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白纹伊蚊细胞色素P450 CYP4H42v2蛋白生物信息学分析
1
作者 黄琳 梁秋果 +5 位作者 杨天皓 杨绚 汤红日 龚英 刘晖 莫兴泽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期544-549,554,共7页
目的运用生物信息学方法预测分析白纹伊蚊细胞色素CYP4H42v2蛋白的结构与功能。方法基于白纹伊蚊基因组数据库筛选出CYP4H42v2基因并进行PCR验证;利用在线软件Expasy分析该基因编码的CYP4H42v2蛋白的理化性质和亲疏水性;利用HMMTOP vers... 目的运用生物信息学方法预测分析白纹伊蚊细胞色素CYP4H42v2蛋白的结构与功能。方法基于白纹伊蚊基因组数据库筛选出CYP4H42v2基因并进行PCR验证;利用在线软件Expasy分析该基因编码的CYP4H42v2蛋白的理化性质和亲疏水性;利用HMMTOP version 2.0和SignalP 4.1 server分别预测CYP4H42v2蛋白的跨膜结构域以及信号肽;运用NetPhos、NCBI-Conserved domains、SOPMA、SWISS-MODEL、IEDB在线程序分别预测CYP4H42v2蛋白潜在的磷酸化位点、保守域结构、蛋白二级、三级结构及其抗原表位;对其编码的氨基酸序列进行同源比对,利用MEGA X软件构建系统进化树,通过STRING数据库对其蛋白互作网络进行预测。结果CYP4H42v2基因全长1664 bp,开放阅读框为1508 bp,编码502个氨基酸;无信号肽,存在跨膜结构域,为疏水性蛋白,有潜在的磷酸化位点和保守域结构;CYP4H42v2蛋白具有α螺旋、β折叠结构和互变异构酶活性;CYP4H42v2蛋白具有18个抗原表位,在STRING数据库共鉴定出11个相关基因以及43个互作关系。结论利用生物信息学方法预测分析白纹伊蚊CYP4H42v2基因,发现其编码蛋白存在潜在抗原表位,且具有多个磷酸化位点,为CYP4基因在白纹伊蚊抗药性机制的研究中发挥的作用提供理论基础。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 cyp4 序列分析 功能蛋白
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华法林相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2的多态性分布
2
作者 王慧 甄拴平 +2 位作者 冯淳 王华 邓明星 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第4期515-518,共4页
目的研究CYP2C9、VKORC1、CYP4F2基因多态性在陕西省宝鸡地区汉族人群中的分布情况,为华法林个体化用药提供遗传依据。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受华法林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行... 目的研究CYP2C9、VKORC1、CYP4F2基因多态性在陕西省宝鸡地区汉族人群中的分布情况,为华法林个体化用药提供遗传依据。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受华法林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对华法林药物相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2分别进行检测,然后对检测结果的基因多态性进行分析。结果华法林药物相关各基因分布频率符合Hardy-Weinberg equilibrium规律,475例患者VKORC1基因型分别是AA型、AG型、GG型,基因频率分别为83.79%,15.58%,0.63%;CYP2C9基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*1/*2型,基因频率分别为95.17%,4.74%,0.11%,未检出*2/*2、*2/*3、*3/*3基因型;CYP4F2基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*3/*3型,基因频率分别为52.40%,39.37%,8.21%。各基因型分布在患者不同性别、年龄之间无统计学差异。结论陕西宝鸡地区汉族人群华法林药物基因VKORC1(c.-1639G>A)以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异,而CYP2C9(*1、*2、*3)和CYP4F2(*1,*3)以野生型为主。 展开更多
关键词 基因多态性 华法林 CYP2C9基因 VKORC1基因 cyp4F2基因
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CYP4A11基因多态性与脑梗死的相关性研究 被引量：1
