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CNR1激活FIS1促进线粒体裂解抑制骨肉瘤细胞恶性进展
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作者 王良铭 张小路 《中国细胞生物学学报》 CSCD 2024年第12期2037-2044,共8页
该文探讨了大麻素受体1(cannabinoid receptor-1,CNR1)在骨肉瘤细胞恶性进展中的作用机制。通过生信分析CNR1在肿瘤组织中表达水平高低和远期生存率变化;采用CNR1过表达慢病毒感染骨肉瘤细胞;通过CCK-8、划痕实验、克隆实验、Transwell... 该文探讨了大麻素受体1(cannabinoid receptor-1,CNR1)在骨肉瘤细胞恶性进展中的作用机制。通过生信分析CNR1在肿瘤组织中表达水平高低和远期生存率变化;采用CNR1过表达慢病毒感染骨肉瘤细胞;通过CCK-8、划痕实验、克隆实验、Transwell细胞侵袭实验和流式细胞凋亡实验检测骨肉瘤细胞增殖、集落形成和侵袭能力变化以及细胞凋亡水平;使用透射电镜、MitoSOX探针和免疫印迹检测线粒体形态和功能变化;通过裸鼠荷瘤实验验证CNR1高表达骨肉瘤细胞在体内的生长情况。结果显示CNR1在骨肉瘤组织中表达上调,并且CNR1高表达组患者的远期生存率显著高于低表达组;免疫印迹证实了慢病毒感染成功地诱导了骨肉瘤细胞系CNR1高表达;CNR1高表达显著抑制了骨肉瘤细胞增殖、集落形成和侵袭,并诱导了骨肉瘤细胞凋亡;CNR1激活了线粒体裂变蛋白1(mitochondrial fission 1 protein,FIS1)从而引起了线粒体过度裂解,诱发了线粒体途径凋亡;在载瘤裸鼠体内,CNR1过表达通过促进线粒体途径凋亡从而抑制骨肉瘤细胞恶性进展。 展开更多
关键词 线粒体分裂 cnr1 凋亡 骨肉瘤 远期生存率
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CNR1、GAD1和BDNF基因多态性与云南傣族男性海洛因依赖的相关性分析 被引量:5
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作者 杨亚鲜 陈燕祥 +4 位作者 武健权 邢豫明 曾发明 黄友浩 程宝文 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期888-896,共9页
为了探讨大麻素受体1基因(Cannabinoid receptor 1,CNR1)3个SNP位点(rs6454674、rs1049353和rs806368)、谷氨酸脱羧酶1基因(Glutamate decarboxylase 1,GAD1)3个SNP位点(rs1978340、rs3791878和rs11542313)、脑源性神经营养因子基因(Bra... 为了探讨大麻素受体1基因(Cannabinoid receptor 1,CNR1)3个SNP位点(rs6454674、rs1049353和rs806368)、谷氨酸脱羧酶1基因(Glutamate decarboxylase 1,GAD1)3个SNP位点(rs1978340、rs3791878和rs11542313)、脑源性神经营养因子基因(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)2个SNP位点(rs6265和rs13306221)与云南傣族男性海洛因依赖的相关性,文章采用病例对照关联分析,建立8-SNPs复合扩增体系,应用SNaPshot方法检测165例傣族男性海洛因依赖患者和170例健康傣族男性CNR1、GAD1和BDNF基因8个SNPs位点基因型,采用SPSS17.0、Haploview4.2、PHASE2.1和MDR软件进行统计学分析。结果显示,rs13306221基因型频率在海洛因依赖组和对照组中的差异具有统计学意义(P<0.025),海洛因依赖组rs6265 A等位基因显著高于对照组(P<0.05),由rs1978340-rs3791878-rs11542313构建的T-A-C、C-C-C、C-C-T和T-C-C单体型及rs6265-rs13306221构建的A-G单体型频率在海洛因依赖组及对照组中差异具有统计学意义(P<0.05),海洛因依赖组T-A-C、C-C-T和A-G单体型频率明显高于对照组,GAD1基因rs1978340与rs3791878之间可能存在强协同的交互作用。结果表明,CNR1基因rs1049353多态性、GAD1基因rs1978340和rs11542313多态性以及BDNF基因rs6265和rs13306221多态性与云南傣族男性海洛因依赖相关联,并且携带rs6265 A等位基因的个体可能更容易对海洛因产生依赖。 展开更多
关键词 cnr1 GAD1 BDNF 海洛因依赖
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绵羊肌内前体脂肪细胞CNR1和FABP4基因表达研究 被引量:4
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作者 闫伟 王玉涛 +3 位作者 张永浩 刘海霞 韩大勇 朱爱文 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期95-102,共8页
