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circCSPP1通过调控miR-642a-5p表达对人视网膜母细胞瘤Y-79细胞增殖、迁移、侵袭的影响
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作者 王瑜瑾 王媛 宁丞君 《眼科新进展》 北大核心 2025年第6期452-456,462,共6页
目的分析其环状RNA CSPP1(circCSPP1)与微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对视网膜母细胞瘤Y-79细胞生物学行为的影响。方法选取2019年6月至2022年10月郑州市中心医院收治的视网膜母细胞瘤患者47例47眼为研究对象,术中切除患者视网膜母细胞... 目的分析其环状RNA CSPP1(circCSPP1)与微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对视网膜母细胞瘤Y-79细胞生物学行为的影响。方法选取2019年6月至2022年10月郑州市中心医院收治的视网膜母细胞瘤患者47例47眼为研究对象,术中切除患者视网膜母细胞瘤组织、瘤旁组织。体外培养人视网膜母细胞瘤细胞株Y-79,依据转染物不同分为Con组(正常培养的Y-79细胞)、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-circCSPP1组(转染sh-circCSPP1)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-642a-5p组(转染miR-642a-5p mimics)、sh-circCSPP1+anti-miR-NC组(共转染sh-circCSPP1与anti-miR-NC)以及sh-circCSPP1+anti-miR-642a-5p组(共转染sh-circCSPP1与anti-miR-642a-5p)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测视网膜母细胞瘤组织、瘤旁组织、Y-79细胞中的circCSPP1与miR-642a-5p表达水平;采用CCK-8、细胞划痕实验、Transwell小室实验分别检测Y-79细胞增殖、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测circCSPP1与miR-642a-5p靶向关系;Western blot实验检测Y-79细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)与神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果与瘤旁组织比较,视网膜母细胞瘤组织中circCSPP1表达水平升高,miR-642a-5p表达水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Con组及sh-NC组比较,sh-circCSPP1组细胞划痕愈合率均降低,侵袭细胞数均减少,E-cadherin蛋白相对表达水平均升高,N-cadherin蛋白相对表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Con组及miR-NC组比较,miR-642a-5p组细胞划痕愈合率均降低,侵袭细胞数均减少,E-cadherin蛋白水平均升高,N-cadherin蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。双荧光素酶报告实验检测证明,circCSPP1可负向调控miR-642a-5p的表达水平。与sh-circCSPP1+anti-miR-NC组比较,sh-circCSPP1+anti-miR-642a-5p组细胞划痕愈合率升高,侵袭细胞数增多,E-cadherin蛋白水平降低,N-cadherin蛋白水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论沉默circCSPP1可通过上调miR-642a-5p表达抑制Y-79细胞增殖、迁移及侵袭,circCSPP1可能成为视网膜母细胞瘤靶向治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 环状RNA cspp1 微小RNA-642a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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全外显子组测序发现CSPP1所致Joubert综合征1例 被引量:5
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作者 罗敏娜 刘志翠 +5 位作者 曹宗富 孙殿荣 马斯禹 高华方 马旭 李玉堂 《中国计划生育学杂志》 2018年第1期56-61,共6页
目的:探讨一个中国Joubert综合征家系的致病基因及位点。方法:对该Joubert综合征家系的先证者进行全外显子组测序,通过与已知数据库的比对分析,找到候选的致病基因及位点,利用聚合酶链式反应(PCR)和Sanger测序进行验证。结果:在先证者的... 目的:探讨一个中国Joubert综合征家系的致病基因及位点。方法:对该Joubert综合征家系的先证者进行全外显子组测序,通过与已知数据库的比对分析,找到候选的致病基因及位点,利用聚合酶链式反应(PCR)和Sanger测序进行验证。结果:在先证者的8号染色体CSPP1基因上存在2个杂合突变位点,分别为c.1132C>T,p.R378X以及c.2244_2245delAA,p.E750GfsX30。这两个位点在家系中符合遗传共分离规律。结论:全外显子组测序结合Sanger测序发现CSPP1基因的c.1132C>T,p.R378X以及c.2244_2245delAA p.E750fsX30位点为引起该Joubert综合征家系临床病变的突变位点,这是国内首次报道的由CSPP1基因突变导致的Joubert综合征病例。 展开更多
关键词 JOUBERT综合征 cspp1 全外显子组测序 小脑蚓部发育不良 纤毛相关疾病
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circ-CSPP1靶向miR-433-3p基因调控子宫内膜癌细胞增殖、凋亡以及细胞免疫因子表达的分子机制