3
作者 廖断修 陈洪 +3 位作者 易兴阳 何妮 王淳 林静 《实用医院临床杂志》 2016年第4期59-63,共5页
目的 评估CYP4A11基因多态性及其与脑梗死发病及梗死后血管事件的相关性。方法 采用基质辅助激光解吸附电离/飞行时间质谱法（MDLDI-TOF-MS）对396例脑梗死患者及378例对照者的CPYP4 A11rs2269231、CPYP4A11rs9333025、CYP4F2rs3093135... 目的 评估CYP4A11基因多态性及其与脑梗死发病及梗死后血管事件的相关性。方法 采用基质辅助激光解吸附电离/飞行时间质谱法（MDLDI-TOF-MS）对396例脑梗死患者及378例对照者的CPYP4 A11rs2269231、CPYP4A11rs9333025、CYP4F2rs3093135及CYP4F2rs2108622 SNPs进行检测。并对所有的脑梗死患者随访12月。结果 脑梗死组CPYP4 A11rs9333025 GG基因型频率发布明显高于对照组（P〈0.001）。CPYP4 A11rs9333025 GG与脑梗死的发病密切相关（OR=1.82,95%CI：1.24~5.04,P=0.016）。rs9333025 GG基因型患者在随访期内脑梗死复发率及其他血管事件发生率明显高于rs9333025 AG基因型患者（P=0.04）。rs9333025 GG为脑梗死后血管事件发生的独立危险因素（RR=1.87,95%CI：1.16~5.36,P=0.003）。结论 rs9333025 GG基因型增加了脑梗死的易感性和脑梗死后血管事件发生的风险。 展开更多
关键词 脑卒中 细胞色素P450 基因 变异 cyp4A1l cyp4F2
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三阴型乳腺癌中CYP4A11和CYP4A22表达及其与M2型肿瘤相关巨噬细胞的关系 被引量：3
4
作者 何佳慧 邬万新 +4 位作者 陈彩萍 郭志琴 王振 陆宁 温晓伟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期263-267,共5页
目的评价CYP4A11和CYP4A22在三阴型乳腺癌(triple-negative breast carcinoma,TNBC)中的表达及其与临床病理特征以及M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)的关系。方法收集72例TNBC根治病例及其临床病理资料,采用... 目的评价CYP4A11和CYP4A22在三阴型乳腺癌(triple-negative breast carcinoma,TNBC)中的表达及其与临床病理特征以及M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)的关系。方法收集72例TNBC根治病例及其临床病理资料,采用免疫组化和图像分析方法检测癌组织中CYP4A11和CYP4A22的表达以及肿瘤间质中巨噬细胞CD68和CD163的表达,分析CYP4A11和CYP4A22表达与TNBC临床病理特征以及M2型TAMs数量的关系。结果 TNBC癌组织中CYP4A11和CYP4A22的表达均较正常乳腺组织增高(P均<0. 001)。CYP4A11高表达与肿瘤直径增大(P <0. 001)、淋巴结转移(P <0. 001)、高临床分期(P <0. 001)和高Ki-67增殖指数(P=0. 011)有关。CYP4A11高表达组的肿瘤间质CD68和CD163阳性细胞比例均较低表达组增高(P=0. 021、P <0. 001)。癌组织CYP4A22高表达与淋巴结转移(P <0. 001)、高临床分期(P=0. 006)、高复发率(P <0. 001)和高Ki-67增殖指数(P=0. 040)有关。CYP4A22高表达组的肿瘤间质CD163阳性细胞比例较低表达组增高(P <0. 001)。结论 TNBC中CYP4A11和CYP4A22高表达均伴随肿瘤间质微环境中M2状态TAMs增加,并与癌细胞高增殖活性和转移相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 cyp4A11 cyp4A22 免疫组织化学
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CYP4A11、CYP4F2基因多态性及其交互作用与代谢综合征的相关性研究 被引量：1
5
作者 王芬 俞敏 +2 位作者 何青芳 范春红 钟要红 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第3期181-186,共6页
