汉防己甲素对TGF-β1诱导的MRC-5细胞中Col-I及FN表达的影响 被引量：7

1

作者 席苑 张海静 +4 位作者 高云航 侯红平 李晗 叶祖光 张广平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期94-99,共6页

目的:探讨汉防己甲素(Tet)对人转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响。方法:不同质量浓度的TGF-β1(0,2.5,5,10,20,40μg·L^-1)作用于MRC-5细胞,应用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测TGF-β1对MRC-5细胞的... 目的:探讨汉防己甲素(Tet)对人转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响。方法:不同质量浓度的TGF-β1(0,2.5,5,10,20,40μg·L^-1)作用于MRC-5细胞,应用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测TGF-β1对MRC-5细胞的增殖毒性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MRC-5细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及波形蛋白(Vimentin)表达水平的变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MRC-5细胞上清液中I型胶原(Col-I)及纤维黏连蛋白(FN)表达水平的变化,以筛选出TGF-β1活化MRC-5细胞的适宜浓度。结合筛选出的TGF-β1的浓度条件,与不同浓度的Tet(0,2.5,5,10,20,40μmol·L^-1)共同作用于MRC-5细胞,再次应用CCK-8法筛选TGF-β1及Tet共培养对MRC-5细胞的安全浓度,Western blot检测MRC-5细胞中α-SMA及Vimentin表达水平的变化,ELISA检测MRC-5细胞上清液中Col-I及FN表达水平的变化。结果:与空白组比较,给药24 h时,20μg·L^-1及40μg·L^-1的TGF-β1对MRC-5细胞有毒性作用(P<0.05),给药48 h时,10,20,40μg·L^-1的TGF-β1对MRC-5细胞有毒性作用(P<0.05);加入Tet培养24 h时,对MRC-5细胞的半数抑制浓度(IC50)值为14.07μmol·L^-1,培养48 h时,IC50值为7.51μmol·L^-1;与空白组比较,5μg·L^-1的TGF-β1刺激MRC-5细胞时,细胞中α-SMA,FN及Col-I的相对含量明显升高(P<0.05),Vimentin相对含量显著升高(P<0.01),10μg·L^-1组细胞中α-SMA,Vimentin,FN及Col-I的相对含量显著升高(P<0.01);10μg·L^-1的TGF-β1与不同浓度的Tet共培养,与TGF-β1组比较,Tet 5μmol·L^-1组,细胞中α-SMA,Vimentin及FN相对含量显著降低(P<0.01),Col-I相对含量明显降低(P<0.05),Tet 10μmol·L^-1组,细胞中α-SMA,Vimentin,FN及Col-I的相对含量均显著降低(P<0.01)。结论:TGF-β1能够升高MRC-5细胞中Col-I,FN等细胞外基质的水平,而Tet可以有效抑制这种变化的发生,提示Tet可能对肺纤维化的形成中,成纤维细胞大量分泌细胞外基质的过程有抑制作用。 展开更多

关键词 汉防己甲素 转化生长因子-β1(TGF-β1) MRC-5 I型胶原(col-i) 纤维黏连蛋白(FN)

原文传递

大黄素对TGF-β1诱导的NRK-49F细胞增殖的影响 被引量：15

2

作者 吉晶 何立群 《世界中医药》 CAS 2019年第5期1093-1097,共5页

目的:研究大黄素对TGF-β1诱导的肾成纤维细胞株(NRK-49F)增殖以及降低FN(纤连蛋白),Col-I(I型胶原蛋白),Smad2/3蛋白及基因表达的机制。方法:采用CCK8法检测不同浓度大黄素对NRK-49F细胞增殖情况的影响;终浓度为20、40、80μmol/L的大... 目的:研究大黄素对TGF-β1诱导的肾成纤维细胞株(NRK-49F)增殖以及降低FN(纤连蛋白),Col-I(I型胶原蛋白),Smad2/3蛋白及基因表达的机制。方法:采用CCK8法检测不同浓度大黄素对NRK-49F细胞增殖情况的影响;终浓度为20、40、80μmol/L的大黄素处理NRK-49F细胞30min后,模型组和观察组均以TGF-β1以5ng/mL的终浓度刺激24h,并收集细胞,蛋白质免疫印迹技术(Westernblot)检测FN,Col-I,Smad2/3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测FN,Col-I,Smad2/3mRNA表达。结果:模型组FN,Col-I,Smad2/3蛋白和基因的表达明显增加,大黄素含药血清组能抑制NRK-49F细胞增殖,且抑制FN,Col-I,Smad2/3蛋白和的表达(P<0.05)。大黄素浓度越高,抑制作用越明显,成一定的量效关系。结论:大黄素干预后,可改善肾纤维化程度,保护NRK-49F细胞模型损伤。 展开更多

