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CYLD基因在宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和凋亡中的作用及可能机制
1
作者 金雯 李宇 +1 位作者 王雯智 邓卓 《解剖科学进展》 2025年第1期51-54,共4页
目的 探讨CYLD基因在宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和凋亡中的作用及可能机制。方法 Western blot观察人宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7细胞、宫颈癌Caski、SiHa、HeLa细胞中CYLD蛋白表达,将Hela细胞分为Control组、pcDNA3.1-CYLD组、pcDNA3.... 目的 探讨CYLD基因在宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和凋亡中的作用及可能机制。方法 Western blot观察人宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7细胞、宫颈癌Caski、SiHa、HeLa细胞中CYLD蛋白表达,将Hela细胞分为Control组、pcDNA3.1-CYLD组、pcDNA3.1组、si-CYLD组、si-NC组,各组细胞处理48h, MTT法、克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术分别检测细胞活力、侵袭能力及凋亡率;Western blot检测细胞NF-κB p65、cyclinD1、MMP-2、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 Caski、SiHa、HeLa细胞中CYLD蛋白表达下调(P<0.05);过表达CYLD可降低细胞OD值、克隆细胞数、侵袭细胞数、cyclinD1、MMP-2、NF-κBp65、Bcl-2蛋白表达,增加细胞凋亡率、CYLD、Bax蛋白的表达(P<0.05);抑制CYLD组增加细胞OD值、克隆细胞数、侵袭细胞数、cyclinD1、MMP-2、NF-κBp65、Bcl-2蛋白的表达,增加细胞凋亡率、CYLD、Bax蛋白表达(P<0.05)。结论 CYLD在宫颈癌细胞中低表达,对宫颈癌细胞增殖、侵袭、凋亡的调控与调节NF-кB信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 cyld基因 凋亡 侵袭 NF-ΚB信号通路
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CYLD介导DVL调控Wnt/β-catenin通路对输卵管炎性上皮细胞纤毛运动的影响
2
作者 夏亚琼 朱悦 +3 位作者 罗莹 阮安晨 谭雅莉 刘玲 《中国生育健康杂志》 2025年第5期455-460,共6页
目的圆柱瘤基因(CYLD)介导DVL蛋白(DVL)调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路对输卵管炎性上皮细胞纤毛运动机制研究,从纤毛运动角度探讨治疗新思路。方法取健康大鼠输卵管上皮细胞,LPS建立炎症细胞模型,细胞转染后先设立免疫共沉淀... 目的圆柱瘤基因(CYLD)介导DVL蛋白(DVL)调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路对输卵管炎性上皮细胞纤毛运动机制研究,从纤毛运动角度探讨治疗新思路。方法取健康大鼠输卵管上皮细胞,LPS建立炎症细胞模型,细胞转染后先设立免疫共沉淀组IP(si-NC组,si-CYLD组)、阳性对照组input(si-NC组,si-CYLD组)检测DVL与氨基酸泛素肽(UB)灰度;之后设立:oe-NC组、oe-CYLD组、oe-CYLD+oe-NC组与oe-CYLD+oe-DVL组;检测各组CYLD、DVL、Wnt3a、β-catenin、actin(内部参考基因)表达量及纤毛跳动频率情况。结果DVL为CYLD的下游因子;CYLD通过去泛素化抑制DVL的降解,调控其表达;CYLD负调控Wnt3a、β-catenin蛋白量,提高纤毛运动频率,DVL则作用相反。各组实验均有统计学意义(P<0.01)。结论CYLD介导DVL去泛素化负调控Wnt/β-catenin通路的激活,增加输卵管炎性上皮细胞纤毛运动频次,改善输卵管炎性不孕。 展开更多
关键词 输卵管炎性不孕 纤毛运动 cyld DVL 去泛素化
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CYLD介导TRAF6/NF-κB信号通路调控输卵管炎性不孕的机制
3
作者 朱悦 夏亚琼 刘玲 《中国生育健康杂志》 2025年第4期349-354,共6页
