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Bar+CP4EPSPS基因转化紫花苜蓿的研究及抗性鉴定
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作者 王英哲 王一楠 +3 位作者 任伟 徐安凯 刘艳芝 郝东云 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第18期32-39,共8页
为了提高苜蓿抗除草剂的能力,以'公农1号'紫花苜蓿为试验材料,采用农杆菌介导的方法将Bar基因和CP4EPSPS基因转入紫花苜蓿中,研究了优化影响转化的5个主要因子(分别为外植体、农杆菌种类、侵染浓度、共培养时间、筛选浓度),建... 为了提高苜蓿抗除草剂的能力,以'公农1号'紫花苜蓿为试验材料,采用农杆菌介导的方法将Bar基因和CP4EPSPS基因转入紫花苜蓿中,研究了优化影响转化的5个主要因子(分别为外植体、农杆菌种类、侵染浓度、共培养时间、筛选浓度),建立了农杆菌介导的'公农1号'紫花苜蓿高效转化体系,获得转基因植株。结果表明:选择再生苗叶片作为外植体、EHA105农杆菌侵染、菌液浓度OD600值为0.8、共培养3 d、转化过程中草铵膦筛选浓度选择2 mg·L-1为宜,是最佳转化方案。试验结合分子检测和试纸条检测初步证明目的基因已经整合到紫花苜蓿中,最终喷施草甘膦确定12株为转基因植株。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 转化 农杆菌 BAR基因 cp4epsps基因
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食用精炼大豆油DNA提取及单管巢式PCR检测 被引量:10
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作者 姚芹 宋浩 陈枫 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期183-186,共4页
设计了针对转基因Roundup Ready大豆外源基因扩增的内外2对引物,分别位于CaMV35s启动子,CTP基因,CP4EPSPS基因区域,并成功对精炼大豆油中的外源基因进行单管巢式PCR检测。结果表明,用改良试剂盒法和冷冻干燥法提取大豆油中的DNA均可以... 设计了针对转基因Roundup Ready大豆外源基因扩增的内外2对引物,分别位于CaMV35s启动子,CTP基因,CP4EPSPS基因区域,并成功对精炼大豆油中的外源基因进行单管巢式PCR检测。结果表明,用改良试剂盒法和冷冻干燥法提取大豆油中的DNA均可以满足单管巢式PCR检测要求;单管巢式PCR扩增对内外引物的Tm值有特殊要求,外引物的退火温度高于内引物。本实验建立的精炼大豆油转基因成分的单管巢式PCR检测方法特异性强,灵敏度高且快速方便。 展开更多
关键词 精炼大豆油 DNA提取 cp4epsps基因 单管巢式PCR
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转基因大豆非同源对照模板QC-PCR检测方法的建立
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作者 徐景升 阙友雄 +2 位作者 李峰 陈华墙 陈如凯 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第5期156-159,共4页
建立了转基因大豆CP4EPSPS基因的非同源对照模板QC-PCR检测方法。非同源竞争对照构建方法如下:利用CP4EPSPS基因特异引物,以大肠杆菌基因组DNA为异源模板,在低严谨度PCR扩增,回收适宜DNA片段并克隆到pMD-8载体上。该片段与CP4EPSPS基因... 建立了转基因大豆CP4EPSPS基因的非同源对照模板QC-PCR检测方法。非同源竞争对照构建方法如下:利用CP4EPSPS基因特异引物,以大肠杆菌基因组DNA为异源模板,在低严谨度PCR扩增,回收适宜DNA片段并克隆到pMD-8载体上。该片段与CP4EPSPS基因相应序列除两端引物序列完全相同外,其他部分没有同源性。 展开更多
关键词 竞争定量PCR 非同源对照 cp4epsps 转基因检测
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辐照对抗草甘膦转基因大豆DNA的降解研究
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作者 杜艳 陈复生 陈晨 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第4期9-15,共7页
探索辐照对抗草甘膦(Roundup Ready,RR)转基因大豆DNA降解的影响,以达到合理应用转基因大豆的目的。分别以RR大豆籽粒、大豆粉为对象,采用剂量为0、4、10 kGy的Co 60γ-射线进行照射,监测辐照后样品DNA的质量浓度、分子量和外源cp4 epsp... 探索辐照对抗草甘膦(Roundup Ready,RR)转基因大豆DNA降解的影响,以达到合理应用转基因大豆的目的。分别以RR大豆籽粒、大豆粉为对象,采用剂量为0、4、10 kGy的Co 60γ-射线进行照射,监测辐照后样品DNA的质量浓度、分子量和外源cp4 epsps基因拷贝数等的变化情况。结果表明:随着辐照剂量的增加,RR大豆籽粒、大豆粉的基因组DNA完整性呈下降趋势,其中大豆粉的下降程度更高;RR大豆粉中cp4 epsps基因拷贝数随辐照剂量的升高而降低。然而,辐照剂量增加至10 kGy时,长片段lectin和cp4 epsps基因的扩增结果仍呈阳性。因此,辐照作为常用的食品处理手段,可以对RR大豆DNA造成降解,其中大豆粉DNA的降解程度高于完整的大豆籽粒,但要达到大幅降解RR大豆外源基因的目的,需与其他处理方式协同作用。 展开更多
关键词 转基因大豆 DNA cp4 epsps基因 辐照 降解
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