关键词 大黄素 NRK-49F细胞 纤连蛋白(FN) I型胶原蛋白(col-i) SMAD2/3

暂未订购

白藜芦醇通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路抑制肺纤维化 被引量：44

3

作者 刘理静 于小华 张平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期425-431,共7页

目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)... 目的观察白藜芦醇(Res)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路起作用。方法 90只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40)和Res组(n=40),后两组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,d 2起Res组大鼠予100 mg.kg-1Res灌胃,其余两组相同条件下给予生理盐水,模型组和Res组分别于d 7、d 14、d 28、d 56随机处死10只大鼠,而对照组于d 56全部处死作为总体对照,取出肺组织行HE染色和Masson染色,用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA及蛋白表达,分离血清,并采用酶联免疫吸附法检测血清I型前胶原羧基端前肽(PICP)和Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PⅢNP)浓度。结果 Res组大鼠肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组肺组织ADAMTS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmR-NA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度增加(P<0.05或0.01);相比于模型组同期,Res组各时间点ADAMTS-1mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而TGF-β1、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达量及血清PICP、PⅢNP浓度则降低(P<0.05或0.01)。结论 Res通过TGF-β1/ADAMTS-1信号通路降解肺组织ColⅠ、ColⅢ发挥抗肺纤维化的作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 白藜芦醇 转化生长因子-Β1 ADAMTS-1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原

暂未订购

左归丸通过p38MAPK信号通路刺激MC3T3细胞核结合因子表达(英文) 被引量：13

4

作者 刘立萍 李然 +3 位作者 任艳玲 王智民 宋囡 何文智 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1457-1461,共5页

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的作用机制。方法:用含或不含p38 MAPK特异性阻滞剂(SB203580)的孵育液预处理细胞60min,加入左归丸含药血清孵育48h后,采用MTT法检测细胞活力;采用蛋白质印迹分析方法测定p38活性和Runx2蛋白表达水平;采... 目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的作用机制。方法:用含或不含p38 MAPK特异性阻滞剂(SB203580)的孵育液预处理细胞60min,加入左归丸含药血清孵育48h后,采用MTT法检测细胞活力;采用蛋白质印迹分析方法测定p38活性和Runx2蛋白表达水平;采用实时定量PCR方法测定Runx2和Col I mRNA表达水平。结果:左归丸含药血清能够显著增加细胞活力和磷酸化p38蛋白表达水平,诱导Runx2和Col I表达(P<0.01)。SB203580抑制了左归丸含药血清诱导的细胞活力和p38蛋白磷酸化水平,同时下调了左归丸含药血清诱导的Runx2和Col I表达(P<0.01)。结论:左归丸含药血清可能部分通过活化p38 MAPK信号通路,上调Runx2表达,刺激Col表达,促进骨形成。 展开更多

关键词 左归丸 成骨细胞 活力 核结合因子 Ⅰ型胶原 P38丝裂原活化蛋白激酶

原文传递

平喘颗粒对气道高反应大鼠气道重塑的干预作用研究 被引量：3

5

作者 蒋鹏娜 张佩青 王丽洁 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第8期1528-1533,共6页