目的分析CYP4A11基因(rs9332978,rs1126742)、CYP4F2基因(rs1558139,rs2108622)多态性与浙江省社区居民代谢综合征(MS)易感性的关系。方法运用病例对照研究方法,确定277例MS人群和304名正常对照进行研究,应用TaqMan荧光探针方法检测4个... 目的分析CYP4A11基因(rs9332978,rs1126742)、CYP4F2基因(rs1558139,rs2108622)多态性与浙江省社区居民代谢综合征(MS)易感性的关系。方法运用病例对照研究方法,确定277例MS人群和304名正常对照进行研究,应用TaqMan荧光探针方法检测4个位点多态性,使用SAS 9.2统计软件分析数据,并结合MDR 2.0分析软件分析基因-基因、基因-环境的交互作用,最后用多因素非条件logistic回归模型估计MS危险因素及MDR模型中危险因素的危险度。结果 rs9332978 GG与AA+AG基因型的分布频率在病例对照组中差异有统计学意义(P=0.04)。连锁不平衡分析显示:rs9332978和rs1126742两位点呈现较强的连锁不平衡(病例组D′=0.783,对照组D′=0.836);但rs2108622和rs1558139两位点并不存在明显的连锁不平衡;连锁不平衡的两两位点组成的单体型在两组中分布差异均无统计学意义。MDR分析结果显示rs1558139、rs2108622两位点多态性存在交互作用。多因素logistic回归分析显示:rs9332978GG基因型、轻度体力活动与MS之间存在负相关,OR及95%CI值分别为0.32(0.10～1.00)、0.70(0.49～0.99);但未发现rs1558139、rs2108622交互作用对MS的影响差异有统计学意义。结论 rs9332978位点的GG基因型及轻度体力活动与MS的发生具有相关关系,可降低MS发生的危险性,可能是MS的保护因素;但rs9332978和rs1126742两个位点多态性在MS发生中可能不存在交互作用。 展开更多
关键词 cyp4A11基因 cyp4F2基因 代谢综合征 多因子降维法 交互作用
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CYP4Z1探针底物及其抑制剂的研究进展
6
作者 张雪 顾凌悦 《当代化工》 CAS 2022年第2期431-435,440,共6页
CYP4Z1活性和抑制实验是围绕能够转化成易于监测产物的探针底物来进行的,探针底物类型主要包括饱和脂肪酸类(月桂酸和肉豆蔻酸)、不饱和脂肪酸类(花生四烯酸和二十碳二烯酸)以及荧光素衍生物等。其中,利用荧光素衍生物来进行的生物发光... CYP4Z1活性和抑制实验是围绕能够转化成易于监测产物的探针底物来进行的,探针底物类型主要包括饱和脂肪酸类(月桂酸和肉豆蔻酸)、不饱和脂肪酸类(花生四烯酸和二十碳二烯酸)以及荧光素衍生物等。其中,利用荧光素衍生物来进行的生物发光测定法,具有灵敏度高、方法简捷、测定快速的优点。近年来发现的CYP4Z1抑制剂主要有HET0016、1-苯并咪唑、ABT类似物以及计算机模拟设计药物Compound 9等,借助计算机模拟设计药物的手段来开发CYP4Z1抑制剂的方法更具高选择性和高特异性。对近年来发现的CYP4Z1的探针底物和抑制剂进行了总结和综述,以期为乳腺癌和其他特定类型癌症的治疗提供相关基础。 展开更多
关键词 cyp4Z1 cyp4Z1底物 cyp4Z1抑制剂 乳腺癌 研究进展
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人参皂苷Re对H9c2心肌细胞CYP450酶的影响 被引量：17
7
作者 马增春 肖勇 +7 位作者 赵佳伟 王宇光 谭洪玲 梁乾德 汤响林 肖成荣 杨凌 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期494-498,共5页
目的观察人参皂苷Re对H9c2心肌细胞色素P450酶的影响,旨在发现人参皂苷Re对心肌细胞作用的分子机制。方法实验分对照组、人参皂苷Re各剂量组(1、5、10、50、100μmol·L^(-1))处理组,人参皂苷Re作用6、24、36、48及60 h后提取RNA或... 目的观察人参皂苷Re对H9c2心肌细胞色素P450酶的影响,旨在发现人参皂苷Re对心肌细胞作用的分子机制。方法实验分对照组、人参皂苷Re各剂量组(1、5、10、50、100μmol·L^(-1))处理组,人参皂苷Re作用6、24、36、48及60 h后提取RNA或蛋白进行测定。利用实时定量PCR法检测H9c2心肌细胞CYP2C11、CYP2J3、CYP4A1、CYP4A3、CYP4F4及ANP mRNA的表达;采用Western blot法检测心肌细胞CYP4A1和CYP2J3蛋白的表达。结果人参皂苷Re明显上调心肌细胞CYP2C11、CYP2J3 mRNA的表达至正常对照的1.6、1.8倍,明显下调CYP4A1、CYP4A3及CYP4F4 mRNA的表达至正常对照的0.4、0.15、0.3倍。人参皂苷Re明显上调ANP基因表达水平至正常对照的3.2倍。随着药物浓度的增加,人参皂苷Re对CYP4A1蛋白表达产生明显的下调作用,而对CYP2J3蛋白产生明显的上调作用。结论人参皂苷Re可影响心肌细胞的CYP450酶和ANP基因的表达。 展开更多
关键词 人参皂苷RE 心肌细胞 利钠肽 细胞色素P450酶 CYP2J3 cyp4A1
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复方益母生化散对奶牛子宫内膜细胞CYP450表达和免疫功能的影响 被引量：8
