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胃癌患者CyPJ、ERp29及CSN5的表达其与预后生存的关系研究 被引量：1
1
作者 杨敬端 何明 吴品 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第3期478-482,共5页
目的分析胃癌患者亲环素J(CyPJ)、内质网蛋白质29(ERp29)及CSN5的表达其与预后生存的关系。方法纳入2015年6月至2017年6月本院收治的115例胃癌患者肿瘤组织(癌组织组)及肿瘤旁的正常胃粘膜组织(癌旁正常组织组)。比较CyPJ、ERp29及CSN5... 目的分析胃癌患者亲环素J(CyPJ)、内质网蛋白质29(ERp29)及CSN5的表达其与预后生存的关系。方法纳入2015年6月至2017年6月本院收治的115例胃癌患者肿瘤组织(癌组织组)及肿瘤旁的正常胃粘膜组织(癌旁正常组织组)。比较CyPJ、ERp29及CSN5在不同组织中的表达;分析CyPJ、ERp29及CSN5与胃癌患者各病理参数的相关性,以Kaplan-Meier生存分析CyPJ、ERp29及CSN5表达对胃癌患者预后生存的影响;采用多元Logistic回归分析影响胃癌患者预后生存的危险因素。结果胃癌组织组CyPJ、CSN5阳性表达率显著高于癌旁正常组织,ERp29较癌旁正常组织阳性表达率低,差异均有统计学意义(P<0.05);年龄、性别、浆膜浸润与胃癌患者CyPJ、ERp29及CSN5表达无相关(P>0.05)。临床分期、浸润深度、淋巴结转移与患者CyPJ、CSN5表达呈正相关,组织分化程度与CyPJ、CSN5表达呈负相关(P<0.05)。ERp29与组织分化程度呈正相关,与临床分期、浸润深度、淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。截至随访结束,115例胃癌患者生存79例,死亡36例,死亡率为31.30%;生存分析显示CyPJ及CSN5(表达阴性)、ERp29(表达阳性)者生存期较长,Keplan-meier生存曲线明显不同(P<0.05)。组织中低分化、TNM分期:Ⅲ+Ⅳ期、淋巴结转移、ERp29阴性表达、CyPJ及CSN5阳性表达为影响胃癌患者预后生存的独立危险因素(P<0.05)。结论 CyPJ、ERp29及CSN5在胃癌组织中呈异常表达状态;其表达水平与患者的肿瘤临床病理特征及预后有关。 展开更多
关键词 胃癌 CyPJ ERp29 csn5
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家蚕JAB1/CSN5蛋白的基因克隆表达及亚细胞定位 被引量：4
2
作者 许红 姚斐 +11 位作者 盛清 吕正兵 陈健 聂作明 王丹 刘立丽 沈红丹 舒建洪 舒特俊 陈剑清 吴祥甫 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期508-515,共8页
JAB1/CSN5是COP9信号复合体(constitutive photomorphogenic signalosome CSN)的第5个亚基,内嵌的JAMM基序是CSN参与蛋白的泛素化降解途径并调控生物体生长发育过程的异构酶活性位点。在家蚕蛹cDNA文库中筛选到的一条基因序列,其ORF长度... JAB1/CSN5是COP9信号复合体(constitutive photomorphogenic signalosome CSN)的第5个亚基,内嵌的JAMM基序是CSN参与蛋白的泛素化降解途径并调控生物体生长发育过程的异构酶活性位点。在家蚕蛹cDNA文库中筛选到的一条基因序列,其ORF长度为1047 bp,预测编码蛋白含有JAB1/CSN5保守结构域JAB-MPN,因此命名为BmJM。将BmJM基因的ORF插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmJM,于E.coliRosetta菌中进行原核表达,重组蛋白以包涵体形式存在。以纯化后的重组蛋白为抗原免疫大白兔获得BmJM的多克隆抗体,采用RT-PCR、Western blotting方法对BmJM基因在家蚕不同发育时期和组织中的转录及蛋白表达水平进行分析,发现BmJM蛋白在家蚕5龄幼虫的生殖腺表达量最高,而在其他组织中表达量较少,由此初步揭示了JAB1/CSN5在家蚕生长发育过程中的作用。亚细胞定位测定表明BmJM蛋白在细胞质近核区域含量最高,在细胞核中也有分布。 展开更多
关键词 家蚕 COP9信号复合体 JAB1/csn5蛋白 基因克隆 序列分析 荧光定量PCR 亚细胞定位
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水稻CSN5B蛋白抗血清的制备及其应用 被引量：5
3
作者 何龙 羊健 +3 位作者 张松柏 张恒木 刘勇 陈剑平 《生物技术通讯》 CAS 2016年第4期525-528,共4页