目的探究圆柱瘤蛋白(CYLD)介导TRAF6去泛素化调控NF-κB信号通路影响输卵管上皮细胞炎症水平的机制。方法选取8~10周龄、性成熟但未交配生育的SPF级雌性SD大鼠,以大鼠输卵管上皮细胞为对象,采用LPS干预建立输卵管上皮细胞炎症模型。先... 目的探究圆柱瘤蛋白(CYLD)介导TRAF6去泛素化调控NF-κB信号通路影响输卵管上皮细胞炎症水平的机制。方法选取8~10周龄、性成熟但未交配生育的SPF级雌性SD大鼠,以大鼠输卵管上皮细胞为对象,采用LPS干预建立输卵管上皮细胞炎症模型。先设立免疫共沉淀组IP(si-NC组,si-CYLD组)、阳性对照组input(si-NC组,si-CYLD组)检测TRAF6、Ub(泛素分子)灰度;再分为oe-NC组,oe-CYLD组、oe-CYLD+oe-NC组、oe-CYLD+oe-TRAF6组。比较各组CYLD、TRAF6、NF-κBp65、p-p65、IkB-a、p-IkB-a表达、炎症因子含量及细胞活性。结果oe-CYLD+oe-NC组的TRAF6灰度比oe-NC组浅;过表达各组均检测出NF-κBp65、p-p65、IkB-a、p-IkB-a与炎症因子,其中oe-NC组灰度最深、oe-CYLD组最浅、且oe-CYLD+oe-TRAF6组比oe-CYLD+oe-NC组灰度深;oe-CYLD组细胞活性最高,oe-NC组最低,oe-CYLD+oe-NC组细胞活性优于oe-CYLD+oe-TRAF6组。结论CYLD高表达可减少TRAF6泛素化抑制NF-κB信号通路,从而降低输卵管炎症水平,改善输卵管炎性不孕。 展开更多
关键词 圆柱瘤蛋白(cyld) TRAF6 NF-ΚB信号通路 输卵管炎性不孕
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CYLD在肿瘤相关信号通路中的作用机制研究
4
作者 班冰冰 魏成 王成 《中国细胞生物学学报》 CSCD 2024年第12期2137-2145,共9页
去泛素化酶家族成员参与调控多种细胞信号转导及代谢过程,其异常表达或活性改变与肿瘤等多种疾病的发展密切相关。肿瘤抑制因子(cylindromatosis,CYLD)在多种肿瘤中低表达,并且是去泛素化酶家族成员之一。它能够去除特定蛋白上的泛素链... 去泛素化酶家族成员参与调控多种细胞信号转导及代谢过程,其异常表达或活性改变与肿瘤等多种疾病的发展密切相关。肿瘤抑制因子(cylindromatosis,CYLD)在多种肿瘤中低表达,并且是去泛素化酶家族成员之一。它能够去除特定蛋白上的泛素链,对细胞内NF-κB、Wnt、JNK等多种信号通路进行调节,影响细胞的生长、分化和凋亡等过程,其表达异常与多种癌症及遗传性疾病相关。近年来报道了大量有关CYLD在各种肿瘤进展中作用方式的研究,该文对CYLD在主要相关信号通路中的研究及其对肿瘤的影响进行综述。 展开更多
关键词 cyld 信号通路 去泛素化酶 肿瘤 肿瘤抑制因子
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氯化钆预处理对ANP肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中CYLD及NF-κB的影响 被引量：4
5
作者 刘立民 马瑞卿 +1 位作者 闫文貌 程石 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期267-271,共5页
目的:观察氯化钆(GdCl3)预处理对性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)肿瘤抑制因子CYLD及NF-κB的影响,探讨CYLD在ANP肺损伤中所起的作用。方法:36只SD大鼠随机分成正常对照组,ANP组,GdCl3预处理组。采用5%牛磺胆酸钠逆行性胰胆... 目的:观察氯化钆(GdCl3)预处理对性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)肿瘤抑制因子CYLD及NF-κB的影响,探讨CYLD在ANP肺损伤中所起的作用。方法:36只SD大鼠随机分成正常对照组,ANP组,GdCl3预处理组。采用5%牛磺胆酸钠逆行性胰胆管注射制备ANP动物模型,GdCl3预处理组在造模前30 min经尾静脉注射GdCl3(10 mg/kg)。术后6 h处死各组动物,经支气管肺泡灌洗获取肺泡AMs,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和IL-1β含量,Western blot检测AMs中NF-κB及CYLD活性水平。检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)的水平变化,并行肺组织病理学检查。