目的:研究平喘颗粒对气道高反应大鼠气道重塑过程中肺组织中Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、转化生长因子-β1(TGFβ1)蛋白表达的影响。方法:将48只SPF级健康6周龄Wistar大鼠分为空白组、模型组、治疗组,每组16只。空白组用生理... 目的:研究平喘颗粒对气道高反应大鼠气道重塑过程中肺组织中Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、转化生长因子-β1(TGFβ1)蛋白表达的影响。方法:将48只SPF级健康6周龄Wistar大鼠分为空白组、模型组、治疗组,每组16只。空白组用生理盐水代替进行致敏和激发,其余两组在实验开始后1 d、14 d和21 d,给予0.2 mL抗原液皮下注射致敏,同日用含有高温杀死的6×10^(9)/mL百日咳杆菌菌苗1 mL腹腔注射,并于第28~34天将其放入自制玻璃箱中,给予1%OVA的生理盐水溶液持续雾化30 min,1次/d,连续定时激发5 d,后每隔日激发1次,共激发6周,造成气道高反应大鼠模型。治疗组在末次致敏后第4天开始给予中药(平喘颗粒)灌胃,药物灌胃剂量为1 mL/100 g,空白组和模型组用相应剂量生理盐水(1 mL/100 g)灌胃。有激发阶段时,则在激发前1 h完成药物灌胃。各组大鼠于末次激发24 h后处死,取肺组织进行HE和Mallory染色,观察各组大鼠肺组织病理HE染色、Mallory染色及免疫组化和Western blotting检测肺组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGFβ1的含量。结果:HE和Mallory染色显示,平喘颗粒能减轻气道高反应大鼠的肺组织形态学改变和胶原沉积。免疫组化法检测结果显示,与空白组相比,治疗组、模型组COL-Ⅰ、CⅠOL-Ⅲ表达均显著升高(均P<0.01);与模型组相比,治疗组COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达均明显降低(均P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与空白组相比,治疗组、模型组COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGFβ1表达均显著升高(P<0.01);与模型组相比,治疗组COL-、COL-Ⅲ、TGFβ1表达明显降低(均P<0.05)。结论:平喘颗粒可以抑制气道高反应大鼠的气道重塑,抑制肺成纤维细胞激活,使TGFβ1的表达降低,减少了ColⅠ和ColⅢ的表达,减少了基底膜增厚和胶原沉积,发挥了抗纤维化的作用。 展开更多

关键词 平喘颗粒 气道高反应 col-i COL-Ⅲ TGFΒ1

暂未订购

住院患者肠杆菌科细菌医院感染的耐药性分析 被引量：13

6

作者 邢昂 张仲义 +2 位作者 李卉 石晓艳 刘敏 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1330-1332,共3页

目的了解医院临床分离肠杆菌科细菌的分布及耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法分析2011年3月-2012年9月临床标本分离的肠杆菌科细菌检出率、分布特点及药敏结果,分离的所有肠杆菌科细菌应用法国生物梅里埃公司VITEK-32微生物分析... 目的了解医院临床分离肠杆菌科细菌的分布及耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法分析2011年3月-2012年9月临床标本分离的肠杆菌科细菌检出率、分布特点及药敏结果,分离的所有肠杆菌科细菌应用法国生物梅里埃公司VITEK-32微生物分析仪进行菌株鉴定,药物试验采用K-B法。结果共检出379株肠杆菌科细菌,大肠埃希菌174株占45.91%,肺炎克雷伯菌119株占31.40%,肠杆菌属76株,占20.05%;送检标本分别为痰液201株占53.03%,肺泡灌洗液103株占27.18%,穿刺液32株占8.44%;大肠埃希菌对氨苄西林、头孢噻肟和头孢唑林的耐药率分别为100.00%、99.43%和99.43%,对阿莫西林/克拉维酸耐药率为6.32%,大肠埃希菌对亚胺培南100.00%敏感;肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率为100.00%,对头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸的耐药率为70.59%和77.31%,而对哌拉西林/舒巴坦和亚胺培南100.00%敏感;肠杆菌属对氨苄西林、头孢唑林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁和头孢呋辛的耐药率均>76.32%,而对头孢哌酮/舒巴坦耐药率为6.59%,对亚胺培南100.00%敏感。结论病原菌的耐药性检测对临床治疗尤为重要,常见肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药性有明显地上升趋势,合理使用抗菌药物是有效地预防和控制医院病原菌感染的暴发流行。 展开更多

关键词 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 医院感染

原文传递

异补骨脂素加锌对大鼠成骨细胞相关细胞因子表达影响的实验研究 被引量：17

7

作者 王建华 张军芳 +1 位作者 吕萍 王雅楠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第3期403-407,共5页

为探讨异补骨脂素加锌对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞相关基因表达的影响,用改良的组织块培养法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,在成骨细胞体系中加入异补骨脂素与锌,以雌激素为阳性对照,空白组为阴性对照。结果显示:异补骨脂素加锌较... 为探讨异补骨脂素加锌对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞相关基因表达的影响,用改良的组织块培养法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,在成骨细胞体系中加入异补骨脂素与锌,以雌激素为阳性对照,空白组为阴性对照。结果显示:异补骨脂素加锌较单纯应用异补骨脂素或硫酸锌在48 h时促体外大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原的表达;异补骨脂素加锌组可以明显上调大鼠成骨细胞TGF-β1的细胞信号转导因子Smad4 mRNA的表达(P<0.01);能促进Runx2/Cbfa1 mRNA的表达(P<0.05)。与空白对照组相比,异补骨脂素组,异补骨脂素加锌组均能增强Osterix mRNA的表达(P<0.05)。与单纯应用异补骨脂素或者锌相比,异补骨脂素与锌联合应用能够协同增效,对促进体外培养的成骨细胞相关转录因子的表达更加明显,探讨了异补骨脂素及其与锌配伍调节骨代谢的分子机制,为提高骨质疏松症的临床疗效以及抗骨质疏松新药的开发提供了实验依据。 展开更多

