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IGF2BP2抑制剂CWI1-2对胶质瘤细胞迁移、侵袭能力及替莫唑胺耐药性的影响 被引量：2
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作者 伊木然·伊拉木 陶震楠 +1 位作者 孙毅 杭春华 《中华神经医学杂志》 北大核心 2025年第2期131-140,共10页
目的探究胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)抑制剂CWI1-2对SHG-140、LN229胶质瘤细胞迁移、侵袭能力以及替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法(1)体外培养SHG-140、LN229胶质瘤细胞株,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测0.1... 目的探究胰岛素样生长因子2(IGF2)mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)抑制剂CWI1-2对SHG-140、LN229胶质瘤细胞迁移、侵袭能力以及替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法(1)体外培养SHG-140、LN229胶质瘤细胞株,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L CWI1-2作用24、48 h对2种细胞存活率的影响,筛选CWI1-2的最佳作用浓度和时间。将2种细胞分为对照组、0.5μmol/L CWI1-2组、1.0μmol/L CWI1-2组,分别加入等量培养基、0.5μmol/L CWI1-2、1.0μmol/L CWI1-2作用24 h,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测3组细胞IGF2BP2蛋白的表达,采用细胞划痕实验和Transwell实验分别检测3组细胞的迁移能力、侵袭能力。(2)采用CCK-8实验检测100、200、400、600、800、1000μmol/L TMZ作用24、48 h对SHG-140、LN229细胞存活率的影响,筛选TMZ的最佳作用浓度和时间。将2种细胞分为对照组、CWI1-2组、TMZ组、TMZ+CWI1-2组,分别加入等量培养基、0.5μmol/L CWI1-2、200μmol/L TMZ、0.5μmol/L CWI1-2+200μmol/L TMZ作用24 h,采用细胞集落实验检测4组细胞的集落形成率,采用CCK-8实验检测4组细胞的增殖率。结果(1)CCK-8实验检测结果显示,作用24、48 h后0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L CWI1-2组SHG-140、LN229细胞存活率较低于0.1、0.2μmol/L CWI1-2组,差异均有统计学意义(P<0.05),且作用24 h时0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L CWI1-2组SHG-140、LN229细胞存活率依次降低,任2组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。故选择对细胞存活率影响较小的0.5μmol/L、1.0μmol/L CWI1-2作用24 h用于后续实验。蛋白质印迹法检测结果显示,0.5μmol/L CWI1-2组、1.0μmol/L CWI1-2组SHG-140细胞IGF2BP2蛋白的表达(0.91±0.09、0.79±0.10)低于对照组(1.27±0.05),差异有统计学意义(P<0.05);1.0μmol/L CWI1-2组LN229细胞IGF2BP2蛋白的表达(0.33±0.02)低于对照组(0.82±0.09)和0.5μmol/L CWI1-2组(0.82±0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色检测结果显示,0.5μmol/L CWI1-2组与1.0μmol/L CWI1-2组细胞的IGF2BP2蛋白免疫荧光强度明显低于对照组。划痕实验检测结果显示,0.5μmol/L CWI1-2组、1.0μmol/L CWI1-2组SHG-140细胞迁移率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、0.5μmol/L CWI1-2组、1.0μmol/L CWI1-2组LN229细胞迁移率依次降低,任2组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验检测结果显示,对照组、0.5μmol/L CWI1-2组、1.0μmol/L CWI1-2组SHG-140、LN229细胞穿膜细胞数依次减少,任2组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)作用24、48 h时,400、600、800、1000μmol/L TMZ组SHG-140、LN229细胞存活率低于100、200μmol/L TMZ组,差异均有统计学意义(P<0.05)。故选择对细胞存活率影响较小的200μmol/L TMZ作用24 h用于后续实验。对照组、CWI1-2组、TMZ组、TMZ+CWI1-2组SHG-140、LN229细胞集落形成率依次降低,任2组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、CWI1-2组、TMZ组、TMZ+CWI1-2组LN229细胞增殖率依次降低,任2组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CWI1-2可抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力,增加TMZ对胶质瘤细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2 cwi1-2 细胞迁移 细胞侵袭 替莫唑胺
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