结果:假手术组肺组织未见病理改变,ANP组和GdCl3预处理组肺组织均出现充血、水肿、炎性渗出等病理改变,但GdCl3预处理组病变程度轻与ANP组;ANP组肺组织的MPO活性,以及BALF的TNF-α,IL-1β含量较正常对照组明显升高(均P<0.05);正常对照组,ANP组,GdCl3预处理组AMs核蛋白NF-κB的表达量分别为0.08±0.03,0.18±0.06及0.11±0.04,3组AMs的CYLD的表达量分别为0.32±0.09,0.15±0.05和0.27±0.07。ANP组,GdCl3预处理组AMs中NF-κB与CYLD的表达活性均呈负相关(r=-0.708,r=-0.571,均P<0.05)。结论:ANP肺损伤中存在CYLD低表达和NF-κB活化,GdCl3预处理能通过增加CYLD表达,减少NF-κB活化,进而减轻肺损伤。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 肺损伤 NF-ΚB cyld 氯化钆
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直肠癌患者肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454表达水平及其相关性 被引量：7
6
作者 王勇 宋林繁 +2 位作者 杨光 沈海峰 范亚召 《中国现代普通外科进展》 CAS 2018年第2期106-109,共4页
目的:研究肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454在直肠癌患者中的表达水平。方法:2016年1~3月,21例直肠癌患者分别检测癌灶组织、癌病灶周围组织以及直肠正常组织中的肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达水平,分析肿瘤抑制因子SEMA3F、... 目的:研究肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454在直肠癌患者中的表达水平。方法:2016年1~3月,21例直肠癌患者分别检测癌灶组织、癌病灶周围组织以及直肠正常组织中的肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达水平,分析肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD与miR-454的相关性,探讨三者在直肠癌发生、发展中的作用。结果:癌组织、癌旁组织以及正常组织中的SEMA3F、CYLD与miR-454表达差异均具有统计学意义(P<0.01)。转移组患者癌组织中SEMA3F、CYLD均显著低于无转移组,miR-454显著高于无转移组(P<0.01)。高分化组CRC组织中SEMA3F、CYLD表达水平显著高于中低分化组,miR-454表达显著低于中低分化组(P<0.01)。肿瘤抑制因子CYLD与miR-454具有显著负相关性(r=-0.971,P<0.01)。肿瘤抑制因子SEMA3F与miR-454具有显著负相关性(r=-0.955,P<0.01)。结论:肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD在直肠癌早期可见高表达,随着病情进展表达水平逐渐下降;而miR-454则起到促进直肠癌细胞异常增殖及转移的作用,随着疾病进展表达水平逐渐升高,且与SEMA3F、CYLD均呈显著负相关;肿瘤抑制因子SEMA3F、CYLD及miR-454表达对于直肠癌的诊断及病情进展、预后的评估均具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 直肠癌 SEMA3F cyld miR-454
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多发性家族性毛发上皮瘤一家系CYLD基因突变及CYLD蛋白的检测 被引量：2
7
作者 赵小燕 黄一锦 +2 位作者 赵岩 杨炳春 曾抗 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1099-1102,共4页
目的检测1个多发性家族性毛发上皮瘤家系(MFT)CYLD基因突变及CYLD蛋白表达情况。方法提取全部患者及健康对照个体的外周血DNA,采用聚合酶链反应扩增CYLD基因的全部外显子,并进行DNA直接测序;采用抗CYLD抗体免疫组化法来检测毛发上皮瘤... 目的检测1个多发性家族性毛发上皮瘤家系(MFT)CYLD基因突变及CYLD蛋白表达情况。方法提取全部患者及健康对照个体的外周血DNA,采用聚合酶链反应扩增CYLD基因的全部外显子,并进行DNA直接测序;采用抗CYLD抗体免疫组化法来检测毛发上皮瘤肿瘤组织中CYLD蛋白的表达。结果在该家系中未检测到CYLD基因突变;免疫组化显示毛发上皮瘤肿瘤组织中CYLD蛋白表达阳性。结论推测该MFT家系可能具有遗传异质性。 展开更多
关键词 多发性家族性毛发上皮瘤 cyld基因 基因突变 遗传异质性