关键词 成骨细胞 异补骨脂素 锌 I型胶原(COLI) 核心结合因子(Runx2/Cbfa1) OSTERIX Smad4

在线阅读 下载PDF 职称材料

TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱胶原产生和术后粘连形成的影响 被引量：9

8

作者 夏长所 杨选影 +2 位作者 韩迎秋 孙康 洪光祥 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期698-703,共6页

目的观察TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响,探讨生物学调节在肌腱粘连防治中的作用。方法取6只成年新西兰大白兔12条屈趾肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组... 目的观察TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响,探讨生物学调节在肌腱粘连防治中的作用。方法取6只成年新西兰大白兔12条屈趾肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组加入1ng/mL TGF-β后,再加入不同浓度TGF-β1中和抗体,对照组不添加任何试剂,培养3d后ELISA测定ColⅠ的产生。取84只兔行中趾屈趾肌腱切断吻合术,随机分成3组,腱鞘内分别注入生理盐水(NS组,n=36)、1.0μg/mL TGF-β1中和抗体(1.0μg/mL TGF-β1组,n=36)和2.0μg/mL TGF-β1中和抗体(2.0μg/mL TGF-β1组,n=12)。术后4、8周取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察。1、2、4、8周后取出NS组及1.0μg/mL TGF-β1组肌腱,原位杂交方法测定TGF-β1和ColⅠmRNA的表达。结果ELISA检测显示,TGF-β1能明显提高肌腱细胞ColⅠ的产生;TGF-β1抗体能降低肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞ColⅠ的产生,且呈剂量依赖关系。术后4、8周,NS组屈趾肌腱滑动距离较短,模拟主动屈曲度明显受限,与1.0μg/mL TGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);最大抗断裂载荷各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜和组织学观察结果显示,术后4、8周NS组胶原纤维排列紊乱,1.0μg/mL TGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组胶原纤维排列整齐。原位杂交结果显示,术后各时间点1.0μg/mL TGF-β1组TGF-β1 mRNA和ColⅠmRNA表达水平均低于NS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1中和抗体能有效抑制TGF-β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连形成。 展开更多

关键词 TGF-β1中和抗体 COL I 肌腱粘连 兔

原文传递

木棉花总黄酮对CCl_4致肝纤维大鼠ColⅠ表达的影响 被引量：10

9

作者 唐爱存 卢秋玉 +1 位作者 伍小燕 曹芬 《世界中西医结合杂志》 2014年第2期159-161,164,共4页

目的研究木棉花总黄酮(TFG)对CCl4致肝纤维大鼠Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法采用50%CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组(... 目的研究木棉花总黄酮(TFG)对CCl4致肝纤维大鼠Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法采用50%CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组(模型组),秋水仙碱阳性对照组(阳性组),木棉花总黄酮高、中、低剂量组,另外设空白组,空白组和模型组给予等剂量的生理盐水,每日灌胃给药1次,连续4周。末次给药24 h后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中ColⅠmRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织ColⅠ蛋白质的表达,运用实时荧光定量PCR方法对肝组织ColⅠmRNA表达进行相对定量。结果 RT-PCR和实时荧光定量PCR结果均表明TFG能显著下调ColⅠmRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。免疫组化结果显示,TFG能显著降低肝组织ColⅠ蛋白质的表达(P<0.05,P<0.01),且表现一定的剂量依赖性。结论 TFG对CCl4诱导的肝纤维大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其下调ColⅠmRNA及蛋白表达有关。 展开更多

关键词 木棉花总黄酮 CCL4 肝纤维化 COL I

暂未订购

姜黄素对人循环纤维细胞增殖及COLⅠ表达影响的研究 被引量：5

10

作者 富徐燕 赵丕文 +4 位作者 李亚东 唐雨晴 牛建昭 王鸿捷 李彧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期942-947,共6页