8
作者 杜金梁 秦建华 +2 位作者 褚景生 徐丽娜 马玉忠 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1248-1254,共7页
【目的】探讨复方益母生化散对奶牛子宫内膜炎的作用机理。【方法】体外实验:分离奶牛子宫内膜细胞,细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症模型,复方益母生化散处理子宫内膜炎症细胞48h、72h,Western blotting法检测CYP450的表达;体内实... 【目的】探讨复方益母生化散对奶牛子宫内膜炎的作用机理。【方法】体外实验:分离奶牛子宫内膜细胞,细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症模型,复方益母生化散处理子宫内膜炎症细胞48h、72h,Western blotting法检测CYP450的表达;体内实验:复方益母生化散栓剂治疗患有子宫内膜炎的奶牛,检测血清中IgG、IgA含量的变化。【结果】复方益母生化散处理后,子宫内膜炎症细胞CYP450的表达随复方益母生化散剂量的增加而呈升高的趋势,血清中IgG、IgA的含量与对照组相比明显升高。【结论】2000μg·mL-1的复方益母生化散作用奶牛子宫内膜炎症细胞48h,CYP450的表达最明显。 展开更多
关键词 奶牛 子宫内膜细胞 cyp4 50 复方益母生化散 免疫功能
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野桑蚕细胞色素P450家族CYP4M5基因的克隆和诱导表达 被引量：13
9
作者 王燕红 王东 +3 位作者 李兵 赵华强 许雅香 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期78-83,共6页
细胞色素P450单加氧酶系在生物体对外源化合物的代谢和内源化合物的调节中都起着非常重要的作用,昆虫对杀虫剂产生抗性与单加氧酶系介导的代谢反应有关。以野桑蚕(Bombyxmandarina)中肠为材料,依据家蚕(Bombyxmori)基因组P450基因预测... 细胞色素P450单加氧酶系在生物体对外源化合物的代谢和内源化合物的调节中都起着非常重要的作用,昆虫对杀虫剂产生抗性与单加氧酶系介导的代谢反应有关。以野桑蚕(Bombyxmandarina)中肠为材料,依据家蚕(Bombyxmori)基因组P450基因预测序列设计一对引物,采用RT-PCR方法克隆了一个P450家族基因的cDNA序列,命名为CYP4M5(GenBank登录号:EU273876)。序列分析表明,野桑蚕CYP4M5基因编码区长度为1 512 bp,编码503个氨基酸,相对分子质量约为58 kD,等电点7.8。同源性分析表明该基因与家蚕CYP4M5的同源性最高,达97.42%。分析鉴定了该基因在野桑蚕各组织中的mRNA表达水平以及溴氰菊酯诱导24 h后mRNA的表达水平,结果显示:在正常野桑蚕幼虫体内,CYP4M5在脂肪体中的表达水平最高;野桑蚕经5 ng/μL溴氰菊酯药液处理后,CYP4M5在中肠和脂肪体中表达量分别增加1.1倍和4.4倍。推测该基因可能参与野桑蚕对杀虫剂的解毒代谢作用。 展开更多
关键词 野桑蚕 细胞色素P450 cyp4M5基因 基因克隆 半定量RT-PCR
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翡翠贻贝CYP4基因克隆及其表达水平分析 被引量：7
10
作者 周驰 李纯厚 +1 位作者 张为民 贾晓平 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期82-88,共7页
利用简并引物PCR以及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得了总长度为1197bp的翡翠贻贝Perna viridis CYP4基因cDNA序列。根据所获得的翡翠贻贝cDNA序列设计定量PCR引物,利用实时荧光定量PCR(Real-time qua... 利用简并引物PCR以及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得了总长度为1197bp的翡翠贻贝Perna viridis CYP4基因cDNA序列。根据所获得的翡翠贻贝cDNA序列设计定量PCR引物,利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术测定了CYP4基因在野生翡翠贻贝消化腺、足和性腺中的表达水平。此外,本研究还应用实时荧光定量PCR技术对经过Aroclor1254暴露处理对翡翠贻贝性腺中CYP4表达水平的影响进行了定量测定。研究结果表明,CYP4基因在野生翡翠贻贝消化腺、足和性腺中均有表达,且其表达水平具有组织差异和性别差异;Aroclor1254暴露处理对翡翠贻贝性腺CYP4基因的表达水平有明显的诱导作用,并且这种诱导作用有明显的时间和剂量效应。本研究为CYP4基因作为生物大分子标记物在环境监测领域的应用提供了分子生物学水平的支持。 展开更多
