目的:观察高糖刺激下人肾小球系膜细增殖分化及Col IV、MCP-1 mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:以体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96孔...目的:观察高糖刺激下人肾小球系膜细增殖分化及Col IV、MCP-1 mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:以体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96孔培养板,采用4因素3水平分为正常对照组,高糖模型组、中药1、2、3、4、5、6、7、8、9组,以相应药物对HMCs干预24、48、72 h。MTT法检测24、48、72 h各时间点HMCs增殖分化情况;以qRT-PCR法检测48 h Col IV、MCP-1 mRNA表达;以ELISA法检测48 h Col IV、MCP-1蛋白活性表达。结果:(1)高糖环境刺激作用下HMCs及胞外基质均能够显著增殖,且在48 h达到顶峰;(2)益气解毒活络中药有效成分药防治DN作用机制与通过下调高糖作用下HMCs Col IV、MCP-1 mRNA及蛋白活性表达,进而抑制高糖刺激HMCs增殖相关;(3)益气解毒活络中药有效,最佳配伍为黄芪甲苷低剂量、盐酸小檗碱低剂量、水蛭素低剂量、木犀草苷低剂量。展开更多
目的:观察四妙散加味方含药血清对高糖刺激肾小球系膜细胞增殖分化及胞外基质变化的影响,探讨中医防治糖尿病肾病的作用机理。方法:将SD大鼠分为正常组、中药复方低剂量组、中药复方中剂量组以及中药复方高剂量组,以对应药物灌胃7 d后...目的:观察四妙散加味方含药血清对高糖刺激肾小球系膜细胞增殖分化及胞外基质变化的影响,探讨中医防治糖尿病肾病的作用机理。方法:将SD大鼠分为正常组、中药复方低剂量组、中药复方中剂量组以及中药复方高剂量组,以对应药物灌胃7 d后取血清,运用各组含药血清对HMCs进行干预24、48、72 h,采用MTT法检测上述3个时间点HMCs增殖分化情况,以q RT-PCR及ELISA法检测48 h FN和ColIV mRNA及蛋白活性表达。结果:(1)与正常组比较模型组HMCs增殖分化显著增高(P<0.01);与模型组比较各中药含药血清组HMCs增殖分化降低(P<0.01)。(2)与正常组比较模型组48 h FN、ColIV mRNA和蛋白活性表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较各用药组48 h FN、ColIV mRNA和蛋白活性表达均明显下降(P<0.01)。结论:(1)高糖环境能够刺激HMCs及ECM增殖。(2)四妙散加味治疗DN的机制可能是通过抑制HMCs胞外基质-FN、ColIV mRNA及蛋白活性表达,进而抑制HMCs异常增殖。(3)四妙散加味含药血清中剂量组抑制HMCs及胞外ECM增殖作用最佳。展开更多
文摘目的:观察高糖刺激下人肾小球系膜细增殖分化及Col IV、MCP-1 mRNA和蛋白活性表达变化,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的分子机制,讨论正交配伍中最优药物组合。方法:以体外培养人肾小球系膜细胞株,传代3~5代后接种于96孔培养板,采用4因素3水平分为正常对照组,高糖模型组、中药1、2、3、4、5、6、7、8、9组,以相应药物对HMCs干预24、48、72 h。MTT法检测24、48、72 h各时间点HMCs增殖分化情况;以qRT-PCR法检测48 h Col IV、MCP-1 mRNA表达;以ELISA法检测48 h Col IV、MCP-1蛋白活性表达。结果:(1)高糖环境刺激作用下HMCs及胞外基质均能够显著增殖,且在48 h达到顶峰;(2)益气解毒活络中药有效成分药防治DN作用机制与通过下调高糖作用下HMCs Col IV、MCP-1 mRNA及蛋白活性表达,进而抑制高糖刺激HMCs增殖相关;(3)益气解毒活络中药有效,最佳配伍为黄芪甲苷低剂量、盐酸小檗碱低剂量、水蛭素低剂量、木犀草苷低剂量。
文摘目的:观察四妙散加味方含药血清对高糖刺激肾小球系膜细胞增殖分化及胞外基质变化的影响,探讨中医防治糖尿病肾病的作用机理。方法:将SD大鼠分为正常组、中药复方低剂量组、中药复方中剂量组以及中药复方高剂量组,以对应药物灌胃7 d后取血清,运用各组含药血清对HMCs进行干预24、48、72 h,采用MTT法检测上述3个时间点HMCs增殖分化情况,以q RT-PCR及ELISA法检测48 h FN和ColIV mRNA及蛋白活性表达。结果:(1)与正常组比较模型组HMCs增殖分化显著增高(P<0.01);与模型组比较各中药含药血清组HMCs增殖分化降低(P<0.01)。(2)与正常组比较模型组48 h FN、ColIV mRNA和蛋白活性表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较各用药组48 h FN、ColIV mRNA和蛋白活性表达均明显下降(P<0.01)。结论:(1)高糖环境能够刺激HMCs及ECM增殖。(2)四妙散加味治疗DN的机制可能是通过抑制HMCs胞外基质-FN、ColIV mRNA及蛋白活性表达,进而抑制HMCs异常增殖。(3)四妙散加味含药血清中剂量组抑制HMCs及胞外ECM增殖作用最佳。