目的从外周血中分离并鉴定人循环纤维细胞,初步探讨姜黄素对人循环纤维细胞的药理作用。方法密度梯度离心法分离纯化细胞,流式细胞术和免疫化学法对细胞进行鉴定;CCK-8法及流式细胞技术分别检测姜黄素对人循环纤维细胞增殖和COLⅠ表达... 目的从外周血中分离并鉴定人循环纤维细胞,初步探讨姜黄素对人循环纤维细胞的药理作用。方法密度梯度离心法分离纯化细胞,流式细胞术和免疫化学法对细胞进行鉴定;CCK-8法及流式细胞技术分别检测姜黄素对人循环纤维细胞增殖和COLⅠ表达的影响。结果在体外成功分离培养了人循环纤维细胞,细胞呈CD34、CD45和COLⅠ阳性,其中79.7%的细胞为COLⅠ和CD45双阳性,可证明为人循环纤维细胞。姜黄素对循环纤维细胞的增殖起调控作用,不同浓度姜黄素的短时间(24 h)作用可促进人循环纤维细胞的增殖;而作用较长时间(72 h)后不仅能明显抑制细胞的增殖,而且能下调COLⅠ的表达,以高浓度效果最为明显(20μmol·L-1)。结论 20μmol·L-1的姜黄素作用72 h可明显抑制人循环纤维细胞的增殖和COLⅠ的表达。 展开更多

关键词 人循环纤维细胞 姜黄素 COL I CD34 CD45 鉴定 增殖 表达

暂未订购

I型胶原和热休克蛋白90在肉鸡胫骨软骨发育不良不同阶段的变化 被引量：4

11

作者 田文霞 覃平 +4 位作者 张艳红 李家奎 毕丁仁 潘思轶 郭定宗 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期428-432,共5页

应用免疫组织化学方法,研究了I型胶原(Col I)和热休克蛋白90(Hsp90)在肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)不同阶段的变化。将80羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后分为2组。对照组饲以基础日粮;试验组在基础日粮中添加福美双100 mg.kg-1,4 d后继续饲以... 应用免疫组织化学方法,研究了I型胶原(Col I)和热休克蛋白90(Hsp90)在肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)不同阶段的变化。将80羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后分为2组。对照组饲以基础日粮;试验组在基础日粮中添加福美双100 mg.kg-1,4 d后继续饲以基础日粮。试验历时23 d。应用抗Col I和Hsp90多克隆抗体对试验第4、9、16、23天的肉鸡胫骨生长板进行免疫组织化学研究。结果表明,在饲喂福美双后第4、第9天,Col I和Hsp90的合成在生长板前肥大区和肥大区软骨细胞都明显增加,而第16、第23天时在TD损伤周边的前肥大区软骨细胞出现。由此推测,Col I蛋白合成增加,可能是由于不能正常钙化的反馈调节所致;而上调表达的Hsp90可能在调节软骨细胞发育周期中发挥重要作用,为进一步认识TD提供了新的思路。 展开更多

关键词 福美双 肉鸡 胫骨软骨发育不良 I型胶原(ColI) 热休克蛋白90(Hsp90)

在线阅读 下载PDF 职称材料

菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织保护作用的研究 被引量：23

12

作者 徐瑜萍 向铮 +1 位作者 潘瑜 黄可新 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2103-2108,共6页

目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组... 目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组化技术检测大鼠肾组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原(Col I)等表达情况。结果相比于模型组,菟丝子给药组大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著降低,减少肾间质胶原沉积和肾组织α-SMA、CTGF、Col I表达。结论菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织有缓解保护作用。 展开更多

关键词 菟丝子水提物 肾间质纤维化 免疫组化 生化测试 平滑肌动蛋白 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原

暂未订购

补骨脂酚对TGF-β诱导人肝星状细胞损伤的保护作用 被引量：8

13

作者 陈巧云 杨柳 +3 位作者 王业秋 李孟 张建辉 李建民 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期131-135,共5页