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MiR-130a靶向调控CYLD基因及其对肝癌细胞增殖的影响 被引量：4
8
作者 倪芳 赵华 +2 位作者 汪心怡 陈卓 汪思应 《世界华人消化杂志》 北大核心 2014年第11期1504-1509,共6页
目的:检测microRNA-130a(miR-130a)在肝癌中的表达水平及其对CYLD基因表达的调控,并探讨miR-130a对肝癌细胞增殖的影响.方法:采用qRT-PCR检测miR-130a在原发性肝癌组织及对应的癌旁组织、肝癌细胞系和正常肝细胞中的表达差异,利用靶基... 目的:检测microRNA-130a(miR-130a)在肝癌中的表达水平及其对CYLD基因表达的调控,并探讨miR-130a对肝癌细胞增殖的影响.方法:采用qRT-PCR检测miR-130a在原发性肝癌组织及对应的癌旁组织、肝癌细胞系和正常肝细胞中的表达差异,利用靶基因预测分析软件预测miR-130a潜在靶基因CYLD后,构建携带靶基因CYLD野生型及突变型3'UTR序列的双荧光素酶报告基因质粒,应用双荧光素酶报告基因实验体系进行验证;采用miR-130a抑制剂下调肝癌细胞系HepG2中miR-130a的表达,Western blot检测CYLD蛋白的表达变化;MTT法检测肝癌细胞增殖的改变.结果:MiR-130a在原发性肝癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织(P<0.05),在肝癌细胞系中的表达也显著高于正常肝细胞(P<0.05);双荧光素酶报告基因系统验证CYLD是miR-130a的直接靶基因;HepG2细胞中转染miR-130a抑制剂下调miR-130a表达后.Western blot检测结果显示CYLD蛋白表达水平显著上调;miR-130a抑制剂转染的HepG2细胞其增殖受到明显抑制.结论:MiR-130a在肝癌中表达上调,下调miR-130a后可以促进靶基因CYLD的表达,并可以抑制肝癌细胞的增殖活性,miR-130a有可能成为原发性肝癌治疗的新靶点. 展开更多
关键词 原发性肝细胞癌 MiRNA-130a cyld 增殖
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CYLD信号通路与肿瘤 被引量：5
9
作者 吴俊杰 李强 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第2期152-155,共4页
圆柱瘤基因CYLD编码的蛋白是一种去泛素酶,在人体内广泛分布,可去泛素化TRAFs、NEMO、Bcl-3及p53等信号分子,调控细胞NF-κB和JNK等信号途径,在细胞周期的调控、介导细胞凋亡、抑制肿瘤发生等分子事件中有着重要的调控作用。CYLD基因缺... 圆柱瘤基因CYLD编码的蛋白是一种去泛素酶,在人体内广泛分布,可去泛素化TRAFs、NEMO、Bcl-3及p53等信号分子,调控细胞NF-κB和JNK等信号途径,在细胞周期的调控、介导细胞凋亡、抑制肿瘤发生等分子事件中有着重要的调控作用。CYLD基因缺陷或缺失主要导致头部或面部的皮肤肿瘤,如多发性家族性毛发上皮瘤(MFT),家族性圆柱瘤(FC)和Brooke-Spiegler综合症(BSS),此外,CYLD在宫颈癌、肾癌、结肠癌、肝癌形成的信号途径中也均表现为下游调控。 展开更多
关键词 cyld 圆柱瘤 NF-ΚB C-JUN氨基末端激酶 Bcl-3
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CYLD基因无突变的多发性毛发上皮瘤2例与文献复习 被引量：2
10
作者 惠云 管海宏 +6 位作者 贾韦雪 曾荣 于瑞星 陈浩 张国毅 毛秋霞 李诚让 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期885-888,共4页
目的分析散发性多发性毛发上皮瘤的临床特点,检测散发性多发性毛发上皮瘤的致病基因,并回顾性分析国内外毛发上皮瘤的文献。方法采集患者的外周血,应用外周血细胞DNA提取、PCR扩增和DNA直接测序等方法分别检测CYLD基因突变情况。结果病... 目的分析散发性多发性毛发上皮瘤的临床特点,检测散发性多发性毛发上皮瘤的致病基因,并回顾性分析国内外毛发上皮瘤的文献。方法采集患者的外周血,应用外周血细胞DNA提取、PCR扩增和DNA直接测序等方法分别检测CYLD基因突变情况。结果病理检查示:真皮中上层多个基底样瘤细胞团,瘤团区域见数个角囊肿,瘤基质中未见明显的收缩间隙,符合毛发上皮瘤的诊断。本实验中未检测到CYLD基因的突变位点。结论毛发上皮瘤患者,尤其是散发病例的CYLD基因突变率低,毛发上皮瘤的致病基因可能存在其他的基因突变位点,其次可能存在遗传异质性。 展开更多
关键词 毛发上皮瘤 cyld基因
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中耳胆脂瘤上皮中CYLD、c-jun、Ki-67的表达及意义 被引量：2