目的:克隆水稻COP9信号复合物5B亚基(CSN5B)的基因,原核表达CSN5B蛋白并制备多克隆抗体。方法:用RT-PCR技术从日本晴水稻中扩增得到CSN5B蛋白基因Os CSN5B并将其连接至p EASYTM-T5 Zero克隆载体,然后将其亚克隆至原核表达载体p ET-32a+... 目的:克隆水稻COP9信号复合物5B亚基(CSN5B)的基因,原核表达CSN5B蛋白并制备多克隆抗体。方法:用RT-PCR技术从日本晴水稻中扩增得到CSN5B蛋白基因Os CSN5B并将其连接至p EASYTM-T5 Zero克隆载体,然后将其亚克隆至原核表达载体p ET-32a+,并导入大肠杆菌BL21plys S宿主菌中诱导表达;重组的CSN5B融合蛋白经Ni-NTA His.Bind Resin纯化后免疫兔子制备多克隆抗体,并经Western印迹分析。结果与结论:获得了CSN5B蛋白的特异性抗体,Western印迹显示CSN5B蛋白在水稻植株中呈高水平表达,为进一步探讨该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 csn5B基因 原核表达 抗血清制备
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COP9亚基FaCSN5在草莓果实发育过程中的功能分析
4
作者 高佳慧 冀桂明 +3 位作者 李文静 郭家选 沈元月 高凡 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2536-2547,共12页
【目的】探究草莓COP9信号复合体亚单位5(constitutive photomorphogenic signalosome subunit 5,CSN5)在草莓果实发育过程中的功能。【方法】以草莓品种红颜为材料,根据草莓果实发育过程中的转录组数据,筛选并克隆FaCSN5基因。基于生... 【目的】探究草莓COP9信号复合体亚单位5(constitutive photomorphogenic signalosome subunit 5,CSN5)在草莓果实发育过程中的功能。【方法】以草莓品种红颜为材料,根据草莓果实发育过程中的转录组数据,筛选并克隆FaCSN5基因。基于生物信息学对其功能域、理化性质、蛋白结构等进行预测。通过SDS-PAGE和Western Blot检测FaCSN5-His目的蛋白,利用烟草对其进行亚细胞定位分析。利用RT-qPCR检测FaCSN5的时空表达水平,利用农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,观察记录表型,检测FaCSN5基因表达水平。利用圆片温育和外源激素处理试验检测外源激素对FaCSN5基因表达的诱导影响。【结果】系统进化树分析表明FaCSN5、FvCSN5和月季CSN5b同源性较高,相似率分别为100%和94.24%。克隆的FaCSN5与艳丽草莓8条基因序列的碱基和氨基酸序列相似率分别达98.97%和99.35%。FaCSN5基因的编码区为1080 bp,编码359个氨基酸,具有一个保守的MPN结构域。p ET30a-FaCSN5融合表达载体的大肠杆菌原核表达表明FaCSN5-His目的蛋白大小约66 ku。亚细胞定位显示FaCSN5-GFP融合蛋白定位为细胞核和细胞质。FaCSN5在根中表达水平最高,在种子中最低,在根中的表达量是种子中表达量的8倍;果实发育过程中在全红期表达量最高,在褪绿期表达量最低,从褪绿期开始随着果实发育表达量升高。农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,FaCSN5过表达能够促进草莓果实成熟;沉默FaCSN5表达则会抑制草莓果实成熟。FaCSN5启动子上含有响应茉莉酸甲酯和赤霉素的顺式作用元件,且其表达受到这两种激素及脱落酸的诱导。【结论】FaCSN5可能是通过多种激素调控促进草莓果实成熟。 展开更多
关键词 草莓 红颜 csn5 表达分析 亚细胞定位 激素诱导
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肿瘤标志物JAB1、Akt和p27^(kip1)的表达及对肿瘤细胞增殖的影响 被引量：1
5
作者 范晓航 杨惠玲 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第3期201-205,共5页
细胞周期调控异常是肿瘤发生发展的重要机制之一,很多肿瘤标志物的异常表达均能影响细胞的正常增殖从而导致肿瘤的发生。C-JUN激活区结合蛋白1(JAB1)通过与多种蛋白相互作用,参与多种信号途径,在人多种癌症中JAB1表达增高,同时介导p27k... 细胞周期调控异常是肿瘤发生发展的重要机制之一,很多肿瘤标志物的异常表达均能影响细胞的正常增殖从而导致肿瘤的发生。C-JUN激活区结合蛋白1(JAB1)通过与多种蛋白相互作用,参与多种信号途径,在人多种癌症中JAB1表达增高,同时介导p27kip1出核转运及泛素化降解从而降低其在胞浆中的水平,促进肿瘤细胞增殖;Akt在细胞浆的表达增高,使p27kip1磷酸化并抑制p27kip1进入细胞核发挥其生物学功能,Akt也可能参与p27kip1的出核转运及蛋白降解,促进p27kip1降解,进而影响细胞周期的调控,促进肿瘤细胞增殖;抑癌基因p27kip1在肿瘤中表达降低,促使肿瘤细胞增殖;在JAB1介导的p27kip1出核转运中可能有Akt的参与;在HER2介导的PI3K/Akt/p27通路中又有JAB1的参与,三者相互作用形成复杂的网络,共同调节信号转导,促进肿瘤的发生发展。 展开更多
关键词 JAB1 csn5 COP9 P27 AKT HER2 肿瘤
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