目的：探讨补骨脂酚对转化生长因子-β（TGF-β）诱导人肝星状细胞损伤的保护作用及其机制。方法：通过噻唑蓝（MTT）比色法检测各组人肝星状细胞活性,筛选出补骨脂酚安全有效浓度;本实验分为空白组、模型组、补骨脂酚组（1×10^-5m... 目的：探讨补骨脂酚对转化生长因子-β（TGF-β）诱导人肝星状细胞损伤的保护作用及其机制。方法：通过噻唑蓝（MTT）比色法检测各组人肝星状细胞活性,筛选出补骨脂酚安全有效浓度;本实验分为空白组、模型组、补骨脂酚组（1×10^-5mol·L^-1）及雌二醇组（1×10^-6mol·L^-1）,同样检测各组细胞的活性,除空白组外,其余各组均加入10μg·L-1TGF-β诱导人肝星状细胞损伤;分别采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞中超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,丙二醛（MDA）的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）,胶原蛋白-Ⅰ（Col-Ⅰ）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中MMP-1,Col-Ⅰ蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,1×10^-5mol·L^-1补骨脂酚显著提高TGF-β诱导人肝星状细胞及细胞中SOD,GSH-Px活性,显著降低细胞中MDA含量及Col-Ⅰ,MMP-1 mRNA和蛋白的表达（P〈0.01）。结论：补骨脂酚对TGF-α诱导人肝星状细胞损伤的保护作用,主要是通过提高细胞中抗氧化酶的活性、降低细胞中MMP-1,Col-ⅠmRNA和蛋白的含量。 展开更多

关键词 补骨脂酚 转化生长因子-β(TGF-β) 人肝星状细胞 抗氧化酶 基质金属蛋白酶-1(MMP-1) 胶原蛋白-Ⅰ(Col-Ⅰ)

原文传递

藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响 被引量：8

14

作者 薛娟 彭蕴茹 +2 位作者 丁永芳 黄一平 王新敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第24期260-265,共6页

目的:观察藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响。方法:采用复合因素(皮下注射40%CCl4/橄榄油溶液+高脂低蛋白复合饲料喂养+给予5%乙醇饮水)构建大鼠肝纤维化模型,造模6周后,于第7周开始分组给药,设置正常对照组、模型组、阳性药组... 目的:观察藏药郎庆阿塔对肝纤维化大鼠胶原代谢的影响。方法:采用复合因素(皮下注射40%CCl4/橄榄油溶液+高脂低蛋白复合饲料喂养+给予5%乙醇饮水)构建大鼠肝纤维化模型,造模6周后,于第7周开始分组给药,设置正常对照组、模型组、阳性药组[复方鳖甲软肝片(0.55 g.kg-1]、郎庆阿塔高、中、低剂量组(按生药量计为11.4,5.7,2.85 g.kg-1),分别ig给药7周。实验末期,取肝组织,HE染色观察肝脏组织的病理学变化,Masson染色观察肝组织内纤维化程度,免疫组化法检测肝组织中金属蛋白酶组织抑制因子I(TIMP-I)的表达水平,荧光定量PCR(RTFQ PCR)法测定药物对肝纤维化大鼠肝组织中I型胶原蛋白(CoL-I)mRNA表达的影响。结果:郎庆阿塔高、中剂量对肝纤维化大鼠肝纤维组织增生、肝组织炎症活动度均有显著的改善作用(P<0.05),免疫组化结果表明,郎庆阿塔能明显降低肝纤维化大鼠肝组织中TIMP-I的表达水平(P<0.01),高剂量组阳性率(4.80±0.92)与模型组(8.60±1.52)相比显著下降;此外,郎庆阿塔还能剂量依赖性地降低CoL-I mRNA表达水平,其中高剂量组与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:郎庆阿塔能明显改善肝纤维组织增生,降低肝组织中TIMP-I和CoL-I mRNA的表达,发挥其抗肝纤维化作用。 展开更多

关键词 郎庆阿塔 金属蛋白酶组织抑制因子I Ⅰ型胶原 荧光定量PCR

原文传递

8周游泳运动对2型糖尿病大鼠心肌间质纤维化的影响 被引量：10

15

作者 上官若男 焦艺科 +1 位作者 尚画雨 苏全生 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期158-164,共7页