11
作者 肖志文 蒋立新 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期629-633,共5页
目的研究抑癌基因CYLD(cylindromatosis)、原癌基因c-jun及细胞核增殖相关抗原Ki-67在中耳胆脂瘤上皮细胞中的表达情况,分析它们之间的相互关系,探讨CYLD、c-jun、Ki-67在中耳胆脂瘤发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化技术检测CYLD... 目的研究抑癌基因CYLD(cylindromatosis)、原癌基因c-jun及细胞核增殖相关抗原Ki-67在中耳胆脂瘤上皮细胞中的表达情况,分析它们之间的相互关系,探讨CYLD、c-jun、Ki-67在中耳胆脂瘤发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化技术检测CYLD、c-jun及Ki-67蛋白产物在30例中耳胆脂瘤上皮组织(实验组)及20例正常耳后皮肤上皮组织(对照组)中的表达情况。结果 CYLD蛋白产物阳性表达定位于细胞浆,其在中耳胆脂瘤上皮中主要见基底层弱阳性或阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,CYLD蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显低于正常耳后皮肤(X2=16.333,p=0.000,p<0.05)。c-jun蛋白产物阳性表达定位于细胞浆和细胞核,其在中耳胆脂瘤上皮中上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,c-jun蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=14.901,p=0.000,p<0.05)。Ki-67蛋白产物定位于细胞核,细胞质内未见Ki-67蛋白表达。其在中耳胆脂瘤上皮基底层、棘层,甚至颗粒层中均可见阳性或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,Ki-67蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=13.675,P=0.000,P<0.05)。Spearman相关性分析发现中耳胆脂瘤上皮细胞CYLD、c-jun蛋白表达存在负相关(rs=-0.381,P=0.038,P<0.05)。结论与正常耳后皮肤的上皮细胞相比,中耳胆脂瘤上皮细胞具有高度增殖的能力。CYLD、c-jun异常表达可能与中耳胆脂瘤发生、发展密切相关。在中耳胆脂瘤上皮中可能也存在CYLD对c-jun表达的负调节。 展开更多
关键词 中耳胆脂瘤 增殖 cyld C-JUN KI-67
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CYLD1基因与皮肤附属器肿瘤 被引量：2
12
作者 杨梅 梁燕华 +1 位作者 杨森 张学军 《中国麻风皮肤病杂志》 2008年第6期458-460,共3页
CYLD1基因是一种肿瘤抑制基因,在经典的NF-κB信号转导途径中发挥重要的生物学作用,影响炎症、免疫反应及肿瘤的形成,参与多种皮肤病的发生发展,如色素失禁症、少汗性外胚层发育不良等。本文仅就CYLD1基因异常与皮肤附属器肿瘤(多发性... CYLD1基因是一种肿瘤抑制基因,在经典的NF-κB信号转导途径中发挥重要的生物学作用,影响炎症、免疫反应及肿瘤的形成,参与多种皮肤病的发生发展,如色素失禁症、少汗性外胚层发育不良等。本文仅就CYLD1基因异常与皮肤附属器肿瘤(多发性家族性毛发上皮瘤、家族性圆柱瘤、Brook-Spiegler综合征)的发病机制简要作一综述。 展开更多
关键词 cyld1 毛发上皮瘤 家族性圆柱瘤 Brook-Spiegler综合征
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一家族性毛发上皮瘤家系CYLD1基因突变的研究 被引量：2
13
作者 凌雁 李俊燕 张莉 《中国麻风皮肤病杂志》 2006年第12期980-982,共3页
目的:收集山东一多发性家族性毛发上皮瘤家系,通过直接测序法检测该家系圆柱瘤病肿瘤抑制基因(cylindromatosis tumor-suppressor gene,CYLD1)第16、18号外显子是否存在突变。方法:提取家系成员外周血基因组DNA,利用PCR特异性扩增、直... 目的:收集山东一多发性家族性毛发上皮瘤家系,通过直接测序法检测该家系圆柱瘤病肿瘤抑制基因(cylindromatosis tumor-suppressor gene,CYLD1)第16、18号外显子是否存在突变。方法:提取家系成员外周血基因组DNA,利用PCR特异性扩增、直接测序方法对CYLD1基因的第16、18号外显子进行检测。结果:本家系成员的CYLD1基因第16、18号外显子未发现突变。结论:未发现本家族性毛发上皮瘤家系CYLD1基因第16、18号外显子存在突变,提示家族性毛发上皮瘤具有遗传异质性。 展开更多