为研究绵羊脂肪细胞增殖分化过程中参与动物能量代谢调控的大麻素受体1(cannabinoid receptor 1)基因CNR1和调控脂肪沉积的脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4)基因FABP4的表达规律和差异,采集一只3日龄湖羊羔羊背最长肌组织... 为研究绵羊脂肪细胞增殖分化过程中参与动物能量代谢调控的大麻素受体1(cannabinoid receptor 1)基因CNR1和调控脂肪沉积的脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4)基因FABP4的表达规律和差异,采集一只3日龄湖羊羔羊背最长肌组织,背肌组织经Ⅱ型胶原酶消化后分离观察原代前体脂肪细胞;开展前体脂肪细胞培养并绘制生长曲线;应用胰岛素、地塞米松和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤诱导前体脂肪细胞后,采用油红O染色观察成熟脂肪细胞形态;收集不同分化时间点细胞,应用实时荧光定量PCR方法测定CNR1和FABP4基因表达量。结果表明,羔羊背最长肌组织成功分离出了前体脂肪细胞,贴壁细胞呈梭形;诱导前体脂肪细胞经油红O染色后观察到脂滴形成,具有脂肪细胞特征;CNR1和FABP4基因表达量在诱导分化早期均较低,但在诱导分化中后期表达量逐步升高;CNR1和FABP4基因表达量在诱导分化后的第2、第4和第8天均差异不显著,但FABP4基因在第12天的表达量显著高于CNR1基因。上述结果为进一步探究绵羊CNR1和FABP4基因调控关系及利用两基因改良绵羊肉品性状提供了参考数据。 展开更多
关键词 绵羊 肌内前体脂肪细胞 FABP4 cnr1 基因表达
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miR-1273g-3p通过靶向CNR1调节A549细胞迁移能力 被引量:1
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作者 侯绿滨 苏雪婷 +7 位作者 秦性良 丁红梅 黄皑雪 李慧 葛兴枫 赵强 李洁 邵宁生 《医学分子生物学杂志》 CAS 2014年第3期125-131,共7页
目的寻找hsa-miR-1273g-3p在人肺腺癌细胞A549中的特异性靶标并探索其生物学功能。方法定量PCR(qPCR)检测miR-1273g-3p在人肺癌细胞A549、H460和H1299中表达情况,利用生物信息学方法预测miR-1273g-3p靶基因,qPCR、免疫印迹(Western... 目的寻找hsa-miR-1273g-3p在人肺腺癌细胞A549中的特异性靶标并探索其生物学功能。方法定量PCR(qPCR)检测miR-1273g-3p在人肺癌细胞A549、H460和H1299中表达情况,利用生物信息学方法预测miR-1273g-3p靶基因,qPCR、免疫印迹(Western Blot)和荧光素酶实验确证靶标,划痕实验和MTS实验验证miR-1273g-3p的生物学功能。结果miR-1273g-3p在非小细胞肺癌细胞系A549、I-1460和H1299中高表达:qPCR、Western印迹和荧光素酶实验证实miR-1273g-3p能够靶向CNR1,可以在mRNA与蛋白水平上调控CNR1的表达;miR-1273g-3p能够通过改变CNR1的表达水平影响A549的细胞迁移能力,对细胞增殖影响不明显。结论研究证明CNR1是miR-1273g-3p的靶基因,揭示miR-1273g-3p通过靶向CNR1影响A549细胞迁移的新功能。 展开更多
关键词 miR-1273g-3p cnr1 细胞迁移
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大麻素受体在溃疡性结肠炎中的表达及意义 被引量:2
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作者 陶科明 吴正祥 +1 位作者 李为慧 王巧民 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第6期505-507,共3页
目的观察大麻素受体(CNR)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达,探讨其作用及意义。方法采用免疫组织化学方法检测45例UC患者和30例健康对照者肠道组织中CNR1和CNR2的表达,并进一步分析CNR1和CNR2与UC临床特征的关系。结果CNR1和CNR2在UC患者中... 目的观察大麻素受体(CNR)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达,探讨其作用及意义。方法采用免疫组织化学方法检测45例UC患者和30例健康对照者肠道组织中CNR1和CNR2的表达,并进一步分析CNR1和CNR2与UC临床特征的关系。结果CNR1和CNR2在UC患者中表达阳性率分别为62.2%、68.9%,明显高于正常对照组(26.7%、36.7%,P<0.05);CNR1和CNR2表达与UC疾病活动性明显相关(P<0.05),与UC严重程度、病变部位及临床特征无明显相关(P>0.05)。结论 CNR在UC肠道组织中表达增加,而且与疾病活动性明显相关,提示CNR可能在UC发生、发展中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 cnr1 CNR2 受体 溃疡性结肠炎 免疫组织化学
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人大麻素受体启动子真核报告质粒的构建及活性分析 被引量:1
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作者 丁生权 王志军 倪新莉 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-54,共5页