关键词 cyp4基因 翡翠贻贝Perna VIRIDIS 荧光定量PCR
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CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响 被引量：9
11
作者 蒋年新 居海宁 +2 位作者 江冰 王玉华 李岩松 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期574-577,共4页
目的:探讨CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响。方法:采用PCRRFLP法检测157例口服华法林抗凝治疗房颤患者CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性,登记并计算患者INR稳定在1.5~3.0时一周的平均日... 目的:探讨CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性对房颤患者华法林使用剂量的影响。方法:采用PCRRFLP法检测157例口服华法林抗凝治疗房颤患者CYP2C9、CYP4F2、GGCX和VKORC1基因多态性,登记并计算患者INR稳定在1.5~3.0时一周的平均日剂量。比较不同基因型房颤患者华法林日用量的差异。结果:INR稳定在1.5~3.0时,CYP2C9*1/*1个体使用华法林剂量[(2.73±0.80)mg·d^(-1)]显著高于*1/*3使用量[(1.83±0.51)mg·d^(-1)];VKORC1TT基因型携带者使用剂量[(2.56±0.79)mg·d^(-1)]显著低于CT基因携带者使用量[(3.31±0.75)mg·d^(-1)];CYP4F2 CC基因型使用剂量[(2.58±0.78)mg·d^(-1)]显著低于TT基因携带者使用量[(3.21±1.04)mg·d^(-1)];GGCX CC基因型使用剂量[(2.49±0.89)mg·d^(-1)]显著低于GG基因型使用量[(3.04±0.75)mg·d^(-1)]。多因素回归分析结果显示CYP2C9、VKORC1和GGCX与个体华法林剂量有关。结论:CYP2C9、VKORC1和GGCX基因多态性可能与个体华法林使用剂量差异有关。 展开更多
关键词 房颤 华法林 CYP2C9 cyp4F2 GGCX VKORC1 基因多态性
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双齿围沙蚕CYP4基因的克隆及序列分析 被引量：4
12
作者 周一兵 陈雪 +4 位作者 杨大佐 万良 王斌 王丽丽 孙静波 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期507-513,共7页
根据已知的绿沙蚕Nereis virens细胞色素氧化酶CYP342A1保守区设计引物,采用RACE技术首次从双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis体壁肌肉中克隆出细胞色素氧化酶CYP4基因全长序列。分析结果表明,该序列全长为1 857 bp,5'端非翻译区为... 根据已知的绿沙蚕Nereis virens细胞色素氧化酶CYP342A1保守区设计引物,采用RACE技术首次从双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis体壁肌肉中克隆出细胞色素氧化酶CYP4基因全长序列。分析结果表明,该序列全长为1 857 bp,5'端非翻译区为186 bp,3'端非翻译区为225 bp,阅读框为1 446 bp,编码为481个氨基酸。第422～431氨基酸序列符合P450所具有的结构保守共有序列FxxGxxxCxG,第319～322氨基酸序列为K螺旋特征基序ExxR区,第282～294氨基酸序列含有CYP4家族特征序列EVDTFMFEGHDTT。经Blast与GenBank中已知物种的氨基酸序列进行同源性比对,CYP4与多毛类绿沙蚕Nereis virens CYP4BB1、CYP342A1(AY453408)氨基酸同源性为73%、36%,与多毛类小头虫Capitella capitata CYP4AT1(AY574044)同源性为39%。据此推断,双齿围沙蚕CYP4基因属于CYP4B亚家族。 展开更多
关键词 双齿围沙蚕 cyp4 RACE 生物信息学分析
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栉孔扇贝(Chlamys farreri)细胞色素CYP4基因表达对石油烃污染的响应特征 被引量：4
13
作者 靳永轩 刘晨临 +2 位作者 丛柏林 刘胜浩 黄晓航 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期257-261,共5页
