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CYP4Z1探针底物及其抑制剂的研究进展
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作者 张雪 顾凌悦 《当代化工》 CAS 2022年第2期431-435,440,共6页
CYP4Z1活性和抑制实验是围绕能够转化成易于监测产物的探针底物来进行的,探针底物类型主要包括饱和脂肪酸类(月桂酸和肉豆蔻酸)、不饱和脂肪酸类(花生四烯酸和二十碳二烯酸)以及荧光素衍生物等。其中,利用荧光素衍生物来进行的生物发光... CYP4Z1活性和抑制实验是围绕能够转化成易于监测产物的探针底物来进行的,探针底物类型主要包括饱和脂肪酸类(月桂酸和肉豆蔻酸)、不饱和脂肪酸类(花生四烯酸和二十碳二烯酸)以及荧光素衍生物等。其中,利用荧光素衍生物来进行的生物发光测定法,具有灵敏度高、方法简捷、测定快速的优点。近年来发现的CYP4Z1抑制剂主要有HET0016、1-苯并咪唑、ABT类似物以及计算机模拟设计药物Compound 9等,借助计算机模拟设计药物的手段来开发CYP4Z1抑制剂的方法更具高选择性和高特异性。对近年来发现的CYP4Z1的探针底物和抑制剂进行了总结和综述,以期为乳腺癌和其他特定类型癌症的治疗提供相关基础。 展开更多
关键词 cyp4z1 cyp4z1底物 cyp4z1抑制剂 乳腺癌 研究进展
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人CYP4Z1基因重组慢病毒载体的构建、鉴定及抑制乳腺癌细胞增殖 被引量:1
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作者 余伟 张秀 +2 位作者 王清 唐立华 吴杰 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第2期175-181,共7页
目的研究CYP4Z1 RNAi慢病毒表达载体作用人乳腺癌细胞后对CYP4Z1 mRNA表达及对细胞增殖和MAPK信号通路的影响。方法用RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达。构建3种CYP4Z1 RNAi慢病毒载体,转染CYP... 目的研究CYP4Z1 RNAi慢病毒表达载体作用人乳腺癌细胞后对CYP4Z1 mRNA表达及对细胞增殖和MAPK信号通路的影响。方法用RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达。构建3种CYP4Z1 RNAi慢病毒载体,转染CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞,筛选出干扰效果最好的靶点序列。用RT-PCR检测转染后CYP4Z1 mRNA表达。用MTT和Western blot分别检测CYP4Z1 siRNA后对乳腺癌细胞增殖和MAPK信号通路的影响。结果在MDA-MB-468细胞中CYP4Z1 mRNA和蛋白表达显著高于MDA-MB-231及T-47D乳腺癌细胞(P<0. 05)。成功构建了3组重组慢病毒载体(LV-CYP4Z1-RNAi-1/2/3),3组重组慢病毒感染MDA-MB-468细胞系后,CYP4Z1 mRNA的表达受到抑制,其中以LV-CYP4Z1-RNAi-2组抑制作用最显著,敲减率达到81%(P<0. 01)。与正常对照组相比,CYP4Z1-RNAi-2组MDA-MB-468细胞增殖受到抑制,p-ERK1/2表达水平显著降低(P<0. 05)。结论成功构建了CYP4Z1 RNAi慢病毒表达载体,且CYP4Z1-RNAi-2可通过下调ERK1/2通路抑制乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖。 展开更多
关键词 cyp4z1 乳腺癌 细胞增殖 慢病毒表达载体
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基于量化计算和分子动力学模拟深入探究细胞色素酶P4504Z1催化月桂酸的区域选择性 被引量:1
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作者 张超 吕旭东 +3 位作者 马宇飞 颜菲 王翠红 张美玲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期689-698,共10页
细胞色素酶P4504(CYP4)家族是人类第二大CYP家族,除CYP4F8、CYP4F12、CYP4X1和CYP4Z1外,大多数CYP4酶都是ω-羟化酶。CYP4Z1是CYP4家族的一个新成员,是目前研究甚少的"孤儿"酶之一,它的过表达会促进乳腺癌中的肿瘤血管生成和... 细胞色素酶P4504(CYP4)家族是人类第二大CYP家族,除CYP4F8、CYP4F12、CYP4X1和CYP4Z1外,大多数CYP4酶都是ω-羟化酶。CYP4Z1是CYP4家族的一个新成员,是目前研究甚少的"孤儿"酶之一,它的过表达会促进乳腺癌中的肿瘤血管生成和生长,并与某些高恶性肿瘤及愈后不良相关,是癌症治疗的潜在药物靶标。月桂酸在各种癌症的治疗和术后康复的调节中发挥重要作用。据报道,月桂酸的链内羟基化由细胞色素CYP4Z1催化,但其催化机制尚不清楚。在这项研究中,使用了量化计算、同源建模、分子对接、分子动力学模拟、自由能分析和主成分分析等方法,深入研究月桂酸羟基化的代谢特征。基于血红素和月桂酸模型的量化计算表明,潜在的羟基化位点的夺氢能垒范围为56.2至85.1 kJ/mol,其中ω-4位点的能垒最低。分子对接的结果表明,活性位点附近的Ser383、Ser113在稳定月桂酸的过程中发挥重要作用。分子动力学模拟结果表明,血红素平面与π-π相互作用形成的共同相互作用,促使ω-4位点更靠近活性氧,这与研究观察结果是一致的。当参与形成π-π相互作用的Phe313突变为Ala313时,对催化选择性的影响消失。自由能分析表明,CYP4Z1活性位点周围的芳香族氨基酸对催化选择性发挥决定性作用。本文探究细胞色素酶P4504Z1主要催化月桂酸的ω-4位点,决定该区域选择性的因素是芳香族氨基酸的π-π相互作用。 展开更多
关键词 细胞色素酶P4504Z1 分子动力学模拟 量化计算 点突变
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