关键词 cyld1基因 家族性毛发上皮瘤 突变 遗传异质性
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microRNA-1271靶向调控白血病细胞CYLD蛋白的表达
14
作者 张茜 王媛媛 +1 位作者 刘丽萍 倪芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第7期908-911,共4页
目的探讨人白血病细胞中微小RNA(microRNA)-1271对CYLD蛋白表达的调控作用。方法 qRT-PCR检测microRNA-1271在不同的人白血病细胞系、临床初诊未治的几种类型原代白血病细胞、正常人外周血单个核细胞中的表达差异,利用Targetscan信息学... 目的探讨人白血病细胞中微小RNA(microRNA)-1271对CYLD蛋白表达的调控作用。方法 qRT-PCR检测microRNA-1271在不同的人白血病细胞系、临床初诊未治的几种类型原代白血病细胞、正常人外周血单个核细胞中的表达差异,利用Targetscan信息学预测软件预测microRNA-1271靶向CYLD基因,构建携带靶基因野生型及突变型3’非翻译区(3’UTR)(缺失了整段预测的microRNA-1271结合序列)的双荧光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 3000包裹双荧光素酶重组质粒及microRNA-1271模拟物(mimic)或阴性对照,共转染HEK293A细胞,应用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定荧光素酶活性。FAM标记的microRNA-1271抑制物和阴性对照分别核转染至人白血病细胞系K562细胞,Western blot法检测CYLD蛋白水平的表达变化。结果 microRNA-1271在不同人白血病细胞系以及临床初诊未治的原代白血病细胞中的表达均明显高于正常人外周血单个核细胞,双荧光素酶报告基因实验验证CYLD是microRNA-1271的潜在靶基因;K562细胞中转染microRNA-1271抑制物下调microRNA-1271后,Western blot法检测结果显示CYLD蛋白水平明显上调。结论人白血病细胞中microRNA-1271的表达上调,下调microRNA-1271后可以促进靶基因CYLD蛋白的表达,microRNA-1271有可能成为白血病治疗的新靶点。 展开更多
关键词 白血病 MICRORNA microRNA-1271 cyld
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肿瘤抑制因子CYLD对细胞功能的调控作用
15
作者 张澄 王萍 +2 位作者 杜艳涛 段世伟 叶孟 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期115-122,共8页
肿瘤抑制因子(cylindromatosis,CYLD)是一种在体内广泛分布的去泛素酶,其包含去泛素化酶结构域和富含甘氨酸细胞骨架相关蛋白结构域,前者可通过去泛素化信号分子,调控细胞信号传导途径,后者主要通过对微管的调节,改变多聚化和乙酰化过程... 肿瘤抑制因子(cylindromatosis,CYLD)是一种在体内广泛分布的去泛素酶,其包含去泛素化酶结构域和富含甘氨酸细胞骨架相关蛋白结构域,前者可通过去泛素化信号分子,调控细胞信号传导途径,后者主要通过对微管的调节,改变多聚化和乙酰化过程,进而调控其组装和排列。CYLD主要通过对信号传导和细胞骨架的调节,从而调控细胞增殖、细胞凋亡、细胞运动和细胞分化等细胞功能。该文对近年来肿瘤抑制因子CYLD对细胞功能调控的研究进行概述。 展开更多
关键词 cyld 信号传导 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动 细胞分化
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CYLD蛋白在皮肤附属器肿瘤中的表达和比较研究
16
作者 应朝霞 肖生祥 +6 位作者 王永贤 周俊 任建文 黄莺 宋刘梅 樊文昕 刘艳 《中国美容医学》 CAS 2018年第9期114-117,共4页