细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)酶系是机体中催化外来物进行代谢的主要酶系之一,研究表明编码该酶系的基因,在生物体受到污染物的诱导时会上调表达,从而可以用于指示污染物对生物体的损伤作用。本研究利用实时定量PCR技术测定了C... 细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)酶系是机体中催化外来物进行代谢的主要酶系之一,研究表明编码该酶系的基因,在生物体受到污染物的诱导时会上调表达,从而可以用于指示污染物对生物体的损伤作用。本研究利用实时定量PCR技术测定了CYP4基因在栉孔扇贝不同组织中的表达水平,并对栉孔扇贝消化腺中CYP4基因表达对石油烃污染的响应特征进行了时间、剂量效应关系的分析。结果表明,CYP4基因在栉孔扇贝消化腺、鳃、成熟性腺和闭壳肌中均有表达,在消化腺中表达最丰富,提示该基因表达产物可能与机体的解毒功能相关。曝油处理4 h,CYP4基因的表达量与石油烃浓度有明显的剂量效应关系;但随着暴露时间延长,诱导作用有所减弱。本研究为CYP4基因作为生物分子标记物在海洋石油污染监测领域的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 分子标志物 石油烃 cyp4 实时定量PCR
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草地贪夜蛾CYP4G15和CYP4L4的时空表达及其对高低温胁迫的响应 被引量：4
14
作者 商暾 杨茂发 +2 位作者 于晓飞 陈亦钗 田太安 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期664-671,共8页
【目的】为明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda在高低温胁迫条件下CYP4G15和CYP4L4是否参与调控。【方法】本研究采用RT-PCR方法检测CYP4G15和CYP4L4在草地贪夜蛾各发育阶段和不同组织以及在36℃高温和4℃低温条件下的表达情况。【结... 【目的】为明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda在高低温胁迫条件下CYP4G15和CYP4L4是否参与调控。【方法】本研究采用RT-PCR方法检测CYP4G15和CYP4L4在草地贪夜蛾各发育阶段和不同组织以及在36℃高温和4℃低温条件下的表达情况。【结果】CYP4G15和CYP4L4基因均在草地贪夜蛾低龄时表达量最高;CYP4G15在表皮组织中表达量最高;CYP4L4在前肠组织中表达量最高;在高温和低温胁迫条件下,两个基因均存在差异表达。【结论】CYP4G15和CYP4L4可能参与草地贪夜蛾体内多种内源物质合成以及受高温、低温胁迫的代谢过程。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 温度胁迫 cyp4G15 cyp4L4 差异表达
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拟除虫菊酯类杀虫剂对赤拟谷盗CYP4基因的诱导表达特性 被引量：5
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作者 梁晓 伍春玲 +1 位作者 陈青 徐雪莲 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1402-1409,共8页
昆虫细胞色素P450的CYP4家族基因是在杀虫剂诱导表达和抗药性研究方面涉及最多的基因家族之一。拟除虫菊酯类杀虫剂是防治赤拟谷盗的常用药剂,当前已有较多抗药性相关报道,但尚缺乏多个拟除虫菊酯农药对赤拟谷盗CYP4家族P450基因诱导表... 昆虫细胞色素P450的CYP4家族基因是在杀虫剂诱导表达和抗药性研究方面涉及最多的基因家族之一。拟除虫菊酯类杀虫剂是防治赤拟谷盗的常用药剂,当前已有较多抗药性相关报道,但尚缺乏多个拟除虫菊酯农药对赤拟谷盗CYP4家族P450基因诱导表达特性的研究。本研究首先选取4个赤拟谷盗CYP4家族P450基因CYP4G7、CYP4G14、CYP4BR1和CYP4BR3,然后用氯氰菊酯、氟氯氰菊酯和氯菊酯分别以不同浓度和时间处理20 d幼虫,并采用荧光定量PCR分析P450基因的诱导表达特性。结果表明,4个P450候选基因中仅有CYP4G7不仅可以被供试的3种菊酯类药剂显著诱导,并且LC20处理24 h和1/4 LC20处理6 h两种处理浓度对CYP4G7的诱导水平无显著差异。本研究结果表明亚致死剂量拟除虫菊酯类杀虫剂6 h处理即可导致赤拟谷盗CYP4家族P450基因表达量的显著提高,为延缓上述3种杀虫剂抗药性合理防治赤拟谷盗提供理论依据。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯农药 赤拟谷盗 P450基因 cyp4家族 诱导特性
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淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定 被引量：6