目的:观察8周游泳运动对2型糖尿病大鼠心肌间质纤维化的影响。方法:健康雄性8周龄SPF级Wistar大鼠45只,随机抽取32只在高糖高脂饲料喂养7周的基础上腹腔注射小剂量STZ缓冲液,建立2型糖尿病大鼠模型。将正常大鼠和造模成功的大鼠分为4组... 目的:观察8周游泳运动对2型糖尿病大鼠心肌间质纤维化的影响。方法:健康雄性8周龄SPF级Wistar大鼠45只,随机抽取32只在高糖高脂饲料喂养7周的基础上腹腔注射小剂量STZ缓冲液,建立2型糖尿病大鼠模型。将正常大鼠和造模成功的大鼠分为4组:空白对照组(C组)、单纯运动组(CE组)、糖尿病对照组(DM组)、糖尿病运动组(DME组)。运动组采用改进的Ploug训练方案,60min/d,每周训练6d,共训练8周。运动8周末尾静脉取血测定空腹血糖(FBG),眶后取血测定空腹血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),HE染色和Masson染色观察心肌形态学变化,ELISA法测定心肌组织COLⅠ和COLⅢ含量。结果:(1)8周运动干预后,DM组和DME组FBG非常显著高于C组和CE组,FINS水平显著低于C组和CE组,HOMA-IR指数DM组非常显著高于C组和CE组、DME组显著高于C组和CE组;DME组与DM组相比,FBG和HOMA-IR指数显著降低,FINS水平显著升高;DM组和DME组心脏相对重量(HW/BW)显著高于C组;DME组与DM组、CE组与C组HW/BW值无显著性差异。(2)DM组大鼠心肌病理改变可见心肌纤维断裂、坏死、严重增生,心肌细胞排列紊乱,水肿明显,变性严重,间质充血;DME组心肌结构改变有所减轻,C组和CE组呈现正常的心肌细胞形态。(3)心肌组织COLⅠ含量DM组显著高于DME组、C组和CE组;DME组、C组和CE组之间无显著性差异;心肌组织COLⅢ含量各组差异均无显著性。结论:8周游泳运动明显改善2型糖尿病大鼠心肌间质纤维化程度,对大鼠心肌损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 2型糖尿病 游泳运动 心肌间质纤维化 COL I COL Ⅲ

暂未订购

人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成 被引量：4

16

作者 袁即山 利天增 祁少海 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期713-717,共5页

目的探讨阳离子脂质体介导Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)转染对人增生性瘢痕成纤维细胞ColⅠA1表达的影响。方法取患者自愿捐赠瘢痕组织,采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细胞并传代... 目的探讨阳离子脂质体介导Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)转染对人增生性瘢痕成纤维细胞ColⅠA1表达的影响。方法取患者自愿捐赠瘢痕组织,采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细胞并传代。于6孔板内按32.25×104个/孔的密度接种第4代细胞,根据转染液不同分为4组:A组为脂质体加ColⅠA1 ASODN,B组为ColⅠA1 ASODN,C组为脂质体,D组为空白对照。转染后8h,1、2、3、4d分别提取细胞总RNA,行RT-PCR后测定ColⅠA1 mRNA表达量;胃酶消化法提取ECM中ColⅠA1蛋白,ELISA测定其浓度。结果扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测显示条带清晰,无杂带、明显的引物二聚体及拖尾现象。ColⅠA1 mRNA相对表达量:转染后8h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后1d,A、B组小于C、D组(P<0.05),A、B组间和C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后2d,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);转染后3、4d,A组小于B、C、D组,B组小于C、D组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。ColⅠ蛋白浓度:转染后8h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05);转染后1d,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);转染后2、3、4d,A、B组小于C、D组,C组小于D组(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论ColⅠA1 ASODN抑制ColⅠA1 mRNA和蛋白表达;阳离子脂质体作为载体有增强效果,促进ASODN进入细胞并在核内分布。 展开更多

关键词 I型前胶原基因 反义寡核苷酸 增生性瘢痕 胶原

原文传递

结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 被引量：3

17

作者 马波 裴澄 +3 位作者 康前雁 秦莉 张小玲 崔丽珺 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期773-778,共6页

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg... 目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg/L)对体外培养的人晶状体上皮细胞诱导24h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达,Real-time PCR和Western blot方法检测α-SMA、Ⅰ型胶原纤维(COL-I)和纤维连接蛋白(Fn)的表达。结果正常人晶状体上皮细胞为多角形贴壁细胞,不同浓度CTGF诱导24h后,晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形,细胞间隙变大,呈纤维细胞样改变。CTGF可诱导α-SMA在HLECs胞质表达。CTGF能促进HLECsα-SMA、Fn、COL-I蛋白和mRNA的表达,且这种作用随CTGF浓度的增加而增强(P<0.05)。结论 CTGF能促进人晶状体上皮细胞转分化及CEM的合成。 展开更多

关键词 结缔组织生长因子 晶状体上皮细胞 后囊膜混浊 a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA) I型胶原纤维(COL—I) 纤维连接蛋白(Fn)