目的:研究CYLD蛋白在毛发上皮瘤、毛母细胞瘤和汗管瘤等皮肤附属器肿瘤中的分布、表达特征,探索皮肤附属器肿瘤的发病机理。方法:收集毛发上皮瘤、毛母细胞瘤和汗管瘤患者皮损,进行CYLD蛋白免疫组织化学染色,并通过IPP软件测定平均光密... 目的:研究CYLD蛋白在毛发上皮瘤、毛母细胞瘤和汗管瘤等皮肤附属器肿瘤中的分布、表达特征,探索皮肤附属器肿瘤的发病机理。方法:收集毛发上皮瘤、毛母细胞瘤和汗管瘤患者皮损,进行CYLD蛋白免疫组织化学染色,并通过IPP软件测定平均光密度值进行半定量分析。结果:毛发上皮瘤组、毛母细胞瘤组的平均光密度值均低于正常人毛囊对照组(P<0.001),但毛发上皮瘤组和毛母细胞瘤组CYLD蛋白平均光密度值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。汗管瘤组的平均光密度值低于正常人汗腺对照组(P<0.001)。结论:CYLD蛋白表达于正常角质形成细胞(基底层和颗粒层为主)、毛囊、汗腺和皮脂腺的细胞质和细胞核周围区域;毛发上皮瘤、毛母细胞瘤、汗管瘤的肿瘤组织中CYLD蛋白表达水平均显著下降,提示这三种皮肤附属器肿瘤的致病机理可能与CYLD蛋白表达下调有关。 展开更多
关键词 cyld蛋白 毛发上皮瘤 毛母细胞瘤 汗管瘤 光密度值
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CYLD抑制自噬提高膀胱癌细胞吉西他滨化疗敏感性 被引量：7
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作者 殷雷 殷睿 +2 位作者 李文佳 刘帅 吕家驹 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第8期1-6,共6页
目的探讨肿瘤抑制因子CYLD提高膀胱癌细胞吉西他滨化疗敏感性。方法构建CYLD过表达质粒转染的人膀胱癌细胞株T24、253J,将细胞分为仅加入脂质体的对照组,转染空载质粒的空载组和CYLD组。Transw ell实验检测CYLD对膀胱癌细胞迁移/侵袭能... 目的探讨肿瘤抑制因子CYLD提高膀胱癌细胞吉西他滨化疗敏感性。方法构建CYLD过表达质粒转染的人膀胱癌细胞株T24、253J,将细胞分为仅加入脂质体的对照组,转染空载质粒的空载组和CYLD组。Transw ell实验检测CYLD对膀胱癌细胞迁移/侵袭能力的影响,CCK8法检测膀胱癌细胞对吉西他滨的化疗敏感性,Western blotting、吖啶橙染色、电镜等检测自噬蛋白表达水平。结果与对照组和空载组相比,CYLD组通过Transw ell小室的细胞数目明显减少(P<0.05),24 h半抑制浓度(IC50)明显降低(P<0.05),自噬相关蛋白LC3、Beclin 1表达降低,p62表达增高,吖啶橙染色及电镜观察发现自噬溶酶体及自噬泡减少。结论肿瘤抑制因子CYLD可以抑制膀胱癌细胞的迁移/侵袭能力,并通过抑制自噬提高膀胱癌细胞对吉西他滨的化疗敏感性。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 吉西他滨 自噬 cyld基因 化疗敏感性
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肿瘤抑制因子CYLD和NF-κB信号通路与溃疡性结肠炎的关系研究
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作者 雷媛 杜凌 《当代医药论丛》 2022年第24期11-14,共4页
目的:探讨肿瘤抑制因子CYLD和NF-κB信号通路与溃疡性结肠炎的关系。方法:选取2020年8月至2022年8月广西医科大学第四附属医院收治的58例溃疡性结肠炎患者和同期在该院接受体检的55例健康体检者作为研究对象。将58例溃疡性结肠炎患者作... 目的:探讨肿瘤抑制因子CYLD和NF-κB信号通路与溃疡性结肠炎的关系。方法:选取2020年8月至2022年8月广西医科大学第四附属医院收治的58例溃疡性结肠炎患者和同期在该院接受体检的55例健康体检者作为研究对象。将58例溃疡性结肠炎患者作为观察组,将55例健康体检者作为对照组。所有研究对象均采用实时定量RT-PCR法检测结肠黏膜组织中CYLD和NF-kB mRNA的表达状况,对比检测结果,分析肿瘤抑制因子CYLD对NF-κB信号通路的调控在溃疡性结肠炎发病机制中的作用,探讨CYLD与溃疡性结肠炎临床表型(性别、年龄、病程、吸烟史、病变部位、病变分期、病变程度)的相关性。结果:观察组CYLD mRNA的水平低于对照组,NF-kB mRNA的水平高于对照组(P<0.05)。经Spearman相关分析后发现,CYLD mRNA水平与溃疡性结肠炎病变之间为负性关系(r=-0.2511,P<0.05),NF-kB mRNA水平与溃疡性结肠炎病变之间为正性关系(r=0.5165,P<0.05)。观察组中共检出CYLD蛋白阳性55例。经单因素分析后得知,年龄≥60岁(100.00%)、病程时间≥1年(98.21%)、病变分期为活动期(100.00%)、病变程度为重度(100.00%)和中度(100.00%)患者的CYLD蛋白阳性率更高(P<0.05)。Logistic回归分析发现,CYLD蛋白阳性率与溃疡性结肠炎患者的病程、病变程度、病变分期、年龄呈正性关系。结论:CYLD受抑制可能活化NF-κB信号通路,导致溃疡性结肠炎的发展,且CYLD的表达与溃疡性结肠炎的临床表型具有相关性。上述结论可为溃疡性结肠炎发病机制的进一步探讨提供研究基础,有利于开发新的治疗靶点。CYLD或能成为新的潜在治疗靶点,为治疗溃疡性结肠炎提供新的治疗策略,进一步提高溃疡性结肠炎临床诊疗的水平。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 肿瘤抑制因子 cyld NF-KB 机制 相关性