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作者 李秀兰 滕达 +2 位作者 孙艳 马磊 朱昌亮 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期552-557,共6页
目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR,从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T-A克隆、测序、比对,在抗性品系高表达的CYP4E2r6... 目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR,从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T-A克隆、测序、比对,在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1,在大肠杆菌BL21中进行原核表达,将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列,由GenBank登录上网(GenBank/NCBICB074944-51、CB270837,2003年);经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族;CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。 展开更多
关键词 淡色库蚊 细胞色素P450 cyp4E2r6 原核表达
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基于CYP2C9、VKORC1及CYP4F2基因多态性的华法林给药模型的验证 被引量：5
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作者 阳丽梅 黄旭慧 +2 位作者 王少明 庄捷 闻武 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期1957-1961,共5页
目的:对已发表的4个基于CYP2C9、VKORC1和/或CYP4F2基因多态性的华法林给药模型的准确性进行验证,寻找真正适合中国人的给药模型。方法:选择心脏瓣膜置换术后服用华法林至少3个月的患者,用PCR-基因测序方法确定患者CYP2C9、VKORC1及CYP... 目的:对已发表的4个基于CYP2C9、VKORC1和/或CYP4F2基因多态性的华法林给药模型的准确性进行验证,寻找真正适合中国人的给药模型。方法:选择心脏瓣膜置换术后服用华法林至少3个月的患者,用PCR-基因测序方法确定患者CYP2C9、VKORC1及CYP4F2基因型,收集患者基本信息,并记录华法林的实际维持剂量,将患者信息带入4个剂量模型中得到模型预测剂量,计算预测剂量与实际剂量的差异率(DR)。用SPSS统计软件配对t检验、线性回归方法及Bland-Altman分析,验证模型预测剂量的准确性。结果:包含CYP2C9、VKORC1及CYP4F2三个基因在内的给药模型(模型3和模型4)对华法林剂量的预测的DR较仅有CYP2C9和VKORC122个基因的给药模型(模型1和模型2)小,预测剂量与实际剂量的线性回归相关系数高,准确性较高,临床可接受度较高。4个模型对中高等剂量(≥3.00mg·d-1)的预测准确性较好,然而除了模型1外,其他3个模型对极低剂量(≤1.5 mg·d-1)的预测准确性较差。结论:基于CYP2C9、VKORC1及CYP4F2基因多态性的给药模型可以较为准确地预测华法林的给药剂量,但对剂量≤1.5 mg·d-1的预测准确性较差,模型的临床应用有待进一步研究来证实。 展开更多
关键词 华法林 CYP2C9 VKORC1 cyp4F2 剂量模型 准确性
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嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究Ⅱ嗜人按蚊CYP4基因cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：3
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作者 曹俊 高琪 +1 位作者 周华云 李菊林 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第2期101-106,共6页