暂未订购

肠出血性大肠杆菌O157毒力及黏附相关基因的PCR检测和PCR-RFLP分析 被引量：3

18

作者 丁红雷 毛旭虎 +1 位作者 王豪举 邹全明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期308-311,共4页

为了了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性。用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因。选用限制性内切酶HincⅡ和EcoRⅡ对分离的O157∶H7菌株eaeA基因进行酶切,选用限制性内切酶Ha... 为了了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性。用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因。选用限制性内切酶HincⅡ和EcoRⅡ对分离的O157∶H7菌株eaeA基因进行酶切,选用限制性内切酶HaeⅢ、HinfⅠ、EcoRⅡ和RsaⅠ对分离的O157∶H7菌株ehxA基因进行酶切,最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析。结果,所有O157∶H7菌株扩增出eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,但没有扩增出stx1和stx2基因;4株O157∶H?菌株,均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,且只有1株扩增出stx1基因。所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同。结果表明,由于所有菌株缺失stx2基因,其致病力相对较低,且在基因水平较为保守,多态性较为单一。 展开更多

关键词 大肠杆菌O157 毒力及黏附相关基因 PCR RFLP

在线阅读 下载PDF 职称材料

复方861含药血清对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA表达的影响 被引量：4

19

作者 阴赪宏 马雪梅 +1 位作者 马红 王宝恩 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2002年第5期286-289,共4页

目的:观察复方861含药血清对HSC-T6细胞I型胶原(CoL-I)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)mRAN表达的影响。方法:不同剂量复方861灌胃大鼠制备的含药血清,作用于HSC-T6细胞48h,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC-T6细胞CoL-I、TIMP1 m... 目的:观察复方861含药血清对HSC-T6细胞I型胶原(CoL-I)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)mRAN表达的影响。方法:不同剂量复方861灌胃大鼠制备的含药血清,作用于HSC-T6细胞48h,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC-T6细胞CoL-I、TIMP1 mRNA表达的影响。结果:复方861 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg、6.0g/kg等不同剂量的含药血清HSC-T6细胞Col-I、TIMP1 mRAN表达水平分别为0.28±0.09、0.29±0.13、0.31±0.18、0.40±0.08,1.28±0.46、1.33±0.40、1.14±0.10、1.22±0.31,与空白对照组(0.58±0.04,2.29±0.67)比较,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:复方861降低HSC-T6细胞CoL-I、TIMP1mRAN表达水平,是其抗肝纤维化的作用机理之一。 展开更多

关键词 复方861 HSC-T6细胞 I型胶原 基质金属蛋白酶组织抑制因子1 信息核糖核酸 逆转录PCR 肝纤维化 临床治疗 血清药理学

暂未订购

骨髓间充质干细胞条件培养液对瘢痕成纤维细胞生物活性的影响 被引量：5

20

作者 武艳 张春雷 +5 位作者 刘阳 李洪志 于晶 包海花 郭冉 袁晓环 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第7期1009-1014,共6页

背景:间充质干细胞移植可通过多种调节机制促进皮肤创伤修复,抑制瘢痕形成,目前多数学者认为间充质干细胞分泌的生物活性因子起主要作用。目的:观察骨髓间充质干细胞条件培养液对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力及胶原合成的影响。方法:... 背景:间充质干细胞移植可通过多种调节机制促进皮肤创伤修复,抑制瘢痕形成,目前多数学者认为间充质干细胞分泌的生物活性因子起主要作用。目的:观察骨髓间充质干细胞条件培养液对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力及胶原合成的影响。方法:分离培养人骨髓间充质干细胞和增生性瘢痕成纤维细胞,制备骨髓间充质干细胞条件培养液。将12,24,48 h收集的条件培养液孵育体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞24 h,并与空白对照组比较,采用CCK-8实验检测增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性,Real-time PCR检测增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。结果与结论:与空白对照组相比较,在24 h和48 h收集的骨髓间充质干细胞条件培养液对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),对其胶原的合成也具有显著的抑制作用(P<0.01)。结果表明骨髓间充质干细胞条件培养液可通过分泌抗纤维化的生物活性因子抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原产生,为细胞疗法策略减轻瘢痕提供了新的理论支持。 展开更多

关键词 组织构建 成纤维细胞 骨髓间充质干细胞 增生性瘢痕 瘢痕成纤维细胞 生物活性因子 细胞治疗

暂未订购