuda)比较,我国金鱼来源的CyHV-2编码的DNA聚合酶基因片段序列同该毒株完全一致,但两者编码的衣壳体间三联蛋白和解旋酶各有1~2个氨基酸的差异,表明我国分布的CyHV-2同H.Fukuda毒株高度相似,但存在一定的差异。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒 锦鲤疱疹病毒 流行病学 金鱼
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异育银鲫感染鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)后血液生理生化指标变化的研究 被引量:16
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作者 刘文枝 曾令兵 +5 位作者 张辉 杨星 徐进 江南 周勇 马杰 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期928-935,共8页
鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)感染异育银鲫(Carassius auratus gibelio)是近年新出现的一种严重病毒性疾病,已经造成重大经济损失,目前缺乏有关该病发病机理的相关研究。以CyHV-2感染异育银鲫的患病鱼内脏组织超微过... 鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)感染异育银鲫(Carassius auratus gibelio)是近年新出现的一种严重病毒性疾病,已经造成重大经济损失,目前缺乏有关该病发病机理的相关研究。以CyHV-2感染异育银鲫的患病鱼内脏组织超微过滤匀浆液,腹腔注射感染健康异育银鲫,分别对感染组与对照组鲫尾静脉采血,进行白细胞分类计数、吞噬细胞活性检测以及血清生化指标测定与分析。结果表明,与对照组相比较,感染组鲫血细胞总数变化不明显,但单核细胞和淋巴细胞百分比显著上升,其中淋巴细胞上升呈极显著差异(P<0.01),单核细胞上升呈显著差异(0.01<P<0.05);嗜中性粒细胞及血栓细胞显著下降,均呈显著性差异(0.01<P<0.05)。单核细胞的吞噬指数与吞噬百分比极显著高于对照组(P<0.01),红细胞的吞噬指数与吞噬百分比显著高于对照组(0.01<P<0.05)。感染组鲫血清总蛋白为(34.32±2.52)mmol/L,对照组为(28.00±2.17)mmol/L,呈显著差异(0.01<P<0.05);血清中谷丙转氨酶为(21.50±1.58)U/L,谷草转氨酶为(407.50±4.52)U/L,碱性磷酸酶为(51.00±5.27)U/L,极显著高于相应的对照组(12.67±1.32)U/L,(346.50±3.07)U/L,(17.50±4.88)U/L(P<0.01);血清中甘油三酯、总胆固醇及血糖则均低于对照组,但差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型 白细胞分类比 吞噬活性 血清生化指标
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鲤和团头鲂幼鱼卵黄蛋白原的诱导、纯化及电泳比较 被引量:13
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作者 梁勇 徐盈 +1 位作者 杨方星 王剑伟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期317-321,共5页
采用腹腔注射人工雌激素 1 7α 乙炔基雌二醇 (1 7α ethinyloestradiol,EE2 )的方法 ,在鲤幼鱼和团头鲂幼鱼体内诱导生成卵黄蛋白原 ;并结合利用阴离子交换介质DEAE SephraroseCL 6B和液相层析技术分离纯化了诱导后的鲤幼鱼和团头鲂幼... 采用腹腔注射人工雌激素 1 7α 乙炔基雌二醇 (1 7α ethinyloestradiol,EE2 )的方法 ,在鲤幼鱼和团头鲂幼鱼体内诱导生成卵黄蛋白原 ;并结合利用阴离子交换介质DEAE SephraroseCL 6B和液相层析技术分离纯化了诱导后的鲤幼鱼和团头鲂幼鱼血浆中的卵黄蛋白原 ;SDS PAGE电泳结果表明所分离的两种鲤科鱼类卵黄蛋白原其亚基的分子量分别为 1 70KD和1 5 0KD。 展开更多
关键词 卵黄蛋白原 鲤科 鱼类 阴离子交换 内分泌干扰物 团头鲂
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鲤疱疹病毒Ⅱ型TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用 被引量:19
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作者 周勇 曾令兵 +2 位作者 张辉 范玉顶 徐进 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期607-613,共7页
针对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)DNA解旋酶基因编码区序列设计特异性引物,利用PCR技术扩增出长度为1 446 bp的基因编码区片段,克隆到pMD19T载体上,构建重组质粒。经PCR鉴定与测序分析确认正确后,以10倍梯度稀释重组... 针对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)DNA解旋酶基因编码区序列设计特异性引物,利用PCR技术扩增出长度为1 446 bp的基因编码区片段,克隆到pMD19T载体上,构建重组质粒。经PCR鉴定与测序分析确认正确后,以10倍梯度稀释重组质粒,作为标准模板进行TaqMan real-time PCR扩增,制作标准曲线,建立了鲤疱疹病毒Ⅱ型的荧光定量PCR检测方法。检测结果显示,标准曲线的相关系数(R2)达到0.999 1,斜率为-3.412;对初始模板定量检测的范围为1×101~1×107copies/μL;特异性试验结果表明,该方法可特异性地检测出鲤疱疹病毒Ⅱ型,而对大鲵虹彩病毒(GSIV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)以及空白对照无检测信号。取江苏射阳和宝应两地疑似患病鲫组织核酸作为模板进行荧光定量PCR,结果表明反应体系中的病毒量分别为6.89×104copies/μL和3.02×102copies/μL。本研究建立的鲤疱疹病毒Ⅱ型TaqMan实时荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强,对因鲤疱疹病毒Ⅱ感染引起的养殖鲫造血器官坏死症的诊断与病毒病原定量检测有重要意义。 展开更多
关键词 造血器官坏死症 鲤疱疹病毒Ⅱ型 TAQMAN REAL-TIME PCR 检测方法
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