目的　获得嗜人按蚊CYP4基因家族成员的c DNA片段。方法　采用简并引物对嗜人按蚊溴氰菊酯敏感和抗性品系总RNA进行RT- PCR扩增,得到的特异性片段采用T/ A克隆法克隆并进行序列测定和分析。结果　敏感品系和抗性品系嗜人按蚊均能扩增得... 目的　获得嗜人按蚊CYP4基因家族成员的c DNA片段。方法　采用简并引物对嗜人按蚊溴氰菊酯敏感和抗性品系总RNA进行RT- PCR扩增,得到的特异性片段采用T/ A克隆法克隆并进行序列测定和分析。结果　敏感品系和抗性品系嗜人按蚊均能扩增得到4 5 0 bp和5 30 bp左右的2个片段。经克隆测序后,得到6个基因序列,其中4个来自敏感品系,2个来自抗性品系。其中1个来自敏感品系的序列和1个来自抗性品系的序列完全相同。所得的5个不同基因序列已被Gen Bank收录(登录号:AY2 0 814 1～AY2 0 814 5 ) ,并递交国际细胞色素P4 5 0命名委员会,经鉴定确认均为细胞色素P4 5 0超家族中的CYP4家族成员,其中4个为新基因,另1个为等位基因,分别属于CYP4家族的CYP4 C、CYP4 H和CYP4 J3个亚家族。结论　得到的5个c DNA新序列为CYP4家族新成员的基因片段。 展开更多
关键词 嗜人按蚊 cyp4 溴氰菊酯 杀虫剂抗性 克隆
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青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达 被引量：2
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作者 关桦楠 迟德富 +1 位作者 宇佳 李晓灿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期357-364,共8页
根据报道的十几种昆虫CYP4家族基因的氨基酸序列保守区域设计一对引物,利用RT-PCR技术扩增编码青杨脊虎天牛Xylotechus rusticus中肠细胞色素氧化酶CYP4G2蛋白的cDNA片段,构建原核表达载体pET-CYP4G2,将其转化入大肠杆菌Escherichia col... 根据报道的十几种昆虫CYP4家族基因的氨基酸序列保守区域设计一对引物,利用RT-PCR技术扩增编码青杨脊虎天牛Xylotechus rusticus中肠细胞色素氧化酶CYP4G2蛋白的cDNA片段,构建原核表达载体pET-CYP4G2,将其转化入大肠杆菌Escherichia coli JM109中表达。序列分析结果表明,该基因（CYP4G2,GenBank登录号为EF429250）保守区域阅读框全长387bp,编码129个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为16.9kD和5.75;推导的氨基酸序列与已报道的昆虫CYP4家族氨基酸序列一致性较高（63%～86%）,且具有细胞色素氧化酶的典型特征。IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳检测到一条22kD大小的外源蛋白,与预测融合蛋白的分子量大小相应。CO差光谱分析证明重组菌表达了有活性的pET-CYP4G2。 展开更多
关键词 青杨脊虎天牛 细胞色素P450酶系 cyp4G2基因 克隆 表达
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Cocktail探针药物法评价生、醋莪术对CYP450酶亚型的影响 被引量：18
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作者 王菊 陆兔林 +2 位作者 毛春芹 肖永庆 顾娟娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1562-1565,共4页
目的用Cocktail探针药物法,研究生、醋莪术对大鼠CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响并进行比较,探讨其通过炮制增强或改变作用的趋向性。方法将SD大鼠随机分组,生、醋莪术组分别给予生、醋莪术提取液(9 g.kg-1),以生理盐水为空白对照,... 目的用Cocktail探针药物法,研究生、醋莪术对大鼠CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响并进行比较,探讨其通过炮制增强或改变作用的趋向性。方法将SD大鼠随机分组,生、醋莪术组分别给予生、醋莪术提取液(9 g.kg-1),以生理盐水为空白对照,在一定时间点采集血样,用HPLC检测探针药物在大鼠体内的代谢情况,以评价生、醋莪术对CYP450酶的影响。结果生莪术的茶碱、氨苯酚和氯唑沙宗的代谢情况与空白组相比差异无显著性;但醋莪术与空白组相比,茶碱和氯唑沙宗的T12、Tmax和AUC明显增加,CL/F明显降低;氨苯酚的T12变化不明显,AUC明显降低,CL/F明显增加;氯唑沙宗的T12、Tmax、AUC明显增加,CL/F明显降低。结论单次给予大鼠生、醋莪术后,生莪术对CYP450酶的作用不明显,醋莪术对CYP1A2和CYP2E1具有抑制作用,对CYP3A4具有诱导作用。 展开更多
关键词 COCKTAIL 莪术 cyp450 CYP1A2 CYP3A4 CYP2E1
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