【目的】鉴定青海茄参(Mandragora chinghaiensis Kuang et A.M.Jl)CML基因家族成员,探究其对冷胁迫的响应。【方法】基于课题组的全长转录组数据,利用生物信息学技术对青海茄参CML基因家族的成员及其蛋白理化性质、系统发育过程、基因...【目的】鉴定青海茄参(Mandragora chinghaiensis Kuang et A.M.Jl)CML基因家族成员,探究其对冷胁迫的响应。【方法】基于课题组的全长转录组数据,利用生物信息学技术对青海茄参CML基因家族的成员及其蛋白理化性质、系统发育过程、基因结构等进行分析。【结果】在青海茄参中共鉴定出19个CML基因家族成员,亚细胞定位主要在细胞核,含有1~4个EF-hand结构域,二三级结构主要由α-螺旋组成;基序分析发现,McCMLs蛋白含有4个典型的EF手部基序;系统进化树分析显示,McCMLs蛋白被分为3个亚族。冷胁迫表达模式分析表明,McCML基因家族在冷胁迫下差异表达,其中McCML3、McCML7表达量显著上调。【结论】通过对McCML基因家族进行鉴定和分析,筛选出McCML3、McCML7作为青海茄参抗寒候选基因,为后期研究其抗寒分子机制提供理论基础。展开更多
为了研究姜黄素对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞信号转导和转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription5,STAT5)信号途径的影响,并探讨姜黄素治疗CML的临床意义,将实验分为三组:正常对照组,CML细胞组和姜黄素...为了研究姜黄素对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞信号转导和转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription5,STAT5)信号途径的影响,并探讨姜黄素治疗CML的临床意义,将实验分为三组:正常对照组,CML细胞组和姜黄素组。运用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖活性,运用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)检测细胞STAT5mRNA的变化,运用电泳迁移率改变分析法(electrophoretic mobility shif tassay,EMSA)检测细胞STAT5活化水平。结果表明:姜黄素组细胞增殖活性(OD值0.640±0.073)低于CML细胞组(0856±0.083),差异有显著性意义(P<0.01)。CML细胞组STAT5mRNA(光密度积分比值1.782±0.156)较正常对照组(光密度积分比值0.289±0.025)明显增高(P<0.01),姜黄素组细胞STAT5mRNA(光密度积分比值1.398±0.126)低于CML细胞组,差异有显著性意义(P<0.01)。CML细胞组STAT5活化水平(灰度面积值5323.375±515.640)明显高于正常对照组(灰度面积值2943.000±273.377),差异有显著性意义(P<0.01)。姜黄素组细胞STAT5活化水平(灰度面积值4331.750±398.035)低于CML细胞组,差异有显著性意义(P<001)。结论:CML原代细胞增殖、STAT5 ITIRNA、STAT5活化水平明显增高,STAT5信号途径可能参与了cML细胞的增殖。姜黄素能抑制cML原代细胞增殖和STAT5 mRNA,并使sTAT5活化水平下调。姜黄素具有抗白血病的作用。展开更多
文摘【目的】鉴定青海茄参(Mandragora chinghaiensis Kuang et A.M.Jl)CML基因家族成员,探究其对冷胁迫的响应。【方法】基于课题组的全长转录组数据,利用生物信息学技术对青海茄参CML基因家族的成员及其蛋白理化性质、系统发育过程、基因结构等进行分析。【结果】在青海茄参中共鉴定出19个CML基因家族成员,亚细胞定位主要在细胞核,含有1~4个EF-hand结构域,二三级结构主要由α-螺旋组成;基序分析发现,McCMLs蛋白含有4个典型的EF手部基序;系统进化树分析显示,McCMLs蛋白被分为3个亚族。冷胁迫表达模式分析表明,McCML基因家族在冷胁迫下差异表达,其中McCML3、McCML7表达量显著上调。【结论】通过对McCML基因家族进行鉴定和分析,筛选出McCML3、McCML7作为青海茄参抗寒候选基因,为后期研究其抗寒分子机制提供理论基础。