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作者 徐琼芳 钟斐 唐海芽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期601-607,615,共8页
目的探讨circ-CSPP1靶向miR-433-3p基因调控子宫内膜癌细胞增殖、凋亡以及细胞免疫因子表达的分子机制。方法以子宫内膜癌细胞Ishikawa为研究对象,细胞分为NC组、si-NC组、si-circ-CSPP1组、miR-NC组、miR-433-3p组、anti-miR-NC+si-cir... 目的探讨circ-CSPP1靶向miR-433-3p基因调控子宫内膜癌细胞增殖、凋亡以及细胞免疫因子表达的分子机制。方法以子宫内膜癌细胞Ishikawa为研究对象,细胞分为NC组、si-NC组、si-circ-CSPP1组、miR-NC组、miR-433-3p组、anti-miR-NC+si-circ-CSPP1组、anti-miR-433-3p+si-circ-CSPP1组。qRT-PCR检测miR-433-3p和circ-CSPP1相对表达量;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western blot检测CyclinD1及Cleaved-caspase-3蛋白表达;ELISA法检测TNF-α及IL-6含量;双荧光素酶报告实验检测miR-433-3p和circ-CSPP1靶向关系。结果miR-433-3p在子宫内膜癌和细胞中表达降低,circ-CSPP1相对表达量增加;circ-CSPP1低表达或miR-433-3p过表达可降低CyclinD1蛋白表达、A值,增加Cleaved-caspase-3、凋亡率,减少TNF-α、IL-6含量。circ-CSPP1靶向负调控miR-433-3p的表达,anti-miR-433-3p可以逆转circ-CSPP1低表达对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞免疫因子表达的作用。结论circ-CSPP1低表达可通过增加miR-433-3p抑制子宫内膜癌细胞增殖和促进细胞凋亡,减少细胞免疫因子表达。 展开更多
关键词 circ-cspp1 miR-433-3p 子宫内膜癌 增殖 凋亡
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CSPP1 stabilizes microtubules by capping both plus and minus ends 被引量:1
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作者 Zhikai Wang Wenwen Wang +11 位作者 Shuaiyu Liu Fengrui Yang Xu Liu Shasha Hua Lijuan Zhu Aoqing Xu Donald LHill Dongmei Wang Kai Jiang Jennifer Lippincott-Schwartz Xing Liu Xuebiao Yao 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期36-46,共11页
Although the dynamic instability of microtubules(MTs)is fundamental to many cellular functions,quiescent MTs with unattached free distal ends are commonly present and play important roles in various events to power ce... Although the dynamic instability of microtubules(MTs)is fundamental to many cellular functions,quiescent MTs with unattached free distal ends are commonly present and play important roles in various events to power cellular dynamics.However,how these free MT tips are stabilized remains poorly understood.Here,we report that centrosome and spindle pole protein 1(CSPP1)caps and stabilizes both plus and minus ends of static MTs.Real-time imaging of laser-ablated MTs in live cells showed deposition of CSPP1 at the newly generated MT ends,whose dynamic instability was concomitantly suppressed.Consistently,MT ends in CSPP1-overexpressing cells were hyper-stabilized,while those in CSPP1-depleted cells were much more dynamic.This CSPP1-elicited stabilization of MTs was demonstrated to be achieved by suppressing intrinsic MT catastrophe and restricting polymerization.Importantly,CSPP1-bound MTs were resistant to mitotic centromere-associated kinesin-mediated depolymerization.These findings delineate a previously uncharacterized CSPP1 activity that integrates MT end capping to orchestrate quiescent MTs. 展开更多
关键词 cspp1 MICROTUBULE plus end minus end capping
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