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去泛素化酶CYLD 被引量：3
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作者 魏俊成 贺福初 王建 《生命科学》 CSCD 2013年第4期352-357,共6页
肿瘤抑制因子CYLD(Cylindromatosis,头帕肿瘤综合征蛋白)是一种去泛素化酶,cyld基因突变或者缺失导致圆柱瘤,并与多种肿瘤的发生、发展密切关联。CYLD通过自身去泛素化酶活性移除特定底物的K63连接的泛素链,并负调控包括NF-κB在内的多... 肿瘤抑制因子CYLD(Cylindromatosis,头帕肿瘤综合征蛋白)是一种去泛素化酶,cyld基因突变或者缺失导致圆柱瘤,并与多种肿瘤的发生、发展密切关联。CYLD通过自身去泛素化酶活性移除特定底物的K63连接的泛素链,并负调控包括NF-κB在内的多条信号通路。在生理条件下,通过磷酸化修饰和泛素化修饰,CYLD的蛋白表达量和活性受到严格的调控。CYLD与多种细胞学功能相关,如细胞运动和迁移、免疫和炎症反应、破骨细胞的形成等。 展开更多
关键词 泛素化 去泛素化酶 cyld 炎症
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CYLD基因对神经母细胞瘤凋亡和活性氧水平及NF-κB信号的影响 被引量：3
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作者 孙家栋 李雪梅 刘君玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第8期798-801,共4页
目的CYLD在神经母细胞瘤高表达,但是具体研究机制尚不清楚。文章主要探讨上调CYLD基因表达对神经母细胞瘤凋亡、活性氧水平及NF-κB信号的影响。方法将SH-SY5Y细胞分为3组,即空白组、pcDNA3.1组(转染空白pcDNA3.1质粒)和pcDNA3.1-CYLD组... 目的CYLD在神经母细胞瘤高表达,但是具体研究机制尚不清楚。文章主要探讨上调CYLD基因表达对神经母细胞瘤凋亡、活性氧水平及NF-κB信号的影响。方法将SH-SY5Y细胞分为3组,即空白组、pcDNA3.1组(转染空白pcDNA3.1质粒)和pcDNA3.1-CYLD组(转染pcDNA3.1-CYLD质粒)。Western blot检测CYLD、p52、cyclinD1和Bax蛋白表达;流式细胞术分别检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)水平;MTT法检测pcDNA3.1-CYLD转染24、48、72和96 h的细胞活力。结果Western blot结果显示,空白组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-CYLD组的蛋白表达分别为(0.074±0.010)、(0.089±0.012)和(0.787±0.067);pcDNA3.1-CYLD组CYLD表达明显高于pcDNA3.1组(P<0.05)。pcDNA3.1-CYLD组细胞活力(48h、72h和96h)明显低于pcDNA3.1组(P<0.05)。pcDNA3.1-CYLD质粒转染SH-SY5Y细胞,空白组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-CYLD组的细胞凋亡率分别为(4.41%±0.47%)、(4.23%±0.41%)和(21.36%±0.79%),pcDNA3.1-CYLD组细胞凋亡率明显高于pcDNA3.1组(P<0.05)。空白组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-CYLD组的ROS荧光强度分别为(64.74±1.02)、(66.51±1.26)和(94.39±1.58),pcDNA3.1-CYLD组ROS荧光强度明显高于pcDNA3.1组(P<0.05)。结论上调CYLD基因表达可能通过提高细胞ROS水平及抑制NF-κB信号通路促进神经母细胞瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 cyld基因 凋亡 ROS NF-ΚB信号通路
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