目的:利用双荧光素酶报告基因体系,根据大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,cnr1)启动子序列不同部位的转录活性来初步确定其活性区域,为脊髓缺血耐受保护中cnr1高表达的转录调控的研究奠定基础。方法:从NCBI中获取cnr1基因转录起始点... 目的:利用双荧光素酶报告基因体系,根据大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,cnr1)启动子序列不同部位的转录活性来初步确定其活性区域,为脊髓缺血耐受保护中cnr1高表达的转录调控的研究奠定基础。方法:从NCBI中获取cnr1基因转录起始点5’端向上约1800 bp的核苷酸序列,按照300 bp的距离间隔,设计6个不同长度的截短体PCR引物,以人全血基因组DNA为模板,分别扩增cnr1启动子区域的截短体片段,并克隆入荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒中。将含有不同截短体的重组质粒分别转染Hela、Jurket和A549细胞后行荧光素酶活性检测。根据不同截短体转录活性检测结果,确定cnr1启动子活性区域。结果:成功将cnr1启动子区6个不同长度(1800、1500、1200、900、600和300 bp)的截短体克隆入荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒。在3种细胞系Hela、Jurket和A549的荧光素酶活性检测均显示600 bp的截短体转录活性最强。结论:成功构建了cnr1启动子的报告基因重组质粒,初步证实-600 bp到-200 bp区为cnr1的启动子的活性区域,从而为进一步研究cnr1的转录调控奠定了基础。 展开更多
关键词 缺血耐受 大麻素受体1 启动子活性区域 双荧光素酶报告基因
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Comparative WGBS identifies genes that influence non-ripe phenotype in tomato epimutant Colourless non-ripening 被引量:4
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作者 Weiwei Chen Zhiming Yu +11 位作者 Junhua Kong Hui Wang Yichen Li Mei Zhao Xiaohong Wang Qianqian Zheng Nongnong Shi Pengcheng Zhang Silin Zhong Paul Hunter Mahmut Tor Yiguo Hong 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期244-252,共9页
Whole-genome bisulfite sequencing(WGBS)allows single-base resolution and genome-wide profiling of DNA methylation in plants and animals.This technology provides a powerful tool to identify genes that are potentially c... Whole-genome bisulfite sequencing(WGBS)allows single-base resolution and genome-wide profiling of DNA methylation in plants and animals.This technology provides a powerful tool to identify genes that are potentially controlled by dynamic changes of DNA methylation and demethylation.However,naturally occurring epimutants are rare and genes under epigenetic regulation as well as their biological relevances are often difficult to define.In tomato,fruit development and ripening are a complex process that involves epigenetic control.We have taken the advantage of the tomato epimutant Colourless non-ripening(Cnr)and performed comparative mining of the WGBS datasets for the Cnr and Sl CMT3-silenced Cnr fruits.We compared DNA methylation profiles for the promoter sequences of approximately 5,000 bp immediately upstream of the coding region of a list of20 genes.Differentially methylated regions were found for some of these genes.Virus-induced gene silencing(VIGS)of differentially methylated gene Sl DET1 or Sl PDS resulted in unusual brown pigmentation in Cnr fruits.These results suggest that comparative WGBS coupled with VIGS can be used to identify genes that may contribute to the colourless unripe phenotype of fruit in the Cnr epimutant. 展开更多
关键词 tomato Cnr SlCMT3 SlDET1 SlPDS DNA methylation WGBS VIGS
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